检索结果-内蒙古大学图书馆

中国现代应用药学 2025年第4期42卷 521-528页

作者：胡中吉李艳玲邓常清湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室长沙410208

目的基于中医“劳则气耗”理论,构建病证结合的气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠模型,分析其生物学特征。方法将大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组和复合造模组。MCAO组采用线栓法阻塞左侧大... 详细信息

目的基于中医“劳则气耗”理论,构建病证结合的气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠模型,分析其生物学特征。方法将大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组和复合造模组。MCAO组采用线栓法阻塞左侧大脑中动脉2 h再灌注48 h;复合造模组先连续力竭游泳21 d,再同MCAO组进行缺血2 h再灌注48 h。Longa评分、气虚血瘀证量表评分评估模型的神经功能缺损和气虚血瘀证,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法、苏木素-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察脑组织病理形态变化,免疫荧光IgG法检测血脑屏障通透性,比色法检测脑组织三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP),Na^(+),K^(+)-ATP酶,二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP),丙二醛(malondialdehyde,MDA),总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD),ELISA法检测血清白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)水平。结果与假手术组比较,MCAO组Longa评分和气虚血瘀证候评分显著增加(P<0.01),脑梗死率及脑水肿率增显著增加(P<0.01),海马CA1区病理损伤加重(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01),血脑屏障IgG平均荧光强度显著增加(P<0.05或P<0.01);脑组织ATP、ADP含量,Na^(+),K^(+)-ATP酶活性显著降低(P<0.05或P<0.01);血清MDA、IL-1β、IL-6显著增加(P<0.05或P<0.01),T-SOD显著降低(P<0.01)。与MCAO组比较,复合造模组Longa评分和气虚血瘀证候评分显著增加(P<0.05或P<0.01),脑梗死率及脑水肿率显著增加(P<0.01)、血脑屏障IgG平均荧光强度显著增加(P<0.01);脑组织ATP、ADP含量,Na^(+),K^(+)-ATP酶活性显著降低(P<0.05或P<0.01);血清MDA、IL-1β、IL-6显著增加(P<0.05或P<0.01),T-SOD显著降低(P<0.01)。结论力竭游泳联合MCAO法可构建病证结合的气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠模型,该法简单易行,兼具脑缺血和气虚血瘀的表征,相比单纯MCAO具有更重的神经功能缺损、气虚血瘀表征、组织损伤、脑组织能量代谢障碍及机体氧化应激和炎症反应。

关键词：脑缺血气虚血瘀型模型大鼠能量代谢氧化应激炎症

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基于UPLC-Q-TOF-MS技术的通脉养心丸入血、入心脏组织成分分析及其质谱裂解规律研究

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中药药理与临床 2025年第2期41卷 27-32页

作者：唐艳陈婷刘思琦陈婷湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室长沙410208 湖南省中药粉体与创新药物研究省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208 湖南中医药大学针灸推拿与康复学院长沙410208 省部共建组分中药国家重点实验室天津301617

目的:本研究采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对通脉养心丸大鼠体内血清及心脏组织成分进行快速定性分析。方法:选择Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱,采用正负离子模式下质谱扫描,根据样品采集模... 详细信息

目的:本研究采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对通脉养心丸大鼠体内血清及心脏组织成分进行快速定性分析。方法:选择Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱,采用正负离子模式下质谱扫描,根据样品采集模式、一级质谱加合离子信息、二级碰撞能量、二级碎片信息等多级质谱信息对化合物进行鉴定分析。结果:从给药通脉养心丸大鼠血清中共鉴定出17个化合物,包括9个黄酮类、4个皂苷类、3个五环三萜类、1个有机酸类化合物。从心脏组织样本中共鉴定出3个化合物,包括2个黄酮类和1个皂苷类。结论:本研究辨析了通脉养心丸入血及心脏组织原型及其代谢成分,揭示了通脉养心丸化学成分群在体内变化和传递过程,为通脉养心丸的质量控制、临床应用以及新药研发提供实验依据。

关键词：通脉养心丸超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法定性分析体内化学成分

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不同针刺深度对2型糖尿病患者周围神经病变疗效的影响分析

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河北中医 2025年第2期47卷 279-283页

作者：雷翰霖邓奕辉蔡昱哲赵锋曹东波湖南中医药大学第一附属医院疼痛理疗科湖南长沙410007 湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的观察不同深度针刺穴位对2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)的控制效果。方法选择DPN患者93例为研究对象,随机分为浅刺组(31例)、中刺组(31例)、深刺组(31例)。3组分别行“天”“地”“人”针刺穴位治疗,即浅刺组浅刺、中刺组中刺、... 详细信息

目的观察不同深度针刺穴位对2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)的控制效果。方法选择DPN患者93例为研究对象,随机分为浅刺组(31例)、中刺组(31例)、深刺组(31例)。3组分别行“天”“地”“人”针刺穴位治疗,即浅刺组浅刺、中刺组中刺、深刺组深刺。治疗2个月后,比较治疗前后感觉神经传导速度(SNCV)和运动神经传导速度(MNCV)、密歇根糖尿病神经病变评分(MDNS)量表和多伦多临床神经病变评分量表(TCSS)评分、血糖指标[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血葡萄糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1)c)]、炎症因子[单核细胞趋化因子1(MCP-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的表达水平,并统计3组的临床疗效及不良反应发生情况。结果浅刺组总有效率61.29%,中刺组总有效率77.42%,深刺组总有效率96.77%,3组疗效比较深刺组>中刺组>浅刺组(P<0.05)。3组治疗后正中神经和腓总神经的SNVC和MNCV均较本组治疗前升高(P<0.05),3组治疗后正中神经和腓总神经的SNVC和MNCV比较,深刺组>中刺组>浅刺组(P<0.05)。3组治疗后MDNS、TCSS量表评分均较本组治疗前降低(P<0.05),3组治疗后得分比较,深刺组<中刺组<浅刺组(P<0.05)。3组治疗后血糖指标FPG、2 hPG、HbA_(1)c均较本组治疗前降低(P<0.05),3组治疗后比较,深刺组<中刺组<浅刺组(P<0.05)。3组治疗后MCP-1、IL-6、TNF-α水平均较本组治疗前降低(P<0.05),3组治疗后比较,深刺组<中刺组<浅刺组(P<0.05)。3组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论深刺穴位用于DPN的治疗中,可有效提高疗效和患者神经传导速度,改善血糖水平和炎性反应情况,且未见明显不良反应,具有较好的安全性。

关键词：针刺穴位针刺深度 2型糖尿病周围神经病变

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青钱柳对棕榈酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积的影响及作用机制

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中国中医药信息杂志 2025年第4期32卷 72-78页

作者：刘艺璇吴昊洋阳晶晶蔡昱哲罗政李定祥邓奕辉湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南长沙410208

目的探讨青钱柳对棕榈酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及潜在机制。方法通过CCK-8法测定棕榈酸钠、青钱柳冻干粉对HepG2细胞活力的影响,确定给药剂量。将细胞分为空白组、模型组、吡格列酮组和青钱柳低、中、高剂量组,采用350μm... 详细信息

目的探讨青钱柳对棕榈酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及潜在机制。方法通过CCK-8法测定棕榈酸钠、青钱柳冻干粉对HepG2细胞活力的影响,确定给药剂量。将细胞分为空白组、模型组、吡格列酮组和青钱柳低、中、高剂量组,采用350μmol/L棕榈酸钠诱导建立HepG2细胞脂质沉积模型,药物组分别予吡格列酮和低、中、高剂量青钱柳冻干粉(100、250、500μg/mL)干预12 h。采用尼罗红染色及BODIPY493/503荧光探针观察细胞内脂质沉积,ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6含量,Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、脂肪酸合成酶(FAS)、Bcl-2、Bax蛋白表达,qPCR检测脂肪甘油三酯酶(ATGL)、CD36 mRNA表达。结果与空白组比较,模型组HepG2细胞有大量脂质沉积,细胞上清液TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.01),细胞p-PI3K、p-Akt、SREBP-1、FAS、Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),ATGL mRNA表达显著降低,CD36 mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,吡格列酮组和青钱柳各剂量组细胞内脂质沉积不同程度改善,细胞上清液TNF-α、IL-6含量降低,细胞p-PI3K、p-Akt、SREBP-1、FAS、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,ATGL mRNA表达升高,CD36 mRNA表达降低,其中吡格列酮组和青钱柳高剂量组差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论青钱柳可能通过调控PI3K/Akt/SREBP-1/FAS信号通路影响三酰甘油代谢,改善棕榈酸钠诱导的HepG2模型细胞脂质沉积。

关键词：青钱柳 HepG2细胞脂质沉积 PI3K/AKt/SREBP-1/FAS信号通路

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通脉养心丸的研究进展及质量标志物(Q-marker)预测分析

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天津中医药 2025年第3期42卷 387-396页

作者：张燕燕秦灏学叶麟晰乐楠茜林佳美慧唐毅陈思璇何睿宁陈婷张伟湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室长沙410208 湖南省中药粉体与创新药物研究省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208 省部共建组分中药国家重点实验室天津中医药大学天津301617

通脉养心丸是一种基于传统中医方剂“炙甘草汤”和“生脉散”加减而成的现代中成药,主要成分包括地黄、甘草、党参等11味中药,具有益气养阴、通脉止痛的功效。现代药理学研究表明,通脉养心丸具有舒张血管、抗炎、保护血管内皮、抑制钙... 详细信息

通脉养心丸是一种基于传统中医方剂“炙甘草汤”和“生脉散”加减而成的现代中成药,主要成分包括地黄、甘草、党参等11味中药,具有益气养阴、通脉止痛的功效。现代药理学研究表明,通脉养心丸具有舒张血管、抗炎、保护血管内皮、抑制钙离子超载等多种药理作用,广泛应用于冠心病、心律失常、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后不良反应等心脏疾病的治疗。通过搜集国内外相关文献,总结了近年来关于通脉养心丸的化学成分、药理作用及临床应用的研究进展,并基于中药质量标志物(Q-marker)的“五原则”,对通脉养心丸的Q-marker进行了预测分析。结果提示地黄苷D、甘草苷、甘草次酸、甘草酸、二苯乙烯苷、大黄素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子乙素、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元、没食子酸、芒柄花黄素,可作为通脉养心丸的质量标志物,后续可选择以上成分作为通脉养心丸的质量评估指标。文章旨在为完善通脉养心丸制剂过程中质量溯源体系及其质量评价与控制体系提供参考,以期为通脉养心丸的临床应用提供理论支撑。

关键词：通脉养心丸质量标志物化学成分药理作用

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基于网络药理学及实验验证探索七福饮和当归芍药散“同病异治”阿尔茨海默病的机制

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现代中西医结合杂志 2025年第5期34卷 598-605页

作者：周金勇何佳维罗荣司庆宋祯彦成绍武湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的通过网络药理学方法及实验验证探讨七福饮和当归芍药散治疗阿尔茨海默病(AD)的共同作用靶点及可能作用机制。方法①通过中药系统药理学数据库(TCMSP)与中药信息数据库(TCMID)获取七福饮和当归芍药散的化学成分及其对应的靶点,并构... 详细信息

目的通过网络药理学方法及实验验证探讨七福饮和当归芍药散治疗阿尔茨海默病(AD)的共同作用靶点及可能作用机制。方法①通过中药系统药理学数据库(TCMSP)与中药信息数据库(TCMID)获取七福饮和当归芍药散的化学成分及其对应的靶点,并构建中药复方调控网络。利用GEO数据库筛选出AD患者的差异表达基因;绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,预测核心基因,并进行富集分析。②将30只雄性SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、当归芍药散组、七福饮组和米诺环素组,每组6只。除假手术组外,其他组大鼠采用双侧侧脑室注射Aβ1-42方法建立AD模型。术后2 d,当归芍药散组给予当归芍药散24 g/(kg·d)灌胃,七福饮组给予七福饮12 g/(kg·d)灌胃,米诺环素组给予米诺环素36 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均2次/d,连续灌胃14 d。末次灌胃结束后采用水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,实时荧光定量PCR法检测海马组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核因子-κB(NF-κB)mRNA表达情况。结果网络药理学分析获得七福饮和当归芍药散与AD共性交集基因91个;GO富集分析显示七福饮和当归芍药散治疗AD主要涉及DNA结合的正向调控、免疫炎症反应、酶结合、细胞凋亡以及脂肪酸代谢等354个生物过程,KEGG富集分析显示七福饮和当归芍药散可能主要通过脂质和动脉粥样硬化、神经退行性变的途径-多重疾病、PI3K-Akt信号通路、钙信号途径、神经营养因子信号通路、PPAR信号通路等特异性通路改善AD患者的症状。实验结果显示,各药物组大鼠学习第5天逃逸时间均明显短于模型组(P均<0.05),第6天穿越平台次数均明显多于模型组(P均<0.05),目标象限停留时间均明显长于模型组(P均<0.05),海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05)。结论NF-κB通路及相关靶标可能为七福饮和当归芍药散发挥同病异治作用的共性靶点,两方可能通过抑制神经炎症反应来干预AD。

关键词：阿尔茨海默病七福饮当归芍药散网络药理学同病异治

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当归芍药散对AD大鼠线粒体稳态及AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2023年第3期29卷 9-16页

作者：杨苗于文静贺春香金怡杰李泽李平邓思思易亚乔成绍武宋祯彦湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室长沙410208

目的:探讨当归芍药散对阿尔茨海默病(AD)大鼠线粒体形态和功能的影响及作用机制。方法:采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)构建AD模型大鼠。40只大鼠随机分为假手术组、模型组、当归芍药散低、中、高剂量(12、24、36 g·kg^(-1))组... 详细信息

目的:探讨当归芍药散对阿尔茨海默病(AD)大鼠线粒体形态和功能的影响及作用机制。方法:采用双侧侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)构建AD模型大鼠。40只大鼠随机分为假手术组、模型组、当归芍药散低、中、高剂量(12、24、36 g·kg^(-1))组,连续灌胃14 d后透射电镜观察大鼠海马区线粒体形态变化,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,免疫荧光检测活性氧(ROS)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ(COXⅣ)、PGC-1α mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、PGC-1α蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马区线粒体损伤明显,ROS产生和细胞凋亡率显著增高(P<0.01),MFN2、COXⅣ、PGC-1α mRNA表达显著下调,Drp1 mRNA表达显著上调,p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白明显下调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,当归芍药散中、高剂量组明显改善线粒体损伤,ROS产生减少,细胞凋亡率下降(P<0.01),MFN2、COXⅣ、PGC-1α mRNA表达显著上调,Drp1 mRNA表达显著下调,p-AMPK/AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白显著上调(P<0.01)。结论:当归芍药散可以显著改善AD模型大鼠线粒体稳态失衡。

关键词：当归芍药散阿尔茨海默病线粒体稳态腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK) 沉默信息调节因子1(SIRT1) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)

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基于网络药理学和实验验证黄芪甲苷和三七总皂苷配伍调控血管生成抗脑缺血作用机制

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1017-1027页

作者：李艳玲陆展辉张燕燕吴莎莎谢天浩丁煌张伟刘晓丹邓常清湖南中医药大学中西医结合学院中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

采用网络药理学结合体内、外实验验证探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)调控血管生成治疗脑缺血的作用机制。运用网络药理学预测ASTⅣ和PNS通过介导血管生成治疗脑缺血的可能机制。... 详细信息

采用网络药理学结合体内、外实验验证探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)调控血管生成治疗脑缺血的作用机制。运用网络药理学预测ASTⅣ和PNS通过介导血管生成治疗脑缺血的可能机制。体内实验:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、ASTⅣ(10 mg·kg^(-1))+PNS(25 mg·kg^(-1))组,大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立脑缺血模型。ASTⅣ及PNS灌胃给药,每天2次。采用Longa法测定神经功能缺损症状;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理损伤;免疫组化测定血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的表达;免疫荧光测定血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、VEGFA、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达。体外实验:原代培养并鉴定脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),取第3代rBMECs,设置对照组、模型组、ASTⅣ+PNS(50μmol·L^(-1)+30μmol·L^(-1))组、LY294002(PI3K/AKT信号通路抑制剂)组、740Y-P组(PI3K/AKT信号通路激动剂)、ASTⅣ+PNS+LY294002组及ASTⅣ+PNS+740Y-P组,氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)建立缺血再灌注损伤模型。CCK-8检测rBEMCs存活情况,划痕实验检测rBEMCs迁移能力;人工基底膜(matrigel)检测rBEMCs成管数;内皮细胞渗漏实验检测内皮细胞渗透率;蛋白质印迹检测rBEMCs中VEGFR2、VEGFA、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达。网络药理学结果显示,ASTⅣ及PNS可调节脑梗死血管生成的21个靶点,包括VEGFA、AKT1等,大部分涉及PI3K/AKT信号通路。体内实验发现,与模型组比较,ASTⅣ+PNS配伍能降低脑缺血后神经功能缺损评分(P<0.05)及脑组织细胞损伤率(P<0.05),增加vWF及VEGFA蛋白的表达(P<0.01),促进血管新生,且显著升高PI3K/AKT通路相关蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。体外实验发现,与模型组比较,ASTⅣ+PNS、740Y-P、ASTⅣ+PNS+LY294002及ASTⅣ+PNS+740Y-P均能增加OGD/R后rBEMCs存活率,增强rBEMCs迁移率,增加rBEMCs成管数,增强PI3K/AKT通路相关蛋白表达,降低内皮细胞渗透率(P<0.05,P<0.01);与LY294002组比较,ASTⅣ+PNS+LY294002组rBEMCs存活率、迁移率、成管数及PI3K/AKT通路相关蛋白表达显著增加,内皮细胞渗透率显著减少(P<0.05,P<0.01);与ASTⅣ+PNS组和740Y-P组比较,ASTⅣ+PNS+740Y-P组rBEMCs存活率、迁移率、成管数及PI3K/AKT通路相关蛋白表达显著增加,内皮细胞渗透率显著降低(P<0.01)。该研究表明,ASTⅣ和PNS在脑缺血后能促进血管生成,机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：黄芪甲苷三七总皂苷血管内皮细胞生长因子(VEGF)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路

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寿胎丸通过调控Nrf2信号通路减轻人绒毛膜滋养层细胞的氧化损伤治疗复发性流产

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中国实验方剂学杂志 2023年第3期29卷 44-51页

作者：申思楠牟珍妮唐丽雷磊湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室中西医结合学院长沙410208

目的:研究寿胎丸含药血清通过核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对过氧化氢(H_(2)O_(2))损伤的人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)的保护作用,并阐明其可能的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度的H_(2)O_(2)溶液(25、50、... 详细信息

目的:研究寿胎丸含药血清通过核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对过氧化氢(H_(2)O_(2))损伤的人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)的保护作用,并阐明其可能的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度的H_(2)O_(2)溶液(25、50、100、200、400μmol·L^(-1))对HTR-8/Svneo增殖的抑制作用,CCK-8法筛选含药血清的最佳浓度。将细胞分为空白组、模型组、地屈孕酮组、寿胎丸组,CCK-8法检测含药血清对H2O2诱导的HTR-8/Svneo细胞增殖活力的影响,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞内活性氧(ROS)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达;细胞免疫荧光检测Nrf2、Bcl-2的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Nrf2、Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA的表达。结果:CCK-8法筛选H_(2)O_(2)最佳造模浓度为50μmol·L^(-1),含药血清的最佳体积分数为10%。与空白组比较,模型组细胞的增殖活力显著降低(P<0.01),细胞内ROS含量显著升高(P<0.01),Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),Caspase-3、Bax蛋白表达显著上升(P<0.01),Nrf2 mRNA表达显著降低(P<0.01),Caspase-3、Bax mRNA的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,寿胎丸组细胞的增殖活力显著上升(P<0.01),细胞内ROS含量显著降低(P<0.01),Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达明显上升(P<0.05,P<0.01),Caspase-3、Bax蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),Nrf2 mRNA表达明显升高(P<0.05),Caspase-3、Bax mRNA的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:寿胎丸含药血清可以通过激活Nrf2信号通路来抑制H_(2)O_(2)诱导的细胞凋亡,对人绒毛膜滋养层细胞具有一定的保护作用。

关键词：寿胎丸氧化应激凋亡人绒毛膜滋养层细胞核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)

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当归芍药散通过调控NF-κB炎性通路改善H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用

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中国实验方剂学杂志 2020年第10期26卷 1-7页

作者：余婧萍贺春香成绍武陈易璇宋祯彦湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室长沙410208

目的:研究当归芍药散(Danggui Shaoyaosan,DSS)含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)氧化应激和炎症反应的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定SH-SY5Y细胞存活率构建最佳时间和最佳剂量的H2O2诱导的细胞损伤... 详细信息

目的:研究当归芍药散(Danggui Shaoyaosan,DSS)含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)氧化应激和炎症反应的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定SH-SY5Y细胞存活率构建最佳时间和最佳剂量的H2O2诱导的细胞损伤模型。实验设空白组,模型组,当归芍药散含药血清高、中、低剂量组(2.5%,5%,10%)。采用MTT比色法检测DSS干预后细胞活率,分光光度法测定抗氧化指标丙二醛(MDA),过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达水平,采用免疫荧光检测核转录因子-κB(NF-κB)p65的核移位情况。结果:H2O2浓度为250μmol·L-1干预24 h后SH-SY5Y细胞存活率约55%为最佳造模条件,DSS高、中、低剂量干预后,与模型组比较,细胞活率呈剂量依赖性上升(P<0.05),MDA明显下调(P<0.05),抗氧化指标CAT,SOD和GSH明显上升(P<0.05);H2O2能显著上调SH-SY5Y细胞炎性因子TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平,并介导胞质NF-κB的激活和向核移位,当归芍药散含药血清能呈剂量依赖性抑制NF-κB p65的入核并降低IL-1β,IL-6和TNF-α等细胞炎性因子的mRNA表达水平。结论:当归芍药散含药血清可以显著降低H2O2诱导的SH-SY5Y细胞的氧化损伤通过改善其抗氧化状态,同时也能降低炎症反应通过抑制NF-κB信号通路。

关键词：当归芍药散氧化应激核转录因子-κB(NF-κB) 炎症

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