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僵蚕提取液促进小胶质细胞极化改善全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤及行为学功能

中国中药杂志 2023年第6期48卷 1589-1596页

作者：侯培媚徐昊李泽康周豪王珊珊葛金文湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合防治心脑血管疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

探讨僵蚕提取液对全脑缺血再灌注(I/R)大鼠行为学改善的作用及可能的机制。全自动血凝仪检测僵蚕提取液干预人血浆凝血四项对提取液进行质控。4周龄雄性SD大鼠60只,分为假手术组,模型组,阳性药物(肝素)组,僵蚕提取液低、中、高剂量组。... 详细信息

探讨僵蚕提取液对全脑缺血再灌注(I/R)大鼠行为学改善的作用及可能的机制。全自动血凝仪检测僵蚕提取液干预人血浆凝血四项对提取液进行质控。4周龄雄性SD大鼠60只,分为假手术组,模型组,阳性药物(肝素)组,僵蚕提取液低、中、高剂量组。除假手术组外,其余5组大鼠行双侧颈总动脉反复夹闭-再通手术,构建I/R大鼠模型。僵蚕提取液低、中、高剂量组予僵蚕提取液(0.45、0.9、1.8 mg·g^(-1)·d^(-1))腹腔注射,阳性药物(肝素)组予肝素注射剂(900 IU·kg^(-1))腹腔注射,假手术组、模型组予等体积生理盐水腹腔注射,共计7 d;平衡木(BBT)检测大鼠行为学;苏木素-伊红(HE)染色检测脑组织形态学变化,免疫荧光法检测脑皮质(CC)区白细胞共同抗原(CD45)、白细胞分化抗原(CD11b)、精氨酸酶1(Arg-1);酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)蛋白表达水平;非靶向代谢组学检测僵蚕提取液、干预后大鼠血浆、干预后大鼠脑皮质代谢物水平。质控结果显示僵蚕提取液有效延长了人血浆活化部分促凝血酶原激酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT),与往期提取所得僵蚕提取液抗凝作用相似。行为学检测结果显示与假手术组比较,模型组大鼠BBT得分增加;与模型组相比,僵蚕提取液干预后小鼠BBT评分降低。组织形态学结果显示与假手术组比较,模型组大鼠CC脑区可见大量神经细胞形态改变;与模型组相比,僵蚕提取液干预后大鼠CC脑区异常形态神经细胞减少。免疫荧光结果显示与假手术组比较,模型组大鼠CC脑区CD45、CD11b平均荧光强度增加;与模型组相比,僵蚕提取液低剂量组大鼠CC脑区CD11b平均荧光强度减少,Arg-1平均荧光强度增多;僵蚕提取液中、高剂量组大鼠CC脑区CD45、CD11b平均荧光强度减少,Arg-1平均荧光强度增多。ELISA结果显示与假手术组比较,模型组大鼠CC脑区IL-1β、IL-6表达增加,IL-4、IL-10表达减少;与模型组比较,僵蚕提取液低、中、高剂量组IL-1β、IL-6表达不同程度减少,IL-4、IL-10表达不同程度增加。非靶向代谢组学结果显示僵蚕提取液共计鉴定代谢物809个,大鼠血浆中新增代谢物57个,大鼠脑皮质新增代谢物45个。具有抗凝药效的僵蚕提取液改善I/R大鼠行为学功能,其机制可能是促进小胶质细胞向M2型极化,增强其抗炎及吞噬功能,从而降低脑皮质神经细胞受损。

关键词：缺血性脑卒中缺血-再灌注损伤僵蚕提取液小胶质细胞

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基于脑小血管病临床脑血流特点构建并评估不完全性全脑缺血再灌注大鼠模型

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中国病理生理杂志 2023年第7期39卷 1330-1338页

作者：王珊珊徐昊侯培媚李泽康周丽娟葛金文湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合防治心脑血管疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的:基于脑小血管病(CSVD)的脑血流特点构建和评估不完全性全脑缺血再灌注大鼠模型,以期为CSVD等缺血性脑血管疾病的基础研究提供理想的大鼠实验模型。方法:将126只雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、轻损伤模型组(minor组)和重损伤... 详细信息

目的:基于脑小血管病(CSVD)的脑血流特点构建和评估不完全性全脑缺血再灌注大鼠模型,以期为CSVD等缺血性脑血管疾病的基础研究提供理想的大鼠实验模型。方法:将126只雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、轻损伤模型组(minor组)和重损伤模型组(serious组),每组42只。采用双侧颈总动脉夹闭-开放循环操作的方法,构建大鼠不完全性全脑缺血再灌注模型,激光散斑血流成像系统评估脑血流实时变化;于造模后2、24和72 h,评估造模动物存活率和动物行为学(平衡木实验,BBT)评分;于造模2、24和72 h取材,采用HE染色观察大鼠不同脑区组织病理形态改变;并运用非靶向代谢组学分析模型大鼠血浆和脑皮质区差异代谢物,评估模型损伤程度。结果:(1)与sham组比较,minor组和serious组大鼠总存活率平均值分别为83.2%和73.7%(P<0.05);(2)残存脑血流量平均值分别为56.3%和40.9%;(3)神经功能检查显示,与sham组比较,minor组和serious组造模后2、24和72 h的BBT评分均显著升高(P<0.05);(4)HE染色镜下可见广泛脑皮质(M1区和RSA区最为明显)、腹内测下丘脑腹外侧部(VMHvl)和海马C2区神经细胞形态发生不同程度改变。(5)非靶向代谢组学结果显示,sham组和serious组大鼠血浆差异性代谢物总数45个,上调代谢物总数33个,下调代谢物总数12个;脑皮质RSA区差异性代谢物总数19个,上调代谢物总数6个,下调代谢物总数13个,提示造模导致了大鼠神经-内分泌功能的紊乱。结论:双侧颈总动脉夹闭-开放循环造模方法可导致大鼠脑皮质、VMHvl和海马C2区散在性广泛损伤,其损伤机制可能与代谢紊乱、氧化应激损伤等有关。该模型为研究CSVD反复缺血再灌注损伤提供了新的大鼠实验模型。

关键词：脑小血管病缺血性脑卒中缺血再灌注损伤动物模型

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僵蚕提取液激活凝血因子XII介导缺血再灌注大鼠血管新生研究

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中草药 2022年第23期53卷 7421-7429页

作者：王珊珊徐昊梁祺杨彤李泽康侯培媚葛金文湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合防治心脑血管疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南长沙410208

目的基于接触系统探讨僵蚕提取液激活凝血因子XII(coagulation factor XII,FXII)对缺血性脑卒中大鼠血管新生的干预作用。方法检测僵蚕提取液干预血浆凝血四项,体外检测僵蚕提取液对FXII及其下游底物激肽释放酶(kallikreinkinin,KK)... 详细信息

目的基于接触系统探讨僵蚕提取液激活凝血因子XII(coagulation factor XII,FXII)对缺血性脑卒中大鼠血管新生的干预作用。方法检测僵蚕提取液干预血浆凝血四项,体外检测僵蚕提取液对FXII及其下游底物激肽释放酶(kallikreinkinin,KK)的激活作用。通过大鼠脑缺血再灌注损伤模型,检测大鼠的脑形态学及FXII、KK、血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factors,VEGF)、CD31、Brdu+/vWF+蛋白表达;通过氧糖剥夺模型,检测大鼠脑微血管内皮细胞的形态学改变、细胞增殖情况及VEGF的表达。采用LC-MS鉴定僵蚕提取液药效物质。结果在体外实验中,僵蚕提取液延长了人血浆部分凝血酶原时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)(P<0.05),激活FXII并导致下游底物KK的生成,呈剂量相关性(P<0.05);在大鼠脑缺血再灌注模型中,僵蚕提取液改善了大鼠神经元损伤,激活了FXII,导致KK生成和VEGF、CD31、Brdu+/v WF+的表达增加(P<0.05、0.01);在细胞氧糖剥夺实验中,僵蚕提取液干预提高了大鼠脑微血管内皮细胞的增殖和VEGF的表达(P<0.05)。LCMS鉴定僵蚕提取液含代谢物共计809个。结论僵蚕提取液可改善缺血再灌注大鼠神经功能损伤,其机制可能与抗凝和促脑微血管内皮细胞增殖有关。

关键词：缺血性脑卒中僵蚕凝血因子XII 缓激肽血管内皮生长因子

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铜死亡研究的文献计量学与可视化分析

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中医康复 2025年第4期2卷 35-42页

作者：曾倩如柳思聪曹智花李晟秦莉花湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 南通大学医学院江苏南通226019 湖南中医药大学护理学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合防治心脑血管疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的:利用文献计量学方法对近10年铜死亡相关的国内外文献进行可视化分析,以便更好地了解铜死亡的研究进展,寻找潜在的研究方向。方法:以中国知网、万方、Web of Science核心数据库为数据来源,使用CiteSpace软件对2014年1月1日~2024年9... 详细信息

目的:利用文献计量学方法对近10年铜死亡相关的国内外文献进行可视化分析,以便更好地了解铜死亡的研究进展,寻找潜在的研究方向。方法:以中国知网、万方、Web of Science核心数据库为数据来源,使用CiteSpace软件对2014年1月1日~2024年9月30日有关铜死亡研究的相关文献进行发文量、国家、作者、机构和关键词的可视化分析。结果:铜死亡发文量近几年迅速增加,中国在发文数量上居首位,但中心性低于二、三名,即美国和印度;国内发文量前4的作者是王议贤、曹建平、焦旸、朱巍;机构间合作较少;热点话题主要集中在细胞凋亡、自噬、氧化应激等机制和相关疾病的探索上;神经退行性疾病和癌症是与铜死亡密切相关的疾病。结论:早期铜死亡发病机制的研究是铜死亡机制研究领域的热点,后期逐渐呈现出发病机制与临床疾病并行研究的趋势。

关键词：铜死亡文献计量学 CiteSpace 知识图谱

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从气血理论探讨病理性血管重构的研究思路

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中华中医药杂志 2019年第10期34卷 4713-4717页

作者：张伟邓常清湖南中医药大学中西医结合学科湖南410208 湖南中医药大学心脑血管疾病防治湖南省重点实验室湖南410208

文章分析了病理性血管重构(VR)的主要病理生理机制,指出血管内皮细胞损伤、血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的变化以及外膜成纤维细胞表型转化是VR的细胞学基础。中医药具有多环节、多靶点的整体调节作用,符合VR与多个细胞、多个病理环... 详细信息

文章分析了病理性血管重构(VR)的主要病理生理机制,指出血管内皮细胞损伤、血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的变化以及外膜成纤维细胞表型转化是VR的细胞学基础。中医药具有多环节、多靶点的整体调节作用,符合VR与多个细胞、多个病理环节有关的机制,在防治VR方面具有良好的前景。通过分析VR的中医病因病机,指出VR的基本病机是气虚血瘀、本虚标实。提出以益气活血为基本治法,开展益气活血中药(如黄芪和当归配伍)改善病理性VR的配伍方法、主要药效物质和作用机制的研究,从而科学揭示病理性VR病机与防治的科学内涵。

关键词：血管重构中医药血管内皮细胞血管平滑肌细胞成纤维细胞细胞外基质

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整合素αvβ3介导EPCs修复损伤血管内皮及补阳还五汤的干预作用

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湖南中医药大学学报 2018年第3期38卷 261-265页

作者：贺冰刘晓丹李亮李平张伟湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005 中医药防治心脑血管疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208

目的探讨补阳还五汤促进EPCs修复损伤血管内皮的作用,从归巢环节阐释其作用机制,为中医药防治心脑血管疾病提供参考。方法以补阳还五汤灌胃及尾静脉输注EPCs作用于内皮损伤的模型大鼠,从血管内皮形态、EPCs归巢等方面评价内皮损伤修复情... 详细信息

目的探讨补阳还五汤促进EPCs修复损伤血管内皮的作用,从归巢环节阐释其作用机制,为中医药防治心脑血管疾病提供参考。方法以补阳还五汤灌胃及尾静脉输注EPCs作用于内皮损伤的模型大鼠,从血管内皮形态、EPCs归巢等方面评价内皮损伤修复情况,从整合素αvβ3和αvβ5介导的SDF-1/CXCR-4信号通路了解该方促进EPCs归巢的机制。结果与单用EPC组(E组)和单用药物组(b组)比较,补阳还五汤联合EPC组(B组)αvβ3表达显著增加(P<0.05),血管SDF-1表达显著增高(P<0.01)。结论补阳还五汤能促进EPC修复损伤的血管内皮,其作用机制可能与该方能上调整合素αvβ3介导的SDF-1信号通路相关蛋白,促进EPCs的归巢有关。

关键词：整合素αvβ3 整合素αvβ5 内皮祖细胞补阳还五汤归巢

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黄芪甲苷和三七的主要有效成分配伍对小鼠脑缺血再灌注后脑组织能量代谢的影响

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中草药 2014年第2期45卷 220-226页

作者：黄小平王蓓邱咏园唐映红曾嵘邓常清湖南中医药大学分子病理实验室湖南省中西医结合心脑血管疾病重点实验室细胞生物学与分子技术湖南省高校重点实验室湖南长沙410208

目的研究黄芪甲苷和三七的主要有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别配伍对小鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织能量代谢的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d,末次给药1 h后,结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再灌注2... 详细信息

目的研究黄芪甲苷和三七的主要有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别配伍对小鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织能量代谢的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d,末次给药1 h后,结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再灌注24 h。采用HPLC法测定脑组织ATP、ADP、AMP水平,计算能荷(EC)值;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和Western-blotting法测定脑组织葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)基因和蛋白表达。结果模型组脑组织ATP、ADP、AMP的量及EC值显著降低(P<0.01),GLUT3基因和蛋白表达显著增强(P<0.05)。黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1、黄芪甲苷+三七皂苷R1均可显著增加脑组织ATP、ADP、AMP的量,增强脑组织GLUT3基因和蛋白表达,黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1改善上述指标的作用强于其单个有效成分;除4个有效成分单用外,黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1可显著增加EC值;黄芪甲苷+人参皂苷Rg1、黄芪甲苷+人参皂苷Rb1和黄芪甲苷+三七皂苷R1配伍对改善脑组织能量代谢指标具有协同或相加作用。结论黄芪甲苷和三七的主要有效成分可改善脑缺血再灌注损伤后脑组织能量代谢,促进缺血脑组织对能量物质的利用,黄芪甲苷与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1配伍对改善脑缺血后脑组织能量代谢具有增效作用。

关键词：黄芪甲苷人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 三七皂苷R1 配伍脑缺血能量代谢葡萄糖转运蛋白3

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黄芪甲苷、人参皂苷Rg_1、Rb_1和三七皂苷R_1抗小鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤和促进能量代谢的配伍研究

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湖南中医药大学学报 2014年第7期34卷 5-11页

作者：黄小平王蓓邱咏园曾嵘邓常清唐映红湖南中医药大学分子病理实验室湖南省中西医结合心脑血管疾病重点实验室细胞生物学与分子技术湖南省高校重点实验室湖南长沙410208

目的从氧化应激和能量代谢研究黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1抗小鼠脑缺血再灌注损伤的配伍关系,明确其有效的配伍剂量。方法采用L9(34)正交试验法,将C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d后结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再... 详细信息

目的从氧化应激和能量代谢研究黄芪甲苷、人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1抗小鼠脑缺血再灌注损伤的配伍关系,明确其有效的配伍剂量。方法采用L9(34)正交试验法,将C57BL/6小鼠随机分组,连续给药3 d后结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,再灌注30 min,测定脑组织三磷酸腺苷(ATP)、还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量、丙二醛(Malonaldehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性。结果黄芪甲苷、人参皂苷Rb1、Rg1和三七皂苷R1能增加脑组织中ATP、GSH含量和SOD活性,降低MDA的含量,对脑缺血再灌注后的氧化应激损伤具有抑制作用,改善脑组织能量代谢。4种有效成分配伍具有增强抗脑缺血再灌注损伤的作用。结论 4种有效成分抗小鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤和改善能量代谢的有效配伍剂量为黄芪甲苷40 mg/kg,人参皂苷Rg150 mg/kg,人参皂苷Rb140 mg/kg,三七皂苷R110 mg/kg。

关键词：黄芪甲苷人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 三七皂苷R1 配伍脑缺血再灌注氧化应激能量代谢

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