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中药复方提取物对猴免疫缺陷病毒感染恒河猴外周CD4＋T淋巴细胞亚群的影响

中国医药 2011年第5期6卷 618-620页

作者：朱惠斌陈颂符林春卢芳国刘吉勇王国佐葛金文湖南中医药大学第一附属医院检验科长沙410007 广州中医药大学热带医学研究所艾滋病研究室湖南中医药大学基础医学院微生物教研室病理生理学实验室中西医结合学院

目的探讨中药复方提取物湘A1号（HNA-1）对猴免疫缺陷病毒（SIV）感染恒河猴外周血CD4＋T淋巴细胞亚群的影响。方法利用HNA-1治疗SIV感染恒河猴，同时对不同时间点的冻存外周血单核细胞（PBMC）进行幼稚型细胞、中央型记忆细胞和效应型... 详细信息

目的探讨中药复方提取物湘A1号（HNA-1）对猴免疫缺陷病毒（SIV）感染恒河猴外周血CD4＋T淋巴细胞亚群的影响。方法利用HNA-1治疗SIV感染恒河猴，同时对不同时间点的冻存外周血单核细胞（PBMC）进行幼稚型细胞、中央型记忆细胞和效应型记忆细胞的分类和计数，并检测血浆病毒载量，对各组数据进行统计分析。结果高、低剂量治疗组CD4＋T淋巴细胞绝对数治疗8周后较治疗前和对照组出现了较为明显的上升（P〈0．05），且停药后较快回落。高剂量组治疗8周和16周后幼稚型CD4＋T淋巴细胞比例均较治疗前明显增长（P〈0．05），低剂量组治疗8周和16周后也出现了明显增长（P〈0．05）。转换成细胞绝对数后，高、低剂量组幼稚型CD4＋T淋巴细胞分别从治疗前的（364±342）个／μl、（309±216）个/μl，增至治疗8周后的（699±319）个／μl、（639±337）个／μl，差异有统计学意义（P〈0．05）。而血浆病毒载量改变不明显。结论中药能有效增加SIV感染恒河猴的外周幼稚型CD4＋T淋巴细胞，HNA-1可能会延缓获得性免疫缺陷综合征的发生，有望作为高效抗逆转录病毒疗法的辅助药物加快免疫重建，值得更长期、全面地对其进行深入研究。

关键词：免疫缺陷病毒 CD4+T淋巴细胞幼稚型CD4+T淋巴细胞中药复方提取物

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冠心病心血瘀阻证血浆代谢组学的检测分析

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中国中西医结合杂志 2010年第6期30卷 579-584页

作者：简维雄袁肇凯黄献平陈清华郑景辉李勇华王丽萍湖南中医药大学中医诊断研究所国家中医药管理局病理生理学实验室长沙410007

目的寻找冠心病(coronary heart disease,CHD)心血瘀阻证患者血浆代谢产物谱,分析CHD心血瘀阻证血浆层面的代谢途径。方法采用QP2010气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测CHD心血瘀阻证组和CHD非心血瘀阻证组及健康对照组血浆代谢产物,对不... 详细信息

目的寻找冠心病(coronary heart disease,CHD)心血瘀阻证患者血浆代谢产物谱,分析CHD心血瘀阻证血浆层面的代谢途径。方法采用QP2010气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测CHD心血瘀阻证组和CHD非心血瘀阻证组及健康对照组血浆代谢产物,对不同组之间代谢产物含量的变化主成分分析(principal components analysis,PCA)、偏最小二乘法分析(partial lease squares,PLS)。结果 (1)主成分分析:显示3组样本主成分积分值,3组分聚于椭圆形散点图的3个区域,其中CHD心血瘀阻证组中乳酸、β-羟基丁酸、尿素、油酸、硬脂酸、花生四烯酸物质含量上调,而柠檬酸含量下调。(2)偏最小二乘法分析:显示健康组远离CHD心血瘀阻证组与CHD非心血瘀阻证组,CHD心血瘀阻证组与CHD非心血瘀阻证组位置比较靠近,可以判别他们同属一类;标准化偏最小二乘系数图显示CHD心血瘀阻证组与硬脂酸、花生四烯酸、尿素、乳酸、β-羟基丁酸呈正相关,与油酸、脯氨酸、甘氨酸、柠檬酸呈负相关。依据VIP值排列各变量与药物干预的密切程度,依次是花生四烯酸、硬脂酸、乳酸、尿素、柠檬酸、β-羟基丁酸、亚油酸、葡萄糖、丙氨酸、油酸和脯氨酸。(3)差异性分析:11种有明显变化的代谢产物差异性分析显示,花生四烯酸、硬脂酸、乳酸、尿素、β-羟基丁酸、油酸在冠心病中均有不同程度提高,以CHD心血瘀阻证中增高最为明显(均P<0.01)。其中CHD心血瘀阻证组的乳酸、β-羟基丁酸、亚油酸及葡萄糖值较CHD非心血瘀阻证增高显著(均P<0.01);而CHD心血瘀阻证组葡萄糖与健康组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。柠檬酸在冠心病中呈现不同程度的下降,其中CHD心血瘀阻证组与健康组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 (1)花生四烯酸、硬脂酸、乳酸、尿素、柠檬酸、β-羟基丁酸、油酸、葡萄糖、丙氨酸为CHD心血瘀阻证患者的血浆代谢产物谱。(2)从血浆代谢产物谱分析,CHD心血瘀阻证与脂质代谢、糖代谢相关,同时也与缺氧、剧痛引起的应激相关。

关键词：代谢组学冠心病心血瘀阻证血浆

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论神经细胞外基质与中医脾土相关及其对脑缺血保护的启示

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中国中医药信息杂志 2010年第3期17卷 5-6,56页

作者：刘旺华李花周小青湖南中医药大学中医诊断研究所病理生理实验室湖南长沙410007

缺血性卒中具有发病率高、致残率高、病死率高的“三高”特点,是威胁人类尤其是中老年人健康的常见病、多发病。在联合国世界卫生组织调查的57个国家中死于脑血管病者占11.3%,其中40个国家脑血管病占死因前3位。我国卫生部卫生统计信息... 详细信息

缺血性卒中具有发病率高、致残率高、病死率高的“三高”特点,是威胁人类尤其是中老年人健康的常见病、多发病。在联合国世界卫生组织调查的57个国家中死于脑血管病者占11.3%,其中40个国家脑血管病占死因前3位。我国卫生部卫生统计信息中心《2006年中国卫生事业发展情况统计公报》显示，脑血管病的死亡率为105．5／10万，居死亡原因第2位。

关键词：细胞外基质健脾补土法脑缺血

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冠心病血瘀证遗传特征研究的若干思考

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中华中医药学刊 2010年第5期28卷 995-997页

作者：王丽萍郑景辉简维雄袁肇凯(指导) 湖南中医药大学中医诊断研究所国家中医药管理局病理生理实验室湖南省高校重点实验室中医证候研究室湖南长沙410007

血瘀证是冠心病中最常见的证型之一。研究血瘀证是否为具有遗传特征的"多基因证",血瘀证存在着哪些遗传易感基因,其位点如何,这些遗传易感基因在血瘀证病人血液处于血栓前高凝状态时的表达如何。本文就这些问题立足证相关基... 详细信息

血瘀证是冠心病中最常见的证型之一。研究血瘀证是否为具有遗传特征的"多基因证",血瘀证存在着哪些遗传易感基因,其位点如何,这些遗传易感基因在血瘀证病人血液处于血栓前高凝状态时的表达如何。本文就这些问题立足证相关基因的研究现状,以冠心病血瘀证为切入点运用遗传流行病学的方法从医学遗传学角度对血瘀证的证候本质提出几点思考。

关键词：冠心病血瘀证遗传流行病学基因芯片

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心血瘀阻证微环境对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响

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湖南中医药大学学报 2010年第9期30卷 38-42,53页

作者：郑景辉李勇华王丽萍袁肇凯黄献平简维雄孙贵香国家重点学科国家中医药管理局病理生理实验室湖南中医药大学中医诊断学研究所湖南长沙410208

目的观察心血瘀阻证微环境(Heart-Blood Stagnation Syndrome Microenvirment)对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法采用全骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标... 详细信息

目的观察心血瘀阻证微环境(Heart-Blood Stagnation Syndrome Microenvirment)对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法采用全骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标志;细胞培养基中加入心血瘀阻证大鼠坏死心肌组织和血清的方法模拟心血瘀阻证微环境;四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察心血瘀阻证微环境对MSCs增值率从而选择最大有效浓度;第4代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化;相差显微镜、免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果鉴定心肌细胞。结果大鼠MSCs细胞表面抗原CD11b和CD45阳性细胞率小于2%,CD90阳性率达到98%以上;疫细胞化学染色显示心血瘀阻证微环境组、5-aza组和健康大鼠微环境组中Desmin和MHC呈阳性,其中心血瘀阻证微环境组表达高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05),空白对照组未见表达;RT-PCR结果显示心血瘀阻证微环境组、5-aza组和健康大鼠微环境组细胞肌钙蛋白(cTnI)和心脏早发育基因GATA-4 mRNA表达水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),心血瘀阻证微环境组显著高于5-aza组和健康大鼠微环境组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外模拟大鼠心血瘀阻证微环境能诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞。

关键词：心血瘀阻证微环境骨髓间充质干细胞心肌梗死/中医药疗法细胞培养大鼠

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代谢组学与中医证候的相关性研究

代谢组学与中医证候的相关性研究

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全国第十一次中医诊断学术年会

作者：简维雄袁肇凯黄献平郑景辉王丽萍胡志希孙贵香湖南中医药大学中医诊断研究所、国家中医药管理局病理生理学实验室

通过对代谢组学与中医证候整体性关系、时空性关系以及结果分析时的关系的比较,认为代谢组学与中医证候在分析问题以及解决问题的具有相同的思维。

关键词：证候代谢组学

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冠心病血瘀证遗传特征研究的若干思考

冠心病血瘀证遗传特征研究的若干思考

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第四次全国中西医结合诊断学术研讨会

作者：王丽萍袁肇凯湖南中医药大学中医诊断研究所国家中医药管理局病理生理实验室湖南省高校重点实验室中医证候研究室

1目前研究证相关基因的几种思路及其局限性"证"是疾病发生过程中不同阶段病因病机的高度概括,既然同一证有共同的临床表达和病理机制,那么其肯定有共同的物质基础,而这种物质基础就很有可能反映在基因或基因组水平上。故而诸... 详细信息

1目前研究证相关基因的几种思路及其局限性"证"是疾病发生过程中不同阶段病因病机的高度概括,既然同一证有共同的临床表达和病理机制,那么其肯定有共同的物质基础,而这种物质基础就很有可能反映在基因或基因组水平上。故而诸多学者在异病同证中,寻找共同性结构基因组与功能基因组,并且在同病异证间观察它们的差异性,从而建立建立一个"证-基因表达谱",使原本模糊、杂乱的"证"变得明确、规范。通过证的相关基因组的研究,有利

关键词：冠心病血瘀证中医证候中医证型基因表达谱病证结合基因芯片技术以方测证家系调查基因组学特征研究

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论神经细胞外基质与中医脾土相关及其对脑缺血保护的启示

论神经细胞外基质与中医脾土相关及其对脑缺血保护的启示

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中华中医药学会中医诊断学分会第十次学术研讨会

作者：刘旺华李花周小青湖南中医药大学中诊研究所病理生理实验室

细胞外基质对于神经元的生长、营养、修复、再生具有重要作用,脑缺血性疾病中抑制神经细胞外基质降解对于脑缺血损伤具有保护作用。通过对比细胞外基质与中医"脾土"的功能,认为其二者具有诸多相似点,健脾补土法可能是通过保... 详细信息

细胞外基质对于神经元的生长、营养、修复、再生具有重要作用,脑缺血性疾病中抑制神经细胞外基质降解对于脑缺血损伤具有保护作用。通过对比细胞外基质与中医"脾土"的功能,认为其二者具有诸多相似点,健脾补土法可能是通过保护神经细胞外基质抗脑缺血损伤的有效方法。

关键词：细胞外基质健脾补土法脑缺血

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论神经细胞外基质与中医脾土相关及其对脑缺血保护的启示

论神经细胞外基质与中医脾土相关及其对脑缺血保护的启示

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中国中西医结合学会诊断专业委员会2009’年会

作者：刘旺华李花周小青湖南中医药大学中医诊断研究所病理生理实验室

关键词：细胞外基质健脾补土法脑缺血

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基于气相色谱-质谱的大鼠心血瘀阻证血浆代谢组学研究

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中华中医药学刊 2009年第4期27卷 796-798页

作者：简维雄黄献平陈清华莫莉郑锦辉孙贵香胡志希袁肇凯湖南中医药大学中医诊断研究所国家中医药管理局病理生理学实验室湖南长沙410007

目的:通过对心血瘀阻证大鼠血浆的代谢产物、血液流变学指标的变化,以及养心通脉方干预后指标改变的分析识别,探讨大鼠心血瘀阻证血浆代谢产物的"组装"规律。方法:32只大鼠分为模型组、空白组、养心通脉方组、假手术组4组,运... 详细信息

目的:通过对心血瘀阻证大鼠血浆的代谢产物、血液流变学指标的变化,以及养心通脉方干预后指标改变的分析识别,探讨大鼠心血瘀阻证血浆代谢产物的"组装"规律。方法:32只大鼠分为模型组、空白组、养心通脉方组、假手术组4组,运用GC-MS法进行血浆代谢组学研究,鉴定各组共有峰,通过对不同组之间代谢产物含量的变化进行主成分分析(PCA),同时检测分析各组血液流变学指标。结果:模型组全血黏度、血浆黏度指标高于其余3组,具有显著性差异(P<0.01);大鼠血浆样品散点图显示模型组与空白组、养心通脉方组、假手术组完全分离。因子载荷图表明乳酸、丙氨酸、缬氨酸、琥珀酸、苹果酸、硬脂酸、花生四烯酸等代谢物质含量明显增高,果糖含量明显降低。养心通脉方干预后代谢物含量、血液流变学指标均不同程度的回调。结论:发生改变的乳酸、丙氨酸、缬氨酸、琥珀酸、苹果酸、硬脂酸、花生四烯酸、果糖等8种代谢物与反映"血瘀"病理的血液流变学指标的改变具有一致性,有可能作为心血瘀阻证代谢性生物标志物。

关键词：代谢组学心血瘀阻证气相色谱-质谱(GC—MS)

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