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巨噬细胞集落刺激因子经PI3K/AKT信号途径影响人乳腺癌MCF-7细胞糖代谢

生物化学与生物物理进展 2019年第4期46卷 398-405页

作者：田云刘臻宁倩莫中成张蒙夏唐圣松长治医学院组织学与胚胎学教研室长治046000 南华大学药物药理研究所组织学与胚胎学教研室衡阳421001 湖南医药学院新型抗体药物及其智能运输系统湖南省重点实验室怀化418000 湖南中医药大学组织胚胎学教研室长沙410208

本文探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人乳腺癌MCF-7细胞糖代谢的影响及其机制.构建胞质稳定转染M-CSF的MCF-7细胞(MCF-7-M);ATP检测试剂盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的ATP生成;葡萄糖测定试剂盒、乳酸测试盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的葡... 详细信息

本文探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人乳腺癌MCF-7细胞糖代谢的影响及其机制.构建胞质稳定转染M-CSF的MCF-7细胞(MCF-7-M);ATP检测试剂盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的ATP生成;葡萄糖测定试剂盒、乳酸测试盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的葡萄糖摄取和乳酸分泌情况;蛋白质印迹法检测在糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-DG)和氧化磷酸化抑制剂OLIG处理后,M-CSF对MCF-7细胞的糖酵解关键酶:己糖激酶2 (HK2)、丙酮酸激酶M2 (PKM2)及葡萄糖转运体1 (GLUT-1)表达的影响;MTT法检测在ATP消耗剂3-溴丙酮酸(3-BrPA)处理后,MCF-7和MCF-7-M细胞对5-FU敏感性的变化.结果发现:MCF-7-M细胞的ATP水平显著高于MCF-7细胞(P<0.05);2-DG降低了MCF-7和MCF-7-M细胞的ATP水平,并且降低MCF-7-M细胞ATP的效果更明显(P<0.01);MCF-7-M细胞的糖摄取能力和乳酸分泌量显著高于MCF-7细胞(P<0.01),经API-2处理后,MCF-7和MCF-7-M细胞葡萄糖消耗和乳酸分泌量均显著减少(P<0.01);MCF-7-M细胞GLUT-1、HK2和PKM2的表达显著高于MCF-7细胞(P<0.01);LY294002和API-2均可抑制MCF-7-M细胞GLUT-1的表达(P<0.05);用3-BrPA处理后,MCF-7-M和MCF-7细胞对5-FU的药物敏感性显著增强(P<0.01).综上,得出结论:胞质M-CSF通过诱导GLUT-1、HK2和PKM2的表达,活化MCF-7细胞糖酵解途径;PI3K/AKT信号通路参与胞质M-CSF活化MCF-7细胞的糖酵解途径.

关键词： M-CSF MCF-7细胞 MCF-7-M细胞糖酵解 PI3K/AKT

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基于自噬与凋亡机制研究左归丸对化疗损伤颗粒细胞及膜细胞的影响

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生物化学与生物物理进展 2022年第9期49卷 1741-1750页

作者：刘涛孙晓峰曾贵荣黄欣怡曾文卓龚力民阳松威刘梦琳湖南中医药大学医学院长沙410208 湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 中南大学湘雅三医院心内科长沙410006 湖南中医药大学药学院长沙410208

目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白... 详细信息

目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白p62、凋亡蛋白Bax、Caspase3在转录水平和翻译水平上的表达。结果10%左归丸含药血清对于细胞存活的挽救率最高。Beclin-1、LC3B、Bax、Caspase3在磷酰胺氮芥作用的颗粒细胞和膜细胞中,相对于空白对照组有高表达(P<0.05),10%左归丸含药血清可下调上述蛋白质在模型组中的表达(P<0.05);然而受体蛋白p62较空白对照组升高(P<0.05),10%左归丸含药血清可上调模型组p62的表达(P<0.05)。此外,在颗粒细胞实验组中,激活或抑制自噬途径后,自噬相关蛋白的表达在发生相应改变的同时,凋亡相关蛋白的表达也会发生相应改变。结论磷酰胺氮芥可通过促进凋亡、激活自噬/溶酶体降解途径的机制损伤颗粒细胞和膜细胞。10%左归丸含药血清能缓解由此带来的损伤,同时影响了颗粒细胞和膜细胞自噬和凋亡过程。在磷酰胺氮芥损伤颗粒细胞的过程和10%左归丸含药血清缓解其损伤过程中均存在自噬与凋亡串流(cross-talk)。

关键词：左归丸化疗颗粒细胞膜细胞自噬凋亡

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胞质M-CSF诱导HeLa细胞侵袭和迁移

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生物化学与生物物理进展 2017年第11期44卷 1007-1015页

作者：张蒙夏刘琪吴海燕李响唐圣松湖南中医药大学组织胚胎学教研室长沙410208 南华大学组织学与胚胎学教研室衡阳421001 南华大学药物药理研究所药物蛋白质组学湖南省高等学校重点实验室衡阳421001 湖南医药学院生物医学研究中心怀化418000

为探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人宫颈癌细胞(He La细胞)侵袭和迁移的影响及机制,采用胞质定位空载体p CMV/cyto/myc与重组载体p CMV/cyto/myc-M-CSF稳定转染He La细胞株,建立稳定高表达胞质M-CSF的细胞系(He La-M细胞).经Transw... 详细信息

为探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人宫颈癌细胞(He La细胞)侵袭和迁移的影响及机制,采用胞质定位空载体p CMV/cyto/myc与重组载体p CMV/cyto/myc-M-CSF稳定转染He La细胞株,建立稳定高表达胞质M-CSF的细胞系(He La-M细胞).经Transwell实验观察胞质M-CSF对He La细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链式反应及蛋白质印迹检测细胞Rho三磷酸鸟苷酶(Rho GTPases)及基质金属酶的表达,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2的活性.结果显示,与转染空载体的He La细胞(He La-C细胞)和对照组He La细胞比较,胞质M-CSF的高表达可明显增强He La细胞在体外的侵袭和迁移能力,其机制与Rho GTPases的活化,以及MMP2表达上调及其活性增高密切相关.

关键词：巨噬细胞集落刺激因子宫颈癌基质金属蛋白酶2 侵袭迁移

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近10年来我国中老年人群骨质疏松症患病率的荟萃分析

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中国骨质疏松杂志 2018年第11期24卷 1415-1420页

作者：罗令孙晓峰皮丕喆应凯强中南大学湘雅三医院骨科湖南长沙410000 湖南中医药大学组织学与胚胎学教研室湖南长沙410208 湖南中医药大学图书馆湖南长沙410208 长沙医学院医学检验系湖南长沙410219

目的通过荟萃分析,了解近10年来我国中老年人群骨质疏松症(osteoporosis, OP)的患病率情况。方法检索PubMed、Medline、EMBASE、Cochrane、CNKI、万方、维普数据库,收集2007年1月到2017年12月期间我国中老年人群OP患病率的研究,提取相... 详细信息

目的通过荟萃分析,了解近10年来我国中老年人群骨质疏松症(osteoporosis, OP)的患病率情况。方法检索PubMed、Medline、EMBASE、Cochrane、CNKI、万方、维普数据库,收集2007年1月到2017年12月期间我国中老年人群OP患病率的研究,提取相关数据,选择Stata12.0软件分析结果。结果共纳入17篇研究,≥40岁的样本共36202例,其中OP样本7711例。本研究异质性显著,故采用随机效应模型合并效应量。荟萃分析显示(95%CI):近10年来,我国中老年人群的OP总体患病率为23%(19%～26%),其中女性27%(23%～31%),男性16%(12%～20%),男女差异显著,与年龄呈正相关。结论近10年来,我国中老年人群OP患病率明显上升,为高发病,形势较严峻,开展相关防治行动意义重大。

关键词：近10年中老年人群骨质疏松症患病率荟萃分析

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左归丸对磷酰胺氮芥体外诱导损伤颗粒细胞自噬与凋亡的影响

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中国比较医学杂志 2021年第1期31卷 22-26页

作者：孙晓峰刘涛曾贵荣陈勇超伍参荣乔江湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 湖南中医药大学医学院长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 湖南中医药大学医学院免疫学教研室长沙410208 湖南中医药大学附属第一医院妇产科长沙410007

目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组... 详细信息

目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组(Control);②模型组(M);③左归丸含药血清组(10%ZGW);④模型+左归丸含药血清组(M+10%ZGW)、以PM处理②④组24 h建立化疗源性颗粒细胞损伤模型后,①②组中加入10%正常大鼠血清,③④组中加入10%左归丸含药血清,37℃,5%CO2条件下培养24 h。流式细胞术检测各组颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白P62、凋亡蛋白Bax、Caspase3的表达。结果与对照组相比:模型组细胞凋亡率明显上升,Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白表达量增高,P62蛋白表达量下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。10%左归丸含药血清可显著降低模型组颗粒细胞凋亡率,下调受损颗粒细胞中Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白的表达,上调受损颗粒细胞中P62蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 PM诱导了卵巢颗粒细胞损伤,促进了颗粒细胞凋亡,激活了颗粒细胞自噬/溶酶体降解途径;10%左归丸含药血清可降低化疗损伤性颗粒细胞凋亡率,与自噬相关蛋白的表达相关。

关键词：左归丸含药血清磷酰胺氮芥颗粒细胞自噬凋亡

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左归丸对化疗源性卵巢早衰小鼠卵母细胞影响的实验研究

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时珍国医国药 2022年第4期33卷 787-790页

作者：孙晓峰黄欣怡曾文卓曾贵荣伍参荣乔江湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室湖南长沙410331 湖南中医药大学医学院免疫学教研室湖南长沙410208 湖南中医药大学附属第一医院湖南长沙410007

目的研究左归丸对化疗源性卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠卵母细胞以及其体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)和体外受精实验(In vitro fertilization,IVF)结局的影响。方法以环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)建立化疗源性POF小鼠动物模型。提取各组生发泡(germinal vesicle,GV)期未成熟裸卵(denuded oocytes,DOs)及MII期卵母细胞分别进行IVM和IVF实验。观察左归丸对模型组小鼠DOs和MII期卵母细胞数量的影响、对IVM实验时生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)和第一极体(the first polar body,PB1)排出的影响及对IVF实验时2-细胞率和囊胚率的影响。使用激光扫描共聚焦显微镜观察各组IVM14h时MII期卵母细胞纺锤体和染色体形态。结果左归丸能增加化疗源性POF小鼠GV期DOs和MII期卵母细胞数量、显著提高模型组IVM实验的GVBD率和PB1排出率、显著提升模型组IVF实验的2-细胞率和囊胚率及纠正CTX引起的MII期卵母细胞纺锤体形成异常。结论左归丸可改善卵母细胞数量和质量,从而促进体外胚胎发育,对化疗源性POF小鼠起到一定治疗作用。

关键词：左归丸化疗源性卵巢早衰卵母细胞体外成熟体外受精

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基于蓝墨云班课的混合式教学模式在组织学与胚胎学教学中的应用

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中国组织化学与细胞化学杂志 2019年第2期28卷 185-190页

作者：孙晓峰许晓源刘涛伍参荣刘梦琳刘畅湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 九江学院基础医学院组织学与胚胎学与医学遗传学教研室九江332000 湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学医学院免疫学教研室长沙410208

为明确基于蓝墨云班课的混合式教学模式在组织学与胚胎学课程中的应用效果,在2017级临床医学本科生中应用蓝墨云班课辅助课程教学,分课前、课堂、课后三阶段制定不同的方案辅助教学,通过相应考核方式评价教学效果。结果显示,基于蓝墨云... 详细信息

为明确基于蓝墨云班课的混合式教学模式在组织学与胚胎学课程中的应用效果,在2017级临床医学本科生中应用蓝墨云班课辅助课程教学,分课前、课堂、课后三阶段制定不同的方案辅助教学,通过相应考核方式评价教学效果。结果显示,基于蓝墨云班课平台的混合式教学加强了教师对于学生学习督导同时提升了学生学习的实际成效,其在组织学与胚胎学课程教学中的应用值得推广。

关键词：混合式教学模式蓝墨云班课组织学与胚胎学

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思维导图在临床医学专业组织学与胚胎学教学中的应用

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基础医学教育 2020年第1期22卷 1-2页

作者：孙晓峰许晓源刘涛伍参荣刘梦琳湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 九江学院基础医学院组织学与胚胎学与医学遗传学教研室湖南中医药大学临床医学专业湖南中医药大学医学院免疫学教研室

组织学与胚胎学是临床医学专业的基础医学课程之一,探索其课程改革措施是临床专业教育的重要内容。思维导图可以实现临床思维过程的可视化,加强相关知识点的横向交联,从而使知识系统化。文章就思维导图应用于临床医学专业组织胚胎学教... 详细信息

组织学与胚胎学是临床医学专业的基础医学课程之一,探索其课程改革措施是临床专业教育的重要内容。思维导图可以实现临床思维过程的可视化,加强相关知识点的横向交联,从而使知识系统化。文章就思维导图应用于临床医学专业组织胚胎学教学的主要内容进行论述,以实现教学的最优化,达到提升教学质量的目的。

关键词：组织学与胚胎学思维导图教学方法

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BOPPPS教学法结合蓝墨云班课平台在组织学教学中的应用

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中国继续医学教育 2020年第9期12卷 69-72页

作者：孙晓峰许晓源刘涛伍参荣刘梦琳刘畅湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室湖南长沙410208 九江学院基础医学院组织学与胚胎学与医学遗传学教研室江西九江332000 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院免疫学与微生物学教研室湖南长沙410208

组织学是各类医学专业学生的基础课程之一,BOPPPS教学模式和蓝墨云班课平台分别是目前教师常用的辅助教学方法及平台。前期使用蓝墨云班课平台辅助教学的实践表明该平台能提升教学效率、利于师生沟通。课后也收到了许多学生的改进意见... 详细信息

组织学是各类医学专业学生的基础课程之一,BOPPPS教学模式和蓝墨云班课平台分别是目前教师常用的辅助教学方法及平台。前期使用蓝墨云班课平台辅助教学的实践表明该平台能提升教学效率、利于师生沟通。课后也收到了许多学生的改进意见。笔者结合相关教改经验并查阅文献后,在湖南中医药大学2019级中西医结合临床医学专业和护理学专业所教班级中尝试应用了BOPPPS教学模式结合蓝墨云班课平台进行组织学教学。本文分析了此方法的优缺点,发现BOPPPS法结合蓝墨云班课平台的应用在组织学教学中可增强学生对医学理论知识的理解,但也需要在优化课时安排等方面进行改进。

关键词：组织学医学专业 BOPPPS 蓝墨云班课应用分析

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组织胚胎学阅片竞赛在临床医学专业教学中的应用效果

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临床医学研究与实践 2021年第7期6卷 183-185页

作者：孙晓峰许晓源刘涛伍参荣刘梦琳陶穗菲湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室湖南长沙410208 九江学院基础医学院组织学与胚胎学与医学遗传学教研室江西九江332000 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院免疫学教研室湖南长沙410208

目的探讨组织胚胎学阅片竞赛在临床医学专业教学中的应用效果。方法选择同时参加本次组织胚胎学阅片竞赛和期末考试的临床1705班和临床1706班学生(100人)为试验组,未参加竞赛的临床1603班和1604班学生(116人)为对照组。比较两组学生的... 详细信息

目的探讨组织胚胎学阅片竞赛在临床医学专业教学中的应用效果。方法选择同时参加本次组织胚胎学阅片竞赛和期末考试的临床1705班和临床1706班学生(100人)为试验组,未参加竞赛的临床1603班和1604班学生(116人)为对照组。比较两组学生的期末实验成绩与理论成绩;分析学生期末综合成绩与竞赛成绩之间的相关性。结果试验组期末实验成绩和理论成绩均高于对照组(P<0.05);学生竞赛成绩与期末综合成绩呈正相关(P<0.05)。结论组织胚胎学阅片竞赛的实施不仅提升了学生学习效果,还有助于教师改进教学方法。

关键词：组织胚胎学阅片竞赛临床医学专业

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