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时珍国医国药 2016年第11期27卷 2806-2810页

作者：唐闻汉陶叶琴李森杨岩涛石继连夏赞韶贺福元湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湖南中医药大学现代中药制剂制备技术与评价实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药超分子机理与数理特征化实验室湖南长沙410208 中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室湖南长沙410208

目的研究一种基于超分子"印迹模板"黄芩苷与酶具有高度特异性亲和作用的分离方法,能实现黄芩苷超分子对其代谢酶勾钓分离。方法通过共反应剂法对DEAE-52纤维素进行化学改性键合黄芩苷,合成DEAE-52纤维素黄芩苷酯,用红外光谱... 详细信息

目的研究一种基于超分子"印迹模板"黄芩苷与酶具有高度特异性亲和作用的分离方法,能实现黄芩苷超分子对其代谢酶勾钓分离。方法通过共反应剂法对DEAE-52纤维素进行化学改性键合黄芩苷,合成DEAE-52纤维素黄芩苷酯,用红外光谱分析检验键合效果;比较DEAE-52纤维素黄芩苷酯与DEAE-52纤维素分别作为固定相制备层析色谱柱对黄芩中代谢酶的分离富集效果,检验DEAE-52纤维素黄芩苷酯与DEAE-52纤维素对代谢酶的特异性吸附性的性能;通过分析获得的酶组分的酶解率检验酶组分的酶解活性,并用电泳检验其纯度。结果红外结果显示,与DEAE-52纤维素相比,形成的DEAE-52纤维素黄芩苷酯在1740 cm-1左右出现了酯基的特征吸收峰,1248 cm-1、1060 cm-1出现C-O-C的伸缩振动峰;对酶的分离效果显示,DEAE-52纤维素黄芩苷酯对黄芩的某种酶组分具有特异性吸附。结论运用超分子"印迹模板"的自主识别规律,黄芩苷与代谢酶可按其超分子"印迹模板"进行勾钓分离。本研究为中药代谢酶的寻找、分离纯化的研究提供了新的方法,为中药成分的生化代谢途径的研究奠定基础。

关键词：超分子印迹模板黄芩苷酶共反应剂法

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夏枯草配伍蒲公英抗乳腺癌最佳配伍比例筛选及体内抗肿瘤研究

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中国药学杂志 2018年第10期53卷 776-782页

作者：闫庆梓张凯强李强夏伯侯傅榕赓吴萍林艳林丽美廖端芳湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室中药有毒物质防控技术湖南省工程实验室长沙410208

目的基于联合指数法(combination index,CI)体外筛选夏枯草(PV)配伍蒲公英(TM)(PV+TM)抗乳腺癌最佳配伍比例并探讨其最佳比例对4T1荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PV+TM联合应用抗乳腺癌细胞增殖活性... 详细信息

目的基于联合指数法(combination index,CI)体外筛选夏枯草(PV)配伍蒲公英(TM)(PV+TM)抗乳腺癌最佳配伍比例并探讨其最佳比例对4T1荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PV+TM联合应用抗乳腺癌细胞增殖活性;CI评价PV+TM联合作用效价,当CI<1时认为两药具有协同效应;通过皮下注射4T1细胞建立移植瘤小鼠模型,持续给药25 d,评价PV+TM体内抗肿瘤活性;小鼠体重和肿瘤体积每3 d测量1次;摘取肿瘤组织,HE染色检测病理结构变化,TUNEL染色法检测药物的促凋亡活性。结果与单独用药相比,PV+TM显著提高了对MCF-7和MDAMB-231细胞的抗增殖活性,并且在夏枯草与蒲公英4∶3配伍时,CI指数为0.199 8和0.407,表现出强协同作用;此外,动物实验表明,PV+TM组小鼠肿瘤体积减小,显著增加了小鼠脾脏大小,而体重并无明显变化;病理切片显示,PV+TM组小鼠肿瘤周边组织炎症细胞浸润、变性坏死;TUNEL染色显示,PV+TM可促进肿瘤细胞凋亡。结论 PV+TM具有显著的协同抗肿瘤活性,对移植瘤小鼠模型具有防治作用,其机制与抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡以及增强免疫相关,是一种有潜力的抗乳腺癌候选组合药物。

关键词：夏枯草蒲公英联合用药乳腺癌凋亡

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片仔癀HPLC指纹图谱的总量统计矩及其相似度法分析

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中国实验方剂学杂志 2016年第8期22卷 53-57页

作者：胡超贺红杨岩涛唐宇周逸群贺福元湖南中医药大学药学院长沙410208 中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室长沙410208 湖南中医药大学中医药超分子机理与数理特征化实验室长沙410208 湖南中医药大学现代中药制剂制备技术与评价实验室长沙410208

目的:对片仔癀HPLC指纹图谱总量统计矩及其相似度进行研究,进一步验证前期所创方法的关联性,并为片仔癀制剂质量控制提供依据。方法:以三七皂苷R1,人参皂苷Rg1与Rb1,牛磺胆酸钠为对照,采用RP-HPLC建立片仔癀指纹图谱,并对指纹图谱总量... 详细信息

目的:对片仔癀HPLC指纹图谱总量统计矩及其相似度进行研究,进一步验证前期所创方法的关联性,并为片仔癀制剂质量控制提供依据。方法:以三七皂苷R1,人参皂苷Rg1与Rb1,牛磺胆酸钠为对照,采用RP-HPLC建立片仔癀指纹图谱,并对指纹图谱总量统计矩及其相似度法的关联性进行分析。结果:10批样品共有特征峰为14个,采用总量统计矩法计算其AUCT,相对AUCT,λT,相对λT,σT,相对σT的平均值分别为7.430×106μV·s,1.002,22.540 min,0.972,5.391 min,1.065,RSD分别为5.0%,4.3%,1.0%,1.0%,2.9%,2.9%;以生成的对照图谱为参考,采用总量统计矩相似度法分析得相似度平均值为0.943,RSD为1.9%;相关性分析得相对λT与相似度的相关系数为0.980,P<0.01,相对σT与相似度的相关系数为-0.683,P<0.05,均具有统计学意义。结论:总量统计矩及其相似度法存在关联性,该法具有加合、偶联与统计性;所建立的片仔癀HPLC指纹图谱重复性好,准确度高,可用于质量控制。

关键词：总量统计矩法总量统计矩相似度片仔癀指纹图谱

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淫藤骨痹康方药动学-药效学相关性研究

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中药材 2014年第3期37卷 473-477页

作者：王元清严建业李顺祥罗堃彭买娇谢瑜徐菲中南林业科技大学生命科学与技术学院生物技术与工程实验室湖南长沙410004 湖南中医药大学药学院中药现代化重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005

目的:研究正常大鼠与血瘀模型大鼠灌胃给予淫藤骨痹康方后,血浆中丹参酮ⅡA的浓度变化及丙二醛浓度变化的药动学-药效学(PK-PD)相关性。方法:以氯雷他定为内标,采用HPLC-UV法测定不同时间血浆中丹参酮ⅡA的浓度;采用TBA法测定不同时间... 详细信息

目的:研究正常大鼠与血瘀模型大鼠灌胃给予淫藤骨痹康方后,血浆中丹参酮ⅡA的浓度变化及丙二醛浓度变化的药动学-药效学(PK-PD)相关性。方法:以氯雷他定为内标,采用HPLC-UV法测定不同时间血浆中丹参酮ⅡA的浓度;采用TBA法测定不同时间血浆中MDA水平;采用梯形面积法计算血药浓度-时间曲线下面积(AUC)与抗氧化效应-时间曲线下面积(AUE);以AUE为Y,lgAUC为X,进行相关与回归分析。结果:在2种不同生理模型下,淫藤骨痹康方在所测的各个时间点均能显著降低血浆中MDA水平。AUE-lgAUC的散点图均呈上升趋势;相关回归分析结果为:正常对照组回归方程为Y=53.367X-30.780,相关系数r=0.822,P=0.007;血瘀模型组回归方程为Y=61.091X-39.863,相关系数r=0.777,P=0.003。结论:淫藤骨痹康方降低体内MDA水平的抗氧化作用与体内丹参酮ⅡA的量呈正相关,丹参酮ⅡA可能为其抗氧化作用的药效物质。

关键词：淫藤骨痹康方丹参酮ⅡA 抗氧化药动学药效学相关性

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中药复方对人体作用本质:“网通虹势”的多重遗传谱效动力学

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中国实验方剂学杂志 2011年第2期17卷 240-247页

作者：贺福元邓凯文刘文龙石继连邹欢唐宇刘平安周宏灏湖南中医药大学药学院长沙410208 中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室长沙410208 湖南中医药大学现代中药制剂技术与评价实验室长沙410208 中南大学临床药理研究所长沙410078 湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

目的:从学科的属性与特点探讨中药复方对人体作用本质:"网通虹势"多重遗传谱效动力学。分析中药学科与遗传药理学科研究的特点,根据中药复方药效物质作用的本源,结合中药现代化的要求,提出中药现代化的思路与方法。结果:与西... 详细信息

目的:从学科的属性与特点探讨中药复方对人体作用本质:"网通虹势"多重遗传谱效动力学。分析中药学科与遗传药理学科研究的特点,根据中药复方药效物质作用的本源,结合中药现代化的要求,提出中药现代化的思路与方法。结果:与西药相比,中药复方为具有自然界原生物体遗传信息的多成分有机整体,在以初生、次生代谢酶系,特别是细胞色素P-450(CYP450)家族酶的作用下合成,进入人体内能被人体以CYP450家族酶为主的酶系按"网通虹势"规律代谢,并与人体内的初生代谢酶系(受体)按质量作用定律产生"反治互补"的药理效应,体现多重遗传谱效动力学特点。结论:中药复方与人体的药效本质是生物体间多重遗传药理学作用,体现"网通虹势"谱效动力学特征,是自然界生物体之间普遍遵循的作用规律,可用遗传多态性的规律来进行研究。

关键词：中药复方多重遗传药理学遗传中药药理学网通虹势药效动力学药物代谢

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水菖蒲倍半萜类成分的研究

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中国中药杂志 2016年第11期41卷 2118-2123页

作者：李娟徐博赵小芳唐敏熊斯李顺祥湖南中医药大学中药现代化教育厅重点实验室湖南长沙410208 湖南省中药活性物质筛选工程技术研究中心湖南长沙410208

研究湖南产水菖蒲化学成分及其体外抑菌活性。利用多种色谱技术分离水菖蒲化学成分,结合理化和波谱数据鉴定化合物的结构,并采用96孔板法测定化合物的体外抑菌活性。水菖蒲中分离得到11个倍半萜类化合物,经波谱分析鉴定为4β,6β-dihydr... 详细信息

研究湖南产水菖蒲化学成分及其体外抑菌活性。利用多种色谱技术分离水菖蒲化学成分,结合理化和波谱数据鉴定化合物的结构,并采用96孔板法测定化合物的体外抑菌活性。水菖蒲中分离得到11个倍半萜类化合物,经波谱分析鉴定为4β,6β-dihydroxy^(-1)α,5β(H)-guai-9-ene(1),4β,6β-dihydroxy^(-1)α,5β(H)-guai^(-1)0(14)-ene(2),teuclatriol(3),异菖蒲二醇(4),菖蒲二醇(5),calamusin H(6),oxyphyllenodiols A(7),oplodiol(8),菠萝香藤素(9),表水菖蒲酮(10)和bullatantriol(11),其中,化合物9为首次从菖蒲属植物中分离得到。体外抑菌实验表明,化合物3,7~9和11具有显著地抑菌活性,化合物7对金黄色葡萄球菌(MBC 12.50 mg·L^(-1))、化合物9对4种供试菌(MBC 20.00 mg·L^(-1))、化合物11对绿脓杆菌(MBC 12.50mg·L^(-1))均具有良好的杀菌作用。

关键词：水菖蒲倍半萜抑菌

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玉竹多糖对甲亢阴虚型大鼠干预的血清代谢组学研究

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中国药学杂志 2017年第14期52卷 1263-1268页

作者：周亚敏肖榕胡玉珍熊苏慧谢明霞夏伯候林丽美湖南中医药大学药学院长沙410208 湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室长沙410208 中药有毒物质防控技术湖南省工程实验室长沙410208

目的分析T3溶液诱导甲亢阴虚型模型大鼠后血清中内源性代谢物的变化,初步探讨玉竹多糖预防甲亢阴虚的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组,模型组,玉竹多糖组(400 mg·kg^(-1));利用注射T3溶液于大鼠腹腔(500μg·kg^(-1))连... 详细信息

目的分析T3溶液诱导甲亢阴虚型模型大鼠后血清中内源性代谢物的变化,初步探讨玉竹多糖预防甲亢阴虚的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组,模型组,玉竹多糖组(400 mg·kg^(-1));利用注射T3溶液于大鼠腹腔(500μg·kg^(-1))连续1周建立甲亢阴虚模型,测定血浆中cAMP、cGMP、血清中T3、T4等指标。采用GC-MS技术分析大鼠血清代谢物图谱,运用软件Simca-P12.0进行多元统计分析。结果玉竹多糖可以显著降低模型动物的T3、T4、cAMP、cAMP/c GMP含量,升高cGMP含量,对甲亢阴虚型大鼠具有一定的改善作用。PCA得分图显示正常组、模型组和玉竹组的代谢轮廓有明显差别,通过偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)对样品进行进一步分型,根据模型的变量重要性因子(VIP值)结果筛选差异代谢物,鉴定出9种内源性代谢物为生物标记物。结论研究表明,玉竹多糖干预的甲亢阴虚型大鼠整体代谢轮廓趋向正常水平,通过调节糖代谢、能量代谢、氨基酸代谢及脂类代谢等对甲亢阴虚发挥预防作用,其所揭示的代谢途径变化将为阴虚诊断及治疗提供一定的依据。

关键词：玉竹多糖阴虚气相色谱-质谱代谢组学

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不同产地马兜铃蜜炙前后HPLC指纹图谱分析

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中国药学杂志 2017年第16期52卷 1397-1402页

作者：章莹肖榕黄杰吴萍林丽美夏伯侯廖端芳湖南中医药大学药学院长沙410208 中药有毒物质防控技术湖南省工程实验室长沙410208 湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室长沙410208

目的建立不同产地马兜铃蜜炙前后的HPLC指纹图谱,比较分析马兜铃蜜炙前后化学成分变化。方法采用高效液相色谱分析,Agilent ZORBAX SB-C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-1%乙酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),... 详细信息

目的建立不同产地马兜铃蜜炙前后的HPLC指纹图谱,比较分析马兜铃蜜炙前后化学成分变化。方法采用高效液相色谱分析,Agilent ZORBAX SB-C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-1%乙酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长250 nm,柱温30℃;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》、SPSS22.0软件对HPLC色谱进行相似度分析、聚类分析及主成分分析。结果建立14批不同产地马兜铃蜜炙前后的指纹图谱,蜜炙后马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)降低率达36%以上;相似度评价显示生、制马兜铃相似度大于0.9(除S4为0.822,S18为0.771,S19为0.639);聚类分析表明,生品马兜铃大致分为4类,主成分分析可知,5个主成分(包括AA I)的累积方差贡献率为84.914%,从化学成分上反映了不同产地样品的相似性及差异性。结论本实验结果可以为马兜铃炮制减毒及炮制工艺的规范化提供参考,具有示范性。

关键词：马兜铃马兜铃酸Ⅰ 高效液相色谱法指纹图谱聚类分析主成分分析

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淫藤骨痹康方挥发油活血药效物质基础研究

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中药材 2014年第8期37卷 1425-1429页

作者：王元清严建业龚力民罗堃李顺祥杨岩涛谢瑜中南林业科技大学生命科学与技术学院生物技术与工程实验室湖南长沙410004 湖南中医药大学药学院中药现代化教育厅重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005

目的:分析大鼠病理与生理状态下淫藤骨痹康方挥发油入血成分的差异,揭示淫藤骨痹康方活血作用药效物质基础。方法:采用CO2超临界流体萃取淫藤骨痹康方挥发油,对其在正常大鼠与急性血瘀模型大鼠的入血成分进行GC-MS分析,比较病理与生理... 详细信息

目的:分析大鼠病理与生理状态下淫藤骨痹康方挥发油入血成分的差异,揭示淫藤骨痹康方活血作用药效物质基础。方法:采用CO2超临界流体萃取淫藤骨痹康方挥发油,对其在正常大鼠与急性血瘀模型大鼠的入血成分进行GC-MS分析,比较病理与生理状态下的挥发油入血成分与代谢成分差异。结果:挥发油经GC-MS分析共鉴定32个组分,以蒿本内酯(39.23%)、柠檬烯为(21.7%)为主。生理状态下,挥发油入血成分有16个,其中有7个成分为挥发油原型成分,9个成分为代谢产生的新成分;病理状态(急性血瘀)下,入血成分有22个,其中有10个成分为挥发油原型成分,12个成分为代谢产生的新成分;两种状态下共同的入血原型成分有7个,代谢产生的相同新成分有8个。结论:血瘀状态影响淫藤骨痹康方挥发油组分的吸收与代谢,其入血成分可能为其活血作用的药效物质。

关键词：淫藤骨痹康方挥发油病理生理模型 GC-MS

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吴茱萸RAPD体系构建及道地性遗传背景研究

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中草药 2010年第6期41卷 975-978页

作者：曹亮李顺祥魏宝阳黄丹徐菲佟志远湖南中医药大学药学院中药现代化重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药研究院中药研究所湖南长沙410013 湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙410128

目的建立吴茱萸的RAPD分子标记技术并对吴茱萸的道地性遗传背景进行探讨。方法应用试剂盒法提取吴茱萸基因组DNA;筛选RAPD引物;对全国3个省市5个吴茱萸产区采取的48份样品进行RAPD分子标记,应用NTSYS-PC软件进行聚类分析。结果获得了吴... 详细信息

目的建立吴茱萸的RAPD分子标记技术并对吴茱萸的道地性遗传背景进行探讨。方法应用试剂盒法提取吴茱萸基因组DNA;筛选RAPD引物;对全国3个省市5个吴茱萸产区采取的48份样品进行RAPD分子标记,应用NTSYS-PC软件进行聚类分析。结果获得了吴茱萸的RAPD分子标记方法 ;通过对RAPD扩增结果进行聚类分析,发现不同品种吴茱萸差异较大,浏阳地区的吴茱萸和其他石虎品种在相似度系数为0.68时聚集为两个类群;而同一品种的石虎遗传背景差异明显,在相似度系数为0.78时,铜仁、浏阳、建德、温州的样品各自聚集在相同地域的族群。结论吴茱萸遗传背景差异明显,RAPD技术是一种可用于吴茱萸道地性遗传背景分析的有效手段。

关键词：吴茱萸药材 RAPD DNA 道地药材

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