检索结果-内蒙古大学图书馆

重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的构建及其在FRT细胞中的表达和定位

吉林大学学报（医学版） 2013年第2期39卷 273-277,428页

作者：李凤娥郝峰藏雨轩马睿泽孔繁利刘磊李艳北华大学附属医院神经二科吉林吉林132013 吉林医药学院生物化学检验教研室吉林吉林132013 吉林医药学院基础护理教研室吉林吉林132013 北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013

目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得a... 详细信息

目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得aquaporin-4编码区基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。经酶切和测序鉴定证实为aquaporin-4后,Lipofectamine 2000脂质体转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体至FRT细胞中,倒置荧光显微镜下观察aquaporin-4在FRT细胞中的表达和分布,并应用Western blotting法检测aquaporin-4蛋白的表达。同时检测转入FRT细胞内钙黄绿素的相对荧光强度以判断FRT细胞水通透性的状况。结果:EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切和测序重组载体结果证实目的基因aquaporin-4成功克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。荧光显微镜下观察融合EGFP的aquaporin-4主要在FRT细胞膜上表达;Western blotting结果证实脂质体转染重组载体的FRT细胞表达aquaporin-4。转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的FRT细胞水通透性显著高于未转染的FRT细胞,其水通透性是未转染FRT细胞的1.65倍。结论:成功构建aquaporin-4真核表达载体,证实其可在FRT细胞中表达,并具有明显的膜蛋白特性和良好水通透性。

关键词： aquaporin-4 转染 FRT细胞载体

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药理学和病理生理学联合开展PBL教学初探

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现代医药卫生 2013年第13期29卷 2055-2056页

作者：汪雄吴胜英龚应霞张亚辉李贤玉潘龙瑞湖北医药学院基础医学院病理生理学教研室湖北十堰442000 湖北医药学院基础医学院药理学教研室湖北十堰442000

分析在药理学和病理生理学教学中联合开展以问题为基础的学习(PBL)教学法的必要性和可行性,阐述联合开展PBL教学的设计及应用,探讨两个学科联合开展PBL教学的效果。

关键词：教学方法药理学基于问题的学习病理生理学

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整合素链激酶在肿瘤中的作用

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吉林医药学院学报 2013年第3期34卷 199-201页

作者：姚欣欣芦莉莉吴巍杨宁江吉林医药学院附属医院病理科吉林吉林132013 北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院附属医院口腔科吉林吉林132013

癌基因和抑癌基因在肿瘤的发生、发展、治疗与预后中发挥着重要作用。在肿瘤细胞的血管生成、凋亡、转移和细胞周期过程中均发现缺陷的蛋白激酶和(或)磷酸酯酶。整合素链激酶(integrin-linked kinase,ILK)是蛋白激酶中的重要成员之一,... 详细信息

癌基因和抑癌基因在肿瘤的发生、发展、治疗与预后中发挥着重要作用。在肿瘤细胞的血管生成、凋亡、转移和细胞周期过程中均发现缺陷的蛋白激酶和(或)磷酸酯酶。整合素链激酶(integrin-linked kinase,ILK)是蛋白激酶中的重要成员之一,在正常组织中ILK表达正常,而在早期侵袭病损ILK过表达,转移病损ILK高表达,因此ILK可作为诊断工具服务于诊断及治疗的评估。

关键词：整合素链激酶肿瘤

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缺糖缺氧对经内质网应激途径诱导Hela细胞凋亡的影响

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吉林大学学报（医学版） 2011年第5期37卷 821-824,I0002页

作者：徐冶钟加滕李晓宁于慧美康劲松苏静孙连坤吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室吉林长春130021 吉林医药学院医学科研实验室吉林吉林132013

目的:体外构建肿瘤细胞缺糖缺氧(OGD)模型,观察缺糖缺氧应激条件对肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法:利用平衡盐溶液EBSS取代细胞正常培养液构建缺糖模型,利用连二亚硫酸钠消耗培养基中氧构建缺氧模型;实验分为对照组、缺糖缺氧4、8和1... 详细信息

目的:体外构建肿瘤细胞缺糖缺氧(OGD)模型,观察缺糖缺氧应激条件对肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法:利用平衡盐溶液EBSS取代细胞正常培养液构建缺糖模型,利用连二亚硫酸钠消耗培养基中氧构建缺氧模型;实验分为对照组、缺糖缺氧4、8和12 h组。MTT法检测各组细胞增殖率;Western blotting检测各组Hela细胞内质网应激和凋亡相关蛋白的表达水平;Hoechst染色检测各组细胞细胞核形态学改变。结果:与对照组比较,缺糖缺氧各组细胞增殖率明显下降(P<0.05);内质网应激相关蛋白GRP78表达水平明显升高,内质网应激相关凋亡信号蛋白CHOP和caspase-4活化片段蛋白表达水平明显升高(P<0.05);细胞内凋亡相关蛋白caspase-3活化片段表达水平(P<0.05);缺糖缺氧组细胞核出现核皱缩和核碎裂等凋亡形态学表现。结论:缺糖缺氧可以诱导Hela细胞发生凋亡,其凋亡可能是通过内质网应激介导。

关键词：缺糖缺氧内质网应激凋亡 Hela细胞

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顺铂诱导人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞内质网应激差异的研究

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中国实验诊断学 2011年第5期15卷 809-811页

作者：周彤于慧美苏静郑向雨徐冶孙连坤吉林大学吉林大学白求恩医学院病理生理学系吉林长春130021 吉林医药学院组织学与胚胎学教研室

目的研究顺铂诱导人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞内质网应激的差异。方法顺铂分别作用SKOV3组、SKOV3/DDP组细胞0 h、12 h、24 h。MTT检测两种细胞对顺铂敏感性差异;Western blot方法检测并比较内质网应激相关蛋白表达;RT-PCR方法检测顺... 详细信息

目的研究顺铂诱导人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞内质网应激的差异。方法顺铂分别作用SKOV3组、SKOV3/DDP组细胞0 h、12 h、24 h。MTT检测两种细胞对顺铂敏感性差异;Western blot方法检测并比较内质网应激相关蛋白表达;RT-PCR方法检测顺铂对各时间点细胞的XBP-1表达。结果顺铂诱导两种细胞内质网应激存在显著差异。顺铂引起SKOV3细胞中内质网应激相关蛋白明显活化;而对SKOV3/DDP细胞中内质网应激相关蛋白没有明显影响;顺铂诱导SKOV3/DDP中XBP-1明显表达上调。结论顺铂诱导的内质网应激相关基因的表达差异可能是卵巢癌细胞耐药机制之一。

关键词：内质网应激顺铂凋亡卵巢癌

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黄芪多糖对小鼠学习记忆能力的影响

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延边大学医学学报 2011年第1期34卷 23-25页

作者：万朋王师王军金清华延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部吉林医药学院生理学教研室

[目的]观察黄芪多糖对小鼠学习记忆能力的影响.[方法]将昆明种小鼠随机分成对照组(生理盐水20.0 mL/kg)及黄芪多糖小(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、大(800 mg/kg)剂量组,灌胃给予相应剂量的药物,3周后进行Morris水迷宫实验,测量并记录小... 详细信息

[目的]观察黄芪多糖对小鼠学习记忆能力的影响.[方法]将昆明种小鼠随机分成对照组(生理盐水20.0 mL/kg)及黄芪多糖小(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、大(800 mg/kg)剂量组,灌胃给予相应剂量的药物,3周后进行Morris水迷宫实验,测量并记录小鼠上台潜伏期、总路程、穿越站台次数和站台象限停留时间,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]黄芪多糖中、大剂量组小鼠的上台潜伏期和总路程明显缩短(P<0.05),穿越站台次数和站台象限停留时间显著增加(P<0.05);黄芪多糖中、大剂量组小鼠血清中SOD活性明显增强(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05).[结论]黄芪多糖可增强小鼠的空间学习记忆能力,其作用机制可能与黄芪多糖的抗自由基作用有关.

关键词：学习记忆黄芪多糖超氧化物歧化酶丙二醛小鼠

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荧光双向凝胶电泳分析温热处理对K562细胞系蛋白质表达谱的影响

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实用医学杂志 2011年第2期27卷 174-176页

作者：赵亮刘亚伟孙学刚南方医科大学南方医院病理科基础医学院病理学系广州市510515 南方医科大学南方医院病理科基础医学院病理生理学教研室广州市510515 中医药学院分子生物学实验室

目的:观察温热处理对K562细胞蛋白质表达谱的影响。方法:将培养获得的K562细胞在41℃恒温处理1h,以37℃作为对照,采用荧光双向凝胶电泳技术分离全细胞蛋白质,分子成像仪获取图像后软件分析差异表达的蛋白质点。结果:温热处理K562细胞与... 详细信息

目的:观察温热处理对K562细胞蛋白质表达谱的影响。方法:将培养获得的K562细胞在41℃恒温处理1h,以37℃作为对照,采用荧光双向凝胶电泳技术分离全细胞蛋白质,分子成像仪获取图像后软件分析差异表达的蛋白质点。结果:温热处理K562细胞与对照组细胞蛋白质表达谱分析比较差异表达蛋白质点数为65个,其中温热处理后表达上调的蛋白质点27个,下调的蛋白质点38个。结论:研究将为阐明热疗的分子基础提供可靠的实验依据,随着研究的深入必将推动基于热疗的肿瘤生物治疗的更大发展和广泛的临床应用。

关键词：蛋白质组学热疗 K562细胞温热处理

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黄芪对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响

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吉林医药学院学报 2011年第2期32卷 69-73页

作者：万朋王师郎茂林王军邴艳华延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部吉林延吉133002 吉林医药学院生理学教研室吉林吉林132013

目的观察黄芪对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法将40只W istar大鼠随机分成4组(每组10只),即阴性组(蒸馏水)、阳性组(脑复康)、黄芪小剂量组和黄芪大剂量组,用D-半乳糖50 mg/(kg.d)腹腔注射6周,建... 详细信息

目的观察黄芪对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法将40只W istar大鼠随机分成4组(每组10只),即阴性组(蒸馏水)、阳性组(脑复康)、黄芪小剂量组和黄芪大剂量组,用D-半乳糖50 mg/(kg.d)腹腔注射6周,建立大鼠亚急性衰老模型,并在此基础上往海马内注入Aβ1-40(4μg)建立阿尔茨海默病模型。用脑部微量透析法和高效液相色谱法测定海马齿状回区的乙酰胆碱浓度,以确认模型的建立。建立模型后,用相应药物灌胃2周,进行Morris水迷宫实验,检测大鼠的学习、记忆能力,并采用生物化学方法测定大鼠海马组织中的胆碱酯酶含量。结果与阴性组比较,黄芪小剂量组、大剂量组大鼠的上台潜伏期明显缩短(P<0.05);黄芪小剂量组、大剂量组大鼠的穿越站台次数显著增多(P<0.05);黄芪小剂量组、大剂量组大鼠海马组织中的胆碱酯酶含量均显著提高(P<0.01)。结论黄芪能改善阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的能力,增加阿尔茨海默病大鼠海马组织内的胆碱酯酶含量,对阿尔茨海默病具有一定的治疗作用。

关键词：阿尔茨海默病黄芪学习记忆胆碱酯酶海马

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基于在体荧光成像技术的中药抗肿瘤研究的思路与方法

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时珍国医国药 2011年第3期22卷 744-745页

作者：范钦刘亚伟王启瑞孙学刚南方医科大学中医药学院分子生物学实验室广东广州510515 南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广东广州510515

应用荧光蛋白,包括增强型绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白等,建立的报告基因技术和在体成像技术能够实现肿瘤的在体荧光实时成像,是研究肿瘤发生、生长和转移的理想工具之一。将其应用于中药研究,可以监测中药对肿瘤生长、转移、放化疗增效... 详细信息

应用荧光蛋白,包括增强型绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白等,建立的报告基因技术和在体成像技术能够实现肿瘤的在体荧光实时成像,是研究肿瘤发生、生长和转移的理想工具之一。将其应用于中药研究,可以监测中药对肿瘤生长、转移、放化疗增效、抑癌基因表达等方面的作用,将有助于遴选有效的抗肿瘤中药并深化其机制研究。

关键词：在体荧光成像中药肿瘤

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慢性铅暴露对大鼠GAP-43蛋白表达和学习记忆影响

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中国公共卫生 2011年第1期27卷 94-95页

作者：田琪王洋刘正琦陈杰文涛高明奇曾晓非王树诚郑新中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院辽宁省疾病控制中心中国医科大学临床医药学院辽宁省卫生厅

目的探讨发育期慢性低浓度铅暴露对大鼠学习记忆及脑海马神经生长相关蛋白(GAP-43)表达影响。方法 30只孕鼠随机分为3组,自受孕1 d起,分别给予蒸馏水,0.05%,0.2%醋酸铅饮水,断乳后仔鼠自行饮用含铅水,至出生后28 d;生后56 d用水迷宫方... 详细信息

目的探讨发育期慢性低浓度铅暴露对大鼠学习记忆及脑海马神经生长相关蛋白(GAP-43)表达影响。方法 30只孕鼠随机分为3组,自受孕1 d起,分别给予蒸馏水,0.05%,0.2%醋酸铅饮水,断乳后仔鼠自行饮用含铅水,至出生后28 d;生后56 d用水迷宫方法测试仔鼠学习记忆行为改变;蛋白印迹实验(Western blot)方法检测脑海马GAP-43蛋白表达。结果发育期慢性低浓度铅暴露可致大鼠空间学习记忆能力下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);生后1、3、7、14、21、28 d,0.05%,0.2%醋酸铅组脑海马GAP-43表达量分别为(0.258±0.089)、(0.832±0.021)、(0.806±0.047)、(0.933±0.010)、(0.593±0.004)、(0.437±0.015)和(0.115±0.010)、(0.590±0.018)、(0.680±0.027)、(0.703±0.004)、(0.450±0.014)、(0.325±0.007),均明显低于对照组(P<0.05)。结论铅致仔鼠空间学习能力下降,与脑海马GAP-43蛋白表达水平下降有关。

关键词：铅脑海马神经生长相关蛋白学习记忆

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