检索结果-内蒙古大学图书馆

中国化学会第30届学术年会

作者：黄燕王珍李永李代琦聂舟姚守拙湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室

初步研究发现超正电荷绿色荧光蛋白(+36 scGFP)与氧化石墨烯(GO)之间主要通过静电作用和π-π作用结合,后者使前者荧光淬灭。适当长度的DNA链(核酸类似物)可以通过静电相互作用与scGFP形成纳米复合物,该复合物的形成使大量scGFP远离GO,... 详细信息

初步研究发现超正电荷绿色荧光蛋白(+36 scGFP)与氧化石墨烯(GO)之间主要通过静电作用和π-π作用结合,后者使前者荧光淬灭。适当长度的DNA链(核酸类似物)可以通过静电相互作用与scGFP形成纳米复合物,该复合物的形成使大量scGFP远离GO,从而有效保护scGFP荧光不被GO淬灭。基于以上发现我们发展了scGFP/GO检测平台,通过酶催化的DNA链断裂或核酸类似物(聚腺苷二磷酸核糖,PAR)的生成调控scGFP荧光,实现了2类DNA损伤相关酶类,碱基切除修复酶如尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1),的无标记灵敏检测,检测限分别为0.0015 U/mL和0.002 U/μL。该平台还可用于酶抑制剂抑制能力的检测。由于GO淬灭scGFP能力强,且体系荧光信号强度直接反映目标酶活性,因此scGFP/GO检测平台无需任何标记便可用于多种酶活性的检测,方法简单、快速、直接、经济、灵敏度高,并有潜力用于抑制剂药物的筛选。

关键词：超电荷绿色荧光蛋白氧化石墨烯碱基切除修复酶聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1

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复杂多相体系的表面增强拉曼光谱准确定量分析方法

复杂多相体系的表面增强拉曼光谱准确定量分析方法

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中国化学会第30届学术年会-第二十五分会：化学信息学与化学计量学

作者：陈瑶陈增萍湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室

混浊体系如污水、食品和细胞悬浮液属于含有固相组分的复杂多相体系。该体系中的固相物质会对样本的表面增强拉曼光谱(SERS)信号产生散射效应。散射效应会导致待测物质SERS光谱强度发生变化,使得SERS定量分析结果准确度差。因而,提出了... 详细信息

混浊体系如污水、食品和细胞悬浮液属于含有固相组分的复杂多相体系。该体系中的固相物质会对样本的表面增强拉曼光谱(SERS)信号产生散射效应。散射效应会导致待测物质SERS光谱强度发生变化,使得SERS定量分析结果准确度差。因而,提出了一种适用于复杂多相体系定量分析的新型SERS定量分析模型——比率型SERS定量分析理论和模型。该模型明确地考虑了复杂多相体系中固体物质的散射效应对SERS光谱强度的影响,并采用"双校正"策略来消除其影响,从而实现复杂多相体系中的待测物质的准确SERS定量分析。比率型探针4-巯基吡啶与氢离子结合后会发生结构变化,从而导致其SERS信号强度发生相对变化。利用比率型探针4-巯基吡啶与比率型SERS定量分析模型相结合应用于复杂多相体系的pH检测,且成功实现了模拟细胞环境下的pH的检测。

关键词：复杂多相体系表面增强拉曼光谱定量分析化学计量学

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随机序列G四链体用于细胞凋亡及组织的原位荧光成像研究

随机序列G四链体用于细胞凋亡及组织的原位荧光成像研究

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中国化学会第30届学术年会

作者：聂舟刘卓靓李旺姚守拙湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室

细胞凋亡是保持体内平衡的一种生理性的自杀机理,是细胞在正常的组织更新中的程序性死亡过程。凋亡细胞的检测可以通过检测凋亡过程中产生的片段化DNA来实现。但是传统方法依赖于标记单体的使用,需洗涤,操作繁琐,背景干扰大。鸟嘌呤四... 详细信息

细胞凋亡是保持体内平衡的一种生理性的自杀机理,是细胞在正常的组织更新中的程序性死亡过程。凋亡细胞的检测可以通过检测凋亡过程中产生的片段化DNA来实现。但是传统方法依赖于标记单体的使用,需洗涤,操作繁琐,背景干扰大。鸟嘌呤四链体因其具有与血卟啉(hemin)结合形成DNAzyme和增强特性荧光染料荧光的性质,被广泛用于生物分析。目前研究的鸟嘌呤四链体序列一般通过人工筛选得到,或者来自于端粒、基因启动子区域的固定序列,极少有研究报道随机序列鸟嘌呤四链体及其性质。鉴于传统检测方法的缺陷,我们利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)合成随机排列的富含鸟嘌呤的DNA链,证明了该DNA链可以形成结构稳定的鸟嘌呤四链体,并可增强鸟嘌呤四链体特异性染料ThT的荧光信号。我们进一步将酶法合成鸟嘌呤四链体增强ThT荧光用于检测凋亡细胞中的DNA片段化,实现了凋亡细胞及组织的原位荧光成像。该方法与传统方法相比具有高信背比、免标记、免清洗、操作简便等特点。

关键词：随机序列G四链体凋亡细胞组织成像免标记方法

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石墨纳米囊拉曼生化分析

石墨纳米囊拉曼生化分析

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中国化学会第30届学术年会

作者：陈卓邹玉秀丁玎徐逸婷湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室化学化工学院

拉曼光谱技术作为一种振动光谱技术,已成为分子医学研究领域中有价值的检测手段,基于拉曼振动光谱的生物检测技术已被广泛的建立和发展起来。我们提出了利用碳纳米材料作为新型拉曼探针来进行生化分析研究的策略。通过将贵金属纳米粒子... 详细信息

拉曼光谱技术作为一种振动光谱技术,已成为分子医学研究领域中有价值的检测手段,基于拉曼振动光谱的生物检测技术已被广泛的建立和发展起来。我们提出了利用碳纳米材料作为新型拉曼探针来进行生化分析研究的策略。通过将贵金属纳米粒子包裹在石墨烯薄层中,我们设计构造了贵金属石墨纳米囊拉曼生化分析平台。这种纳米囊状结构的设计既利用了石墨烯纳米材料优异的理化性能,又保证了贵金属稳定的表面等离激元性能。我们研制了超级稳定的银纳米颗粒,并通过功能化修饰核酸适配体等分子,实现了对肿瘤细胞的靶向、低背景、快速拉曼成像。我们还研制了金石墨纳米囊复合纳米结构,结合拉曼与双光子荧光成像等模式,实现了对细胞的多模态检测与成像,进一步提高了成像的准确性。此外,我们还研究了石墨纳米囊材料的生物相容性,并探讨了其在有无靶向核酸分子修饰下被细胞内吞摄取的途径,为进一步生物医学应用做了有益的探索。

关键词：碳纳米材料石墨纳米囊拉曼光谱生化分析

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基于表面重构荧光蛋白的新型生物传感器

基于表面重构荧光蛋白的新型生物传感器

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中国化学会第30届学术年会

作者：聂舟黄燕雷春阳王珍唐石云赵崑荔姚守拙湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室

荧光蛋白由于自发荧光及低毒性,一直受到生物化学及化学生物学研究者的青睐。为了提高荧光蛋白的稳定性、水溶性及穿膜能力,我们对超折叠荧光蛋白表面进行多点突变,制备了具有大量表面正电荷的超电荷荧光蛋白（Sc GFP）及表面可调控带... 详细信息

荧光蛋白由于自发荧光及低毒性,一直受到生物化学及化学生物学研究者的青睐。为了提高荧光蛋白的稳定性、水溶性及穿膜能力,我们对超折叠荧光蛋白表面进行多点突变,制备了具有大量表面正电荷的超电荷荧光蛋白（Sc GFP）及表面可调控带电荷荧光蛋白(HGFP)。基于以上荧光蛋白的特点,我们构建了一系列超灵敏的生物传感平台:（1）将ScGFP与Toehold核酸探针结合,发展了一种具有高特异性的DNA点突变检测方法;并进一步将该方法与亚硫酸氢盐处理和核酸级联扩增相结合,发展了一种高灵敏的细胞特定基因位点的甲基化荧光分析方法,并用于结肠癌病人的实际癌症组织样本分析;（2）基于氧化石墨烯（GO）对ScGFP荧光的超淬灭能力,构建了DNA竞争性响应GO/ScGFP纳米复合物用于核酸氧化损伤检测;（3）基于阳离子聚合物和超电荷荧光蛋白正电荷,通过带负电的PARP链介导两者之间的FRET,我们发展一种对PARP-1活性检测及其抑制剂筛选的免标记方法;（4）HGFP表面具有多组氨酸的性质,据此发现HGFP对Cu的特异性螯合及超强淬灭性质,进而发展了一种免标记的Cu传感平台,并应用于乙酰胆碱酯酶及其抑制剂的灵敏分析;（5）根据超电荷荧光蛋白具有优良核酸载体性质,我们通过p H或Ni对HGFP表面电荷进行调控,实现了智能化响应核酸载体的细胞内化逻辑门体系。

关键词：表面重构荧光蛋白生物传感石墨烯

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化学计量学方法辅助色谱波谱联用技术开展精准定量分析

化学计量学方法辅助色谱波谱联用技术开展精准定量分析

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中国中西部地区第五届色谱学术交流会暨重庆市色谱年会、甘肃省第十四届色谱年会

作者：吴海龙俞汝勤湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室湖南省长沙市410082

近年来，利用化学计量学数学分离功能辅助提高色谱联用技术及多维色谱的定性定量分析能力的相关工作时有报道，本实验室已有若干开创性探索，并取得了系列成果。本报告将侧重如下：1)运用交替三线性分解(ATLD)方法解析HPLC-DAD产生的三... 详细信息

近年来，利用化学计量学数学分离功能辅助提高色谱联用技术及多维色谱的定性定量分析能力的相关工作时有报道，本实验室已有若干开创性探索，并取得了系列成果。本报告将侧重如下：1)运用交替三线性分解(ATLD)方法解析HPLC-DAD产生的三维响应数据，借助二阶校正方法所特有的二阶优势：即使包含有共流出组分和重叠光谱情况亦能获得复杂样本中感兴趣组分的准确含量，建立了一种对五种生物碱的简单快速同时定量分析方法，用于中草药长春花品质分析及临床用药中血药浓度的监测。

关键词：液质联用 HPLC-DAD 化学计量学数学分离精准定量

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化学计量学辅助色谱质谱联用技术开展精准定量分析

化学计量学辅助色谱质谱联用技术开展精准定量分析

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第34届(2016)中国质谱学会学术年会

作者：吴海龙俞汝勤湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室湖南省长沙市410082

开展复杂体系感兴趣组分的精准定量分析,尤其是复杂体系干扰共存下多组分同时精准定量分析,是分析科学的研究前沿和难点问题;利用化学计量学"数学分离"功能,进一步提高色谱质谱联用技术定量分析能力,是我们实验室近年来开创... 详细信息

开展复杂体系感兴趣组分的精准定量分析,尤其是复杂体系干扰共存下多组分同时精准定量分析,是分析科学的研究前沿和难点问题;利用化学计量学"数学分离"功能,进一步提高色谱质谱联用技术定量分析能力,是我们实验室近年来开创性研究的主要方向之一,并已取得初步创新性成果.本报告将侧重汇报如下内容：1)针对液相色谱串级质谱(LC-MS/MS)定量分析过程中仪器设备复杂昂贵且条件优化繁琐费时等问题,提出了采用化学多维校正软技术来简化三重四极杆硬技术,即运用"数学分离"来代替三重四极杆质谱仪的第二(Q2)和第三重四极杆(Q3),从而实现对目标化合物离子的二次选择功能这一新策略.该策略在"数学分离"的辅助下仅运用单级质谱就能实现与三重四极杆质谱相当甚至更好的定量分析效果,所需仪器成本大大降低.与常规的多重反应监测(MRM)方法相比,该策略无需繁琐的色谱及串级质谱条件优化,大大降低了实验的复杂程度、节省了量测时间,具有快速和环保的优点.由于该策略利用目标化合物的总离子流而不是碎片离子流来进行定量分析,因此具有更高的灵敏度.运用该新型定量分析策略,实现了人尿液和血浆样中十种抗高血压药物及保健茶和人血浆样中六种磺酰脲类口服降糖药等同时快速无干扰定量分析.所得定量分析结果与MRM方法结果相比无显著性差异.且所需样品预处理简单,具有快速、成本较低、灵敏度高、选择性好等优点,有望拓展成为可用于复杂体系中感兴趣多目标分析物的高效、绿色、定量分析新方法.2)针对化学计量学辅助的液相色谱全扫描单级质谱新型定量分析策略在应用过程中仪器容易受自身状态及外界环境的影响,从而使得LC-MS出现信号不稳定现象并导致定性定量结果不准确等难题,提出了分段直接标准化结合交替三线性分解(PDS/ATLD)新策略.该策略先通过PDS对不稳定的信号进行校准,然后再运用ATLD方法解析校准后的信号,从而维持了ATLD方法的"二阶优势".结果显示,PDS/ATLD方法能够代替传统的重校正策略而克服LC-MS在不同分析时间所出现的信号不稳定问题,极大地节约花费在信号校准方面的实验时间,且该方法能够在有未知背景干扰共存下实现对复杂分析体系中多个感兴趣组分的同时定量分析.PDS/ATLD策略的提出有利于将化学计量学辅助的液相色谱全扫描单级质谱新型定量分析策略进一步推广和普及.

关键词：复杂体系液质联用数学分离精准定量化学计量学

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核酸外切酶辅助的信号放大策略在生化分析中的应用进展

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分析化学 2015年第11期43卷 1620-1628页

作者：文立徐凤州何晓晓王柯敏何定庚卿太平邹振化学生物传感与计量学国家重点实验室湖南大学生物学院湖南大学化学化工学院生物纳米与分子工程湖南省重点实验室

作为工具酶重要成员之一的核酸外切酶是一类无严格碱基序列依赖性的水解酶。近年来,通过利用核酸外切酶水解方式的差异性与纳米技术、酶切循环效应、核酸适配体技术、金属离子稳定的非沃森-克里克碱基配对系统、核酸荧光染料探针技术、... 详细信息

作为工具酶重要成员之一的核酸外切酶是一类无严格碱基序列依赖性的水解酶。近年来,通过利用核酸外切酶水解方式的差异性与纳米技术、酶切循环效应、核酸适配体技术、金属离子稳定的非沃森-克里克碱基配对系统、核酸荧光染料探针技术、电化学方法等相结合,发展了一系列核酸外切酶辅助的信号放大技术,对于提高生化分析检测方法与技术的灵敏度起到了非常关键的作用,已广泛应用于核酸、蛋白质、离子和小分子等物质的高灵敏检测。为了更好地理解和应用核酸外切酶辅助的信号放大策略,本文对核酸外切酶发展的信号放大策略在生化分析中的应用进展进行了综述。

关键词：分析检测工具酶信号放大核酸外切酶评述

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生命分析化学与化学多维校正基础研究若干新进展

生命分析化学与化学多维校正基础研究若干新进展

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2016全国生命分析化学学术大会

作者：吴海龙俞汝勤湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082

化学多维校正方法与各类现代分析量测仪器相结合，利用“数学分离”代替或增强化学或物理分离，进一步解决生命等复杂体系多目标物精准定量分析难题，从而提供复杂体系强有力定量分析策略。它具有“二阶优势”：即使有未知背景及干扰共... 详细信息

化学多维校正方法与各类现代分析量测仪器相结合，利用“数学分离”代替或增强化学或物理分离，进一步解决生命等复杂体系多目标物精准定量分析难题，从而提供复杂体系强有力定量分析策略。它具有“二阶优势”：即使有未知背景及干扰共存也可对复杂体系中感兴趣多组分进行直接、快速、同时精准定量分析，不仅十分灵巧，而且“绿色”。

关键词：化学多维校正生命等复杂体系多维荧光光谱数学分离交替多线性分解

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基于金/银合金纳米颗粒的SERS探针构建及细胞中核酸内切酶的比率检测研究

基于金/银合金纳米颗粒的SERS探针构建及细胞中核酸内切酶的比率...

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2016全国生命分析化学学术大会

作者：司艳美李继山湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室化学化工学院湖南长沙410082

通过表面保护退火处理合成的金/银合金纳米颗粒，呈现均匀的金银元素分布，既拥有类似于银的等离子体性质，又具有类似于金的稳定性和生物相容性，在表面增强拉曼散射(SERS)生物传感构建中具有良好的应用前景[1]。核酸内切酶在生物体的... 详细信息

通过表面保护退火处理合成的金/银合金纳米颗粒，呈现均匀的金银元素分布，既拥有类似于银的等离子体性质，又具有类似于金的稳定性和生物相容性，在表面增强拉曼散射(SERS)生物传感构建中具有良好的应用前景[1]。核酸内切酶在生物体的众多生理过程中具有重要作用，其活性分析已成为现代分子生物学的一项重要任务[2]。

关键词：金/银合金纳米颗粒表面增强拉曼散射核酸内切酶

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