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中国生物化学与分子生物学报 2021年第11期37卷 1489-1501页

作者：袁顺灵彭美向逸杨启明雷勇刘文锋刘霞汤长发印大中湖南师范大学体适能与运动康复湖南省重点实验室湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室长沙410012 湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室湖南师范大学生命科学学院衰老生化研究室长沙410081 广州医科大学附属清远人民医院衰老实验中心广东清远511500

为研究探讨规律运动对老年大鼠纹状体蛋白质氧化应激与细胞凋亡的影响,通过差异羰基化蛋白质组学特征分析,筛选靶标蛋白质并阐明其作用机制。将24只健康雄性23月龄老年大鼠随机分为静息组(Con-SED)和规律运动组(Aero-EXE)。采用运动强... 详细信息

为研究探讨规律运动对老年大鼠纹状体蛋白质氧化应激与细胞凋亡的影响,通过差异羰基化蛋白质组学特征分析,筛选靶标蛋白质并阐明其作用机制。将24只健康雄性23月龄老年大鼠随机分为静息组(Con-SED)和规律运动组(Aero-EXE)。采用运动强度相当于最大摄氧量(VO_(2max))60%~65%逐渐递增到70%~75%的10周中等强度规律运动。HE染色结果显示,规律运动改善了老年大鼠纹状体基质间区和纹状质间区的结构。TUNEL检测出所有老年大鼠纹状体均出现细胞凋亡核。与Con-SED组相比较,Aero-EXE组纹状体基质间区细胞凋亡指数增加了68.24%(P<0.01),而纹状质间区凋亡指数下降了43.14%(P<0.05)。亲和素珠富集和电喷雾四级杆飞行时间质谱分离鉴定羰基化蛋白质。进一步使用MASCOT服务器的数据库进行生物信息学搜索,结果显示,羰基化蛋白质涵盖28种氧化修饰位点。其中鉴定出Con-SED组羰基化蛋白质有14-3-3蛋白(e)和核内不均一性核糖核蛋白(HNRNPA2B1)等69个;而Aero-EXE组羰基化蛋白质有电压依赖型阴离子选择性通道1(VDAC1)和VDAC2等71个。生物信息学分析羰基化蛋白质的氧化修饰位点及蛋白质相互作用关系,筛选出14-3-3蛋白(e)和HNRNPA2B1羰基化蛋白质与细胞凋亡有着重要关系。免疫组织化学检测结果显示,与Con-SED组相比较,Aero-EXE组的大鼠纹状体SOD和BDNF表达水平显著提高(P<0.01,P<0.05);qRT-PCR检测结果显示,14-3-3蛋白(e)和HNRNPA2B1表达水平显著上调(P<0.05,P<0.01);免疫印迹检测结果显示,PI3K/AKT1/mTOR和CAMKⅡα信号通路相关分子的表达水平显著上调(P<0.05或P<0.01)。综上所述,规律运动刺激了抗氧化系统的适应,改善了与细胞凋亡密切相关的14-3-3蛋白(e)和HNRNPA2B1等蛋白质羰基化,维护了纹状体基质间区和纹状质间区细胞凋亡的稳态,其机制是通过上调14-3-3蛋白(e)和HNRNPA2B1表达水平,促进BDNF的表达,进一步激活并上调下游PI3K/AKT/mTOR和CAMKs信号通路而调控纹状体细胞凋亡。

关键词：规律运动电喷雾四级杆飞行时间质谱 14-3-3蛋白(e) 核内不均一性核糖核蛋白A2/B1

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中等强度运动大鼠左室肌蛋白质组差异表达

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北京体育大学学报 2013年第1期36卷 64-68页

作者：袁爱国史绍蓉邵阳学院体育系湖南邵阳422000 湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室湖南长沙410012

目的:采用蛋白质组学技术,探究中等强度运动后大鼠左室肌蛋白质组的差异表达。方法:将SD大鼠分为运动组和对照组,训练完成后麻醉处死,计量大鼠心重,提取左室肌全蛋白样品,采用2-DE进行分离,选择运动后差异表达量≥10倍的备选目标蛋白点... 详细信息

目的:采用蛋白质组学技术,探究中等强度运动后大鼠左室肌蛋白质组的差异表达。方法:将SD大鼠分为运动组和对照组,训练完成后麻醉处死,计量大鼠心重,提取左室肌全蛋白样品,采用2-DE进行分离,选择运动后差异表达量≥10倍的备选目标蛋白点,进行质谱鉴定。结果:取5个目标蛋白点,经质谱鉴定4个。未知蛋白质训练后表达量下调≥12.5倍。结论:1)中等强度运动后,大鼠心脏发生形态学变化使心肌增厚,心收缩力增强;2)训练组大鼠在长期运动训练中,左心室心肌蛋白质组变化显著;3)鉴定出运动医学中还未涉及的4种蛋白质,分别是三磷酸腺苷合酶偶合因子6(CF6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、烯酰辅酶A水合酶(ECH)和ATP合酶α亚基(ATP synthase subunit alpha),其表达发生的顺应性改变说明,中等强度运动可提高心肌的能量代谢水平。

关键词：中等强度运动左室肌蛋白质组差异表达运动心脏重塑能量代谢蛋白热休克蛋白

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4个月规律有氧运动对老年大鼠外周血内皮祖细胞增殖及黏附能力的影响

4个月规律有氧运动对老年大鼠外周血内皮祖细胞增殖及黏附能力的...

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全民健身科学大会

作者：郑澜龚晓明雷志军凡婷陈依琳湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室

世界人口老龄化加剧使衰老机理及延缓衰老方法的研究成为生命科学研究的热点。内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一种能自我更新、增殖分化为血管内皮细胞的干细胞,与血管新生和内皮修复密切相关,而血管结构和功能损害... 详细信息

世界人口老龄化加剧使衰老机理及延缓衰老方法的研究成为生命科学研究的热点。内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一种能自我更新、增殖分化为血管内皮细胞的干细胞,与血管新生和内皮修复密切相关,而血管结构和功能损害的早期标志便是内皮功能障碍。因此,本研究通过体外原代培养有氧运动后老年大鼠外周血内皮祖细胞,观察其生长情况,探讨有氧运动对其增殖及黏附能力的影响。为体育锻炼改善中老年人心脑血管机理的研究及老年人群的体育锻炼运动处方的优化提供实验资料。研究方法:选用健康雌性SD大鼠24只,随机分为两组:空白对照组和有氧运动组。以递增负荷跑台训练建立有氧运动模型,并采用乳酸阈作为控制运动强度的指标,每天以15m/min的速度训练15分钟适应性训练一周后开始正式训练,速度每2周增加1m/min,时间每2周增加5min,时间和速度交叉递增。第一周为15m/min×20min,第二周为16m/min×20min,第三周为16m/min×25min,第四周为17×25min,如此递增到第十六周为22 m/min×60min。方案结束后12h提取大鼠外周血,运用Ficoll密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以EGM-2对其体外原代培养诱导分化获取内皮祖细胞,通过双荧光染色法观察细胞对乙酰化低密度脂蛋白的摄取和与荆豆凝集素1的结合,以及形态学特征鉴定内皮祖细胞。倒置显微镜下计数贴壁细胞数量反映细胞增殖和黏附情况。研究结果:与对照组相比,有氧运动组培养48小时和第7天的贴壁细胞数量都明显增加(P<0.01),但增殖倍数两组无明显差异(P>0.05);细胞黏附检测发现,有氧运动组黏附的内皮祖细胞比对照组多(P<0.01)。结论:有氧运动能促进老年大鼠外周血中的内皮祖细胞增殖,也能使其黏附能力增强,可能参与改善血管内皮修复和血管再生能力。

关键词：有氧运动内皮祖细胞细胞培养增殖

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一次性力竭运动对大鼠心房肌蛋白质组表达的影响

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中国运动医学杂志 2009年第4期28卷 391-394页

作者：史绍蓉刘田龚丽刘建荣袁爱国王娟湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室长沙410012 湖南涉外经济学院体育学部湖南省长沙市第八人民医院康复医学科湖南省邵阳学院体育系

目的:探讨一次性力竭运动后大鼠心房肌蛋白质组的表达特征,初步筛选对力竭运动应激有意义的心房肌蛋白质。方法:10只SD雄性大鼠随机分为对照组和运动组。采用三级递增运动负荷跑台训练建立动物力竭运动模型。提取心房肌组织全蛋白进行... 详细信息

目的:探讨一次性力竭运动后大鼠心房肌蛋白质组的表达特征,初步筛选对力竭运动应激有意义的心房肌蛋白质。方法:10只SD雄性大鼠随机分为对照组和运动组。采用三级递增运动负荷跑台训练建立动物力竭运动模型。提取心房肌组织全蛋白进行双向电泳分离。结果:经图像分析,对照组平均检测到382±24个蛋白质点,运动组平均检测到352±17个点。与对照组相比,运动组共有47个蛋白质点发生了变化。12个点在运动后消失,运动后表达量上调3倍以上的点有25个,下调超过2/3的有10个,其中上调量在5倍以上的有14个,下调超过4/5以上的有6个。对运动后表达差异大的4个蛋白质点进行质谱鉴定,鉴定出心肌型-α肌球蛋白重链、乌头酸水合酶、异戊酰辅酶A脱氢酶和甘露糖结合蛋白C前体4种蛋白质。结果表明,一次性力竭运动后,大鼠心房肌的蛋白质组发生了明显改变。

关键词：蛋白质组心房肌一次性力竭运动双向凝胶电泳

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一次性力竭运动后大鼠心室肌蛋白质组的差异性表达

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中国运动医学杂志 2008年第2期27卷 144-148,160页

作者：史绍蓉刘田龚丽刘建荣袁爱国王娟湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室长沙410012

目的:探讨力竭运动对大鼠心室肌蛋白质组表达的影响,初步筛选出对运动应激具有重要意义的心室肌目标蛋白质。方法:将10只雄性SD大鼠随机分为安静对照组和运动组(n=5)。运动组大鼠采用三级递增运动负荷跑台训练建立一次性力竭运动实验动... 详细信息

目的:探讨力竭运动对大鼠心室肌蛋白质组表达的影响,初步筛选出对运动应激具有重要意义的心室肌目标蛋白质。方法:将10只雄性SD大鼠随机分为安静对照组和运动组(n=5)。运动组大鼠采用三级递增运动负荷跑台训练建立一次性力竭运动实验动物模型。取心室肌,提取心室肌组织全蛋白进行双向凝胶电泳(2-DE)分离。通过图像分析软件PD Quest进行分析后,选择运动后消失和表达量上调5倍或下调4/5以上的蛋白质点作为备选质谱鉴定蛋白点。结果:在电泳图谱上对照组平均检测到蛋白质点332±17个,运动组平均检测到347±22个。运动后共有47个蛋白质点发生了变化:5个点在运动后消失;表达量上调3倍以上的点有28个,下调2/3以上的点有14个,其中上调5倍以上的点14个,下调4/5以上的点4个。对6个备选蛋白质点进行了质谱鉴定,共鉴定出心肌α-肌球蛋白重链、原肌球蛋白-1、甘露糖结合蛋白C前体、腈水解酶和一个未知的分子量为21kD的蛋白质。结果表明,力竭运动后大鼠心室肌蛋白质组发生了明显变化;本研究为寻找新的运动性疲劳的生物标志物提供了新的思路。

关键词：蛋白质组心室肌一次性力竭运动双向凝胶电泳

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运动性疲劳的蛋白质变化及其蛋白质组学研究展望

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中国运动医学杂志 2008年第1期27卷 117-120页

作者：张松江史绍蓉邬力祥中南大学湘雅医学院生理系长沙410078 湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室

运动性疲劳是指人体在运动过程中,运动能力及身体功能暂时下降的正常生理现象。关于它的发生规律及其机制一直是运动医学界具有重要实际意义和挑战性的课题。研究者已在此方面做了大量的工作,并提出了不少假说。目前国内外关于运动性疲... 详细信息

运动性疲劳是指人体在运动过程中,运动能力及身体功能暂时下降的正常生理现象。关于它的发生规律及其机制一直是运动医学界具有重要实际意义和挑战性的课题。研究者已在此方面做了大量的工作,并提出了不少假说。目前国内外关于运动性疲劳发生机制的研究已由原来的单一理论(如能源耗竭理论或代谢产物堆积等)向综合性网络理论发展,并由物质和能量代谢紊乱的表面现象深入到分子生物学机制。在运动性疲劳的应激状态下,蛋白质作为生命活动的直接执行者,必然产生表达量和功能的变化。本文从神经内分泌、免疫、能量代谢及肌肉收缩等已知与运动关系密切的四个方面分析运动性疲劳分子生物学机制的研究进展,以期进一步深入认识运动性疲劳机制,并阐述蛋白质组学的理论和方法在运动性疲劳的研究中的应用现状和前景。[第一段]

关键词：蛋白质组学研运动性疲劳白质变化分子生物学机制能量代谢紊乱正常生理现象神经内分泌运动过程

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递增负荷运动对大鼠心房肌蛋白质组研究的影响

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中国康复医学杂志 2008年第2期23卷 107-109,113,I0001页

作者：龚丽史绍蓉黄鹰任一春湖南长沙市第八医院康复科 410100 湖南省师范大学体育学院运动人体科学教研室 410081 湖南省第一师范学校文体部

目的:通过探讨递增负荷运动对大鼠心房肌蛋白质组的影响,以筛选出心房肌组织中对运动应激具有重要意义的差异性表达的目标蛋白质,在蛋白质组学水平上研究运动对心脏功能与结构影响的规律。方法:10只雄性SD大鼠,分为运动组(n=5)和对照组(... 详细信息

目的:通过探讨递增负荷运动对大鼠心房肌蛋白质组的影响,以筛选出心房肌组织中对运动应激具有重要意义的差异性表达的目标蛋白质,在蛋白质组学水平上研究运动对心脏功能与结构影响的规律。方法:10只雄性SD大鼠,分为运动组(n=5)和对照组(n=5)。递增负荷运动训练7周,力竭运动后6h,运动组和对照组同时麻醉处死。提取心房肌组织的全蛋白,依次对样品蛋白进行pH梯度-SDS双向凝胶电泳分离蛋白、改良考马斯亮蓝方法染色、基质辅助激光解吸离子化飞行时间串联质谱分析。结果:运动组和对照组蛋白质斑点数目分别是354±40个和382±24个;共获得具有两倍以上差异性表达的蛋白质点104个;运动后上调两倍以上的蛋白质点66个,运动后下调两倍以上的蛋白质点38个。选择差异性表达5倍以上的蛋白质点为目标蛋白进行质谱分析,共鉴定出5个蛋白质点。结论:在运动应激状态下,大鼠心房肌蛋白质发生了明显的差异性表达,这些差异性表达的蛋白质点为进一步深入运动对心脏结构与功能影响的新的目标蛋白提供了实验依据。

关键词：蛋白质组大鼠心房肌负荷运动 2-DE 质谱

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递增负荷运动后大鼠心房肌蛋白质组的差异性表达

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第7期12卷 1281-1286页

作者：史绍蓉龚丽黄鹰宋敏任一春湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室湖南省长沙市410081 长沙市第八医院康复科湖南省长沙市410100 湖南省第一师范学校文体部湖南省长沙市410002

目的:以往的许多研究都是针对心房的单个蛋白质进行的,没有系统地对心房的"全部"蛋白质进行研究,因而不能全面地对心房在运动性心脏重塑或运动性心脏疲劳中的作用做出解释。本实验应用双向凝胶电泳技术,认识递增运动负荷训练... 详细信息

目的:以往的许多研究都是针对心房的单个蛋白质进行的,没有系统地对心房的"全部"蛋白质进行研究,因而不能全面地对心房在运动性心脏重塑或运动性心脏疲劳中的作用做出解释。本实验应用双向凝胶电泳技术,认识递增运动负荷训练后,大鼠心房肌组织中对运动应激具有重要意义的差异性表达的目标蛋白质,从蛋白质组学水平上探讨运动性疲劳的发生及发展的规律。方法:实验于2006-11/2007-03在湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与蛋白质组学国家教育部重点实验室和省级运动人体科学实验室完成。①实验动物:10只雄性SD大鼠,随机分为运动组5只和对照组5只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:递增运动负荷训练7周,力竭运动后6h,运动组和对照组同时麻醉处死。提取心房肌组织的全蛋白,依次对样品蛋白进行pH梯度-SDS双向凝胶电泳分离蛋白、改良考马氏亮蓝方法染色。运用Bio PD quest图像分析软件对双向凝胶电泳图谱进行分析。结果:①运动组和对照组蛋白质斑点数目分别是(354±40)个和(382±24)个,匹配率分别为(68.67±9.87)%和(72.6±8.62)%,相关系数为0.71。②共获得具有2倍以上差异性表达的蛋白质点104个。③运动后上调2倍以上的蛋白质点66个,其中运动后上调5倍以上的蛋白质点18个,未见运动后新增的蛋白质点。④运动后下调2倍以上的蛋白质点38个,其中运动后下调5倍以上的蛋白质点23个,运动后消失的蛋白质点7个。结论:在运动应激状态下,大鼠心房肌蛋白质发生了明显的差异性表达,这些差异性表达的蛋白质点为进一步深入观察具有运动性疲劳特征的新的目标蛋白提供了充分的实验依据。

关键词：蛋白质组大鼠心房肌运动性疲劳 2-DE 组织构建

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长期递增负荷训练后大鼠心室肌蛋白质组的差异性表达

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中国运动医学杂志 2008年第6期27卷 697-701页

作者：刘田史绍蓉龚丽刘建荣袁爱国王娟湖南涉外经济学院体育学部长沙410205 湖南师范大学体育学院运动人体科学教研室湖南省长沙市第八医院康复医学科湖南省邵阳学院体育系

目的:探讨递增运动负荷训练后大鼠心室肌蛋白质组的表达特征,为进一步筛选对运动性疲劳的研究具有重要意义的蛋白提供实验依据。方法:将10只SD雄性大鼠随机分为对照组和实验组。实验组经过7周的递增运动负荷训练(最后一次为力竭)后与对... 详细信息

目的:探讨递增运动负荷训练后大鼠心室肌蛋白质组的表达特征,为进一步筛选对运动性疲劳的研究具有重要意义的蛋白提供实验依据。方法:将10只SD雄性大鼠随机分为对照组和实验组。实验组经过7周的递增运动负荷训练(最后一次为力竭)后与对照组同时麻醉处死,取心室肌,提取心肌组织的全蛋白进行双向凝胶电泳分离。运用Bio-radPDquest图像分析软件对图谱进行分析。结果与结论:在电泳图谱上运动组可见蛋白质点338±17个,对照组可见352±17个。运动后差异表达的蛋白质点共有99个。运动后消失的点有5个,表达量上调4倍以上和下调幅度超过80%的点各12个,表达量上调1倍以上和下调幅度超过50%的点分别有52个和42个。递增负荷运动训练后,大鼠心室肌蛋白质组发生了明显的质变和量变。运动后表达量差异比较大的蛋白质点的分子量主要集中在35～57kD,等电点主要集中在6.0～7.4和8.6～9.6,在这个范围的蛋白质多为能量代谢酶,提示心室肌能量代谢的改变可能是运动引起心肌疲劳的原因。

关键词：蛋白质组运动性疲劳心室肌递增运动负荷双向凝胶电泳

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闭合复位经皮穿针治疗移位的肱骨外科颈骨折20例

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新乡医学院学报 2008年第2期25卷 200-201页

作者：郭新明曹兰菊杨勇徐宏新乡市第一人民医院骨科河南新乡453000 河南师范大学体育学院运动人体科学教研室河南新乡453007

目的评价闭合复位经皮穿针治疗移位的肱骨外科颈骨折的疗效。方法肱骨外科颈骨折共20例，其中Ⅱ型骨折15例，Ⅲ型骨折5例。采用闭合复位经皮穿针术治疗并评定疗效。结果随访时间为6-16个月，平均随访8个月，优11例，良6例，可3例，优良... 详细信息

目的评价闭合复位经皮穿针治疗移位的肱骨外科颈骨折的疗效。方法肱骨外科颈骨折共20例，其中Ⅱ型骨折15例，Ⅲ型骨折5例。采用闭合复位经皮穿针术治疗并评定疗效。结果随访时间为6-16个月，平均随访8个月，优11例，良6例，可3例，优良率达85％；术后未出现感染及血管神经损伤。结论闭合复位经皮穿针治疗Ⅱ、Ⅲ型肱骨外科颈骨折是一种有效的治疗方法。

关键词：肱骨外科颈骨折闭合复位克氏针固定

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