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利用α-突触核蛋白预制纤维作用于分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型

中国医科大学学报 2025年第1期54卷 5-11页

作者：粟璟曦宋琼景子涵陈良颢邹春林广西医科大学基础医学院转化医学研究中心长寿与老年相关疾病教育部重点实验室神经科学研究所广西脑科学研究重点实验室南宁530021 再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心广西再生医学重点实验室南宁530021

目的探讨利用α-突触核蛋白预形成纤维(α-Syn PFF)作用于视黄酸(RA)分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型的可行性。方法将SH-SY5Y细胞随机分为未分化组和RA分化组,Western blotting检测酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)、淋... 详细信息

目的探讨利用α-突触核蛋白预形成纤维(α-Syn PFF)作用于视黄酸(RA)分化的SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型的可行性。方法将SH-SY5Y细胞随机分为未分化组和RA分化组,Western blotting检测酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)、淋巴细胞活化基因3蛋白(LAG3)、巢蛋白(Nestin)表达水平,免疫荧光染色检测微管相关蛋白2(MAP2)、神经元特异核蛋白(NeuN)表达情况。将经RA分化后的SH-SY5Y细胞随机分为control组和α-Syn PFF组,Hoechst 33342染色检测细胞核固缩情况,一氧化氮(NO)含量检测试剂盒测定细胞内NO生成量,Western blotting检测TH、多聚腺苷酸二磷酸(PAR)、多聚腺苷酸二磷酸核糖酶(PARP)表达水平,免疫荧光染色检测细胞内129位丝氨酸磷酸化α-突触核蛋白(pS129-α-Syn)及磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达情况。结果RA处理可诱导SH-SY5Y细胞胞体变小、突起变长。Western blotting结果显示,RA处理可提高SH-SY5Y细胞TH、DAT、LAG3表达水平,降低Nestin表达水平(P<0.05);α-Syn PFF处理可使分化的SH-SY5Y细胞TH蛋白表达水平降低,PAR、PARP-1、cleaved PARP-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,RA处理能提高SH-SY5Y细胞MAP2和NeuN表达水平(P<0.001);α-Syn PFF处理可使分化的SH-SY5Y细胞γH2AX和pS129-α-Syn的表达水平升高(P<0.01)。Hoechst 33342染色结果显示,α-Syn PFF处理可使分化的SH-SY5Y细胞核固缩(P<0.001)。NO检测结果显示,α-Syn PFF处理可提高分化的SH-SY5Y细胞内NO含量(P<0.01)。结论α-Syn PFF作用于RA分化的SH-SY5Y细胞可建立帕金森病细胞模型。

关键词：帕金森病 α-突触核蛋白预制纤维视黄酸 SH-SY5Y细胞细胞模型

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肠道菌群及其代谢产物在动脉粥样硬化发展中的作用

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生命的化学 2025年第1期45卷 43-54页

作者：欧阳雨欣胡密张杨恺林惠玲唐宛莹彭茂何平平欧阳新平南华大学衡阳医学院基础医学院生理学教研室神经科学研究所神经变性与认知障碍衡阳市重点实验室衡阳421001 湖南师范大学医学院生理学教研室模式动物与干细胞生物学湖南省重点实验室生殖与转化医学湖南省工程研究中心长沙410013 湖南师范大学医学院护理系长沙410013

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性代谢性疾病,与血脂异常和炎症密切相关,但其发病机制尚未完全阐明。肠道菌群作为调节代谢的核心因素,能够产生多种代谢产物,并参与维持宿主稳态、营养物质代谢等过程。大量研究已证实肠道菌... 详细信息

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性代谢性疾病,与血脂异常和炎症密切相关,但其发病机制尚未完全阐明。肠道菌群作为调节代谢的核心因素,能够产生多种代谢产物,并参与维持宿主稳态、营养物质代谢等过程。大量研究已证实肠道菌群在AS发展中的重要作用。本文综合当前研究,强调并阐述了肠道菌群失调及其相关代谢产物与AS之间的复杂联系,并探讨了以肠道菌群为靶点的新兴治疗方法与潜在作用,以期为预防和治疗AS提供新思路。

关键词：肠道菌群代谢产物动脉粥样硬化干预治疗

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产后抑郁母代对子代小鼠青少年期抑郁发病的影响

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中国医学科学院学报 2016年第2期38卷 187-191页

作者：吴如燕陆彩夏宝妹薛文达陶伟伟陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学实验中心南京210023

目的探讨产后抑郁母代对子代小鼠青少年期抑郁发病的影响。方法 48只Balb/c雌鼠按随机数字表法分为对照组及应激组,每组24只。对照组不予任何刺激,应激组给予慢性应激3周：束缚（6 h/d）联合光照24 h（2次/周）。应激结束后,应激组分为3... 详细信息

目的探讨产后抑郁母代对子代小鼠青少年期抑郁发病的影响。方法 48只Balb/c雌鼠按随机数字表法分为对照组及应激组,每组24只。对照组不予任何刺激,应激组给予慢性应激3周：束缚（6 h/d）联合光照24 h（2次/周）。应激结束后,应激组分为3组,每组8只,分别于造模后、造模后正常饲养3周后、分娩3周后予以行为测量,以验证产后抑郁造模成功。正常母代与造模成功的产后抑郁母代所生的F1代雄鼠为：正常对照子代组（CTL-F1）及产后抑郁子代组（PPD-F1）。3～4周龄CTL-F1及PPD-F1雄鼠糖水偏好、强迫游泳及新奇环境摄食实验测量子代的抑郁样行为。结果 PPD-F1代3及4周龄体质量显著低于正常对照组（CTL-F1）（P=0.000,P=0.002）;糖水偏好显著下降（P=0.000）;强迫游泳不动时间显著延长（P=0.001）;摄食潜伏期显著延长（P=0.000）,并且单位体质量摄食量显著下降（P=0.005）。结论产后抑郁子代可能更易患抑郁症,最早可能发病于青少年期。

关键词：产后抑郁子代抑郁症青少年期

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骨髓单个核细胞移植对大鼠损伤脑组织BDNF表达的调节

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四川大学学报（医学版） 2012年第2期43卷 254-257,265页

作者：赵楠但齐琴刘俊马钢李俊彦金华习阳彦斌昆明市第一人民医院神经外科昆明650031 四川大学华西医院转化神经科学中心成都610041 昆明医学院神经科学研究所昆明650031

目的探讨骨髓单个核细胞移植对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、脑外伤组(TBI组)和TBI+单核细胞移植治疗组。建立自由落体TBI大鼠脑损伤模型,取骨髓分离纯化单个核细胞(5×... 详细信息

目的探讨骨髓单个核细胞移植对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、脑外伤组(TBI组)和TBI+单核细胞移植治疗组。建立自由落体TBI大鼠脑损伤模型,取骨髓分离纯化单个核细胞(5×106/mL),经颈动脉注射移植(单核细胞移植治疗组大鼠每只注射1mL)。各组动物分别于TBI后第1、3、7、10d进行神经功能缺损评分(NSS)。TBI后7d取损伤处脑组织行RT-PCR检测BDNF mRNA表达,TBI后10d取损伤处脑组织行原位杂交和免疫组化染色,确定BDNF mRNA和蛋白的细胞定位,计数BDNF阳性细胞数量变化。结果骨髓单个核细胞移植治疗明显减少TBI大鼠NSS评分,与TBI组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BDNF主要分布于皮质神经元,移植组BDNF mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P均<0.05)。结论单个核细胞移植能改善TBI大鼠神经功能,减少神经功能缺损。其机制可能与BDNF表达上调有关。

关键词：创伤性脑损伤单个核细胞脑源性神经营养因子移植

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LncRNAs调控卵巢癌细胞卡铂耐药的机制和功能研究

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广西医科大学学报 2025年第1期42卷 74-86页

作者：洪旖陈翠兰尹富强刘夏广西医科大学基础医学院转化医学研究中心“长寿与老年相关疾病”教育部重点实验室神经科学研究所“广西脑科学研究”重点实验室广西高校人体发育与疾病研究重点实验室南宁530021 广西医科大学生命科学研究院南宁530021 广西医科大学区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室南宁530021 广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心广西再生医学重点实验室南宁530021

目的:基于表达谱芯片筛选卵巢癌卡铂耐药中的差异长链非编码RNA(lncRNAs)并进行功能富集分析,从整体上了解lncRNA响应卵巢癌铂类耐药的信号途径;筛选卡铂耐药调控关键lncRNAs并进行相关功能研究,初步探究分子机制。方法:表达谱芯片筛选... 详细信息

目的:基于表达谱芯片筛选卵巢癌卡铂耐药中的差异长链非编码RNA(lncRNAs)并进行功能富集分析,从整体上了解lncRNA响应卵巢癌铂类耐药的信号途径;筛选卡铂耐药调控关键lncRNAs并进行相关功能研究,初步探究分子机制。方法:表达谱芯片筛选两对卵巢癌卡铂耐药和敏感细胞(HeyA8-CBP/HeyA8及SKOV3-CBP/SKOV3)中差异表达lncRNAs;基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)对差异表达的lncRNAs进行功能注释和通路富集;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNAs的表达,蛋白免疫印迹法(western blotting)检测蛋白表达。慢病毒转染构建lncRNA DAPK1-IT1过表达细胞,克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:通过表达谱芯片分析,筛选出在两株耐药细胞中稳定差异表达lncRNAs 161个,其中表达上调lncRNAs 107个,表达下调lncRNAs 54个。KEGG通路富集结果表明,差异表达的lncRNAs显著富集于p53信号通路、溶酶体、粘着斑等经典耐药途径以及PPAR免疫相关信号通路。基于表达谱芯片和RT-qPCR验证,筛选出在两株卡铂耐药细胞中表达均显著下调4倍以上的lncRNA DAPK1-IT1进行功能验证。在卡铂处理下,过表达lncRNA DAPK1-IT1的卵巢癌卡铂耐药细胞SKOV3-CBP的克隆形成能力显著降低,并导致细胞周期阻滞于G2/M期;western blotting结果表明,lncRNA DAPK1-IT1显著影响细胞周期和细胞自噬相关蛋白的表达。结论:lncRNA DAPK1-IT1在卵巢癌卡铂耐药细胞中的表达稳定下调,其表达抑制卡铂耐药细胞克隆形成,阻滞细胞周期,影响细胞自噬,是卵巢癌卡铂耐药调控的潜在关键因子,而p53信号通路、溶酶体、PPAR信号通路和IL-18可能是lncRNAs调控卡铂耐药的潜在途径,研究结果为进一步理解卵巢癌耐药调控提供了新的思路。

关键词：卵巢癌卡铂耐药长链非编码RNA DAPK1-IT1

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一氧化碳与疼痛调控

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四川大学学报（医学版） 2021年第3期52卷 396-401页

作者：郑智尧金愈茗金思怡柯博文四川大学华西临床医学院成都610041 四川大学华西医院麻醉与危重急救研究室转化神经科学中心成都610041

一氧化碳(carbon monoxide,CO)是一种由哺乳动物体内血红素氧化酶(heme oxygenase,HO)催化血红素降解产生的重要内源性气体信号传导分子。CO参与了生物体内多种生理活动和病理过程,并与器官组织中的细胞保护和稳态维持密切有关。越来越... 详细信息

一氧化碳(carbon monoxide,CO)是一种由哺乳动物体内血红素氧化酶(heme oxygenase,HO)催化血红素降解产生的重要内源性气体信号传导分子。CO参与了生物体内多种生理活动和病理过程,并与器官组织中的细胞保护和稳态维持密切有关。越来越多的研究表明,CO能够通过多种作用机制,在痛觉的发生、发展过程中发挥调节干预作用,但其作用机制尚未完全明确,且给药方式的不可控因素也使其应用受到较大限制。本文旨在梳理CO在疼痛调控中可能的靶点和途径,并对CO临床应用中所面临的挑战和机遇进行讨论,为CO镇痛药物的进一步研发提供线索。

关键词：一氧化碳气体信号分子疼痛与镇痛伤害性感受

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督脉电针刺激对脊髓全横断小鼠大脑皮质运动区BDNF表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2012年第2期43卷 250-253页

作者：张向飞邹宇赵娅王廷华章为四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 昆明医学院神经科学研究所昆明650031 四川大学华西医院转化神经科学中心成都610041

目的研究督脉电针刺激对脊髓全横断(spinal cord transection,SCT)小鼠大脑皮质运动区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法将绿色荧光蛋白转基因小鼠在T9、T10间行SCT,随机分为电针(EA)组、对... 详细信息

目的研究督脉电针刺激对脊髓全横断(spinal cord transection,SCT)小鼠大脑皮质运动区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法将绿色荧光蛋白转基因小鼠在T9、T10间行SCT,随机分为电针(EA)组、对照组,每组9只小鼠。EA组于术后第1d开始电针刺激至第13d结束,对照组仅做SCT。术后28d时,取小鼠大脑皮质运动区脑组织,用免疫组化、原位杂交、逆转录-聚合酶链式反应、酶联免疫吸附试验检测皮质运动区BDNF的表达变化。结果 BDNF蛋白和mRNA阳性产物主要表达于皮质运动区神经元。EA组、对照组皮质运动区BDNF蛋白表达分别为(1973.41±194.71)pg/mg、(1615.22±137.21)pg/mg,差异有统计学意义(P<0.05);而BDNFmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论脊髓损伤后督脉电针刺激能够有效增加小鼠大脑皮质运动区BDNF蛋白表达,这有助于揭示电针刺激促进脊髓损伤修复的机制。

关键词：脊髓全横断电针刺激脑源性神经营养因子小鼠

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CC趋化因子与心肌梗死的研究进展

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生物化学与生物物理进展 2020年第10期47卷 1046-1055页

作者：冯聚玲王真真赵磊陈乃宏湖南省中医药大学药学院长沙410208 中国医学科学院-北京协和医学院药物研究所神经科学中心北京100050 南华大学衡阳医学院转化医学研究室衡阳421001 南华大学附属第一医院胃肠外科衡阳421001

CC类趋化因子亚家族是趋化因子家族中成员最多、研究最广泛的一大类细胞因子,其主要功能是参与炎症细胞激活、迁移、黏附等病理生理过程.大量研究表明,CC类趋化因子亚家族成员参与了心肌梗死后病理过程的各个阶段.其中研究最为深入的是... 详细信息

CC类趋化因子亚家族是趋化因子家族中成员最多、研究最广泛的一大类细胞因子,其主要功能是参与炎症细胞激活、迁移、黏附等病理生理过程.大量研究表明,CC类趋化因子亚家族成员参与了心肌梗死后病理过程的各个阶段.其中研究最为深入的是单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2).MCP-1和CCR2在心肌梗死后炎症期、增殖期及疤痕愈合期都发挥了重要作用从而影响梗死后心室重构.近年来,CC类趋化因子亚家族其他成员亦被逐渐揭示参与了心肌梗死的发展.本文结合以往大量文献,就CC类趋化因子亚家族在心肌梗死各个阶段中的作用,尤其是梗死后各期对于心室重构的影响进行综述,以期为今后的CC趋化因子研究提供方向,为相关疾病的预防和治疗研究提示潜在的药物靶点.

关键词： CC类趋化因子亚家族心肌梗死炎症心室重构

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大鼠损伤脊髓BDNF的表达变化

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四川大学学报（医学版） 2012年第2期43卷 231-235页

作者：金华但齐琴荣荣王廷华昆明医学院附属昆华医院云南省第一人民医院麻醉科昆明650031 四川大学华西医院转化神经科学中心成都610041

目的探讨大鼠脊髓横断损伤尾端脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达变化及其与神经行为学改变的关系。方法成年SD大鼠66只,随机分为假手术组和脊髓全横断(SCT)术后1d、3d、7d、14d、21d、28d组,其中假手术组和SCT术后28d组13只,其余每组8... 详细信息

目的探讨大鼠脊髓横断损伤尾端脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达变化及其与神经行为学改变的关系。方法成年SD大鼠66只,随机分为假手术组和脊髓全横断(SCT)术后1d、3d、7d、14d、21d、28d组,其中假手术组和SCT术后28d组13只,其余每组8只。假手术组和SCT术后28d组各取5只大鼠于0、7、14、21、28d进行神经功能评分(BBB评分)后,于28d处死大鼠,取脊髓尾端组织进行原位杂交和免疫组化染色及ELISA分析,观察BDNF mRNA和蛋白在脊髓尾端的表达和分布;剩余每组各时间点取8只大鼠脊髓尾端组织用于RT-PCR检测BDNFmRNA含量变化。结果 SCT后大鼠后肢运动功能消失,BBB评分于术后14d至28d增加较前一时间点明显(P<0.05);原位杂交及免疫组化示BDNF mRNA及其免疫产物定位于神经元胞浆和突起;RT-PCR示SCT术后各时点BDNF mRNA表达与假手术组比较无差异(P>0.05),而SCT术后14d时BDNFmRNA水平高于术后1d和3d(P<0.05);ELISA检测发现损伤脊髓28dBDNF含量高于假手术组(P<0.05)。结论 SCT后大鼠后肢运动功能随时间呈现一定可塑性,其机制可能与BDNF表达增加相关。

关键词：大鼠脊髓横断脑源性神经营养因子神经可塑性

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奥氮平多靶点激活H1R-AMPK通路导致药源性肥胖

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武汉理工大学学报 2020年第4期42卷 18-25,98页

作者：张颖李文婷黄旭枫钱琨何梦孙涛垒武汉理工大学化学化工与生命科学学院武汉430070 伍伦贡大学医学院伊拉瓦拉卫生与医学研究所和转化神经科学中心伍伦贡2522

抗精神病药物所致肥胖是长期困扰临床医师和患者的一大难题。本项目研究奥氮平"多靶点"导致肥胖的共同通路。用蛋白质免疫印迹法在奥氮平肥胖大鼠模型中检测急性及短期奥氮平给药对下丘脑内侧基底部(Medial basal hypothalamu... 详细信息

抗精神病药物所致肥胖是长期困扰临床医师和患者的一大难题。本项目研究奥氮平"多靶点"导致肥胖的共同通路。用蛋白质免疫印迹法在奥氮平肥胖大鼠模型中检测急性及短期奥氮平给药对下丘脑内侧基底部(Medial basal hypothalamus,MBH),室旁核和迷走神经复合体(Dorsal vagal complex of brainstem,DVC)内组胺H1受体(H1 receptor,H1R)-腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)通路的调控规律,分析其与肥胖的关系。单次奥氮平给药未增加动物摄食,但显著激活MBH及DVC内H1R-AMPK信号通路,奥氮平给药3d增加动物摄食及体重,同时激活H1R-AMPK信号通路。AMPK磷酸化与动物体重呈显著正相关。奥氮平多靶点激活H1R-AMPK信号通路,该通路激活早于肥胖的发生,是动物肥胖的关键原因,多靶点抑制该通路对治疗奥氮平所致肥胖有重要意义。

关键词：奥氮平肥胖下丘脑内侧基底部脑干背侧迷走神经复合体 H1受体-AMPK信号通路

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