目的:通过观察泰山磐石散加味对大鼠流产模型白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)的影响来了解其对母胎界面Th1/Th2型细胞因子平衡的调控,探究其作用机制。方法:将56只已孕Wistar大鼠按随机数字表分为空白对照组、流产模型对照组、环境模型对照组、泰山低剂量组、泰山中剂量组、环境泰山低剂量组、环境泰山中剂量组7组。以米非司酮建立流产模型,涉及环境的组别在其基础上再置于辐射和烟雾的环境造模。在妊娠第1天至第15天予以灌胃,分别给予低剂量(7.26 g/kg)、中剂量(14.52 g/kg)的泰山磐石散,空白对照组、模型对照组每日以4 m L蒸馏水灌胃1次。于大鼠妊娠第16天股动脉采血,ELISA法检测IL-4、IFN-γ。结果:与流产模型对照组对比,泰山低、中剂量组IL-4升高、IFN-γ降低,差别有统计学意义(P<0.01)。与环境流产模型对照组对比,环境泰山低、中剂量组IL-4升高、IFN-γ降低,差别有统计学意义(P<0.01)。环境泰山低剂量组与泰山低剂量组、环境泰山中剂量组与泰山中剂量组之间二指标对比,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:泰山磐石散加味对流产模型、环境流产模型能有效上调Th2细胞因子并抑制Thl细胞因子,Th1/Th2倾斜使母体排异反应降低,对环境模型Th1/Th2倾斜调节效果更明显。
目的:利用Ad Easy TMsystem构建携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,转染至人胚肾细胞系HEK293细胞,检测外源FAM3C在细胞中的表达。方法:取小鼠肾脏提取RNA,创建c DNA文库,用PCR的方法扩增FAM3C基因,将其克隆到p EASY-1载体中,T3连接酶连接。经Bgl II单酶切后,接入p Ad Tra Ck-CMV穿梭载体,T4连接酶连接,构建重组腺病毒的穿梭质粒p Ad Tra Ck-CMV-FAM3C。将经Pme I线性化的p Ad Track-CMFAM3C电穿孔共转化入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-FAM3C,再将经Pac I线性化的Ad-FAM3C重组病毒骨架质粒转染人胚胎肾细胞系HEK293细胞,包装并扩增病毒。用Ad-FAM3C感染小鼠肾系膜细胞,Western blot法检测FAM3C在小鼠肾系膜细胞中的表达。结果:DNA序列分析和琼脂糖凝胶电泳结果表明,已构建表达FAM3C基因的重组腺病毒,该腺病毒在体外能有效感染小鼠肾系膜细胞,且高表达FAM3C蛋白。结论:成功地构建了携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,为进一步阐明FAM3C的功能及作用机制奠定实验基础。
暂无评论