检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杨东亮华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室、传染病学教研室

动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制,研制有效抗病毒药物和疫苗的不可缺的工具。我国是肝炎病毒感染较为严重的国家,对动物模型的需求很大。然而,目前在嗜肝DNA病毒感染动物模型研究方面与国外... 详细信息

动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制,研制有效抗病毒药物和疫苗的不可缺的工具。我国是肝炎病毒感染较为严重的国家,对动物模型的需求很大。然而,目前在嗜肝DNA病毒感染动物模型研究方面与国外有较大差距。我们近年来在寻找和建立适合我国国情的嗜肝DNA病毒感染动物模型方面做了一些探索:(1)发现我国的某些种属旱獭(土拨鼠)可能存在着自然感染的嗜肝DNA病毒。(2)中国旱獭对WHV易感,WHV可以在旱獭体内复制和传代,病毒抗原在肝内大量表达,部分中国旱獭可以形成慢性感染。免疫抑制剂CsA可以提高病毒感染率并有助于形成持续感染。 (3)不同地区旱獭对WHV易感性有明显差异,与种系进化差异有关。(4)旱獭IFN-α、IL-6、IL-10、L-15、IRF-1、STAT- 1等多种基因与土拨鼠相应基因核苷酸同源性高达96％以上。(5)对土拨鼠MHC-I基因家族进行了基因分析,鉴定出土拨鼠MHC- Ⅰ类基因A座位的14种等位基因,其中A1和A9的表型分布频率分别为46％和30％。对表达频率较高的MHC-1分子进行了体外表达和纯化。(6)克隆并命名12个不同的中国旱獭IFN-α基因亚型。体外表达了其中8个基因亚型并检测了其生物活性,虽然抗病毒活性不相同,但均显示出严格的种系限制性。(7)克隆并表达土拨鼠IL-15,重组土拨鼠IL-15有明显刺激淋巴细胞增殖功能。(8)发现HBcAg和WHcAg的N末端存在着保守的线性B淋巴细胞抗原表位。(9)构建WHV X基因的siRNA和反义 RNA表达质粒,体外实验提示WHV序列特异性siRNA可以有效抑制WHV X蛋白的表达。(10)应用高压水注射技术将复制性HBV／WHV基因导入小鼠肝脏,建立了HBV／WHV急性感染小鼠模型,病毒特异性siRNA能够抑制病毒基因表达和复制。上述研究结果为建立适合我国国情并能够推广应用的嗜肝DNA病毒感染动物模型奠定了初步实验基础。

关键词：动物模型 HBV 病毒感染白细胞介素嗜肝病毒 DNA

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多房棘球绦虫ELP抗原在大肠埃希菌中的表达及其在免疫诊断中的初步应用

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中国病原生物学杂志 2006年第2期1卷 98-101页

作者：王昌源张洪花陈雅棠李文桂唐霓山东大学医学院传染病学教研室济南市传染病院山东济南250021 青岛市疾病预防控制中心重庆医科大学

目的实现多房棘球绦虫ELP蛋白在大肠埃希菌中的表达,制备高纯度、高特异性的重组抗原,为多房棘球绦虫感染的流行病学调查和临床诊断提供新的工具。方法在建立了多房棘球绦虫elp基因克隆的基础上,应用亚克隆方法将目的基因插入原核非融... 详细信息

目的实现多房棘球绦虫ELP蛋白在大肠埃希菌中的表达,制备高纯度、高特异性的重组抗原,为多房棘球绦虫感染的流行病学调查和临床诊断提供新的工具。方法在建立了多房棘球绦虫elp基因克隆的基础上,应用亚克隆方法将目的基因插入原核非融合表达载体pQE30(+)。经酶切鉴定,转化于大肠埃希菌,以IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE及Westernblot进行鉴定。亲和层析纯化ELP蛋白,用于ELISA检测患者血清特异性抗体。结果酶切鉴定、SDS-PAGE及Westernblot分析证实,成功地构建了pQ-ELP原核非融合表达载体,该载体转化大肠埃希菌在IPTG诱导下能高效表达ELP蛋白。ELP重组抗原用于ELISA检测18份包虫病人血清均阳性,10份华支睾吸虫病、27份乙肝病毒感染者和10份健康人血清均为阴性。结论多房棘球绦虫ELP抗原在大肠埃希菌中得到了高效非融合表达,初步实验结果显示该重组蛋白对包虫病具有较高的诊断价值。

关键词：多房棘球绦虫 ELP抗原非融合表达免疫诊断

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牙科诊室病原微生物监测及防护研究

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华夏医学 2006年第5期19卷 1025-1026页

作者：胡婷婷蒋就喜广西师范大学生命科学院广西桂林541004 桂林医学院传染病学教研室广西桂林541001

随着口腔医疗保健水平的不断提高,其治疗过程出现的感染问题也日益突出.建立严格消毒灭菌措施及防护制度,切断医患、患者之间医源性交叉感染,是摆在牙科门诊及医务工作者面前的头等大事。[第一段]

关键词：牙科诊室病原微生物监测防护

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flaB-PCR在钩端螺旋体病检测中应用

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中国公共卫生 2006年第3期22卷 291-293页

作者：王兆芬蒋秀高李秀文聂一新顾黎莉耿排力青海医学院公共卫生系流行病教研室西宁810001 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所安徽省疾病预防控制中心

目的探讨flaB-PCR对组织标本中钩端螺旋体检测的可行性,为钩端螺旋体流行病学调查提供一种快速、有效的技术手段。方法根据黄疸出血型钩体赖株高度保守序列flaB设计一对引物,用PCR方法对实验动物标本及疫区动物标本中的钩端螺旋体DNA进... 详细信息

目的探讨flaB-PCR对组织标本中钩端螺旋体检测的可行性,为钩端螺旋体流行病学调查提供一种快速、有效的技术手段。方法根据黄疸出血型钩体赖株高度保守序列flaB设计一对引物,用PCR方法对实验动物标本及疫区动物标本中的钩端螺旋体DNA进行flaB基因片断扩增,扩增产物用琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果该引物可特异性扩增钩端螺旋体DNA,而对本实验所用其它细菌均不扩增。肾组织中含10条钩端螺旋体经flaB-PCR扩增后,琼脂糖凝胶电泳可以目测到扩增产物。26份人工感染钩端螺旋体的动物脏器标本,flaB-PCR扩增阳性10份,阳性率38.46%;细菌分离阳性2份,阳性率7.69%,2种方法比较差异有统计学意义(χ2=6.93,P<0.01)。疫区70份蛙肾标本,分离细菌8株,阳性检出率11.43%;flaB-PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳阳性14份,阳性检出率20%。细菌分离阳性的标本flaB-PCR均为阳性。结论flaB-PCR灵敏、特异、快速,是钩端螺旋体检测的有效方法,可用于钩体病疫情监测和流行病学调查。

关键词： flaB基因聚合酶链反应钩端螺旋体

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CD37基因在不同肿瘤细胞中的表达

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现代肿瘤医学 2006年第4期14卷 391-393页

作者：汪莉萍陈红松魏来费然陈明江苏徐州医学院传染病学教研室江苏徐州221002 北京大学人民医院肝病研究所北京100044

目的了解CD37基因在正常组织、肝细胞、肝癌组织和各种肿瘤细胞中的表达情况。方法运用RT-PCR方法检测睾丸组织、肝癌组织、癌旁组织和11种肿瘤细胞株和正常肝细胞中CD37的表达。结果CD37在MCF-7、HeLa、MEL-ED1、Huh7、HLE、NCI-H446、... 详细信息

目的了解CD37基因在正常组织、肝细胞、肝癌组织和各种肿瘤细胞中的表达情况。方法运用RT-PCR方法检测睾丸组织、肝癌组织、癌旁组织和11种肿瘤细胞株和正常肝细胞中CD37的表达。结果CD37在MCF-7、HeLa、MEL-ED1、Huh7、HLE、NCI-H446、BGC-823、SK-N-SH、LS-174-T、CNE、Eca-109和L-02细胞株中均不表达;而在睾丸组织、肝癌组织、癌旁组织、Burkitt's淋巴瘤细胞Naml-wa和肝癌细胞HepG2中均表达。结论CD37的表达可能与某些肿瘤如Burkitt's淋巴瘤和肝细胞癌的发生有关。

关键词： CD37 肿瘤细胞 4跨膜蛋白超家族(TM4Sr)

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嗜肝DNA病毒感染的动物模型研究进展

嗜肝DNA病毒感染的动物模型研究进展

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首届北京地坛感染病学术会议

作者：杨东亮华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室武汉430030

动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制，研制有效抗病毒药物和疫苗的不可或缺的工具。嗜肝DNA病毒不仅包括HBV，也包括其它哺乳动物的嗜肝病毒，如土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)和... 详细信息

动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制，研制有效抗病毒药物和疫苗的不可或缺的工具。嗜肝DNA病毒不仅包括HBV，也包括其它哺乳动物的嗜肝病毒，如土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)和长毛猴肝炎病毒(WMHV)，以及禽嗜肝病毒，如鸭乙型肝炎病毒(DHBV)、灰苍鹭乙型肝炎病毒(HHBV)和雪鹅肝炎病毒(SGHV)。所有嗜肝DNA病毒家族成员的生物学特性有许多相似之处，如病毒形态、复制过程和致病性等。但是，由于(1)嗜肝DNA病毒的易感宿主范围较狭窄：如HBV感染黑猩猩，长臂猿和树驹，WHV感染土拨鼠，DHBV可感染鸭子。(2)不同动物的免疫遗传学特性存在差异;(3)动物的来源和价格差异较大等，因此，不同动物模型的应用范围也有所区别。尽管如此，这些动物模型提供了进行组织培养和体内研究的实验体系，使人们得以认识嗜肝DNA病毒的复制周期以及病毒持续存在和病毒清除的机制;有利于进一步研究病毒生命周期中各种病毒基因的作用;还可详尽地研究疾病自然史相关的各种问题，包括病毒基因多态性，病毒感染的免疫病理，病毒肝外储存部位以及肝细胞肝癌(HCC)的发生机制等。近年来，应用鸭和土拨鼠模型评价了抑制病毒反转录酶的核苷类似物在清除慢性感染中的作用，研究发现长期用药虽然可有助于清除病毒，但是耐药突变株的产生也随之增加。在自然感染模型和转基因小鼠模型中均证明，抗病毒细胞免疫应答可能是清除慢性病毒感染的前提。因此，这些动物模型可使我们获得更多HBV分子生物学相关的信息，以及对慢性HBV感染的治疗新策略进行实验性评估。

关键词：嗜肝DNA病毒动物模型免疫病理

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原位杂交检测NF-κB p65在皮肤血管瘤组织中的表达

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数理医药学杂志 2006年第4期19卷 363-365页

作者：吴建红张端莲陕光陕声国武汉市传染病医院武汉430022 武汉大学医学院组织胚胎教研室武汉大学医学院武汉大学人民医院整形外科

目的:探讨NF-κB p65在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及其意义。方法:采用免疫组织化学方法(S-P法)和原位杂交的方法,检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织及内皮中NF-κB p65的表达水平,并利用计算机图像分析技术... 详细信息

目的:探讨NF-κB p65在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及其意义。方法:采用免疫组织化学方法(S-P法)和原位杂交的方法,检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织及内皮中NF-κB p65的表达水平,并利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织NF-κB p65表达的平均光密度和平均阳性面积。结果:增生期血管瘤内皮细胞NF-κBp65表达水平高于退化期,差异有显著性(P<0.01);退化期血管瘤内皮细胞NF-κB p65表达水平与正常皮肤组织相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:NFκ-B p65可能通过调控血管生成因子的表达而促进血管瘤的形成。

关键词：血管瘤核转录因子血管生成因子

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商陆抗病毒蛋白对感染细胞模型中HCV复制的影响

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中西医结合肝病杂志 2006年第4期16卷 226-228页

作者：陈瑞烈林少锐李忆璇郑晓丹贺永文高勇杨小铭罗端德汕头市中心医院感染科广东汕头515031 华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病教研室

目的:探讨商陆抗病毒蛋白(PAP)对丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞模型中HCV复制的影响。方法:用不同浓度PAP处理HCV感染细胞模型(HCV-HepG2),以荧光定量PCR法检测培养上清液中及细胞内HCV RNA,以不同浓度的α-2b干扰素(IFNα-2b)处理同样的... 详细信息

目的:探讨商陆抗病毒蛋白(PAP)对丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞模型中HCV复制的影响。方法:用不同浓度PAP处理HCV感染细胞模型(HCV-HepG2),以荧光定量PCR法检测培养上清液中及细胞内HCV RNA,以不同浓度的α-2b干扰素(IFNα-2b)处理同样的细胞模型作为对照。结果:经PAP处理后各模型组细胞内HCVRNA含量于48小时、96小时和144小时进行比较,差异有非常显著性意义(P<0·01);培养上清液中HCV RNA含量在48小时时,各组间比较,差异无显著性意义(P>0·05),但在96小时和144小时时,各组间比较差异有非常显著性意义(P<0·01)。PAP对HCV的抑制作用随PAP浓度的增加而增强,以100μg/ml浓度的抑制作用最强。用IFN-α2b处理HCV-HepG2模型亦得出类似的结果。两者均以第48小时的抑制率最高。但在96小时、144小时时PAP对细胞内HCV的抑制作用明显强于IFN(P<0·05,P<0·01)。结论:PAP对HCV感染细胞模型中的HCV复制有明显地抑制作用,且作用强于IFN-α2b。PAP对细胞无明显毒性。

关键词：丙型肝炎病毒商陆抗病毒蛋白干扰素

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鸭乙型肝炎病毒cccDNA TaqMan荧光定量PCR的建立

鸭乙型肝炎病毒cccDNA TaqMan荧光定量PCR的建立

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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：傅美丽林青刘小朋施水兰陈少华郑丽雅林福海李东良陈紫榕福建医科大学福总临床医学院476临床部内科学(传染病学)教研室福州350002

本文用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物间设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和护增条件,建立了DHBVcccDNA TaqMan荧光定量PCR方法.最... 详细信息

本文用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物间设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和护增条件,建立了DHBVcccDNA TaqMan荧光定量PCR方法.最低可检出104拷贝/ml;批内误差为0.2％～3.14％,批间误差为2.22％～4.43％;在103-1012拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性[Ct=-2.8361ln(x)+41.45,r=-09985].该法是一种灵敏度高、特异性强、较为简便的DHBVcccDNA定量检测技术.

关键词：鸭乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸荧光定量PCR

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慢性乙型病毒性肝炎血清HBV DNA载量与肝组织病毒学标志及肝脏损害程度的关系

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中国厂矿医学 2006年第6期19卷 486-488页

作者：季红夏海鸣沈玲东南大学临床医学院传染病教研室江苏省南京市210009 东南大学附属南京第二医院江苏省南京市210023

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA载量与肝组织病毒学标志及肝组织病理损伤的关系。方法根据血清学检查结果将90例CHB患者分为血清HBV DNA阳性与阴性2组,对2组患者血清HBeAg阳性率、肝组织病毒学标志HBsAg、HBcAg的表达及肝组... 详细信息

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA载量与肝组织病毒学标志及肝组织病理损伤的关系。方法根据血清学检查结果将90例CHB患者分为血清HBV DNA阳性与阴性2组,对2组患者血清HBeAg阳性率、肝组织病毒学标志HBsAg、HBcAg的表达及肝组织病理损伤进行对比分析。结果血清HBV DNA阳性组血清HBeAg阳性率、肝组织中HBeAg、HBcAg表达明显高于HBV DNA阴性组,统计学处理有显著性差异,而2组肝组织肝脏炎症和纤维化程度比较无明显差异。结论CHB患者血清HBV DNA定量与血清HBeAg阳性率、肝组织中HBsAg、HBcAg表达有高度的相关性,而与肝组织炎症和纤维化程度无关。

关键词：乙型病毒性肝炎慢性 HBV DNA 血清学病理学免疫组织化学

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