检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第4期40卷 446-453页

作者：黄媛媛姚世杰卞致芳温易鑫郑丽曹雅明中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110122

目的探讨地塞米松(DEX)对实验性脑型疟(ECM)小鼠的免疫保护作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为感染组、DEX治疗组和对照组,每组20只。感染组和DEX治疗组小鼠经腹腔注射1×10^(6)个伯氏疟原虫ANKA感染红细胞,对照组小鼠不作任何处理。... 详细信息

目的探讨地塞米松(DEX)对实验性脑型疟(ECM)小鼠的免疫保护作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为感染组、DEX治疗组和对照组,每组20只。感染组和DEX治疗组小鼠经腹腔注射1×10^(6)个伯氏疟原虫ANKA感染红细胞,对照组小鼠不作任何处理。DEX治疗组小鼠在感染后第1、2天腹腔注射地塞米松磷酸钠(80 mg/kg)进行治疗,对照组和感染组则注射等体积生理盐水。感染后第3天起,取感染小鼠尾静脉血制备血涂片,吉氏染色后计数感染红细胞,观察原虫血症变化情况。每日记录小鼠的存活和与ECM相关的神经体征。感染后第3、5天,取小鼠脾脏制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾Th1细胞,调节性T细胞(Tregs),表达程序性死亡受体-1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)的CD4^(+)T细胞以及M1、M2型巨噬细胞的变化情况。取脾细胞悬液体外培养48 h后取上清,ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10等促炎/抑炎相关因子的分泌水平。感染后第6天,伊文思蓝(EB)染色法评价DEX治疗后对小鼠血脑屏障的影响。流式细胞术和细胞因子检测结果的比较采用One-way ANOVA检验,小鼠原虫血症比较采用独立样本t检验,生存率的比较采用Log-Rank检验。结果感染后第3天,感染组和DEX治疗组小鼠外周血开始出现疟原虫感染红细胞,感染后第9天的原虫血症分别为(25.89±1.97)%和(22.91±3.21)%,二者差异无统计学意义(t=1.12,P>0.05)。感染组小鼠在感染后第6天开始出现死亡,伴有ECM神经症状,感染后第9天全部死亡;DEX治疗组小鼠在感染后第8天出现死亡,伴有ECM神经症状,第10天全部死亡。与感染组比较,DEX治疗延缓了脑型疟的发生(χ^(2)=4.31,P<0.05)。感染后第3、5天,DEX治疗组小鼠表达PD-1的脾CD4^(+)T细胞比例分别为(18.10±0.52)%和(39.13±0.91)%,高于对照组的(11.53±1.00)%和(13.72±1.78)%以及感染组的(14.87±1.02)%和(35.87±0.74)%(F=41.41、378.00,P<0.05、0.01);表达CTLA-4的脾CD4^(+)T细胞比例分别为(3.05±0.12)%和(8.70±1.01)%,高于对照组的(0.28±0.02)%和(0.45±0.10)%以及感染组的(0.44±0.13)%和(0.68±0.13)%(F=730.20、191.80,P<0.01)。感染后第3、5天,DEX治疗组小鼠脾细胞中Th1细胞的比例分别为(0.14±0.04)%和(0.63±0.06)%,低于感染组的(0.30±0.06)%和(0.80±0.04)%(F=10.93、56.58,P<0.05、0.01)。感染后第5天,DEX治疗组小鼠脾细胞中Tregs细胞的比例为(1.30±0.08)%,高于对照组的(1.12±0.08)%和感染组的(0.86±0.03)%(F=36.51,P<0.01)。感染后第3天,DEX治疗组小鼠脾细胞中M1型巨噬细胞的比例为(0.43±0.12)%,低于感染组的(1.03±0.14)%(F=29.81,P<0.01)。感染后第5天,DEX治疗组小鼠脾细胞中M2型巨噬细胞比例为(1.56±0.20)%,高于对照组的(0.49±0.04)%和感染组的(0.87±0.06)%(F=60.21,P<0.01)。感染后第3、5天,DEX治疗组小鼠脾细胞培养上清中TNF-α水平分别为(140.18±27.38)和(328.23±75.70)pg/ml,低于感染组的(247.34±35.34)和(650.88±43.56)pg/ml(F=11.70、32.09,P<0.01);IL-6水平分别为(40.03±9.09)和(1270.52±83.75)pg/ml,低于感染组的(511.97±41.70)和(4131.31±645.16)pg/ml(F=299.40、93.11,P<0.01);IL-10的水平分别为(283.06±44.83)和(592.63±51.69)pg/ml,高于感染组的(118.82±8.47)和(424.49±51.44)pg/ml(F=36.04、73.95,P<0.01)。感染后第6天,感染组小鼠的血脑屏障破坏严重,EB渗入脑组织,呈现深蓝色;对照组小鼠血脑屏障完好,未见明显的EB渗入;DEX治疗组小鼠仅有少量EB渗入脑组织。结论在ECM小鼠中,DEX通过提高CD4^(+)T细胞表面免疫抑制分子PD-1和CTLA-4的水平调控Th1和Tregs细胞活化与应答强度,促进M1向M2型巨噬细胞极化,抑制促炎因子的分泌水平,减轻EC

关键词：疟疾地塞米松脾脏促炎症反应

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结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第10期39卷 940-945页

作者：黄胜男李芳芳金丹延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室吉林延吉133002

结直肠癌是胃肠道中常见的恶性肿瘤,其发生发展除了与自身特性相关外,也与肿瘤所处的微环境相关。肿瘤相关巨噬细胞(TAM)作为肿瘤微环境(TME)中数量最多的免疫细胞之一,被募集到肿瘤部位后,受到TME中不同的信号刺激可分化为M1和M2两种... 详细信息

结直肠癌是胃肠道中常见的恶性肿瘤,其发生发展除了与自身特性相关外,也与肿瘤所处的微环境相关。肿瘤相关巨噬细胞(TAM)作为肿瘤微环境(TME)中数量最多的免疫细胞之一,被募集到肿瘤部位后,受到TME中不同的信号刺激可分化为M1和M2两种不同亚型。结直肠癌早期TAM主要表现为M1型巨噬细胞,介导抑制肿瘤生长的免疫反应;在晚期阶段,TAM逐渐以M2型巨噬细胞为主,表现出免疫抑制、刺激肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生成、促进肿瘤细胞侵袭及转移等能力。研究发现影响TAM极化可以调控其与结直肠癌发生发展的关系。

关键词：结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞肿瘤微环境综述

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人黏着斑激酶(FAK)原核表达及多克隆抗体制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第2期39卷 175-180页

作者：张丽张娅季江颖魏梓妤刘家宇许涛汪洪涛蚌埠医学院第一附属医院分子诊断中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆... 详细信息

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达;利用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)金属鳌合亲和层析树脂进行蛋白纯化,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;通过间接ELISA和Western blot法进行效价和特异性鉴定。结果成功构建pCZN1-FAK重组表达载体,FAK蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白纯化后,制备的兔抗FAK多克隆抗体效价达1∶512000,且与外源和内源FAK蛋白发生特异性反应。结论成功克隆、表达与纯化FAK蛋白,制备兔抗FAK多克隆抗体,可用于内源FAK蛋白特异性检测。

关键词：人黏着斑激酶(FAK) 多克隆抗体

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基于线粒体氧化应激损伤探讨白杨素对溃疡性结肠炎大鼠的保护作用及机制

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中药材 2023年第12期46卷 3081-3090页

作者：潘中武李泽朋陈晓张薇李先伟皖南医学院医学微生物与免疫学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院药学院药理学教研室安徽芜湖241002 芜湖市中医医院消化内科安徽芜湖241000

目的:探究白杨素对溃疡性结肠炎的作用及其机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪(200 mg/kg)阳性对照组及白杨素低(25 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,每组10只。3%葡聚糖硫酸钠喂养1 w联合2%冰醋酸... 详细信息

目的:探究白杨素对溃疡性结肠炎的作用及其机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪(200 mg/kg)阳性对照组及白杨素低(25 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,每组10只。3%葡聚糖硫酸钠喂养1 w联合2%冰醋酸直肠灌注1次制备UC大鼠模型。对各组大鼠进行DAI评分,HE染色观察结肠组织病理学变化,透射电镜观察结肠线粒体超微结构。ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6及结肠组织4-HNE水平,比色法检测结肠组织MDA水平,Western Blot检测结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、SIRT3、OGG1、p-IκBα、p-NF-κB P65蛋白表达及NF-κB P65核转移情况。体外培养结肠上皮细胞(NCM460),实验设正常对照组、白杨素(100μmol/L)对照组、模型组及白杨素1、10、100μmol/L组。DCFH-DA荧光探针检测细胞ROS水平,比色法检测细胞MDA水平,Western Blot和(或)免疫荧光法检测细胞Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、SIRT3、OGG1、p-IκBα、p-NF-κB P65的蛋白表达及NF-κB P65核转移情况。结果:体内实验中,与模型组比较,各给药组大鼠体质量显著升高,DAI评分显著降低(P<0.05或P<0.01),结肠病理损伤明显缓解;血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平与结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达显著降低,结肠组织Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);结肠线粒体损伤明显减轻,SIRT3、OGG1蛋白表达显著升高,MDA、4-HNE水平显著降低,IκBα、NF-κB P65磷酸化水平与NF-κB P65核转移程度显著降低(P<0.05或P<0.01)。体外实验中,与模型组比较,白杨素各组ROS、MDA、4-HNE、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低,SIRT3、OGG1蛋白表达显著升高,IκBα、NF-κB P65磷酸化程度及NF-κB P65核转移水平显著降低(P<0.05或P<0.01),线粒体损伤减轻。结论:白杨素对UC具有一定的缓解作用,其机制可能与减轻线粒体氧化应激损伤,抑制NF-κB信号通路活化,降低炎症反应和细胞凋亡有关。

关键词：白杨素溃疡性结肠炎线粒体氧化应激 NF-κB

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分枝杆菌诱导宿主免疫细胞凋亡机制的研究进展

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1480-1483页

作者：丁寿鹏王国富吴利先大理大学基础医学院医学微生物与免疫教研室云南大理671000

鸟结核分枝杆菌(Mycobacterium avium tuberculosis,MAV)是引起严重机会性肺病的重要病原体之一。对于免疫功能低下的患者,例如合并HIV感染者,MAV是严重的晚期并发症。目前,MAV与免疫细胞间作用机制尚不清楚。MAV主要寄生于巨噬细胞中,... 详细信息

鸟结核分枝杆菌(Mycobacterium avium tuberculosis,MAV)是引起严重机会性肺病的重要病原体之一。对于免疫功能低下的患者,例如合并HIV感染者,MAV是严重的晚期并发症。目前,MAV与免疫细胞间作用机制尚不清楚。MAV主要寄生于巨噬细胞中,因此了解其对巨噬凋亡的诱导机制极其上游调控基因对未来寻找有效的治疗手段尤为重要。本文将对MAV诱导巨噬细胞及其他免疫细胞凋亡的机制进行综述。

关键词： MAV 巨噬细胞免疫细胞细胞因子综述

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八年制医学整合课程《感染与免疫前沿进展》的教学实践与思考

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第11期40卷 1050-1054页

作者：雷迎峰吕欣柏银兰庄然徐志凯张瑞陈丽华张芳琳空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

医学整合课程是现代医学教育模式发展变革的重要模式之一,以模块为单元的整合课程对知识、能力与素质目标提出了更高要求。空军军医大学八年制医学整合课程《感染与免疫前沿进展》教学改革实践包括教学内容的选择与整合,多种教学方法的... 详细信息

医学整合课程是现代医学教育模式发展变革的重要模式之一,以模块为单元的整合课程对知识、能力与素质目标提出了更高要求。空军军医大学八年制医学整合课程《感染与免疫前沿进展》教学改革实践包括教学内容的选择与整合,多种教学方法的创新应用,多元化教学评估与反馈和教学团队建设。该课程不仅拓展了学生的知识深度,促进学生的能力发展,还提升了学生的综合素养和国际视野,培养的高素质医学人才能够适应未来医学发展需要。

关键词：八年制医学整合课程感染与免疫前沿进展教学内容教学评估教学团队

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生长阻滞特异性转录因子5剪接变异体GAS5_O1增强慢性髓系白血病细胞对伊马替尼的敏感性

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第3期40卷 348-361页

作者：张斯玮 Gwyn T.Williams 西安医学院基础医学部生物化学与分子生物学教研室西安710021 西安医学院西安市病原微生物与肿瘤免疫重点实验室西安710021 School of Life Sciences Keele UniversityStaffordshireUK

在多种肿瘤中,生长阻滞特异性转录因子5(growth-arrest specific transcript 5,GAS5)高表达与患者的良好生存期相关。GAS5存在多种剪接变异体,本研究探讨GAS5部分剪接变异体在髓系白血病细胞系中的表达模式。并基于对凋亡诱导敏感的慢... 详细信息

在多种肿瘤中,生长阻滞特异性转录因子5(growth-arrest specific transcript 5,GAS5)高表达与患者的良好生存期相关。GAS5存在多种剪接变异体,本研究探讨GAS5部分剪接变异体在髓系白血病细胞系中的表达模式。并基于对凋亡诱导敏感的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞系K562,研究GAS5部分剪接变异体对K562细胞自身增殖、凋亡以及对靶向药物伊马替尼(imatinib,IM)的敏感性的影响。反转录PCR结果显示,GAS5剪接模式在髓系白血病细胞系HL-60、K562、NB4和KASUMI-1之间未见明显差异。相较于指数增长期,GAS5_AE表达水平在细胞密度引起的生长停滞期有一定程度的累积。通过核转染,将GAS5剪接变异体(pcDNA3-GAS5_1B、-GAS5_2B、-GAS5_3A、-GAS5_4A、-GAS5_O1或-GAS5_AE)转入K562细胞的单克隆株中。通过台盼蓝染色、吖啶橙染色后进行细胞计数,克隆形成实验检测细胞集落形成能力。结果与对照组相比,瞬时转染GAS5剪接变异体并无抑制细胞的基础增殖或增强细胞对药物的敏感性。建立GAS5_O1的稳定转染株,延长培养时程并计算倍增时间,发现GAS5_O1的表达水平和倍增时间成正比(R^(2)=0.5692)。在稳转株O1-C8中观察到GAS5_O1可促进IM引起的细胞生长抑制(56.94%±2.84%vs.36.07%±2.32%,P<0.05)和凋亡(29.33%±1.30%vs.52.00%±2.52%,P<0.05)。上述结果表明,GAS5_O1的上调可能增加CML细胞的倍增时间,并使CML细胞对IM处理敏感。

关键词：生长阻滞特异性转录因子5 剪接变异体慢性髓系白血病凋亡

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基于自然杀伤(NK)细胞的肝癌免疫疗法研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第1期40卷 80-88页

作者：朱鑫月周玉付朱诗国上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203

肝细胞肝癌(HCC)异质性高,晚期诊断和化疗耐药使其成为我国难治性肿瘤之一。自然杀伤(NK)细胞在机体的免疫监视过程中充当重要角色。但在肝癌的进展过程中,NK细胞的功能受损致肿瘤免疫逃逸。该文总结了HCC中基于NK细胞的不同免疫治疗策... 详细信息

肝细胞肝癌(HCC)异质性高,晚期诊断和化疗耐药使其成为我国难治性肿瘤之一。自然杀伤(NK)细胞在机体的免疫监视过程中充当重要角色。但在肝癌的进展过程中,NK细胞的功能受损致肿瘤免疫逃逸。该文总结了HCC中基于NK细胞的不同免疫治疗策略,包括直接输注过继性NK细胞免疫疗法、基因工程NK细胞免疫疗法、靶向NK细胞受体免疫疗法、改变免疫抑制微环境免疫疗法、细胞因子增强NK细胞肿瘤毒性免疫疗法以及中医药增强NK细胞肿瘤毒性免疫疗法,这些基于NK细胞的免疫治疗策略已显示出巨大的治疗潜力。

关键词：自然杀伤细胞肝癌肿瘤逃逸免疫疗法综述

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登革病毒-2感染人脐静脉内皮细胞的磷酸化蛋白质组学分析

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南方医科大学学报 2023年第1期43卷 29-38页

作者：胡盼程瑶王远迎苟小琴刘华左丽吴宁贵州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院实验教学中心贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫教研室贵州贵阳550004

目的对登革病毒-2(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的差异磷酸化蛋白质进行分析以及初步探究DENV-2感染的可能致病机制。方法实验设置DENV-2感染HUVEC组和HUVEC空白对照组,每组3个重复。收集细胞沉淀后,利用SDT裂解法获取蛋白质,通... 详细信息

目的对登革病毒-2(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的差异磷酸化蛋白质进行分析以及初步探究DENV-2感染的可能致病机制。方法实验设置DENV-2感染HUVEC组和HUVEC空白对照组,每组3个重复。收集细胞沉淀后,利用SDT裂解法获取蛋白质,通过串联质谱标签(TMT)法对磷酸化蛋白质进行定性与定量分析,对鉴定到的差异磷酸化蛋白质进行氨基酸保守基序分析、亚细胞定位分析、蛋白质结构域分析、GO富集分析、KEGG通路分析和蛋白质互作(PPI)等生物信息学分析。利用Western blot检测JUN、MAP2K2和AKT1磷酸化蛋白的表达。结果共检测到1385个差异蛋白质上的2918个修饰肽段,其中有1346个修饰肽段显著上调(FC>1.2,P<0.05),1572个修饰肽段显著下调(FC<0.83,P<0.05)。氨基酸保守基序分析共获得49个磷酸化保守基序。蛋白质结构域分析中富集到的差异磷酸化肽段最多是RNA识别基序、蛋白激酶结构域和PH结构域。通过亚细胞定位分析发现差异的修饰肽段主要定位在细胞核和细胞质中。GO富集和KEGG通路分析结果显示差异肽段主要在刺激反应的调节、含核碱基的小分子生物合成过程、吞噬体和白细胞跨内皮迁移处富集。对上调和下调的差异磷酸化蛋白分别进行蛋白质互作—KEGG联合分析,结果发现上调和下调的差异磷酸化蛋白质共富集到15条通路,且通过Western Blot检测与自噬途径相关的3个差异磷酸化蛋白质即JUN、MAP2K2和AKT1的表达,结果显示DENV-2组与空白组相比,p-JUN表达显著下调(1.48±0.01 vs 1.23±0.01,P<0.0001);p-AKT1表达显著上调(0.87±0.02 vs 1.01±0.01,P<0.001);p-MAP2K2表达显著上调(1.10±0.02 vs 1.29±0.05,P<0.01)。结论DENV-2感染HUVEC存在较多差异表达蛋白,p-JUN的下调、p-MAP2K2和pAKT1的上调提示3个能够调节自噬的磷酸化蛋白可能与DENV-2感染机制有关。

关键词：磷酸化组学登革病毒-2 人脐静脉内皮细胞

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IL-27联合IL-15通过磷酸化STATs途径调控NK92细胞的抗肿瘤作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2021年第3期28卷 261-268页

作者：蒋亚楠孙雨飞王坤付强滨州医学院免疫学教研室山东烟台264003 滨州医学院生物制药教研室山东烟台264003 山东思乐基医药科技有限公司山东烟台264003

目的:探讨IL-27联合IL-15对NK92细胞抗肿瘤作用的影响及其分子和信号通路机制。方法:将高表达IL-15的NK92(IL-15-NK92)细胞分别置于不同质量浓度的IL-27(0、10、20、30及60 ng/ml)下培养24 h,ELISA法检测IL-27对IL-15-NK92细胞分泌IL-15的影响,Transwell法检测IL-27对IL-15-NK92细胞迁移作用的影响,CCK-8法检测IL-27对IL-15-NK92细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测IL-15-NK92细胞表面受体NKG2D、NKp30和NKp46的表达水平以及穿孔素和颗粒酶B的分泌水平,LDH法检测IL-15-NK92细胞对多种血液肿瘤和实体瘤细胞的杀伤作用,WB检测STATs通路相关蛋白的表达及其磷酸化水平。结果:30 ng/ml的IL-27可以促进IL-15-NK92细胞IL-15的分泌(P<0.01)、明显增强其迁移能力(P<0.05),但明显抑制其增殖能力(P<0.05);并且显著促进IL-15-NK92细胞表面受体NKG2D、NKp30和NKp46的表达(均P<0.05)、明显促进穿孔素分泌(P<0.05)但不影响颗粒酶B的分泌(P>0.05)。30 ng/ml的IL-27可显著促进IL-15-NK92细胞对多种血液肿瘤和实体瘤细胞的杀伤能力(P<0.05或P<0.01),并且上调STAT1、STAT3、及STAT5蛋白的磷酸化水平(均P<0.01)。结论:IL-27可增强IL-15-NK92细胞对实体肿瘤细胞和血液肿瘤细胞的杀伤作用,该作用与IL-27上调IL-15-NK92细胞中JAK-STAT通路相关蛋白STAT1、STAT3、STAT5磷酸化水平和促进该细胞中多种活化性受体相关。

关键词： IL-27 IL-15 NK92细胞抗肿瘤 JAK-STAT通路

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