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第九届全国免疫学学术大会

作者：杨沙文李艳朱平陈礼杰刘艳君富宁南方医科大学基础医学院免疫学教研室

研究背景:非B细胞来源Ig(non-Ig)不仅在多种肿瘤细胞中存在,在肿瘤恶化、迁移和增殖中也具有重要作用。2008年,Lee发现肿瘤细胞来源的IgG重链成份(CA215)和正常人IgG高度同源,单抗RP215可特异性识别肿瘤Ig重链可变区特殊的糖基表位(CA21... 详细信息

研究背景:非B细胞来源Ig(non-Ig)不仅在多种肿瘤细胞中存在,在肿瘤恶化、迁移和增殖中也具有重要作用。2008年,Lee发现肿瘤细胞来源的IgG重链成份(CA215)和正常人IgG高度同源,单抗RP215可特异性识别肿瘤Ig重链可变区特殊的糖基表位(CA215C),但不识别正常人Ig。在卵巢癌、宫颈癌、结肠癌等多种肿瘤组织和患者血清中,CA215检测呈阳性;RP215单抗不仅能在体外实验中抑制肿瘤细胞的增殖和诱导其凋亡,还可有效抑制裸鼠体内的肿瘤增长。因此,作为一种泛肿瘤标志,CA215可作为肿瘤诊断和治疗的新靶点。由于CA215是糖基表位,属于TI抗原,限制了其直接成为疫苗候选靶点的可能性。本研究以单抗RP215为靶分子,利用噬菌体展示肽库技术可将其转化为肽表位。目的:筛选肿瘤细胞来源的IgG重链可变区糖基表位的模拟肽,探索用于治疗性肿瘤疫苗的新候选表位。方法:用特异性识别肿瘤来源Ig重链可变区特殊糖基表位CA215的单克隆抗体RP215作为钓饵分子,筛选噬菌体12肽库,双夹心ELISA鉴定噬菌体克隆,根据阳性克隆的DNA序列,合成线性肽并鉴定其与RP215的结合。以BSA为载体交联线性肽免疫小鼠,并对其免疫血清进行鉴定。结果:以RP215为钓饵蛋白对噬菌体12肽库进行3轮筛选后,得到22个可与RP215结合的噬菌体克隆,经DNA序列分析显示,其中17个克隆的氨基酸序列中包含5组保守序列,其余5个克隆的序列均不相同。经对比后选择3个序列进行肽合成,经ELISA检测表明其中两个序列R-2和R-42合成肽可特异地与单抗RP215结合。以BSA为载体的合成肽交联物免疫的小鼠抗血清可与CA215特异性结合,并能有效竞争抑制RP215和CA215的结合。结论:筛选得到的噬菌体克隆及合成线性肽R-2/R-42可与RP215特异性结合,合成线性肽和BSA交联后免疫小鼠得到的抗血清具有和RP215相似的特性,提示该合成肽可能为肿瘤细胞来源IgG重链可变区特殊糖基结构CA215的表位模拟短肽。

关键词：非B细胞来源IgG 糖基表位噬菌体肽库

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桦褐孔菌多糖对小鼠巨噬细胞的影响

桦褐孔菌多糖对小鼠巨噬细胞的影响

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：作姜雨薇孟繁平崔逢德李红花金松竹金丹延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室

研究背景:药用真菌桦褐孔菌(Inonotus obliquus或Fuscop oria obliqua),属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、锈革孔菌科、褐卧孔菌属.寄生于白桦等树干上,广泛分布于欧洲、亚洲和北美洲等地区.在我国,桦褐孔菌主要分布于吉林省长... 详细信息

研究背景:药用真菌桦褐孔菌(Inonotus obliquus或Fuscop oria obliqua),属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、锈革孔菌科、褐卧孔菌属.寄生于白桦等树干上,广泛分布于欧洲、亚洲和北美洲等地区.在我国,桦褐孔菌主要分布于吉林省长白山地区和黑龙江省.该菌的多糖提取物具有抗肿瘤、抗氧化和抗炎等活性,这些研究报道提示桦褐孔菌多糖具有免疫调节作用.但关于桦褐孔菌多糖确切的免疫调节作用的研究报道较少.目的:观察桦褐孔菌多糖对小鼠巨噬细胞株ARW264.7细胞与小鼠腹腔巨噬细胞的影响,为阐明桦褐孔菌多糖的免疫调节作用及其机制的研究提供实验依据.

关键词：桦褐孔菌多糖巨噬细胞细胞因子

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细粒棘球蚴感染小鼠早期阶段Tim-3表达的初步分析

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中国免疫学杂志 2014年第12期30卷 1616-1621,1626页

作者：徐芳洁印双红侯隽方海瑞蒋红群吴向未陈雪玲石河子大学医学院免疫学教研室石河子832002 铜仁学院材料与化学工程学院铜仁554300 石河子大学第一附属医院肝胆外科石河子832002

目的:了解Tim-3作为一个新型促炎因子,在细粒棘球蚴感染小鼠的早期阶段的表达水平。方法:原头蚴感染BALB/c小鼠后1、5、9、13天,取其腹腔巨噬细胞和脾细胞。采用流式细胞术(FCM)检测各时间点腹腔巨噬细胞、脾巨噬细胞、脾CD3+细胞Tim-3... 详细信息

目的:了解Tim-3作为一个新型促炎因子,在细粒棘球蚴感染小鼠的早期阶段的表达水平。方法:原头蚴感染BALB/c小鼠后1、5、9、13天,取其腹腔巨噬细胞和脾细胞。采用流式细胞术(FCM)检测各时间点腹腔巨噬细胞、脾巨噬细胞、脾CD3+细胞Tim-3的表达水平。采用qRT-PCR法检测各时间点TLR4的mRNA水平。结果:细粒棘球蚴组与对照组小鼠CD3+脾细胞Tim-3表达无明显差别;小鼠脾脏巨噬细胞(9、13天)、腹腔巨噬细胞(5、9、13天)表面Tim-3表达水平较对照组有升高,与对照组有显著差异(P<0.05)。巨噬细胞数量无明显变化。小鼠感染细粒棘球蚴第1天时TLR4 mRNA的表达水平升高,并与对照组有显著差异(P<0.05)。结论:小鼠感染细粒棘球蚴早期,巨噬细胞Tim-3的表达升高,并可能通过下调TLR4的表达,抑制了巨噬细胞功能,从而抑制宿主的免疫杀伤,产生了免疫逃避作用。

关键词：细粒棘球蚴 Tim-3 TLR4 巨噬细胞

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NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：胡为民郭亚平朱红付茂勇王朝莉李倩倩川北医学院微生物学与免疫学教研室

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca109细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达.Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组中... 详细信息

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca109细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达.Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组中已发现包括Nek1～11共11个成员.其中,Nek2、Nek6、Nek7和Nek9与有丝分裂有关,Nek1和Nek8与纤毛形成有关,Nek1、Nek2和Nek11参与DNA损伤反应.越来越多的研究表明,Nek家族部分成员的表达或功能异常与肿瘤的发生发展高度相关,其中以Nek2、Nek6研究最多.目前关于Nek8的研究较少,多集中在与囊性肾病的关系,本研究初步探索了Nek8与食管鳞癌的关系.

关键词： Nek8 食管鳞癌免疫组织化学药物靶标

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82例成人斯蒂尔病临床特点和疗效分析

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皖南医学院学报 2014年第5期33卷 396-399页

作者：毛桐俊许国飞李志陆进明皖南医学院附属弋矶山医院风湿免疫科安徽芜湖241001 皖南医学院微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002

目的:探讨成人斯蒂尔病(AOSD)的临床特点、实验室检查结果、疗效及转归。方法:回顾性分析82例AOSD患者的临床资料,总结临床特征、药物治疗方法、疗效并进行随访。结果:临床表现为高热98.78%,皮疹95.12%,关节痛和(或)关节炎82.93%,咽痛78... 详细信息

目的:探讨成人斯蒂尔病(AOSD)的临床特点、实验室检查结果、疗效及转归。方法:回顾性分析82例AOSD患者的临床资料,总结临床特征、药物治疗方法、疗效并进行随访。结果:临床表现为高热98.78%,皮疹95.12%,关节痛和(或)关节炎82.93%,咽痛78.05%,淋巴结肿大41.06%,脾脏肿大36.59%;实验室检查中白细胞增多78.05%,C反应蛋白升高98.78%,红细胞沉降率增快97.56%,血清铁蛋白升高97.56%,乳酸脱氢酶升高86.21%,纤维蛋白原升高76.79%,D-二聚体升高80.36%,肝功能异常40.24%。98.78%应用糖皮质激素,89.02%患者联合应用了免疫抑制剂;血清铁蛋白≥2 000 ng/ml组复发率高达71.43%。结论:AOSD表现为高热、皮疹、关节痛、血白细胞和炎症指标升高,排除感染和肿瘤后应考虑AOSD,激素联合免疫抑制剂治疗有效;大多数患者能在4周内达到病情缓解,但维持阶段病情易复发。

关键词：成人斯蒂尔病临床特点治疗转归

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桦褐孔菌多糖对小鼠巨噬细胞的影响

桦褐孔菌多糖对小鼠巨噬细胞的影响

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第九届全国免疫学学术大会

作者：姜雨薇孟繁平崔逢德李红花金松竹金丹延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室

研究背景:药用真菌桦褐孔菌(Inonotus obliquus或Fuscop oria obliqua),属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、锈革孔菌科、褐卧孔菌属。寄生于白桦等树干上,广泛分布于欧洲、亚洲和北美洲等地区。在我国,桦褐孔菌主要分布于吉林省... 详细信息

研究背景:药用真菌桦褐孔菌(Inonotus obliquus或Fuscop oria obliqua),属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、锈革孔菌科、褐卧孔菌属。寄生于白桦等树干上,广泛分布于欧洲、亚洲和北美洲等地区。在我国,桦褐孔菌主要分布于吉林省长白山地区和黑龙江省。该菌的多糖提取物具有抗肿瘤、抗氧化和抗炎等活性,这些研究报道提示桦褐孔菌多糖具有免疫调节作用。但关于桦褐孔菌多糖确切的免疫调节作用的研究报道较少。目的:观察桦褐孔菌多糖对小鼠巨噬细胞株ARW264.7细胞与小鼠腹腔巨噬细胞的影响,为阐明桦褐孔菌多糖的免疫调节作用及其机制的研究提供实验依据。方法:利用桦褐孔菌多糖(40μg/mL)处理被LPS(100 ng/mL)刺激的Raw 264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞,用半定量RT-PCR方法测定促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA表达;用ELISA法测定TNF-α和IL-1β的浓度,并用SPSS19软件进行统计学分析。结果:用桦褐孔菌多糖和LPS同时刺激的Raw 264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞,其促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA表达均较用LPS刺激的细胞明显减少(P<0.05)。桦褐孔菌多糖刺激Raw 264.7细胞株48 h后,被LPS和桦褐孔菌多糖同时处理的细胞所分泌的促炎细胞因子TNF-α(0.27±0.04 ng/mL)和IL-1β(0.03±0.25ng/mL)的分泌均较单用LPS刺激的细胞所分泌的TNF-α(0.44±0.08 ng/mL)和IL-1β(0.42±0.21ng/mL)明显下降(P<0.05)。结论:桦褐孔菌多糖对LPS刺激后的Raw 264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA表达均有明显的抑制作用;对LPS刺激后的Raw 264.7细胞株促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的分泌均有明显的抑制作用。

关键词：桦褐孔菌多糖巨噬细胞细胞因子

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IL-24及IL-12基因联合治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

IL-24及IL-12基因联合治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：许灵会牟斌崔逢德延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室

目的:研究重组质粒pEGFP-N1-IL-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及作用机制.方法:构建小鼠黑色素瘤B16细胞荷瘤模型,将荷瘤小鼠随机分成5组,每组8只,分别向瘤体内注射脂质体包裹的基因重组质粒... 详细信息

目的:研究重组质粒pEGFP-N1-IL-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及作用机制.方法:构建小鼠黑色素瘤B16细胞荷瘤模型,将荷瘤小鼠随机分成5组,每组8只,分别向瘤体内注射脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(IL-24组),pEGFP-N1-IL-24与pGEG-IL-12(IL-24+IL-12组),pGEG-IL-12(IL-12组),pEGFP-N1(空质粒组)和PBS缓冲液(PBS组).每次在注射药物之前,测量小鼠背部肿瘤的长径和短径,并绘制肿瘤的生长曲线.采用HE染色观察各组肿瘤组织形态,RT-PCR法检测移植瘤组织中IL-24,IL-12,Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3和caspase-12mRNA的表达,Western Blot法检测移植瘤组织中的Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3和caspase-12蛋白的表达.

关键词：白细胞介素-24 白细胞介素-12 黑色素瘤联合基因治疗

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NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

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第九届全国免疫学学术大会

作者：胡为民郭亚平朱红付茂勇王朝莉李倩倩川北医学院微生物学与免疫学教研室

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca1 09细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达。Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组... 详细信息

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca1 09细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达。Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组中已发现包括Nek1～11共11个成员。其中,Nek2、Nek6、Nek7和Nek9与有丝分裂有关,Nek1和Nek8与纤毛形成有关,Nek1、Nek2和Nek11参与DNA损伤反应。越来越多的研究表明,Nek家族部分成员的表达或功能异常与肿瘤的发生发展高度相关,其中以Nek2、Nek6研究最多。目前关于Nek8的研究较少,多集中在与囊性肾病的关系,本研究初步探索了Nek8与食管鳞癌的关系。目的:探讨食管鳞癌组织和细胞系中Nek8的表达及其与食管鳞癌临床病理特征和术后生存的关系,寻找新的抗肿瘤治疗的靶标。方法:采用RT-PCR的方法,检测食管鳞癌细胞系Eca109细胞、两例配对的食管鳞癌组织和癌旁粘膜上皮中Nek8 mRNA表达情况;应用免疫组织化学方法检测Nek8蛋白在食管鳞癌组织芯片中的表达情况,并结合临床病理资料和生存率进行统计学分析。结果:Nek8 mRNA在Eca109细胞、两食管鳞癌病人的癌组织均有表达,而癌旁食管粘膜上皮中均未见明显的表达。组织芯片结果示Nek8蛋白主要表达于胞浆,在78例配对的标本中,Nek8在食管鳞癌组织中的表达显著高于其在癌旁粘膜组织的表达(P=2.16E-13)。其表达与肿瘤大小有关(P=0.008),而与性别、年龄、分化程度、浸润深度、淋巴结转移无关(P>0.05)。生存分析显示高表达和低表达Nek8的患者生存率无显著差异(P>0.05)。结论:Nek8在食管鳞癌组织和细胞中表达上调,可能参与了食管鳞癌的发生发展,可作为诊断的标志物和治疗的靶标。

关键词： Nek8 食管鳞癌免疫组织化学药物靶标

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IL-24及IL-12基因联合治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

IL-24及IL-12基因联合治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

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第九届全国免疫学学术大会

作者：许灵会牟斌崔逢德延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室

目的:研究重组质粒pEGFP-N1-IL-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及作用机制。方法:构建小鼠黑色素瘤B16细胞荷瘤模型,将荷瘤小鼠随机分成5组,每组8只,分别向瘤体内注射脂质体包裹的基因重组质... 详细信息

目的:研究重组质粒pEGFP-N1-IL-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及作用机制。方法:构建小鼠黑色素瘤B16细胞荷瘤模型,将荷瘤小鼠随机分成5组,每组8只,分别向瘤体内注射脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(IL-24组),pEGFP-N1-IL-24与pGEG-IL-12(IL-24+IL-12组),pGEG-IL-12(IL-12组),pEGFP-N1(空质粒组)和PBS缓冲液(PBS组)。每次在注射药物之前,测量小鼠背部肿瘤的长径和短径,并绘制肿瘤的生长曲线。采用HE染色观察各组肿瘤组织形态,RT-PCR法检测移植瘤组织中IL-24,IL-12,Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3和caspase-12 mRNA的表达,Western Blot法检测移植瘤组织中的Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3和caspase-12蛋白的表达。结果:肿瘤的生长曲线表明,IL-24组、IL-12组的瘤体积都明显小于空质粒组、PBS组(P<0.05),联合应用组的瘤体积最小(P<0.05)。HE染色结果显示重组质粒组多数细胞生长差,形态不规则,细胞皱缩,结构稀疏,细胞核溶解,变形,细胞成片坏死。RT-PCR法检测结果表明IL-24组和IL-12组分别有IL-24,IL-12基因的mRNA表达,联合应用组同时有两者的表达,而空质粒组和PBS组均无;并且IL-24组、IL-12组Bax基因的mRNA表达水平高于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组Bax基因的mRNA表达水平最高,相比之下,Bcl-2和VEGF基因的mRNA表达水平则相反(P<0.05)。Western Blot法检测结果显示IL-24组和IL-12组中Bax,caspase-3,caspase-12蛋白的表达明显高于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组中Bax,caspase-3,caspase-12蛋白的表达量最高,而Bcl-2和VEGF蛋白的表达量则相反(P<0.05)。结论:IL-24和IL-12对荷瘤小鼠有一定的治疗作用,二者联合应用作用效果更强。

关键词：白细胞介素-24 白细胞介素-12 黑色素瘤联合基因治疗

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下调GPC-3基因转录对肝癌细胞侵袭及血管新生的抑制作用

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世界华人消化杂志 2014年第16期22卷 2221-2228页

作者：邰伯军姚敏王理钱琦时杨蔚丹丹陆少林姚登福南通大学附属医院感染性疾病科江苏省南通市226001 南通大学医学院免疫学教研室江苏省南通市226001 南通大学医学院医学信息学教研室江苏省南通市226001 南通大学附属医院肿瘤科江苏省南通市226001 南通大学附属医院临床医学研究中心江苏省南通市226001

目的:观察以短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC-3)基因转录,对抑制肝癌MHCC-97H细胞侵袭和血管新生的作用与机制.方法:将对GPC-3特异性shRNA转染肝癌MHCC-97H细胞,以荧光定量PCR和Western blot分析GPC-3 mRNA及蛋白表达;以5-ethynyl-2'-deoxyuridine(EdU)和Transwell法等评估细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果:shRNA1转染MHCC-97H细胞,GPC-3在mRNA水平下降75.6%(t=15.473,P<0.001),蛋白表达同步下调;干预GPC-3基因转录,可抑制肝癌细胞增殖,细胞迁移与侵袭能力减低,与抗癌药物具协同作用;Wnt/β-catenin中β-catenin表达下调67.7%;Hedgehogs通路中脑胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene 1,Gli1)表达上调53.3%;shRNA1转染72 h细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达下调54.2%(t=46.746,P<0.001).结论:shRNA下调GPC-3转录,经Wnt/β-catenin和Hh信号通路抑制癌细胞迁移、侵袭和血管新生,为肝癌基因治疗潜在的分子靶目标.

关键词：肝细胞性癌磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 shRNA 血管新生

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