检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2005年第1期25卷 15-20页

作者：陈勇李柏青蚌埠医学院免疫学教研室 233003

目的　探讨γδT细胞对结核杆菌抗原 (Mtb Ag)识别的分子机制。方法　采集人外周血 (PB) ,分别经抗TCRγδ PE和FITC标记的Mtb Ag及其纯化的不同组分 ,结核杆菌高分子量蛋白组分 (Mtb HW Ag)、低分子量多肽组分 (Mtb LW Ag)或Mtb Ag峰 ... 详细信息

目的　探讨γδT细胞对结核杆菌抗原 (Mtb Ag)识别的分子机制。方法　采集人外周血 (PB) ,分别经抗TCRγδ PE和FITC标记的Mtb Ag及其纯化的不同组分 ,结核杆菌高分子量蛋白组分 (Mtb HW Ag)、低分子量多肽组分 (Mtb LW Ag)或Mtb Ag峰 3单一主肽抗原 (Mtb Ag Pk3)进行双标记染色 ,或使用过量Mtb Ag先与细胞预处理 ,然后再做上述染色 ,用流式细胞仪检测γδT细胞上结合的抗TCRγδ PE荧光强度变化。将人外周血PBMC经Mtb Ag刺激 2 4h后 ,使用抗TCRγδ PE和Mtb Ag FITC染色 ,用激光共聚焦显微镜观察γδT细胞表面TCRγδ分子的聚集。结果　经流式细胞仪分析 ,Mtb Ag及其纯化的Mtb LW Ag、Mtb Ag Pk3均可与γδT细胞发生特异性直接结合 ,而且Mtb Ag可有效阻断抗TCRγδ单抗与γδT细胞的结合。而Mtb HW Ag与γδT细胞并无特异性结合效应。经激光共聚焦显微镜观察 ,Mtb Ag可显著激活γδT细胞而诱导TCRγδ分子发生功能性聚集化。结论　γδT细胞通过其表面的TCRγδ分子可直接结合Mtb Ag ,而Mtb Ag Pk3多肽可能是Mtb Ag发挥其结合效应的有效成分。Mtb Ag可激活γδT细胞并诱导TCRγδ分子聚集 ,而可能参与功能性脂筏 (raft)的形成。

关键词： γδT细胞 TCR 结核杆菌多肽抗原人外周血 FITC 激光共聚焦显微镜特异性结合脂筏分子

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德国洋甘菊精油对咪喹莫特诱导的BALB/c小鼠皮肤银屑病样损害的作用研究

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临床皮肤科杂志 2025年第5期 269-275页

作者：吕曹华廖国艳葛维维吕荫宜吴双杜云婷陈光台州市第二人民医院皮肤科台州学院医学院病原生物与免疫学教研室辽宁省肿瘤医院检验科

目的：研究德国洋甘菊精油（MCEO）预处理对咪喹莫特（imiquimod,IMQ）诱导的BALB/c小鼠银屑病样皮肤炎症的保护作用。方法：取28只6～8周体重约为20 g的雌性BALB/c小鼠，随机分为3组：正常对照组（n=8）、IMQ模型组（n=12）和MCEO预处... 详细信息

目的：研究德国洋甘菊精油（MCEO）预处理对咪喹莫特（imiquimod,IMQ）诱导的BALB/c小鼠银屑病样皮肤炎症的保护作用。方法：取28只6～8周体重约为20 g的雌性BALB/c小鼠，随机分为3组：正常对照组（n=8）、IMQ模型组（n=12）和MCEO预处理+IMQ组（n=8）。正常对照组小鼠予橄榄油外涂背部皮肤，每日2次，连续7日；IMQ模型组小鼠予IMQ外涂背部皮肤，每日1次，连续7日；MCEO预处理+IMQ组小鼠予MCEO外涂背部皮肤预处理，每日2次，连续7日，随后予IMQ（每日1次）+MCEO（每日2次）连续外涂背部7日。每日观察小鼠皮损情况，根据银屑病皮损面积及严重程度指数（psoriasis area and severity index,PASI）进行评分，HE染色观察皮肤损伤情况。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（quantitative realtime reverse transcriptase polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测小鼠皮肤组织中炎性细胞因子白细胞介素（IL）-6和IL-1βm RNA的表达水平，采用液相芯片技术（Luminex）检测小鼠外周血中炎性细胞因子IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ、IL-10和IL-17A的水平。Western blotting法观察小鼠皮肤组织中丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路蛋白的表达水平。结果：与正常对照组相比，IMQ模型组小鼠背部出现明显的红斑、鳞屑和银屑病样皮损，表皮角化过度伴角化不全，炎性细胞浸润。与IMQ模型组相比，MCEO预处理+IMQ组中MCEO预处理明显改善了小鼠皮损情况，角化过度和角化不全明显减轻，仅见少量炎性细胞浸润；小鼠皮肤组织中IL-6和IL-1β mRNA以及外周血中IL-1β、TNF-α和IFN-γ的表达水平均显著降低（P均<0.05）；小鼠皮肤组织中p-PI3K/PI3K、pm TOR/mTOR和p-p38/p38 MAPK蛋白的表达水平均显著降低（P均<0.05）。结论：MCEO预处理可明显改善IMQ诱导的小鼠皮肤银屑病样损害及皮肤炎性细胞浸润，其保护性作用机制与MCEO预处理抑制PI3K/mTOR和p38 MAPK信号通路活性、下调皮肤组织和外周血中IL-6、IL-1β、TNF-α和IFN-γ等炎性细胞因子的表达水平密切相关。

关键词：德国洋甘菊精油预处理银屑病咪喹莫特 BALB/c小鼠炎症

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氦氖激光照射胸腺区促进荷瘤小鼠T细胞的CD59表达与活化信号转导

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中国激光 2009年第10期36卷 2603-2608页

作者：徐鹤高美华青岛大学医学院免疫学教研室山东青岛266071

探讨低功率氦氖激光照射对荷瘤小鼠T细胞CD59表达及其功能的影响。将(BALB/C)小鼠分为4组:Ⅰ组不做处理;Ⅱ组仅致瘤;Ⅲ组致瘤后每日照射胸腺区;Ⅳ组致瘤后隔日照射胸腺区。致瘤后第20天处死小鼠,分离培养胸腺T细胞。采用噻唑蓝(MTT)比... 详细信息

探讨低功率氦氖激光照射对荷瘤小鼠T细胞CD59表达及其功能的影响。将(BALB/C)小鼠分为4组:Ⅰ组不做处理;Ⅱ组仅致瘤;Ⅲ组致瘤后每日照射胸腺区;Ⅳ组致瘤后隔日照射胸腺区。致瘤后第20天处死小鼠,分离培养胸腺T细胞。采用噻唑蓝(MTT)比色法测T细胞增殖,用免疫组化和免疫荧光测T细胞CD59表达量,然后用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测T细胞活化后白介素2(IL-2)水平,用激光共聚焦测T细胞胞浆内钙离子变化,以及用流式细胞术测T细胞活化为CD2+5T细胞的能力。结果表明,照射组肿瘤生长受抑;荷瘤组T细胞的CD59表达量、白介素2水平、增殖能力、钙离子浓度及活化的CD2+5T细胞水平均低于正常组,但照射组明显高于非照射组。由此可见,激光照射促进了荷瘤小鼠T细胞CD59的表达,增强了其活化信号的转导。

关键词：医用光学免疫病理学氦氖激光照射免疫调节 CD59 胸腺T细胞小鼠

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肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3和炎症因子IL-17、IL-8相关性及临床诊断研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第3期36卷 213-218页

作者：李广云陈政华徐逢皇王雪丹王斐斐易君祝栾希英山东省千佛山医院济南250014 滨州医学院烟台附属医院烟台264100 滨州医学院免疫学教研室烟台264003

目的研究肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3与炎症因子IL-17、IL-8的相关性及其在肝癌临床诊断中的应用价值.方法收集原发性肝细胞癌患者的血清标本,以同期健康体检人员外周血标本作为正常对照.采用ELISA法检测肝癌组和正常对照组血清中... 详细信息

目的研究肝癌患者血清中共刺激分子sB7-H3与炎症因子IL-17、IL-8的相关性及其在肝癌临床诊断中的应用价值.方法收集原发性肝细胞癌患者的血清标本,以同期健康体检人员外周血标本作为正常对照.采用ELISA法检测肝癌组和正常对照组血清中sB7-H3、IL-8、IL-17的水平;运用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）统计学分析比较三者对肝癌的诊断效能,logistic回归获得sB7-H3、IL-8、IL-17三者联合诊断的模型预测肝癌.结果原发性肝癌患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8的含量均明显高于正常对照组.sB7-H3与IL-17呈正相关,但与IL-8不相关.IL-8与IL-17之间呈负相关.ROC分析sB7-H3、IL-17和IL-8预测肝癌的AUC值分别为0.832、0.657和0.953,对诊断肝癌三者差异均有统计学意义.通过Logistic逐步回归得出的回归模型预测肝癌的曲线下面积（area under the curve,AUC）值、敏感度、特异度分别为0.960、91.30%和94.29%均较单独诊断时高.结论原发性肝细胞癌患者外周血中sB7-H3与IL-17呈正相关,sB7-H3、IL-17和IL-8联合回归模型在肝癌的早期诊断中具有潜在的应用价值.

关键词： B7-H3 IL-17 IL-8 肝癌

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肿瘤患者外周血中抑制性受体LAIR-1表达升高

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第4期24卷 373-374,377页

作者：薛江楠王春艳张晓姝曹奇志宿振国滨州医学院免疫学教研室山东烟台264003 第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032 滨州医学院附属医院检验科山东烟台264003

目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的... 详细信息

目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的表达。结果:肿瘤患者血清sLAIR-1水平为(4.6±3.2)μg/L,明显高于正常人血清sLAIR-1水平(3.9±3.0)μg/L,P<0.05。NK细胞,CD4+T细胞及CD8+T细胞表达LAIR-1水平上调。肺癌患者CD4/CD8比值明显低于正常人,B细胞百分率明显高于正常人。NK细胞、CD4+T细胞CD8+T细胞中LAIR-1的表达阳性率高于对照组。结论:在肿瘤患者LAIR-1分子表达水平高于正常人。肿瘤患者抑制性受体LAIR-1表达水平的上调可能与肿瘤的免疫逃逸有关。

关键词： LAIR-1 CD305 抑制性受体肿瘤

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前纤维蛋白多克隆抗体对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第4期37卷 437-443页

作者：杨瑞熊乙丁郭珊珊廖业夏嫱郭锦锦杜联峰遵义医学院珠海校区免疫学教研室

目的制备抗刚地弓形虫前纤维蛋白(TgPRF)的多克隆抗体,初步研究其对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响。方法提取刚地弓形虫RH株RNA、扩增TgPRF基因,并构建pET-30a(+)-TgPRF重组质粒,将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞... 详细信息

目的制备抗刚地弓形虫前纤维蛋白(TgPRF)的多克隆抗体,初步研究其对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响。方法提取刚地弓形虫RH株RNA、扩增TgPRF基因,并构建pET-30a(+)-TgPRF重组质粒,将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖昔(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定蛋白表达情况。目的蛋白经AKTA系统进行亲和层析纯化和超滤浓缩后进行蛋白质印迹分析(Western blotting).将2mg纯化的重组蛋白TgPRF与等体积弗氏完全佐剂混合乳化后,背部皮下多点注射免疫新西兰兔2只,首次免疫后每隔2周,用1mg纯化的重组蛋白空PRF与等体积弗氏不完全佐剂加强免疫3次,末次免疫后10d心脏采血。免疫后血清进行Western blotting鉴定及ELISA抗体效价检测。将胚胎成纤维细胞接种于96孔板中(4×10^3,个细胞/孔),并加入10^4个刚地弓形虫速殖子(RH-GFP)。设空白对照组(A组),抗体干预组(Bl、B2和B3组),阴性血清组(C组)。B1、B2和B3组分别加入1:20、1:80、1:200稀释的抗TgPRF兔血清100μl;C组加入1:20稀释的免疫前兔血清100μl,每组均设3个复孔。培养72h后荧光显微镜观察,通过Imagepro6.0软件分析虫体增殖情况。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果PCR扩增TgPRF基因片段为510bp,pET-30a(+)-TgPRF经测序与目的序列完全一致。经IPTG诱导表达,TgPRF蛋白相对分子质量(M1)约为25000,且高表达条带主要存在于上清中。TgPRF蛋白经纯化浓缩后浓度为4mg/ml,Western blotting分析显示,在M1 25000处出现特异性条带。经细胞计数试剂盒(CCK-8法)检测,抗TgPRF血清对胚胎成纤维细胞未见毒性损伤。ELISA检测抗ZgPRF血清抗体效价>1:10^5;各实验组细胞于感染24h时,A组(0.62±0.23)及C组(0.74±0.25)相对虫体数量高于B1组(0.35±0.16)(P<0.05),但与B2和B3组间差异无统计学意义(P>0.05),B1-B3组虫体增殖抑制率分别为43.5%、11.4%、3.6%。感染48h时,A组(3.61±0.66)与C组(3.38±0.78)相对虫体数量明显高于B1-B3组(P<0.01),而B1组(1.09±0.58)与B2组(1.92±0.73)低于B3组(2.47±0.84)(P<0.05),B1-B3组虫体增殖抑制率分别增高至69.9%、46.9%、31.7%;感染72h时,A组(19.90±3.92)与C组(20.61±4.07)相对虫体数量高于B1组(5.58±2.43)与B2组(8.06±2.66)(P<0.01),B3组(16.02±6.46)明显升高。B1-B3组抑制率分别为72.0%、59.5%、19.5%。结论弓形虫TgPRF蛋白能有效刺激新西兰兔产生抗体,且TgPRF兔血清抗体在体外能有效抑制弓形虫速殖子在小鼠胚胎成纤维细胞中的增殖并呈现明显的量效关系,但并不能完全消除虫体。

关键词：刚地弓形虫前纤维蛋白多克隆抗体原核表达

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HLA-A＊3101、B＊4001、B＊5801、DRB1＊1602 等位基因与遵义地区汉族肾综合征出血热发病的相关性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第11期30卷 1004-1007页

作者：秦娜琳兰惠琴徐林汤贤英孙万邦姚新生罗军敏遵义医学院免疫学教研室 563003

目的探讨HLA-A＊31、B＊40、B＊58、DRB1＊16位点基因多态性与遵义地区汉族肾综合征出血热（HFRS）的关联性.方法采用群体研究方法,应用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）技术对100例HFRS患者（患者组）和100例健康对照者（健... 详细信息

目的探讨HLA-A＊31、B＊40、B＊58、DRB1＊16位点基因多态性与遵义地区汉族肾综合征出血热（HFRS）的关联性.方法采用群体研究方法,应用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）技术对100例HFRS患者（患者组）和100例健康对照者（健康对照组）进行HLA-A＊31、B＊40、B＊58、DRB1＊16基因亚型分型,比较基因频率（GF）,并计算其相对危险度（RR）.结果 HFRS患者组HLA-A＊3101、B＊5801、DRB1＊1602的基因频率均较对照组明显增高（RR=13.825,x2=4.296,P=0.038 RR=2.614,x2=6.133,P=0.013 RR=8.523,x2=8.865,P=0.003）,差异有统计学意义（P均＜0.05）患者组HLA-B＊4001的基因频率较对照组明显降低（RR=0.414,x2=6.640,P=0.010）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论遵义地区汉族人群中,HLA-A＊3101、B＊5801、DRB1＊1602等位基因与HFRS呈正相关,HLA-B＊4001等位基因与HFRS呈负相关.

关键词：人类白细胞抗原基因亚型肾综合征出血热相关性

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两株登革2型病毒E基因重组质粒免疫BALB／c小鼠产生特异性抗体水平的比较

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第3期29卷 229-233页

作者：王娇左丽王丛李学政贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的用含登革2型病毒（Dengue type2virus，DEN2）B株和NGC株E基因部分序列pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠，观察免疫小鼠体液免疫应答的差异。方法用两株含DEN2E基因部分序列（1～476bp）的pcDNA3．1重组质粒与含有佐剂... 详细信息

目的用含登革2型病毒（Dengue type2virus，DEN2）B株和NGC株E基因部分序列pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠，观察免疫小鼠体液免疫应答的差异。方法用两株含DEN2E基因部分序列（1～476bp）的pcDNA3．1重组质粒与含有佐剂的重组质粒共同免疫BALB／c小鼠，初次免疫后第14天、28天分别加强免疫1次，共免疫3次。收集初次免疫后第14、28、42、70和98天外周血标本，间接ELISA法测定小鼠血浆特异性IgM／IgG类抗体水平，细胞病变抑制法检测特异性抗体水平。结果不同DEN2毒株E基因部分序列的pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠诱导特异性IgM、IgG类抗体的产生存在差异，B株重组质粒加强免疫小鼠后特异性抗体效价水平较高并持续较长时间。结论DEN2两毒株E基因部分序列重组质粒免疫小鼠后诱生的特异性抗体类别、水平存在差异。

关键词：登革2型病毒 E基因重组质粒 BALB/c小鼠特异性抗体

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两株登革2型病毒E、NS1蛋白基因序列测定及其系统发生分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第4期24卷 287-291页

作者：郝牧左丽舒莉萍李永念贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的　对从登革出血热 (denguehemorrhagicfever,DHF)病人血清分离到的一株登革 2型病毒 (denguevirustype 2 ,DEN 2B株 )和DEN 2NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析 ,了解其变异及分子进化特征。方法　利用RT PCR... 详细信息

目的　对从登革出血热 (denguehemorrhagicfever,DHF)病人血清分离到的一株登革 2型病毒 (denguevirustype 2 ,DEN 2B株 )和DEN 2NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析 ,了解其变异及分子进化特征。方法　利用RT PCR法扩增B株和NGC株E、NS1部分基因片段 ,PCR产物直接测序 ;利用DNAssist软件预测其氨基酸序列 ,以及PHYLIP软件的CLUSTAL方法绘制系统发生树。结果　B株与NGC株E蛋白基因区第 1～ 4 76nt( 4 76bp)碱基序列存在 8个位点的差异 ;编码氨基酸存在 4个位置的不同 ;NS1基因区第 5 89～ 10 0 2nt( 4 13bp)碱基序列存在 7个位点的差异 ,编码氨基酸有 2个位置的改变 ;B株与NGC株和DEN 2 4 4株E区部分片段核苷酸同源性分别为99 .1%和 98.7% ;与NS1区部分片段核苷酸同源性分别为 98.3%和 98.1%。B株E基因、NS1基因序列已登录GenBank ,注册号分别为AY179733和AY2 384 71。结论　B株E、NS1基因序列和氨基酸序列与NGC株存在差异 ;B株与我国海南 1989年流行的DEN 2 4 4株和NGC株系统进化关系较近。

关键词：登革2型病毒 E基因 NS1基因系统发生树基因序列登革出血热

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登革病毒Ⅱ型对人脐静脉血管内皮细胞通透性的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第7期31卷 592-596页

作者：任玮左丽吕秉乐崔冬冰贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的研究登革病毒Ⅱ型（DENV-2）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）通透性的影响。方法DENV一2病毒滴定，DENV-2接种HUVEC单层细胞，用间接免疫荧光法动态观察DENV-2感染HUVEC的情况（30min，1、3、6、12、24、30、36、42、48、72b），... 详细信息

目的研究登革病毒Ⅱ型（DENV-2）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）通透性的影响。方法DENV一2病毒滴定，DENV-2接种HUVEC单层细胞，用间接免疫荧光法动态观察DENV-2感染HUVEC的情况（30min，1、3、6、12、24、30、36、42、48、72b），实时定量荧光PCR方法检测病毒载量，transwell法检测DENV-2对HUVEC通透性的影响，透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果DENV－2对HUVEC通透性的影响30min时作用最为明显，其次为42h时。且病毒载量与HUVEC通透性改变呈正相关。透射电镜结果显示有细胞微绒毛脱落，胞质溶解，部分核膜间隙增宽，甚至是细胞核中也存在裂隙，部分线粒体嵴消失甚至空化，线粒体髓样变，包膜不完整。结论DENV-2对HUVEC通透性有影响，为探究登革病毒的发病机制提供一定的理论依据。

关键词：登革病毒人脐静脉血管内皮细胞通透性

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