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右江民族医学院学报 2024年第1期46卷 65-71,84页

作者：孙悦王耀辉杨继文储博文王俊董博翰皖南医学院微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241000 皖南医学院弋矶山医院核医学科安徽芜湖241000 皖南医学院临床学院安徽芜湖241000

目的评估及比较改良后的结核分枝杆菌热休克蛋白65-肿瘤细胞裂解物(MHSP65-TCL)疫苗对不同类型三阴性乳腺癌的疗效和差异。方法首先,生物信息学分析不同病理类型三阴性乳腺癌肿瘤微环境中免疫细胞浸润活化情况;其次,分析三阴性乳腺癌细... 详细信息

目的评估及比较改良后的结核分枝杆菌热休克蛋白65-肿瘤细胞裂解物(MHSP65-TCL)疫苗对不同类型三阴性乳腺癌的疗效和差异。方法首先,生物信息学分析不同病理类型三阴性乳腺癌肿瘤微环境中免疫细胞浸润活化情况;其次,分析三阴性乳腺癌细胞中RACK1、Bcl-2、CTNNBL1等细胞活化因子,及细胞凋亡诱导因子PDL1、HMGB1、Fas-L在三阴性乳腺细胞中的丰度及其影响免疫细胞活化的信号通路。进而,在制备MHSP65-TCL去除TCL中的PDL1或增加TCL中Bcl-2,再通过体内外抗肿瘤实验,检测、比较两种方法治疗不同类型三阴性乳腺癌效果的差异。结果蛋白表达丰度的检测,MDA-MB-453细胞中HMGB1的表达量是最高的,但Bcl-2表达最低,结合各类型三阴性乳腺癌淋巴浸润,体外杀伤实验以及体内动物实验,3种不同类型的三阴性乳腺癌细胞尤其是LAR型细胞系MDA-MB-453,主要依赖HMGB1抑制免疫细胞。从TCL中去除HMGB1可以更为有效地提高MHSP65-TCL的抗肿瘤效果。结论阐明MHSP65-TCL疫苗对各类型三阴性乳腺癌疗效差异及机制,并建立起一种三阴性乳腺癌治疗的新方法。

关键词：三阴性乳腺癌生物信息学肿瘤细胞裂解物免疫细胞浸润抗肿瘤疫苗

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潜伏相关核抗原在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染过程中的作用

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安徽医科大学学报 2023年第12期58卷 2150-2154页

作者：路正东晏巍振(综述) 王林定周畅(审校) 安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验室合肥230032 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明... 详细信息

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明LANA蛋白在KS发病机制中的具体过程,为KS潜伏期治疗提供参考。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒潜伏相关核抗原发病机制信号通路裂解复制免疫逃逸

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基于HBc载体的SARS-CoV-2 S蛋白嵌合病毒样颗粒疫苗诱导的粘膜免疫反应评估

基于HBc载体的SARS-CoV-2 S蛋白嵌合病毒样颗粒疫苗诱导的粘膜免...

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浙江省免疫学会第十三次学术大会

作者：陈卓李青峰陈俊朱珊丽张丽芳温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

背景:SARS-CoV-2引起COVID-19大流行,威胁全球公共卫生安全。迄今为止,不同监管机构批准使用的COVID-19疫苗均是通过肌肉免疫接种,该免疫途径诱导粘膜免疫应答能力较弱,迫切需要应对COVID-19大流行的新型疫苗和免疫策略。SARS-CoV-2S蛋... 详细信息

背景:SARS-CoV-2引起COVID-19大流行,威胁全球公共卫生安全。迄今为止,不同监管机构批准使用的COVID-19疫苗均是通过肌肉免疫接种,该免疫途径诱导粘膜免疫应答能力较弱,迫切需要应对COVID-19大流行的新型疫苗和免疫策略。SARS-CoV-2S蛋白通过与宿主细胞ACE2受体结合进而入侵细胞,故S蛋白已成为疫苗研究的重要靶标。其中S蛋白中RBM、FP、HR1、HR2等四个结构域在病毒入侵宿主细胞过程中至关重要。乙肝病毒核心抗原(HBc)可自组装成病毒样颗粒(VLPs),作为载体携带异源蛋白质并能增强其免疫原性。研究目的:以HBc为载体携带新冠病毒S蛋白结构域,制备嵌合VLPs疫苗,并评估不同免疫途径刺激机体产生的免疫应答效应。材料和方法:本研究将新冠病毒S蛋白的四个主要结构域通过柔性肽连接,形成长度为230个氨基酸的多肽分子命名为S230,并以HBc为载体携带S230,构建HBc-S230 VLPs,分别通过肌肉注射、滴鼻免疫、肌肉联合滴鼻的方式免疫小鼠,检测血清抗体IgG、粘膜分泌物抗体sIgA及脾细胞IFN-γ、IL-4等细胞因子的产生情况,同时在细胞水平检测分析了免疫后小鼠血清抗体对野生型、Delta突变株和Omicron突变株新冠假病毒的中和活性,以评估嵌合VLPs疫苗的免疫效应、开发更有效的疫苗及免疫策略。结果:采用肌肉、鼻内及肌肉联合鼻内等三种方式免疫小鼠,通过ELISA检测血清中IgG抗体水平和粘膜分泌物中sIgA抗体水平,结果显示,血清中IgG抗体A450值分别为1.70±0.02、2.10±0.07、1.89±0.08;肺泡灌洗液中sIgA抗体A450值分别为0.81±0.03、1.05±0.05、1.63±0.09,鼻灌洗液中sIgA抗体A450值分别为0.57±0.03、1.21±0.02、2.15±0.04。说明三种途径免疫HBc-S230 VLPs均可刺激机体产生高水平的血清特异性抗体和粘膜分泌物sIgA,以肌肉联合鼻内免疫效果最佳。同时采用ELISA检测脾细胞分泌的细胞因子IFN-γ、IL-4的产生情况,结果显示,三种途径免疫小鼠均能刺激机体产生高水平的IFN-γ,且以肌肉联合鼻内免疫效果最佳。荧光素酶报告实验检测三种免疫途径血清中IgG对新冠假病毒的中和能力,结果显示,肌肉注射、肌肉联合鼻内免疫途径产生的血清IgG均能中和野生型、Delta突变株和Omicron突变株SARS-CoV-2假病毒,且以肌肉联合鼻内免疫组中和效果最佳(对野生型、Delta突变株、Omicron突变株病毒中和活性IC50肌肉注射组分别为1:257、1:26、1:76,肌肉联合鼻内组分别为1:811、1:161、1:3435),而鼻内免疫组无中和活性。结论:HBc-S230 VLPs通过肌肉注射、滴鼻免疫、肌肉联合滴鼻免疫均能刺激机体产生高水平的体液免疫(血清IgG抗体和粘膜分泌物sIgA抗体)和细胞免疫效应,血清IgG抗体均能中和野生型、Delta突变株和Omicron突变株SARS-CoV-2假病毒,且以肌肉联合滴鼻免疫效果最佳。

关键词： SARS-CoV-2 S蛋白粘膜免疫 HBcAg 中和作用

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大蒜素对白念珠菌形态转换的影响研究

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中国真菌学杂志 2021年第1期16卷 14-18页

作者：熊延靖厉荣玉吴艳红皖南医学院医学微生物学与医学免疫学教研室芜湖241002

目的探讨大蒜素对白念珠菌形态转换的影响及其作用机制。方法倒置显微镜观察白念珠菌菌丝形成的体外动力学过程;采用CLSI-M27-A3微量液基稀释法检测大蒜素对白念珠菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);倒置显微镜... 详细信息

目的探讨大蒜素对白念珠菌形态转换的影响及其作用机制。方法倒置显微镜观察白念珠菌菌丝形成的体外动力学过程;采用CLSI-M27-A3微量液基稀释法检测大蒜素对白念珠菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);倒置显微镜观察不同浓度大蒜素对白念珠菌在Spider液体培养基中菌丝形成的影响;qRT-PCR法检测在不同浓度大蒜素作用下白念珠菌菌丝相关基因HWP1、ALS1、EFG1、PDE2表达水平的变化。结果白念珠菌在Spider液体培养基中6 h时出现较长菌丝,24 h后镜下可见大量念珠菌菌丝包裹酵母细胞,紧密交错;大蒜素对白念珠菌的MIC值为25μg/mL;倒置显微镜观察(25~100)μg/mL浓度的大蒜素能明显抑制Spider液体培养基中白念珠菌菌丝的生长;qRT-PCR结果显示,在(25~100)μg/mL浓度的大蒜素作用下,白念珠菌菌丝相关基因表达下调。结论大蒜素能有效抑制白念珠菌的形态转换,其作用机制可能与调节菌丝形成相关基因的表达水平有关。

关键词：白念珠菌形态转换菌丝相大蒜素

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医学微生物学科研课题式实验体系的探索研究

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基础医学教育 2024年第1期26卷 25-29页

作者：王微微宋姗姗杨艾华王小敏遵义医科大学基础医学院医学微生物学与免疫学实验室遵义563000 遵义医科大学基础医学院微生物学教研室国家感染性疾病临床医学研究中心药效学评价平台

培养创新能力强的应用型护理人才是新医科背景下护理人才的培养目标。医学微生物实验是护理专业的基础课程,集应用性和实践性于一体,培养了学生的实践动手能力和解决问题的能力。为了更好地提升学生实践创新的能力,实现课程的人才培养... 详细信息

培养创新能力强的应用型护理人才是新医科背景下护理人才的培养目标。医学微生物实验是护理专业的基础课程,集应用性和实践性于一体,培养了学生的实践动手能力和解决问题的能力。为了更好地提升学生实践创新的能力,实现课程的人才培养目标和强化护理学生的岗位胜任力,课题组将医学微生物学科研课题式实验体系应用于护理学生的实验教学中,通过实验设计、实验操作、数据分析和论文撰写的课题研究过程,提升学生自主学习、积极思考和实践论证的能力,锻炼创新思维和科研实践能力,增强学生的综合素养的同时,课程教学质量也得以提高,教学改革成效初显。

关键词：医学微生物学实验教学教学改革科研素养创新意识

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贝莱斯芽孢杆菌Y6抗菌肽抑制白念珠菌活性的研究

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中国真菌学杂志 2022年第3期17卷 183-187,194页

作者：杨成乔云龙厉荣玉熊延靖汤兴丽皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002 活性生物大分子研究安徽省重点实验室(皖南医学院) 芜湖241002 皖南医学院药学院芜湖241002

目的对贝莱斯芽孢杆菌Y6代谢物抑制白念珠菌活性及其作用机理进行初步研究。方法采用平板结合牛津杯研究贝莱斯芽孢杆菌Y6发酵上清液对白念珠菌抑制活性,梯度稀释法测定了最小抑菌浓度(MIC),通过薄层色谱法对代谢物的活性成分进行筛检;... 详细信息

目的对贝莱斯芽孢杆菌Y6代谢物抑制白念珠菌活性及其作用机理进行初步研究。方法采用平板结合牛津杯研究贝莱斯芽孢杆菌Y6发酵上清液对白念珠菌抑制活性,梯度稀释法测定了最小抑菌浓度(MIC),通过薄层色谱法对代谢物的活性成分进行筛检;同时比较抗菌肽处理前和处理后菌体胞内大分子释放量及荧光染料PI的摄入量的变化,考察抗菌肽对胞膜通透性影响。结果贝莱斯芽孢杆菌Y6代谢物能有效抑制白念珠菌生长繁殖,测试浓度为10 mg·mL^(-1)时,抑菌圈直径达到(38.2±0.5)mm,其MIC浓度为0.625 mg·mL^(-1);通过薄层色谱结合茚三酮显色对活性组分筛检发现Y6代谢物中有2个抗菌组分,其中主要活性组分遇茚三酮显紫色,推测为肽类组分;经抗菌肽处理后的白念珠菌胞内大分子释放量及PI摄入量明显高于对照组,表明菌株Y6抗菌肽对白念珠菌胞膜完整性具有一定的损伤作用。结论贝莱斯芽孢杆菌Y6产肽类抗菌物质,且对白念珠菌细胞膜存在一定的损伤作用,从而产生明显的抗菌活性。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌白念珠菌抗菌肽抗菌活性

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病原感染与免疫教学AI视频动画的制作与思考

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基础医学教育 2024年第3期26卷 249-254页

作者：夏丹丹郭萍刘伯玉张俊玲张林杰王林定王明丽安徽医科大学临床医学院基础医学部病原生物学与免疫学教研室合肥230031 安徽医科大学临床医学院临床医学系安徽医科大学基础医学院微生物学教研室

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系... 详细信息

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系。实施方案根据病原感染与免疫三门临床医学生必修课程为主线梳理出40个重难点,制作出30个具有综合内容的教学脚本,依据脚本完成AI化视频动画的制作与表现。在安徽医科大学临床医学院小范围使用后盲评教学效果,99%的学生都认为该教学动画能够加深对相应知识点的理解和记忆。71.71%学生认为画面非常有趣。全体参加该教学动画制作的学生的专业技能与理论联系实际能力显著提升。教师在教学过程使用该视频动画可以提高教学效率。

关键词：基础医学病原感染与免疫教学AI视频动画线上教育教学方法

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乳双歧杆菌诱导旋毛虫感染小鼠Th2型免疫应答的研究

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贵州医科大学学报 2024年第11期49卷 1631-1638页

作者：迟茜文姚梦玮解文利马翔宇魏洪贵州医科大学基础医学院感染与免疫学实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025

目的探究不同剂量乳双歧杆菌干预对旋毛虫感染小鼠的淋巴细胞增殖、辅助型T细胞2(Th2)型免疫和肠道损伤的影响。方法用活力良好的旋毛虫灌胃48只小鼠获得感染旋毛虫模型小鼠,随机分为感染组(0.02 mL/g PBS灌胃)、乳双歧杆菌(高、中、低... 详细信息

目的探究不同剂量乳双歧杆菌干预对旋毛虫感染小鼠的淋巴细胞增殖、辅助型T细胞2(Th2)型免疫和肠道损伤的影响。方法用活力良好的旋毛虫灌胃48只小鼠获得感染旋毛虫模型小鼠,随机分为感染组(0.02 mL/g PBS灌胃)、乳双歧杆菌(高、中、低)剂量组(乳双歧杆菌浓度分别为1×10^(6)、1×10^(5)、1×10^(4) CFU/L,0.02 mL/g灌胃)连续灌胃30 d;采用噻唑蓝(MTT)法检测第7、14、21、28天各组模型小鼠脾细胞中T淋巴细胞增殖水平,流式细胞术检测小鼠脾脏及肠系膜淋巴结中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞表达水平,苏木精-伊红(HE)染色法对十二指肠组织病理学进行观察。结果与感染组比较,高剂量组、中剂量组脾脏T淋巴细胞的刺激指数(SI)升高(P<0.05);与感染组相比,小鼠脾脏中乳双歧杆菌高剂量组第14、21天脾脏中CD4^(+)T细胞表达升高,第21天乳双歧杆菌高剂量组表达CD8^(+)T细胞降低,小鼠肠系膜淋巴结中乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组CD4^(+)T细胞表达增加(P<0.05);HE结果显示;与感染组比较,乳双歧杆菌高剂量乳双歧杆菌灌胃后第7天和14天炎性细胞浸润减轻,肠绒毛脱落减少。结论一定浓度的乳双歧杆菌能够提高小鼠抗旋毛虫感染的免疫效应,其机制可能与通过诱导小鼠趋向Th2型免疫极化、修复肠道病理损伤有关。

关键词：乳双歧杆菌旋毛虫 T淋巴细胞淋巴细胞增殖 Th2型免疫免疫保护

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抗人B7-H4嵌合抗体的制备及鉴定

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中国免疫学杂志 2022年第22期38卷 2763-2769页

作者：范振军张文婷张丽张俊爱赵祖国徐军发(指导) 广东医科大学医学技术学院检验医学研究所东莞523808 广东医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室东莞523808

目的:制备抗人B7-H4嵌合单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:从杂交瘤细胞株扩增抗人B7-H4可变区基因序列;构建表达人鼠嵌合抗体的表达载体,并转染CHO-K1细胞构建稳定表达抗B7-H4嵌合抗体的CHO-K1细胞株;SDS-PAGE检测... 详细信息

目的:制备抗人B7-H4嵌合单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:从杂交瘤细胞株扩增抗人B7-H4可变区基因序列;构建表达人鼠嵌合抗体的表达载体,并转染CHO-K1细胞构建稳定表达抗B7-H4嵌合抗体的CHO-K1细胞株;SDS-PAGE检测mAb纯度;ELISA测定mAb效价;SPR测定mAb的亲和力;BCA法检测mAb浓度;CCK-8法检测T细胞增殖情况;ELISA和Western blot确定mAb结合表位范围;使用Discovery Studio软件对单抗表位进行分析。结果:从杂交瘤细胞成功扩增出抗体可变区基因,筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO-K1细胞株;细胞培养上清中mAB浓度为1.82 mg/ml,ELISA有效效价为1.97×10^(5)左右,亲和力为3.72×10^(-9)kD;CCK-8结果表明嵌合单抗可以阻断B7-H4-Fc分子对T细胞增殖的抑制作用;表位分析结果表明嵌合mAb主要以氢键和疏水作用与B7-H4 IgC域结合。结论:本研究成功制备了抗B7-H4的人鼠嵌合单抗,可在体外有效地阻断B7-H4-Fc对T细胞增殖抑制作用并为B7-H4抗体药物研发提供了前期基础。

关键词： B7-H4 嵌合抗体抗体表位 T细胞增殖

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基于“五步一环模式”的医学免疫学教学实践与探索

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基础医学教育 2024年第10期26卷 829-832页

作者：张帆王艳红刘继斌姚红蔡红艳樊卫平山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室太原030001 山西医科大学基础医学院院办

医学免疫学是医学院校本科生一门重要主干和桥梁课程,但基础免疫学内容抽象复杂,理论较为深奥,且知识更新进展迅速,是医学生所学课程中最难理解和学习的课程之一。文章采用“五步一环”教学模式,通过案例-问题-原因-成果-思政五个步骤... 详细信息

医学免疫学是医学院校本科生一门重要主干和桥梁课程,但基础免疫学内容抽象复杂,理论较为深奥,且知识更新进展迅速,是医学生所学课程中最难理解和学习的课程之一。文章采用“五步一环”教学模式,通过案例-问题-原因-成果-思政五个步骤形成的闭环来讲解基础免疫学主要知识点。同时在采用“五步一环模式”的教学中借助故事教学法、案例教学法及文献阅读法等多种教学手段,一方面使抽象的免疫学知识点易于理解,激发学生科研热情,培养学生高阶思维能力;另一方面,可将思政元素巧妙融入,实现专业教学与思政教育互相交融,使学生的学业水平、专业素养和创新能力得到明显提升。

关键词：医学免疫学教学改革 “五步一环”教学模式案例教学法课程思政

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