检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：富景奇崔琪李璐王惠惠赵锐杨蓓董坚侯永永徐苑苑皮静波中国医科大学公共卫生学院环境毒理学研究室中国医科大学法医学院法医病理学教研室中国医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室武汉科技大学生物医学研究院

【目的】转录因子Nrf2(Nuclear factor E2-relatedfactor2)是调控适应性抗氧化反应的核心调控因子,在对抗氧化损伤、解毒和维持细胞氧化-还原稳态中起关键作用。本研究组前期研究表明,Nrf2可保护胰岛β细胞免受急性氧化损伤。除氧化应激... 详细信息

【目的】转录因子Nrf2(Nuclear factor E2-relatedfactor2)是调控适应性抗氧化反应的核心调控因子,在对抗氧化损伤、解毒和维持细胞氧化-还原稳态中起关键作用。本研究组前期研究表明,Nrf2可保护胰岛β细胞免受急性氧化损伤。除氧化应激外,内质网应激也是1型和2型糖尿病中胰岛β细胞损伤和功能障碍的共同机制之一。在内质网应激条件下,胰岛β细胞内的未折叠蛋白反应(Unfolded Protein Response,UPR)被激活,起到保护细胞免受内质网应激损伤的作用。本研究采用稳定沉默Nrf2的胰岛β细胞系MIN6作为研究对象,研究Nrf2在急性内质网应激引起的胰岛β细胞损伤中的作用及其机制。【材料和方法】应用慢病毒负载shRNA稳定转染技术获得Nrf2稳定沉默(Nrf2-KD)和空白对照MIN6胰岛β细胞(Scr)。将Nrf2-KD和Scr细胞急性暴露于内质网应激刺激物毒胡萝卜素(Thapsigargin,TG)或衣霉素(Tunicamycin,TUN),继而检测细胞活力,细胞凋亡,ATP生成和内质网应激标志物及其未折叠蛋白反应等。【结果】通过对细胞活力,细胞凋亡和ATP生成的检测发现,Nrf2-KD MIN6细胞比Scr细胞对TG和TUN诱导的急性内质网应激导致的细胞损伤更敏感。检测内质网应激及其介导的UPR发现,Nrf2-KD细胞在内质网应激条件下BIP、CHOP蛋白表达水平明显低于Scr细胞,提示Nrf2-KD细胞中UPR的降低可能是Nrf2-KD细胞对急性内质网应激更敏感的原因。【结论】Nrf2调节的UPR在胰岛β细胞处于急性内质网应激条件下起到关键保护作用,这种保护作用是由Nrf2调控UPR关键蛋白BIP、CHOP实现的。结合前期研究结果,Nrf2调节的适应性反应,包括适应性抗氧化反应和未折叠蛋白反应,在胰岛β细胞防御急性氧化应激和急性内质网应激中起到重要保护作用。

关键词： Nrf2 胰岛β细胞内质网应激未折叠蛋白反应

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跨代染镉对子代大鼠大脑引起的脂质过氧化

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遵义医学院学报 2014年第6期37卷 609-611页

作者：张燕王克跃遵义医学院公共卫生学院毒理学教研室贵州遵义563099

目的探讨跨代低剂量镉暴露对子代大鼠引起的氧化损伤。方法将36只8周龄SD大鼠随机分为4组:饲料中不添加镉组(1组);饲料中按1mg/kg加入镉组(2组);饲料中按5mg/kg加入镉组(3组)、饲料中按25mg/kg加入镉组(4组)。雌雄分开饲养,1月后按照雌... 详细信息

目的探讨跨代低剂量镉暴露对子代大鼠引起的氧化损伤。方法将36只8周龄SD大鼠随机分为4组:饲料中不添加镉组(1组);饲料中按1mg/kg加入镉组(2组);饲料中按5mg/kg加入镉组(3组)、饲料中按25mg/kg加入镉组(4组)。雌雄分开饲养,1月后按照雌雄2∶1的比例合笼,产下的幼鼠同亲代同组大鼠镉暴露方式和剂量继续接触镉,待幼鼠成长至8周,测定子代大鼠脑组织中丙二醛(MDA)的含量,测定亲代和子代大鼠肝、肾、脑中镉含量。结果与1组相比,2、3、4组各组织中镉含量均增高,脑组织中MDA的含量升高,但脑中锌含量降低(P<0.01或P<0.05)。脑组织中MDA含量与脑中镉含量(r=0.69,P<0.05)、肝脏中镉含量(r=0.58,P<0.05)和肾脏中镉含量(r=0.78,P<0.05)呈正相关,与脑中锌含量呈负相关(r=-0.11,P<0.05)。结论低剂量跨代镉暴露能引起子代大鼠大脑脂质过氧化损伤。

关键词：镉锌丙二醛

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慢性氟砷联合暴露对大鼠骨骼Runx2及其下游相关因子的影响

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中华预防医学杂志 2013年第9期47卷 794-798页

作者：洪峰郑冲徐德淦钱亚利贵阳医学院公共卫生学院卫生毒理学教研室 550004

目的研究慢性氟砷联合暴露对大鼠骨骼代谢Runx2及其下游相关因子的影响.方法将54只8周龄清洁级SD大鼠按析因设计方法随机分成9组,每组6只,雌雄各半,分为对照组、低氟组、高氟组、低砷组、高砷组、低氟低砷组、低氟高砷组、高氟低砷组... 详细信息

目的研究慢性氟砷联合暴露对大鼠骨骼代谢Runx2及其下游相关因子的影响.方法将54只8周龄清洁级SD大鼠按析因设计方法随机分成9组,每组6只,雌雄各半,分为对照组、低氟组、高氟组、低砷组、高砷组、低氟低砷组、低氟高砷组、高氟低砷组及高氟高砷组.使用氟化钠（NaF,低氟组5mg/kg、高氟组20 mg/kg）和亚砷酸钠（NaAsO2,低砷组2.5 mg/kg、高砷组10 mg/kg）灌胃染毒6个月；测定大鼠骨骼中Runx2、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、成骨相关转录因子（Osterix）核因子-κB受体活化因子配基（RANKL）蛋白浓度.结果对照组、低砷组、高砷组无氟斑牙出现,低氟组、高氟组氟斑牙比例（分别为5/6、6/6）与对照组（O）相比,差异均有统计学意义（x2=8.57、12.00,p＜0.05）.骨氟含量随着氟染毒剂量的增加而升高,无氟染毒组[对照组、低砷组、高砷组的几何均数（最小值～最大值）分别为0.005（0.003 ～0.009）、0.006（0.003～0.021）、0.007（0.002～0.100）mg/g]、低氟组[低氟组、低氟低砷组、低氟高砷组分别为3.395（2.416 ～5.871）、3.809（1.471 ～7.799）、3.853（1.473～6.732）mg/g]、高氟组[高氟组、高氟低砷组、高氟高砷组分别为70.086（46.183～ 131.927）、69.925 （40.503 ～ 96.183）、67.950（52.622 ～ 89.487） mg/g]组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.骨砷含量随着砷染毒剂量的增加而升高,其中低砷组[低砷组、低氟低砷组、高氟低砷组分别为7.195（5.060 ～9.860）、6.518（2.960 ～ 12.130）、6.970（3.400 ～9.730）μg/g]、高砷组[高砷组、低氟高砷组、高氟高砷组分别为8.823 （5.760 ～ 10.840）、9.470（7.230～12.860）、8.321（2.420 ～17.540）μg/g]浓度均高于无砷染毒组[对照组、低氟组、高氟组分别为1.785（0.300～3.750）、2.226（1.410～3.980）、2.030（1.040 ～3.850） μg/g],差异有统计学意义（P＜0.05）,而低砷组与高砷组骨砷含量差异无统计学意义（P＞0.05）.氟与Runx2、MMP-9、Osterix、RANKL蛋白含量间呈正相关（氟染毒量与蛋白含量间相关系数分别为0.647、0.354、0.582和0.613）,骨氟含量与蛋白含量间相关系数分别为0.559、0.387、0.487、0.525,P值均＜0.01,砷染毒剂量与Runx2呈负相关（相关系数为-0.527,P＜0.05）,与MMP-9、RANKL、Osterix无相关关系（P＞0.05）.氟砷联合染毒与Runx2、MMP-9、RANKL、Osterix蛋白含量具有交互效应（F值分别为3.88、15.66、2.92、6.42,P值均＜0.05）.结论氟砷联合暴露对大鼠骨骼代谢Runx2及其下游相关因子的交互作用表现为拮抗作用.

关键词：氟砷大鼠联合作用 Runx2

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亚砷酸钠对HaCaT细胞MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2、DNA甲基转移酶1、组蛋白去乙酰化酶-1结合的影响

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中华地方病学杂志 2013年第1期32卷 16-20页

作者：张博潘雪莉张爱华贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室 550004

目的观察亚砷酸钠（NaAsO：）对人肤角质形成细胞株（HaCaT细胞）MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2（MeCP2）、DNA甲基转移酶1（DNMTl）及组蛋白去乙酰化酶1（HDACl）结合情况的影响，为深化阐释砷毒作用机制提供依据。方法分别以0... 详细信息

目的观察亚砷酸钠（NaAsO：）对人肤角质形成细胞株（HaCaT细胞）MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2（MeCP2）、DNA甲基转移酶1（DNMTl）及组蛋白去乙酰化酶1（HDACl）结合情况的影响，为深化阐释砷毒作用机制提供依据。方法分别以0．00（空白对照）、3．13、6，25、12．50、25．00μmol／LNaAs02重复间隔处理HaCaT细胞72h（NaAs02处理24h，隔天再次相同处理，重复3次），以人表皮鳞癌细胞株（A431）作为阳性对照。定量染色质免疫共沉淀技术（Q—CHIP）检测MGMT基因转录调控区CHIPl、CHIP2区域及MGMT基因编码区ChIP3区域MeCP2、DNMTl、HDACl结合情况。结果各组HaCaT细胞MGMT基因转录调控区CHIPl、CHIP2区域MeCP2、DNMTl、HDACl蛋白结合水平比较，差异有统计学意义（F值分别为7．387、84．634、78．442和19．263、69．649、26．546，P均〈0．05）；其中各N以s02处理组CHIPl、CHIP2区域MeCI〉2、DNMTl、HDACl蛋白结合水平[3．13μmol／LNaAs02处理组：（136．00±16．97）％、（145．00±2．83）％、（88．50±19．09）％和（106．50±37．48）％、（112．34±8．73）％、（59．71±8．49）％；6．25μmol／LNaAs02处理组：（130．00±42．43）％、（154．50士4．95）％、（101．00±1．27）％和（88．50±3．54）％、（134．32±2．82）％、（102．75±19．91）％；12．50~mol／LNaAs02处理组：（141．50±23．33）％、（161．50±7．78）％、（125．00±U．31）％和（119．50±24．75）％、（171．59±3．54）％、（167．61±10．61）％；25，00μmol／LNaAs02处理组：（134．50±43．13）％、（472．50±50．20）％、（383．50±30．41）％和（180．09±12．73）％、（348．50±27．58）％、（158．45±12．02）％]均高于空白对照组[（51．50±9．19）％、（82．00±12．73）％、（25．03±2．91）％和（37．02±4．24）％、（91．56±26．16）％、（19．09±2．90）％，P均〈0．05]。各组HaCaT细胞MGMT基因编码区CHIP3区域MeCP2蛋白结合水平比较，差异无统计学意义（F=1．670，P〉0．05），而DNMTl、HDACl蛋白结合水平比较，差异有统计学意义（F值分别为4．404、9．863，P均〈0．05），其中25．00I,Lmol／LNaAs02处理组DNMTl、HDACl蛋白结合水平[（615．85±29．63）％、（306．09±59．40）％]与空白对照组[（99．70±12．02）％、（92．45，±48．79）％]比较，差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论MeCP2可结合于砷所致高甲基化MGMT基因转录调控区。通过招募DNMTl及HDACl使组蛋白去乙酰化，同时DNMTl可结合于MGMT基因编码区，以非甲基化DNA结合蛋白（IVIBD）依赖的方式招募HDACl，通过染色质重塑方式导致MGMT基因沉默，可能是砷毒性表现的早期分子事件。

关键词：砷中毒基因 O(6)-甲基鸟嘌呤DNA转移酶甲基-CpG-结合蛋白2 DNA(胞嘧啶-5-)-甲基转移酶组蛋白脱乙酰基酶类

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以转化应用为导向加强砷毒作用机制研究

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中华预防医学杂志 2013年第9期47卷 774-776页

作者：张爱华贵阳医学院公共卫生学院卫生毒理学教研室 550004

砷是一种环境毒物,多以化合物的形式广泛存在于自然界中,地球化学元素分布不均和工农业用途均会造成环境污染,导致环境中居民发生急慢性砷中毒甚至癌症.地球化学性因素导致的地方性砷中毒（以下简称地砷病）是影响面广、后果严重的世界... 详细信息

砷是一种环境毒物,多以化合物的形式广泛存在于自然界中,地球化学元素分布不均和工农业用途均会造成环境污染,导致环境中居民发生急慢性砷中毒甚至癌症.地球化学性因素导致的地方性砷中毒（以下简称地砷病）是影响面广、后果严重的世界性公共卫生问题,包括因长期饮用高砷地下水导致的饮水型砷中毒和因燃用高砷煤导致空气和食物污染而引起的燃煤型砷中毒.目前地砷病至少威胁着22个国家和地区的5000多万人口;其中饮水型砷中毒在我国大陆地区9个省（自治区）存在,受威胁人口约185万,燃煤型砷中毒是全球惟一存在于我国贵州和陕西两省的病型,受威胁人口122万[1].

关键词：地砷病毒作用机制燃煤型砷中毒饮水型砷中毒导向转化地方性砷中毒公共卫生问题

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表观遗传学：揭示砷中毒机制及改进防治策略的新路径

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中华地方病学杂志 2013年第1期32卷 1-2页

作者：张爱华 550004 贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室

随着后基因组时代的到来。人们逐渐发现生物体除了存在以DNA序列为基础的遗传编码信息外。还存在决定遗传编码信息表达的调控机制，表观遗传学（epigenetics）是针对后者研究基因演绎为表型过程和机制的一门新兴遗传学分支学科。遗传学... 详细信息

随着后基因组时代的到来。人们逐渐发现生物体除了存在以DNA序列为基础的遗传编码信息外。还存在决定遗传编码信息表达的调控机制，表观遗传学（epigenetics）是针对后者研究基因演绎为表型过程和机制的一门新兴遗传学分支学科。遗传学信息提供了生命所必须蛋白质的模板，而表观遗传学信息则提供何时、何地以及如何应用上述遗传学信息的指令，在时间、空间顺序上调控基因的表达。表观遗传学主要研究内容有DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、遗传印记、X染色体失活、RNA调控等。

关键词：表观遗传学砷中毒基因表达

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穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖的影响

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遵义医学院学报 2014年第2期37卷 188-191页

作者：何亮康亚辉黄厚今王忠明遵义医学院公共卫生学院毒理学教研室贵州遵义563099 江苏省连云港市第二人民医院蚌埠医学院附属连云港医院江苏连云港222000

目的研究穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖的影响。方法在不同浓度的穿心莲内酯培养基中将人结肠癌细胞株Caco-2(高分化)、HT-29(中分化)和Lovo(未分化)培养24、48、72 h,用MTT法检测穿心莲内酯对各种癌细胞的药物半数抑制浓度... 详细信息

目的研究穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖的影响。方法在不同浓度的穿心莲内酯培养基中将人结肠癌细胞株Caco-2(高分化)、HT-29(中分化)和Lovo(未分化)培养24、48、72 h,用MTT法检测穿心莲内酯对各种癌细胞的药物半数抑制浓度(IC50),比较穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株之间的增殖抑制的差异。结果穿心莲内酯对结肠癌细胞Caco-2、HT-29和Lovo有明显增殖抑制作用,且其抑制作用呈剂量效应和时间效应关系;低分化结肠癌细胞株对穿心莲内酯的敏感性高于分化程度较高的结肠癌细胞株。结论穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖抑制作用不同。

关键词：穿心莲内酯结肠癌细胞 MTT法

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谷胱甘肽硫转移酶P1基因DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与燃煤污染型地方性砷中毒关系探讨

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中华地方病学杂志 2013年第1期32卷 7-12页

作者：杨婷婷张爱华黄晓欣董学新贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室 550004 解放军第四十四医院

目的探讨谷胱甘肽硫转移酶P1（GSTPl）基因启动子区DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与砷中毒的关系。方法123例砷中毒患者来自贵州省兴仁县交乐村燃煤污染型地方性砷中毒病区，按地方性砷中毒诊断标准（WS／T211-2001），其中轻度42例、中度4... 详细信息

目的探讨谷胱甘肽硫转移酶P1（GSTPl）基因启动子区DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与砷中毒的关系。方法123例砷中毒患者来自贵州省兴仁县交乐村燃煤污染型地方性砷中毒病区，按地方性砷中毒诊断标准（WS／T211-2001），其中轻度42例、中度41例，重度40例。在距病区约13km的非砷暴露村．选择47例正常健康人作为对照。根据知情同意的原则，采集被调查者的外周血，用PCR法检测外周血GSTPl基因启动子区DNA甲基化，用荧光实时定量PCR法检测GSTPlmRNA表达。取自愿手术治疗的53例砷中毒患者的皮肤病理标本，其中一般病变28例、癌前病变20例、癌变5例，以病理学诊断无异常的15例非肿瘤手术患者的皮肤组织为对照组。采用免疫组织化学（IHC）法检测皮肤组织中GSTPl蛋白的表达。结果在按病情分组中，外周血GSTPl基因DNA甲基化阳性率轻（28．57％，12／42）、中（57．10％，23／41）、重度（65．00％。26／40）砷中毒组与对照组（6．38％，3／47）比较差异有统计学意义（x。值分别为7．792、26．000、33．412，P均〈0．01）；在按皮肤病理诊断分组中，GSTPl基因DNA甲基化阳性率一般病变（21．43％，6／28）、癌前病变（50．00％，10／20）、癌变组（80．00％，4／5）与对照组（6．67％，1／15）比较差异有统计学意义（x。值分别为3．562、7．468、10．756，P均〈O．05）。GsTPl基因DNA甲基化阳性率随砷中毒患者病情及皮肤病理损害程度加重而升高（趋势x。=38．239、x。=13．659，P均〈0．01）。与对照组（0．18426）比较，中（0．08777）、重度（0．05693）砷中毒组外周血GSTPlmRNA表达显著降低（P均〈0．01），其中重度砷中毒组低于中度砷中毒组（P〈0．01）；与对照组（0．33845）、一般病变组（0．27674）比较，癌前病变组（0．10481）、癌变组（0．04370）GSTPlmRNA表达显著降低（P均〈0．01），其中癌变组显著低于癌前病变组（P〈0．01）。皮肤组织中GSTPl蛋白阳性表达率组间比较差异有统计学意义（x2=20．948，P〈0．05），其中癌前病变组（65．00％，13／20）、癌变组（40．00％，2／5）与对照组（100．00％，15／15）比较差异有统计学意义（x2=12．183、11．778，P均〈0．01）。皮肤病损程度与GSTPl蛋白表达强度经Spearman等级相关分析，呈负相关关系（r=-0．520，P〈0．05）。按GSTPl基因DNA甲基化分组，GSTPlmRNA和蛋白表达阳性率与非甲基化组（0．18707、95．74％）比较，甲基化组（0．03840、57．14％）显著降低（Z=9．032，P〈0．01；x2=23．134，P〈0．01）。结论砷中毒可通过导致人体GSTPl基因启动子区DNA甲基化，进而抑制其mRNA和蛋白表达，GSTPl基因在砷致病或致癌过程中起重要作用。

关键词：砷中毒煤谷胱甘肽硫转移酶P1 DNA甲基化转录基因表达

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猪带绦虫CDC37基因的克隆、表达与组织定位研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 23-26页

作者：黄江李波戴佳琳张爱华贵阳医学院寄生虫学教研室贵阳550004 贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室贵阳550004

目的原核表达猪带绦虫(Taeniasolium)细胞分裂周期蛋白37(cell division cycle 37,TsCDC37),并对其进行组织定位和免疫原性研究。方法通过Blastx分析从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中筛选出TsCDC37基因,PCR扩增CDC37基因,以pET-28a(+)为载... 详细信息

目的原核表达猪带绦虫(Taeniasolium)细胞分裂周期蛋白37(cell division cycle 37,TsCDC37),并对其进行组织定位和免疫原性研究。方法通过Blastx分析从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中筛选出TsCDC37基因,PCR扩增CDC37基因,以pET-28a(+)为载体构建目的基因原核表达体系,在大肠埃希菌(***)BL-21/DE3中诱导表达,纯化的重组蛋白免疫SD大鼠制备免疫血清,Western blotting分析重组蛋白的免疫原性,免疫组织化学方法观察TsCDC37在猪带绦虫成虫中的组织定位。结果 PCR、双酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pET-28aTsCDC37构建成功。目的基因在BL-21/DE3菌株中得到稳定表达,重组蛋白的相对分子质量(M_r)为52 000。纯化的重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清和猪带绦虫病、亚洲带绦虫病或牛带绦虫病患者血清识别。免疫组化结果显示,TsCDC37分布于猪带绦虫成虫表膜和子宫中的虫卵。结论纯化后的猪带绦虫细胞周期分裂蛋白TsCDC37具有较强的免疫原性,主要定位于猪带绦虫成虫的表膜和子宫中的虫卵。

关键词：猪带绦虫细胞分裂周期蛋白37 抗原性组织定位

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亚洲带绦虫六钩蚴Ta 18基因克隆及生物信息学分析

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中国公共卫生 2013年第3期29卷 328-331页

作者：黄江王宇张爱华贵阳医学院寄生虫学教研室贵州贵阳550004 贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室

目的从亚洲带绦虫(Taenia asiatica)六钩蚴cDNA文库中克隆出亚洲带绦虫六钩蚴Ta 18基因,生物信息学分析预测其编码蛋白的结构和生物学功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://***/)和瑞士生物信息学研究所... 详细信息

目的从亚洲带绦虫(Taenia asiatica)六钩蚴cDNA文库中克隆出亚洲带绦虫六钩蚴Ta 18基因,生物信息学分析预测其编码蛋白的结构和生物学功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://***/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://***/)中生物信息学分析工具,并结合其他分析软件,分析该基因的结构并预测其编码的蛋白质的结构和功能特征。结果成功克隆出Ta 18基因,全长396 bp,编码131个氨基酸,其序列包含完整开放阅读框,推导出的氨基酸序列与GenBank中牛带绦虫18 kD蛋白的同源性最高,一致性达99%,与猪带绦虫一致性达97%;Ta 18蛋白质的理论分子量为14 810.4 Da,等电点为10.05,蛋白理化性质稳定,分析显示Ta 18蛋白质含有1个信号肽和1个纤连蛋白FnⅢ型结构域。结论成功从亚洲带绦虫六钩蚴中克隆出Ta 18基因并分析预测到所编码蛋白的功能特征。

关键词：亚洲带绦虫 Ta18基因克隆生物信息学

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