检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2018年第9期13卷 958-962页

作者：赵慧琳吴玉龙荣倩玉徐正丁雲飞张玉梅乔媛媛李波清季晓飞滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化至*... 详细信息

目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化至*** BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用亲和层析法纯化重组蛋白,通过检测重组酶处理胶原蛋白后L-亮氨酸的产生量表征其胶原蛋白降解活性。结果 HpPrtC基因编码422个氨基酸,与已知PrtC家族蛋白酶氨基酸序列比对最高相似性<40%。克隆HpPrtC基因连接入表达质粒pET-22b(+),将测序正确的表达质粒pET-22b(+)-HpPrtC转化至感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导表达相对分子质量约为47×103的可溶性蛋白,与预期相符。经亲和层析纯化后的重组蛋白酶降解热变性I型胶原蛋白(可溶、不可溶)和天然I型胶原蛋白的活性分别为922.2±36.2、1168.8±65.6和674.0±13.4,与幽门螺杆菌培养液中胶原蛋白酶对可溶热变性I型胶原蛋白、不可溶热变性I型胶原蛋白和天然I型胶原蛋白活性分别为205.6±21.5、228.4±19.3和123.2±14.5一致。结论幽门螺杆菌定植因子HpPrtC为胶原蛋白酶。通过大肠埃希菌异源表达的重组HpPrtC蛋白具有胶原蛋白酶解活性,为探索该酶在幽门螺杆菌感染定植中的作用机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌胶原蛋白酶异源表达胶原蛋白

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山楂原花青素抗氧化、清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的研究

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滨州医学院学报 2019年第2期42卷 119-122,160页

作者：宓伟韩丽珍韩富磊张红萍蒋伟李汶洋杨灵华黄续钊田丽君滨州医学院营养与食品卫生学教研室烟台264003 临沂市人民医院肿瘤科滨州医学院附属医院肿瘤科

目的探讨山楂原花青素(HPC)抗氧化、清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的作用。方法 HPC和维生素C浓度均为20、80、140、200、260、320 mg/L,采用分光光度计法分别测定HPC组对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(·OH)和DPPH·... 详细信息

目的探讨山楂原花青素(HPC)抗氧化、清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的作用。方法 HPC和维生素C浓度均为20、80、140、200、260、320 mg/L,采用分光光度计法分别测定HPC组对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(·OH)和DPPH·的清除能力、总抗氧化能力及清除亚硝酸盐和阻断亚硝胺合成能力,并与维生素C组比较。结果 20～260 mg/L的浓度范围内,HPC对·OH清除率显著高于维生素C(P <0. 05)。在一定浓度范围内,HPC对DPPH·自由基的清除率及总抗氧化能力均高于维生素C组(P <0. 05),且其自由基清除能力与总抗氧化能力均与浓度成正比; HPC能够有效清除体系中的亚硝酸盐,其清除能力在试验浓度范围内随浓度增大而增大,在140～320 mg/L范围内,HPC对亚硝酸盐的清除率均高于维生素C组(P <0. 05)。结论 HPC能够有效清除自由基和亚硝酸并且能够阻断亚硝胺的合成,对机体抗衰老、预防肿瘤有积极作用。

关键词：山楂原花青素抗氧化亚硝酸盐亚硝胺

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hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP在冠心病患者中的应用价值研究

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医学美学美容 2020年第4期29卷 123-123页

作者：李芹徐芳滨州医学院滨州医学院病理生理学教研室山东烟台264003

目的:探讨hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP与CHD患者冠状动脉狭窄的相关性.方法:选择CHD的患者124例为观察组,另选30例造影无异常的就诊者为对照组,其中CHD根据造影结果分为轻度狭窄组、中度狭窄组、重度狭窄组,观察不同组之间hs-CRP/ALB、... 详细信息

目的:探讨hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP与CHD患者冠状动脉狭窄的相关性.方法:选择CHD的患者124例为观察组,另选30例造影无异常的就诊者为对照组,其中CHD根据造影结果分为轻度狭窄组、中度狭窄组、重度狭窄组,观察不同组之间hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP是否存在差异,相关指标是否与冠状动脉狭窄具有相关性.结果:随着冠状动脉狭窄程度的加重,hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP血清水平也随之升高,其中重度狭窄组明显高于中度狭窄组,轻度狭窄组和对照组(P<0.01),hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP与Gensini评分具有显著的正相关性(P<0.01).结论:hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP三种血清标记物与冠状动脉硬化具有一定的相关性,可能在临床对CHD临床诊断和严重程度的判断中具有一定的临床应用价值.

关键词：冠心病 hs-CRP/ALB、NLR和NT-proBNP

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辛硫磷对泥鳅脑谷丙转氨酶活性的影响

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安徽农业科学 2019年第17期47卷 89-90页

作者：于敏岳丹霞乔媛媛滨州医学院生物科学实验中心山东烟台264003 解放军总医院第七医学中心北京100700 滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

研究了5种浓度辛硫磷处理液对泥鳅脑细胞谷丙转氨酶(GPT)活性的影响。结果表明:低浓度的辛硫磷处理液对泥鳅脑细胞中的GPT活性起诱导作用,而高浓度则起抑制作用。建议以泥鳅脑组织GPT活性变化作为水环境监测的生物指标,从而达到评价水... 详细信息

研究了5种浓度辛硫磷处理液对泥鳅脑细胞谷丙转氨酶(GPT)活性的影响。结果表明:低浓度的辛硫磷处理液对泥鳅脑细胞中的GPT活性起诱导作用,而高浓度则起抑制作用。建议以泥鳅脑组织GPT活性变化作为水环境监测的生物指标,从而达到评价水生生态环境的目的。

关键词：辛硫磷泥鳅谷丙转氨酶生物指标

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ILK对幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2018年第8期13卷 819-822,826页

作者：徐正丁雲飞荣倩玉吴玉龙赵慧琳季晓飞张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的探讨ILK在幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡中的作用。方法体外培养GES-1细胞,随机分为空白对照组、Cpd22组和Hp组。采用罗丹明-鬼笔环肽检测不同浓度ILK抑制剂Cpd22对胃上皮细胞形态及细胞骨架改变的影响;Cpd22作用于GES-1细胞1h... 详细信息

目的探讨ILK在幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡中的作用。方法体外培养GES-1细胞,随机分为空白对照组、Cpd22组和Hp组。采用罗丹明-鬼笔环肽检测不同浓度ILK抑制剂Cpd22对胃上皮细胞形态及细胞骨架改变的影响;Cpd22作用于GES-1细胞1h后,Western blot检测细胞内ILK表达情况;Hp与Cpd22作用1h的GES-1细胞共培养(MOI=100∶1)24h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP表达情况。结果与空白对照组相比,Cpd22浓度为2μmol/L时细胞形态变圆,间隙变大,细胞外缘伪足减少,细胞无法正常伸展。空白对照组与Cpd22组ILK相对表达量分别为0.83±0.01、0.74±0.01,比较差异有统计学意义(t=5.65,P<0.05)。空白对照组、Cpd22组、Hp组细胞凋亡率分别为(6.53±2.78)%、(21.13±5.60)%、(14.07±3.97)%,比较差异有统计学意义(t值分别为-5.52和-6.83,P<0.05);Caspase-3相对表达量分别为0.63±0.07、0.95±0.14、0.88±0.11,差异均有统计学意义(t值分别为-5.44和-5.88,P<0.05);PARP的相对表达量分别为1.17±0.07、0.93±0.16、1.09±0.12,差异有统计学意义(t值分别为3.32和3.46,P<0.05)。Cpd22与Hp共作用组细胞凋亡率为(30.37±5.17)%,Caspase-3的相对表达量为1.07±0.10,PARP的相对表达量为0.86±0.07,与Cpd22组比较差异均有统计学意义(t值分别为4.90、2.85和6.70,P<0.05)。结论抑制ILK表达可增强Hp诱导GES-1细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞骨架重排和Caspase-3的表达有关。

关键词：幽门螺杆菌细胞凋亡 GES-1细胞 ILK Cpd22

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HPLC法测定柴香疏肝胶囊中芍药苷的含量

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滨州医学院学报 2019年第1期42卷 30-32页

作者：肖露李淑翠栾海云张树平滨州医学院药学院药理学教研室烟台264003 菏泽市中医医院药剂科

目的采用高效液相色谱法测定柴香疏肝胶囊中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Inert Sus-tain C18柱(4. 6mm×150 mm,5μm),以乙腈-0. 1%磷酸溶液(14∶86)为流动相,流速为1. 0 m L/min,检测波长为230nm。结果芍药苷的... 详细信息

目的采用高效液相色谱法测定柴香疏肝胶囊中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Inert Sus-tain C18柱(4. 6mm×150 mm,5μm),以乙腈-0. 1%磷酸溶液(14∶86)为流动相,流速为1. 0 m L/min,检测波长为230nm。结果芍药苷的线性范围为0. 1172～2. 344μg(r=0. 9999),芍药苷平均加样回收率为99. 05%,RSD为2. 08%。结论高效液相色谱法可以用于柴香疏肝胶囊中芍药苷的含量测定。

关键词：柴香疏肝胶囊芍药苷液相色谱法含量测定

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hp0169基因在幽门螺杆菌感染GES-1细胞中的作用研究

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中国病原生物学杂志 2018年第10期13卷 1062-1066页

作者：赵慧琳吴玉龙徐正丁雲飞张艳丽杜镇镇张珍李波清季晓飞滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)hp0169基因的敲除突变株,研究其在Hp感染GES-1细胞中的作用。方法敲除质粒pSJHK为模板,通过同源重组双交换的方法构建hp0169基因敲除突变株(Δ0169),分析其与野生26695株的生长曲线及琼脂表... 详细信息

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)hp0169基因的敲除突变株,研究其在Hp感染GES-1细胞中的作用。方法敲除质粒pSJHK为模板,通过同源重组双交换的方法构建hp0169基因敲除突变株(Δ0169),分析其与野生26695株的生长曲线及琼脂表面菌落扩散情况;通过FITC标记法检测两菌株对GES-1细胞的吸附率;以感染复数(MOI=200)构建Hp感染GES-1细胞体系,比较Δ0169突变株与野生株感染后致细胞凋亡及细胞活性变化的差异。结果通过质粒敲除、电击转化成功获得hp0169基因敲除突变株Δ0169。该突变株与野生菌株的生长曲线、琼脂表面菌落扩散情况基本一致,对GES-1细胞的吸附率差异无统计学意义(t值为1.102,P>0.05)。Δ0169突变株与野生株感染GES-1细胞活力分别为6h(0.74±9.56)%、(0.90±6.31)%,12h(0.53±7.89)%、(0.73±8.31)%,差异均有统计学意义(t值分别为-3.474,-2.880,P<0.05);野生组和突变组GES-1细胞凋亡率分别为6h(19.2±11.03)%、(20.4±8.67)%和12h(29.3±14.47)%、(28.6±10.32)%,差异均无统计学意义(t值分别为-0.995,0.218,P>0.05)。结论 Hp hp0169基因敲除后不影响其生长、运动以及对GES-1细胞的吸附,不影响细菌感染GES-1细胞致细胞凋亡的程度,但影响细菌感染致细胞活力下降的程度。这对研究Hp感染及致病机制有重要意义。

关键词：幽门螺杆菌 hp0169 基因敲除细胞活力细胞凋亡

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DWI和SWI联合常规MRI序列在HIE的应用

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潍坊医学院学报 2019年第1期41卷 75-77页

作者：黄晓华姜兴岳滨州医学院医学影像学教研室山东烟台264003 东营市人民医院放射科滨州医学院附属医院放射科

目的探讨磁共振常规序列+扩散加权成像(DWI)+磁敏感加权成像(SWI)联合应用在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)诊断中的应用价值。方法回顾性分析临床诊断为HIE的患儿67例,磁共振常规序列+DWI+SWI分别与磁共振常规序列、磁共振常规序列+DWI、... 详细信息

目的探讨磁共振常规序列+扩散加权成像(DWI)+磁敏感加权成像(SWI)联合应用在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)诊断中的应用价值。方法回顾性分析临床诊断为HIE的患儿67例,磁共振常规序列+DWI+SWI分别与磁共振常规序列、磁共振常规序列+DWI、磁共振常规序列+SWI对照,以发现病灶总例数、缺氧性脑损伤病灶例数、出血性病灶例数为对比项目。结果磁共振常规序列+DWI+SWI联合应用发现病灶总例数均较其他3组多,发现缺氧性脑损伤病灶例数较磁共振常规序列、磁共振常规序列+SWI多,发现的出血性病灶例数较磁共振常规序列、磁共振常规序列+DWI多,差异均有显著性(P<0.05)。结论磁共振常规序列+DWI+SWI联合应用可以尽早、准确发现HIE患儿脑内病灶。

关键词：新生儿缺氧缺血性脑病磁共振多序列联合应用扩散加权成像磁敏感加权成像

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顺铂通过上调miR-93影响肺腺癌细胞的生长机制研究

顺铂通过上调miR-93影响肺腺癌细胞的生长机制研究

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第九届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术年会

作者：谢宁刘远蓉杨亚楠潘丽魏毓伯王萍玉李有杰谢书阳滨州医学院生物化学与分子生物学教研室

微小RNA (miRNA)在抗癌药物的化学治疗作用中起重要作用。为了研究miRNA在顺铂诱导的肺腺癌细胞增殖抑制中的作用,用不同浓度的顺铂处理A549细胞。MTT分析表明,顺铂以剂量依赖性方式抑制A549细胞增殖。顺铂可通过增加miR-93,miR-26a和mi... 详细信息

微小RNA (miRNA)在抗癌药物的化学治疗作用中起重要作用。为了研究miRNA在顺铂诱导的肺腺癌细胞增殖抑制中的作用,用不同浓度的顺铂处理A549细胞。MTT分析表明,顺铂以剂量依赖性方式抑制A549细胞增殖。顺铂可通过增加miR-93,miR-26a和miR-26b的水平显着诱导细胞凋亡并抑制细胞迁移。此外,作为上游因子,miR-93可以调节在miR-93转染的A549细胞中的细胞周期蛋白D2。顺铂还诱导肺腺癌细胞中Bax表达并降低Bcl-2和c-Myc水平。体内研究进一步支持顺铂通过调节细胞周期蛋白D2和miR-93抑制肺腺癌细胞生长。总之,本研究结果表明顺铂可通过miR-93降低细胞周期蛋白D2水平,从而有效抑制肺腺癌细胞增殖。

关键词： microRNA 顺铂细胞周期蛋白D2 细胞增殖肺癌

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紫薯花青素减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎

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卫生研究 2018年第4期47卷 517-524页

作者：宓伟韩富磊梁洁梁亚楠关百初徐昊滨州医学院公共卫生与管理学院营养与食品卫生学教研室烟台264003

目的探讨紫薯花青素通过核因子κB(NF-κB)通路减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎机制。方法将70只雄性大鼠随机分为对照组(10只)和高脂饲料组(60只),对照组喂饲普通饲料,高脂组喂饲高脂饲料同时每周2次腹腔注射四氯化碳-橄... 详细信息

目的探讨紫薯花青素通过核因子κB(NF-κB)通路减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎机制。方法将70只雄性大鼠随机分为对照组(10只)和高脂饲料组(60只),对照组喂饲普通饲料,高脂组喂饲高脂饲料同时每周2次腹腔注射四氯化碳-橄榄油制剂(50:50)2 mL/kg,对照组注射等量橄榄油,共10周,每周称体重并检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)浓度。从造模成功的58只大鼠中随机选取50只再分为模型组,紫薯花青素低、中、高剂量组(60、120、240 mg/kg)和阳性药物组(水飞蓟素150 mg/kg),每组10只,每天1次等体积(20 mL)灌胃给药,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,8周后,检测大鼠血清ALT、AST、TC、TG、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)浓度和血清促炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和抗炎症因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)浓度;实时定量荧光聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肝脏内TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-13、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)和高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)的mRNA表达;Western blotting检测肝组织核因子κB抑制蛋白(IκB)磷酸化程度及PPAR-γ和HMGB-1蛋白表达。结果与对照组比较,造模后大鼠体重增加(P<0.05),血清AST、ALT、TG、TC和LDL浓度均显著升高(P<0.05),HDL浓度明显下降(P<0.05);与对照组相比,模型组大鼠TNF-α、IL-1β和HMGB-1的表达显著升高(P<0.05),IL-4、IL-13和PPAR-γ的表达显著降低(P<0.05),磷酸化IκB(p-IκB)和NF-κB表达量明显增高(P<0.05);与模型组比较,高剂量紫薯花青素组NF-κB的表达水平明显降低,IκB磷酸化程度下降(P<0.05),肝组织内TNF-α、IL-1β和HMGB-1 mRNA表达量显著降低(P<0.05),IL-4、IL-13和PPAR-γ的mRNA表达显著升高(P<0.05)。紫薯花青素低、中、高剂量组及阳性药物组上述指标均有所改善,高剂量组作用优于低、中剂量组,与阳性药物组效果接近。结论紫薯花青素可通过NF-κB通路起到减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎的作用。

关键词：紫薯花青素 NF-κB通路脂肪性肝炎过氧化物酶体增殖物激活受体γ 高迁移率族蛋白B1

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