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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1117-1119页

作者：程晓丽温雯静刘晓东赵国强曾昭书郑红连建华薛长贵郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院寄生虫学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院解剖学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院法医学教研室郑州450001

目的:对河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白(Fd)基因突变进行检测分析。方法:采用改良法提取阴道毛滴虫全基因组DNA,应用特异性引物对Fd基因进行扩增,随机选取河南省内5个地区来源的10个虫株的Fd基因扩增片段直接进行双向测序,应用Chromas... 详细信息

目的:对河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白(Fd)基因突变进行检测分析。方法:采用改良法提取阴道毛滴虫全基因组DNA,应用特异性引物对Fd基因进行扩增,随机选取河南省内5个地区来源的10个虫株的Fd基因扩增片段直接进行双向测序,应用Chromas和Clustalx软件对测序结果进行分析,将测序所得Fd基因核苷酸序列与GenBank中的Fd基因(M33717)进行比对,对所得Fd基因的同源性进行分析。结果:河南省内5个地区来源的Fd基因的核苷酸序列无差异,与Fd基因(M33717)对比,在第200位发生碱基插入,插入碱基为ctg,与Fd基因M33717的同源性为99%。结论:经NIHGenBank基因命名委员会认定,本研究中Fd基因为新型基因,收录编号为EU652852。

关键词：阴道毛滴虫 DNA测序铁氧环蛋白

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X连锁隐性遗传鱼鳞病基因突变研究进展

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国际遗传学杂志 2008年第6期31卷 463-466页

作者：席红利蒋玮莹中山大学医学院医学遗传学教研室

X连锁隐性遗传鱼鳞病(XLRI)是一种常见的遗传角化障碍性皮肤病,以皮肤干燥、大块状、深褐色鳞屑脱落为主要表现。皮肤以外的特征包括:角膜混浊和隐睾症等。1978年已经有研究阐述了类固醇硫酸酯酶(steroid sulfatase,STS)的缺陷与XLRI发... 详细信息

X连锁隐性遗传鱼鳞病(XLRI)是一种常见的遗传角化障碍性皮肤病,以皮肤干燥、大块状、深褐色鳞屑脱落为主要表现。皮肤以外的特征包括:角膜混浊和隐睾症等。1978年已经有研究阐述了类固醇硫酸酯酶(steroid sulfatase,STS)的缺陷与XLRI发生的内在关系。STS基因定位于Xp22.3。该区域逃避了X染色体失活,具有很高的缺失频率,约90%的患者存在STS基因的完全缺失。男性患者的诊断和携带者的筛查主要依赖于生化检测和遗传学分析。目前已经有很多关于XLRI病分子遗传学的研究。本文主要就X连锁隐性遗传性鱼鳞病基因突变特点和基因诊断作一综述。

关键词： X 连锁隐性遗传鱼鳞病类固醇硫酸酯酶基因缺失

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创伤弧菌溶细胞素融合蛋白重组、表达与细胞毒活性鉴定

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细胞生物学杂志 2008年第1期30卷 89-94页

作者：桂静肖美英楼永良胡蝶严杰朱晔晶温州医学院微生态学研究所浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 浙江大学医学院病原生物学教研室杭州310031

研究重组创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbili-cal vein endothelial cells,human ECV304)凋亡的作用。诱导含pET-28a(+)vvhA重组质粒的BL21大肠杆菌表达创伤弧菌溶细胞素融合蛋白,应用Ni2+亲和层析方法... 详细信息

研究重组创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbili-cal vein endothelial cells,human ECV304)凋亡的作用。诱导含pET-28a(+)vvhA重组质粒的BL21大肠杆菌表达创伤弧菌溶细胞素融合蛋白,应用Ni2+亲和层析方法对rVvhA进行纯化;利用分步稀释加透析相结合的方法进行蛋白质复性;绵羊红细胞裂解试验对复性后的rVvhA进行溶血活性初步测定;MTT法检测rVvhA对人ECV304细胞的体外毒性作用;应用Hochest33342/PI活细胞荧光双染及流式细胞术分析rVvhA对人ECV304细胞诱导凋亡的影响。结果显示,用Ni2+-NTAHisBand亲和层析柱纯化rVvhA纯度达88.6%左右;复性后的rVvhA有一定的溶血活性,其溶血活性具有时间-剂量依赖性;MTT结果显示rVvhA具有降低人ECV304细胞的存活率活性;浓度为2.0HU/mlrVvhA作用人ECV30412h后,其诱导凋亡的活性高于对照组和浓度为0.5HU/mlrVvhA处理组,具有剂量依赖性;浓度为2.0HU/mlrVvhA处理组加用40μmol/Lcaspase全酶抑制剂(Z-VAD-FMK)后凋亡率较2.0HU/mlrVvhA处理组有一定程度降低。rVvhA对人ECV304细胞具有诱导凋亡的生物学活性,推测诱导调亡途径可能与caspase家族有关。

关键词：创伤弧菌溶细胞素 rVvhA 人ECV304细胞细胞凋亡 caspase

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MUS81基因在喉癌中的突变和表达

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中华医学遗传学杂志 2008年第5期25卷 560-565页

作者：李婵媛王淑云袁海明李巍李子政李晓渝郭星李福才中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科

目的探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变；应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组... 详细信息

目的探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变；应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组织中的表达情况。结果42例喉癌、癌旁组织标本中，癌旁正常组织均无突变，喉癌组织标本中19例发生突变，占45．2％（19／42），11例喉癌组织第9外显子发现有突变，占26．2％（11／42），8例喉癌组织第10外显子有突变，占19％（8／42），分析表明具有统计学意义（P〈0．01）。逆转录．PCR结果表明，42例喉癌中有17例MUS81基因mRNA低表达，占40．48％（17／42）。Western印迹方法分析结果表明，42例喉癌中有17例MUS81蛋白质低表达，占40．48％（17／42），经统计学分析肿瘤组与对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。分析表明MUS81基因突变与mRNA和蛋白质低表达有显著相关性（P〈0．01）。统计结果显示喉癌MUS81基因突变与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。MUS81基因低表达与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。结论发现MUS81基因在喉癌组织中有突变发生及表达异常，提示MUS81基因突变和表达异常可能是喉癌发生及发展的重要因素之一。

关键词：喉鳞状细胞癌 MUS81基因聚合酶链反应-单链构象多态性

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同时沉默Livin基因和MTA1基因的siRNA载体的构建

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郑州大学学报（医学版） 2008年第2期43卷 202-205页

作者：杨松华赵国强郑红李月白赵继敏冯龙董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450001

目的:构建同时沉默Livin基因和MTA1基因的小干扰RNA(siRNA)载体。方法:设计Livin和MTA1的siRNA靶序列,合成它们互补的寡核苷酸链,分别退火后重组入pRNAT-U6.2载体,得到pRNAT-U6.2-Livin和pR-NAT-U6.2-MTA1。AccⅡ和XhoⅠ酶切pRNAT-U6.2-MTA1,回收475bp的MTA1siRNA单元,然后与XhoⅠ和PmeⅠ酶切线形化的pRNAT-U6.2-Livin重组,得到pRNAT-U6.2-Livin-MTA1,后者用脂质体包被转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR法分别检测转染细胞Livin和MTA1基因mRNA的表达情况。结果:针对Livin基因和MTA1基因的siRNA的双链寡核苷酸片段分别克隆入pRNAT-U6.2载体,经测序分析插入片段正确。PCR扩增证实MTA1siRNA单元重组入pRNAT-U6.2-Livin。RT-PCR检测显示,转染pRNAT-U6.2-Livin-MTA1的EC9706细胞Livin基因和MTA1基因mRNA表达水平皆明显降低。结论:同时沉默Livin基因和MTA1基因表达的siRNA载体构建成功。

关键词： RNA干扰 Livin MTA1 载体构建

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喉鳞癌微卫星不稳定性及杂合性丢失的研究

喉鳞癌微卫星不稳定性及杂合性丢失的研究

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吉林省第六届生命科学大型学术报告会

作者：吕团伟翟妍刘冰吉林大学白求恩医学院医学遗传学教研室

目的:在8p21-22、11q21-24、13q21-32和22q11.2-12.3四个区域内筛查喉鳞癌相关的基因,为发现和定位新的抑癌基因提供线索和依据。方法:在上述位点,应用聚合酶链式反应-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳.银染方法,分析36例喉鳞癌的微卫星不稳定性... 详细信息

目的:在8p21-22、11q21-24、13q21-32和22q11.2-12.3四个区域内筛查喉鳞癌相关的基因,为发现和定位新的抑癌基因提供线索和依据。方法:在上述位点,应用聚合酶链式反应-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳.银染方法,分析36例喉鳞癌的微卫星不稳定性及杂合性缺失情况。结果:LOH频率和MSI频率的最高值均出现在D8S261位点,D22S315位点MSI发生频率最低,D22S421位点LOH频率最低。结论:喉鳞癌的发生与微卫星位点D8S261.D11S925.D13S317,D22S315和D22S421密切相关。

关键词：喉鳞癌微卫星不稳定性杂合性缺失

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儿童哮喘与诱导型一氧化氮合酶基因5′调控区(CCTTT)n缺失关系研究

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中国实用儿科杂志 2008年第4期23卷 260-262页

作者：靳秀红王群思沈照波李晓文郑州市儿童医院呼吸科河南郑州450053 郑州大学基础医学院医学遗传学教研室河南郑州450052

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因与哮喘的关系。方法2005年1月至9月,在郑州市儿童医院应用聚合酶链反应(PCR)扩增其短串联重复序列,对扩增产物进行聚丙烯酰胺变性凝胶电泳检测,银染显色并分析结果。结果(1)iNOS基因5′调控区(CCTT... 详细信息

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因与哮喘的关系。方法2005年1月至9月,在郑州市儿童医院应用聚合酶链反应(PCR)扩增其短串联重复序列,对扩增产物进行聚丙烯酰胺变性凝胶电泳检测,银染显色并分析结果。结果(1)iNOS基因5′调控区(CCTTT)n短串联重复序列PCR检测结果:该序列在77例哮喘患儿有63例缺失,在102例正常对照组中有25例缺失,差异有统计学意义。(2)iNOS基因该序列缺失与哮喘患儿病情的严重程度有关。(3)iNOS基因该序列缺失与哮喘患儿年龄无关。结论儿童支气管哮喘患者存在iNOS基因5′调控区(CCTTT)n短串联重复序列缺失,与正常儿童差异有统计学意义。iNOS基因5′调控区(CCTTT)n短串联重复序列与儿童支气管哮喘和病情严重程度有关。

关键词：诱导型一氧化氮合酶哮喘短串联重复序列

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脂联素的研究进展

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现代生物医学进展 2008年第8期8卷 1549-1552页

作者：王芳顾鸣敏王铸钢上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海200025

脂联素(adiponectin)是一种由脂肪细胞特异性高分泌,具有多种生物学功能的特殊蛋白质.它直接作用于肝脏、骨骼肌和血管,能提高胰岛素敏感性,增强脂肪酸β氧化,抵制血管炎症反应,最新研究还发现脂联素和骨生成密切相关.与其它脂肪因子不... 详细信息

脂联素(adiponectin)是一种由脂肪细胞特异性高分泌,具有多种生物学功能的特殊蛋白质.它直接作用于肝脏、骨骼肌和血管,能提高胰岛素敏感性,增强脂肪酸β氧化,抵制血管炎症反应,最新研究还发现脂联素和骨生成密切相关.与其它脂肪因子不同的是,循环中脂联素的浓度与人体脂肪含量成反比,会因TNF-α的作用而上调,会被噻唑烷二酮类药物所抑制,还受到胰岛素抵抗和炎症反应的影响.脂联素受体有2类,分别为AdipoR1和AdipoR2,AdipoR1主要分布在骨骼肌上,AdipoR2则高表达于肝脏组织.本文主要综述了脂联素及其受体的结构、生物学功能和研究进展.

关键词：脂联素脂联素受体胰岛素抵抗

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脂联素基因剔除小鼠糖代谢和骨代谢的初步研究

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现代生物医学进展 2008年第9期8卷 1623-1624,1616页

作者：王芳李西华王铸钢上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海200025

目的:研究前期建立的脂联素基因剔除小鼠模型在基础状态的葡萄糖代谢及骨代谢状态.方法:采用长期追踪野生型和该基因剔除纯合子小鼠的体重和空腹血糖水平,并进行葡萄糖耐量(GTT)和胰岛素耐量(ITT)试验以评价该小鼠的葡萄糖代谢能力.对... 详细信息

目的:研究前期建立的脂联素基因剔除小鼠模型在基础状态的葡萄糖代谢及骨代谢状态.方法:采用长期追踪野生型和该基因剔除纯合子小鼠的体重和空腹血糖水平,并进行葡萄糖耐量(GTT)和胰岛素耐量(ITT)试验以评价该小鼠的葡萄糖代谢能力.对骨代谢的初步研究采用检测小鼠骨密度(BMD)的方式.结果:发现该基因剔除小鼠在6w时,出现空腹血糖比对照组显著低下的现象,而随着鼠龄的增长,血糖水平又趋于正常.GTT和ITT试验证明该基因别除小鼠无糖尿病或胰岛素抵抗表型.BMD检测亦显示该小鼠在基础状态下无骨密度低下的现象.结论:脂联素基因剔除小鼠在基础状态下并无显著的糖代谢和骨代谢异常.

关键词：脂联素基因剔除空腹血糖糖代谢骨代谢

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脂联素基因+45位T/G多态性与2型糖尿病遗传易感性的相关性

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基础医学与临床 2008年第9期28卷 940-943页

作者：魏颖丽何兰杰霍正浩赵巍浙江武警总队医院杭州医院浙江杭州310000 宁夏医学院附属医院内分泌科宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室宁夏银川750004

目的研究脂联素基因单核苷酸多态性(SNP)45(T/G)位点与宁夏汉族人群2型糖尿病之间的关系。方法100例2型糖尿病患者和101例正常对照者,采用聚合酶链式反应——限制性内切酶长度多态性(PCR-RFLP)技术,对脂联素基因SNP45多态性位点进行基... 详细信息

目的研究脂联素基因单核苷酸多态性(SNP)45(T/G)位点与宁夏汉族人群2型糖尿病之间的关系。方法100例2型糖尿病患者和101例正常对照者,采用聚合酶链式反应——限制性内切酶长度多态性(PCR-RFLP)技术,对脂联素基因SNP45多态性位点进行基因分型,同时测定代谢参数。结果2型糖尿病组SNP45位点GG基因型频率和G等位基因频率均高于正常对照组(P<0.05)。结论脂联素基因的SNP45多态性位点与宁夏汉族人群中2型糖尿病相关,GG基因型者具有2型糖尿病高易感性。

关键词： 2型糖尿病脂联素基因单核苷酸多态性遗传易感性

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