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中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会

作者：尚超郭艳富伟能刘佳孙开来医学遗传学教研室基础医学院中国医科大学神经生物学教研室基础医学院中国医科大学

喉癌是头颈部的常见肿瘤,我国东北地区为高发区,其发生的病理分子机制仍不清楚。在前期研究中发现 SH3GL2基因在喉癌中的表达出现异常,为了进一步研究该基因在喉癌组织中的表达及其对喉癌细胞增殖和凋亡的影响,我们应用荧光定量 PCR 和 ... 详细信息

喉癌是头颈部的常见肿瘤,我国东北地区为高发区,其发生的病理分子机制仍不清楚。在前期研究中发现 SH3GL2基因在喉癌中的表达出现异常,为了进一步研究该基因在喉癌组织中的表达及其对喉癌细胞增殖和凋亡的影响,我们应用荧光定量 PCR 和 Western blot 检测74 例喉癌组织及相应癌旁组织中 SH3GL2基因的表达水平:构建 SH3GL2基因真核表达载体并转染人喉癌细胞系 Hep2,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测转染后喉癌细胞增殖能力和细胞凋亡情况的变化。实验结果显示喉癌组织中 SH3GL2基因表达下调,明显低于相应癌旁组织(P<0.05);转染 SH3GL2基因后的喉癌细胞 Hep2与对照组相比,增殖能力明显下降(P<0.05),而凋亡情况明显升高(P<0.05)。结果证实 SH3GL2基因表达下调与喉癌的发生发展相关,且能够促进喉癌细胞的凋亡,可能是喉癌一个新的抑癌基因。

关键词： SH3GL2基因喉癌凋亡

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He-Ne激光照射对脑梗死患者淋巴细胞生物学的影响

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中国激光医学杂志 2008年第4期17卷 235-239页

作者：朱键梁敏仪刘承宜广州医学院附属第一医院激光室广州市510120 广州医学院医学遗传学与细胞生物学教研室华南师范大学激光运动医学实验室

目的探讨鼻腔内低强度激光照射治疗(ILILT)对脑梗死患者淋巴细胞增殖、畸变、凋亡和细胞周期动力学指数的影响,以及致突变性。方法对ILILT前、后的35例脑梗死患者和35例健康成年人外周血进行淋巴细胞培养,并进行细胞增殖指数(MI)、细胞... 详细信息

目的探讨鼻腔内低强度激光照射治疗(ILILT)对脑梗死患者淋巴细胞增殖、畸变、凋亡和细胞周期动力学指数的影响,以及致突变性。方法对ILILT前、后的35例脑梗死患者和35例健康成年人外周血进行淋巴细胞培养,并进行细胞增殖指数(MI)、细胞周期动力学指数(CKI)、姐妹染色单体交换(SCE)频率和细胞凋亡的分析,观察ILILT对淋巴细胞的效应。结果ILILT后,脑梗死患者的淋巴细胞增殖活性比对照组和照射前有所提高,并且随着照射剂量的增加其增殖活性也增高(P<0.05,P<0.001),但对淋巴细胞周期的进程影响不大。各组间的SCE频率差异不显著(P>0.05)。ILILT前、后的CKI与对照组相比,差异无显著意义(P>0.05)。ILILT后脑梗死患者的细胞凋亡率比照射前和对照组比较均有极显著增加(P<0.001)。结论ILILT能提高脑梗死患者的淋巴细胞增殖活性,虽可诱发较高的淋巴细胞凋亡率,但对细胞没有致突变性。

关键词：激光脑梗死淋巴细胞

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SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠的建立及生物学特性研究

SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠的建立及生物学特性研究

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中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会

作者：陈辉金辉张钦宪高翔郑红李晓文郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室南京大学模式动物研究所

本实验构建了胃壁细胞特异性真核表达载体 pcDNA3.1(一)/HKSV,从该载体酶切回收 3.8kb 的基因片段 H+-K+ATPase β promoter/SV40T,通过显微注射的方法构建转基因小鼠, PCR 和 southern 印迹检测阳性转基因小鼠并建系繁殖,RT-PCR 检测基... 详细信息

本实验构建了胃壁细胞特异性真核表达载体 pcDNA3.1(一)/HKSV,从该载体酶切回收 3.8kb 的基因片段 H+-K+ATPase β promoter/SV40T,通过显微注射的方法构建转基因小鼠, PCR 和 southern 印迹检测阳性转基因小鼠并建系繁殖,RT-PCR 检测基因 mRNA 的表达,免疫组化检测蛋白表达,HE 染色观测胃组织形态学改变,电镜观测胃粘膜壁细胞亚显微结构的变化,小鼠胃液酸度测定检测胃酸分泌状况。出生的77只 G0仔鼠 PCR 检测发现10只首建阳性鼠。除1只不育外,其他9只共生出99只 F1代鼠,其中1个品系 F1代 PCR 检测尚未发现阳性鼠,另8个品系 PCR 和 Southern 印迹检测均有阳性鼠产生,阳性率为40.8%。RT-PCR 检测 F1代阳性鼠均仅在胃组织中有 SV40T 基因 mRNA 的表达,而在心、肝、肾、肺、食道、肠、骨骼肌等组织中均无该基因的表达。免疫组化仅在转基因阳性鼠胃组织中检测到 SV40T 抗原的表达,阴性对照鼠胃组织和阳性鼠的其它组织均无该抗原表达。HE 染色显示转基因阳性鼠胃底腺拉长,成熟壁细胞数目减少,而其前体细胞数目增加。出生后35d、60d、120d 转基因阳性鼠相对于同龄未转基因鼠胃粘膜厚度明显增加,电镜观测转基因鼠的壁细胞相比于未转基因对照鼠壁细胞体积缩小,线粒体数目减少,胞内微管泡系统不发达甚至缺如。小鼠胃液酸度测定表明转基因鼠胃酸分泌显著降低,胃液酸度为7.1±0.4,与未转基因鼠胃液酸度 (2.06±0.5)相比具有显著性差异。转基因阳性鼠均表现为胃腺上皮增生,有些品系转基因鼠出现萎缩性胃炎,局部囊性扩张,腺体数量减少,坏死和炎性渗出等病理学改变。不育首建鼠处死解剖发现胃体出现蕈伞形肿瘤,腹腔中尚存在直径约8mm 的腹膜瘤。而该鼠食管、肝、脾、肾、心脏、胰腺、肺、十二指肠等组织未见明显病变。本实验建立的胃壁细胞定位表达 SV40T基因的转基因小鼠动物模型将为胃癌发病机理的研究、抗癌药物的筛选提供十分有用的实验动物模型。

关键词： SV40T 抗原 Southern 印迹转基因小鼠

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临床遗传学教学方法的探索

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2008年第4期10卷 397-398页

作者：周万军杨海英南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515 南方医科大学实验动物中心

如何教好临床遗传学，充分培养学生的临床技能，是众多教学工作者所面临的实际问题。将基础理论充分结合临床实践，以突出临床、解决临床问题、学以致用、学有所用为原则进行教学，化抽象为具体，以激发学生的学习兴趣与求知欲，提高教... 详细信息

如何教好临床遗传学，充分培养学生的临床技能，是众多教学工作者所面临的实际问题。将基础理论充分结合临床实践，以突出临床、解决临床问题、学以致用、学有所用为原则进行教学，化抽象为具体，以激发学生的学习兴趣与求知欲，提高教学质量，取得好的教学效果。

关键词：临床遗传学教学方法病例

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PTEN基因单核苷酸多态性与喉癌的关联分析

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中华肿瘤防治杂志 2008年第22期15卷 1695-1697页

作者：刘冰刘洋邹景峰龚海珍祝威吉林大学基础医学院医学遗传学教研室吉林长春130021 解放军第二零九医院外一科黑龙江牡丹江157011 吉林大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科吉林长春130021

目的:探讨中国汉族人群PTEN基因与喉癌的关联性。方法:通过生物信息学方法在公共SNP数据库中查找该基因2个SNP位点,用PCR-RFLP法对汉族人群散发喉癌患者(91例)和对照组(104例)进行分型、病例-对照关联分析及单倍型分析。结果:基因型频... 详细信息

目的:探讨中国汉族人群PTEN基因与喉癌的关联性。方法:通过生物信息学方法在公共SNP数据库中查找该基因2个SNP位点,用PCR-RFLP法对汉族人群散发喉癌患者(91例)和对照组(104例)进行分型、病例-对照关联分析及单倍型分析。结果:基因型频率分析表明,2个SNP均符合Hardy-Weinberg平衡,P均>0.05。病例对照分析显示,rs2735343与喉癌相关,χ2=6.447,P=0.014;rs701848与喉癌不相关,χ2=0.12,P=0.720。单倍体型分析表明,rs2735343-rs701848单倍体型与喉癌密切相关,χ2=12.92,P=0.0048。结论:PTEN本身或其邻近位点与中国汉族人群喉癌发生密切相关。

关键词：喉肿瘤/流行病学多态性,单核苷酸肿瘤抑制蛋白质类

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喉癌组织中MKRN1和HSP90基因表达的研究

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国际遗传学杂志 2008年第1期31卷 1-4页

作者：王淑云李福才李婵媛郭星李晓渝中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室中国医科大学附属第一临床医学院耳鼻喉科

目的正常细胞中 MKRN1和 HSP90基因的平衡决定了端粒酶活性和端粒长度,使细胞保持正常的状态;二者的表达异常可能与肿瘤的发生发展有关。为探讨 MKRN1和 HSP90基因的表达与喉癌发生发展之间的关系,我们研究了喉癌组织中 MKRN1和 HSP90基... 详细信息

目的正常细胞中 MKRN1和 HSP90基因的平衡决定了端粒酶活性和端粒长度,使细胞保持正常的状态;二者的表达异常可能与肿瘤的发生发展有关。为探讨 MKRN1和 HSP90基因的表达与喉癌发生发展之间的关系,我们研究了喉癌组织中 MKRN1和 HSP90基因 mRNA 的表达情况。方法提取50例喉癌组织的总 mRNA,用半定量 RT-PCR 的方法检测 MKRN1和 HSP90基因 mRNA 的表达情况。结果 50例喉鳞癌中有26例 MKRN1基因 mRNA 表达下调,占52%(26/50);23例 HSP90基因mRNA 表达上调,占46%(23/50)。MKRN1基因在肿瘤组织中的表达水平为0.74±0.63,在癌旁正常对照组织中为1.21±0.76,(P<0.01)。HSP90基因在肿瘤组织中表达水平为1.82±1.25,而在癌旁正常对照组织中为1.23±1.04,(P<0.05),差异具有统计学意义。MKRN1与 HSP90基因的表达存在负相关(r=0.458,P<0.05)。HSP90基因表达情况与肿瘤的病理分期和患者年龄相关(P<0.05),MKRN1的表达与肿瘤的临床特征均无相关性(P>0.05)。结论喉癌组织中 MKRN1和 HSP90基因mRNA 的表达异常存在相关性,二者表达平衡的破坏可能在喉癌的发生发展中起着重要的作用。

关键词：喉鳞状细胞癌 MKRN1 HSP90

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抗维生素D佝偻病PHEX基因突变分析

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国际遗传学杂志 2008年第4期31卷 251-253+276页

作者：王静金春莲任梅宏林长坤武盈玉孙开来中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室中国医科大学第二临床医院儿科

目的研究10例家族性及非家族性(散发)抗维生素 D 佝偻病患者 PHEX 基因突变,初步探讨我国东北地区抗维生素 D 佝偻病患者 PHEX 基因突变的类型。方法应用常规饱和酚-氯仿法提取基因组 DNA,聚合酶链反应扩增 PHEX 基因22个外显子序列,DG... 详细信息

目的研究10例家族性及非家族性(散发)抗维生素 D 佝偻病患者 PHEX 基因突变,初步探讨我国东北地区抗维生素 D 佝偻病患者 PHEX 基因突变的类型。方法应用常规饱和酚-氯仿法提取基因组 DNA,聚合酶链反应扩增 PHEX 基因22个外显子序列,DGGE 方法结合测序检测突变。结果 3名患者检测出 PHEX 基因突变:患者(H11)检测出16外显子上游46 bp(T>C)突变;患者(H1,H2)检测出18外显子1861(C>T)(Gin621X)的无义突变。结论 PHEX 基因突变是抗维生素 D 佝偻病的致病原因。检测到的这两种 PHEX 基因突变为国际上首次报道的新的突变类型。

关键词：抗维生素 D 佝偻病 PHEX 基因 DGGE

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中国人群CYP1A1 SNPrs4646903遗传多态性研究

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中国热带医学 2008年第1期8卷 13-15,18页

作者：刘春莲顾继伟彭亮焦海燕宁夏医学院附属医院生殖医学中心宁夏银川750004 宁夏医学院附属医院心胸外科宁夏银川750004 宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室

目的研究CYP1A1 SNPrs4646903在宁夏地区正常女性人群中的基因型频率和等位基因频率分布特征,并与国内其它人群进行比较,获得该位点人群的遗传学数据。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术及测序分析对154例宁夏... 详细信息

目的研究CYP1A1 SNPrs4646903在宁夏地区正常女性人群中的基因型频率和等位基因频率分布特征,并与国内其它人群进行比较,获得该位点人群的遗传学数据。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术及测序分析对154例宁夏地区汉族女性正常人的CYP1A1 SNP rs4646903分布进行测定,并利用χ2检验比较本地与中国各地人群基因频率分布差异。结果SNP rs4646903突变纯合子(CC基因型)、突变杂合子(TC基因型)和野生纯合子(TT基因型)在宁夏人群中的基因型频率分别为11.7%、47.4%、40.9%;SNP rs4646903T和C等位基因频率在宁夏人群中为64.6%、35.4%,其等位基因和基因型频率分布与中国广州人和河南人群的差异有统计学意义(P<0.05),但与其它各地的研究结果统计无差异。结论中国各地人群CYP1A1 SNP rs4646903基因型频率和等位基因频率分布不同,具有其特有的群体遗传学特征。

关键词： CYP1A1 SNP rs4646903 宁夏汉族

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亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与缺血性卒中

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国际脑血管病杂志 2008年第11期16卷 870-875页

作者：陈芳郑红许予明焦作市人民医院神经内科 454000 郑州大学基础医学院细胞生物与医学遗传学教研室 450052 郑州大学医学院附属第一医院神经内科 450052

近年来的研究表明，高同型半胱氨酸血症通过多种机制造成血管内皮损伤，破坏机体凝血和纤溶系统，影响脂质代谢，是卒中的独立危险因素。亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）是体内同型半胱氨酸代谢途径的关键酶，该酶含量不足或活性下降将... 详细信息

近年来的研究表明，高同型半胱氨酸血症通过多种机制造成血管内皮损伤，破坏机体凝血和纤溶系统，影响脂质代谢，是卒中的独立危险因素。亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）是体内同型半胱氨酸代谢途径的关键酶，该酶含量不足或活性下降将直接导致同型半胱氨酸在体内的蓄积，从而引起高同型半胱氨酸血症。虽然许多研究发现MTHFR基因突变是该酶缺乏或活性下降的主要原因，但是MTHFR基因突变与缺血性脑血管病的相关关系目前颇有争议。文章就MTHFR基因多态性与缺血性卒中的关系进行综述。

关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性缺血性卒中

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RNAi抑制NF-κB通路相关基因对喉鳞癌凋亡及转移的影响

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现代肿瘤医学 2008年第3期16卷 351-354页

作者：黄带发富伟能孙开来徐振明董卫东沈阳军区总医院辽宁沈阳110015 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室辽宁沈阳110001

目的:用RNA干涉方法探讨NF-κB通路参与喉癌发生、发展的可能机制。方法:RT-PCR、Western Blot检测喉鳞癌组织中NF-κB通路中相关基因表达,RNA干涉方法抑制p65,p50表达,流式细胞仪,TUNEL方法检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭力。结果... 详细信息

目的:用RNA干涉方法探讨NF-κB通路参与喉癌发生、发展的可能机制。方法:RT-PCR、Western Blot检测喉鳞癌组织中NF-κB通路中相关基因表达,RNA干涉方法抑制p65,p50表达,流式细胞仪,TUNEL方法检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭力。结果:36例喉鳞癌组织中21例p65mRNA表达上调(58.33%)高于癌旁组织(P=0.012),13例出现p50mRNA表达上调(36.11%),但与癌旁组织比较无显著差异(P=0.602)。喉鳞癌组织的p65蛋白表达明显较癌旁组织增强(P=0.044),而p50蛋白表达无显著差异。特异siRNA转染Hep2细胞明显抑制p50,p65基因表达,该作用可持续10天。RNAi抑制p65基因表达使Hep2细胞凋亡率增加,在转染后第7天最高达29.89%,与对照组比较升高超过10倍(P=0.020);同时使Hep2细胞侵袭力明显下降(P=0.003),而干涉p50基因对细胞凋亡及细胞侵袭性影响不明显。结论:RNAi抑制p65表达诱导Hep2细胞凋亡、抑制细胞侵袭力,提示抑制p65表达与常规治疗结合可能成为改善喉癌预后的选择。

关键词：喉鳞状细胞癌 NF—κB通路 RNA干涉 Hep2细胞

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