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中国实用口腔科杂志 2023年第5期16卷 513-516,521页

作者：赵静雯薛明中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病学教研室辽宁省口腔疾病重点实验室辽宁沈阳110002

根管治疗术是目前治疗牙髓病和根尖周病变最有效的方法,其中的首要步骤是髓腔进入和初预备。形成操作便宜形有利于根管系统的清理和减少机械预备并发症的发生,对于高质量完成根管治疗和预防医源性问题至关重要。文章就根管治疗中便宜形... 详细信息

根管治疗术是目前治疗牙髓病和根尖周病变最有效的方法,其中的首要步骤是髓腔进入和初预备。形成操作便宜形有利于根管系统的清理和减少机械预备并发症的发生,对于高质量完成根管治疗和预防医源性问题至关重要。文章就根管治疗中便宜形制备的方法、其在机械预备并发症控制方面的临床意义以及微创开髓理念做一介绍。

关键词：根管治疗便宜形直线通路机械预备并发症微创开髓

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根尖孔通畅的临床意义考量

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中国实用口腔科杂志 2023年第5期16卷 530-533页

作者：张文朔薛明中国医科大学口腔医学院.附属口腔医院牙体牙髓病学教研室辽宁省口腔疾病重点实验室辽宁沈阳110002

根尖部作为根管解剖结构中最为复杂的部分,影响着根管治疗感染控制的质量及效果。若根尖部处理不当,常导致根尖阻塞、工作长度丧失、根管偏移、台阶形成及穿孔,为了解决这些问题,常用的方法是保证根尖通畅,即在根管预备过程中使用小号... 详细信息

根尖部作为根管解剖结构中最为复杂的部分,影响着根管治疗感染控制的质量及效果。若根尖部处理不当,常导致根尖阻塞、工作长度丧失、根管偏移、台阶形成及穿孔,为了解决这些问题,常用的方法是保证根尖通畅,即在根管预备过程中使用小号根管通畅器械超出根尖狭窄部1 mm。但也有研究表明根尖通畅可能会将碎屑、药物、冲洗液等推出根尖孔导致根尖周炎症或疼痛。文章就根尖通畅的利弊及其临床意义做一介绍。

关键词：根尖通畅根管预备根尖阻塞

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TOM40介导牙髓成纤维细胞线粒体呼吸链蛋白转运调控牙髓炎症的作用和机制研究

TOM40介导牙髓成纤维细胞线粒体呼吸链蛋白转运调控牙髓炎症的作...

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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第17次牙体牙髓病学学术会议

作者：刘肖晨李兆扬张旗同济大学口腔医学院/附属口腔医院牙体牙髓病学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心

目的 :探究牙髓炎中线粒体外膜转位因子的表达变化及其通过影响牙髓成纤维细胞(DPFs)线粒体呼吸功能调控牙髓炎症发展的机制。方法:1、构建大鼠磨牙牙髓炎模型,苏木素-伊红(HE)染色观察炎症浸润和牙髓坏死面积;免疫组化染色观察细胞凋... 详细信息

目的 :探究牙髓炎中线粒体外膜转位因子的表达变化及其通过影响牙髓成纤维细胞(DPFs)线粒体呼吸功能调控牙髓炎症发展的机制。方法:1、构建大鼠磨牙牙髓炎模型,苏木素-伊红(HE)染色观察炎症浸润和牙髓坏死面积;免疫组化染色观察细胞凋亡水平、促炎因子IL-1β、TNF-α及DNA氧化损伤标志物8-OHDG表达情况。2、体外培养人来源的DPFs并以脂多糖(LPS)进行炎性刺激,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)及western blot检测IL-1β、TNF-α及促凋亡因子Bax、Bak的表达情况,TMRE探针、DCFH-DA探针和三磷酸腺苷(ATP)试剂盒检测检测线粒体呼吸功能变化;qPCR检测呼吸链核心蛋白的m RNA表达变化;western blot分别检测全细胞和线粒体中呼吸链蛋白的表达情况;高分辨荧光成像(HIS-SIM)观察呼吸链蛋白在线粒体内外的分布情况。3、转录组测序(RNA-seq)筛选炎症牙髓线粒体内外膜转位因子的差异表达基因,并通过qPCR和western blot进行验证。体外炎性刺激DPFs,qPCR、western blot及免疫荧光(IF)检测各内外膜转位因子的表达变化。4、分别构建TOM40过表达和敲减DPFs并通过LPS炎性刺激,qPCR及western blot检测IL-1β、TNF-α、Bax和Bak的表达情况,TMRE探针、DCFH-DA探针和ATP试剂盒检测线粒体呼吸功能。结果:1、体内模型中,随着暴露时间延长,炎症浸润面积增加,牙髓坏死面积增大,细胞凋亡增多,IL-1β、TNF-α及8-OHDG表达升高。2、体外DPFs细胞中,随着LPS浓度增加,IL-1β、TNF-α、Bax和Bak的m RNA和蛋白表达升高,线粒体膜电位下降,ROS升高,ATP产生减少。呼吸链核心蛋白的mRNA表达及在全细胞中的蛋白水平未见明显差异,但在线粒体中含量显著减少;HIS-SIM荧光成像显示呼吸链蛋白与线粒体共定位减少。3、RNA-seq结果显示:线粒体内外膜转位因子中,TOM40特异性表达下调,qPCR及western blot及体外DPFs中验证结果与之一致。4、在TOM40敲减的DPFs中,IL-1β、TNF-α、Bax和Bak表达上升,线粒体膜电位下降,ROS表达升高,ATP产生减少;TOM40过表达的DPFs中,IL-1β、TNF-α、Bax、Bak表达下调,线粒体膜电位回升,ROS表达减少,ATP产生增加。结论:DPFs中TOM40表达下调造成其呼吸链蛋白转运障碍、线粒体呼吸功能受损,进而导致牙髓炎症浸润。

关键词：线粒体呼吸链 Bax 核心蛋白 RNA Bak 线粒体膜电位牙髓炎症牙髓成纤维细胞 TOM40

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Pdcd1基因敲除鼠的构建及其对肿瘤生长的影响

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滨州医学院学报 2024年第6期47卷 452-458页

作者：刘润楷贾玉萱赵鑫钰李尊岭烟台毓璜顶医院检验科山东烟台264003 滨州医学院附属烟台山医院手术室山东烟台264003 滨州医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 山东省肿瘤免疫治疗研究创新团队山东烟台264003 山东省医药卫生呼吸系统感染与肿瘤免疫重点实验室山东烟台264003

目的获得程序性死亡受体-1基因(Pdcd1)敲除鼠,即C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)鼠;构建小鼠荷瘤模型,初步探究Pdcd1基因敲除对肿瘤生长的影响。方法应用CRISPR/Cas9技术,将Cas9 mRNA和靶向Pdcd 1的gRNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,利用非... 详细信息

目的获得程序性死亡受体-1基因(Pdcd1)敲除鼠,即C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)鼠;构建小鼠荷瘤模型,初步探究Pdcd1基因敲除对肿瘤生长的影响。方法应用CRISPR/Cas9技术,将Cas9 mRNA和靶向Pdcd 1的gRNA显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,利用非同源重组修复引入突变的方式,造成Pdcd1基因蛋白读码框移码和功能缺失,获得C57BL/6J-Pdcd1^(+/-)杂合子小鼠;杂合子小鼠自交,获得Pdcd1基因敲除的纯合子小鼠(C57BL/6J-Pdcd1^(-/-));接下来,应用PCR和基因测序确定小鼠基因型。提取C57BL/6J-Pdcd 1^(+/+)和C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)小鼠外周血,流式细胞仪检测各免疫细胞水平;取小鼠脾脏CD3^(+)T细胞,anti-CD3/CD28 beads激活4天后,流式细胞仪检测活化CD3^(+)T细胞表面PD-1的表达。将3×10^(6)个小鼠结肠癌细胞MC38接种于C57BL/6J-Pdcd1^(+/+)和C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠皮下,每隔2天测量一次肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;取小鼠肿瘤组织,拍照并称重,分析Pdcd1基因敲除对肿瘤生长大小的影响。结果测序结果序列对比表明,Pdcd1基因2-4号外显子之间缺失1691 bp,即Pdcd1基因产生了读码框移码突变;小鼠基因型的检测结果显示,引物P1/P2 PCR获得单一的341 bp片段,P3/P4 PCR不能获得条带,成功构建C57BL/6J-Pdcd1^(-/-)小鼠。流式检测结果显示,与C57BL/6J-Pdcd 1^(+/+)小鼠相比较,C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠外周血各免疫细胞水平无明显变化,活化的CD3^(+)T细胞表面几乎检测不到PD-1的表达。MC38小鼠皮下荷瘤模型表明,与WT小鼠相比较,C57BL/6J-Pdcd 1^(-/-)小鼠荷瘤后肿瘤生长显著被抑制。结论成功构建Pdcd1基因敲除鼠,小鼠Pdcd1基因敲除能够显著抑制肿瘤生长。

关键词：免疫检查点 PD-1 CD3^(+)T细胞肿瘤免疫

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临床路径教学法在牙体牙髓科进修医师规范化培训中的应用体会

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北京口腔医学 2022年第3期30卷 220-221页

作者：李红侯本祥李涢孙驰首都医科大学口腔医学院牙体牙髓病学教研室北京100050

临床路径(clinical pathway,CP)是一种规范临床诊疗行为、保证医疗安全与质量、控制医疗成本、优化医疗服务流程的多功能管理工具[1]。而临床路径教学法(clinical pathway teaching method,CPTM)是将CP理念引入临床教学方法中,以循证医... 详细信息

临床路径(clinical pathway,CP)是一种规范临床诊疗行为、保证医疗安全与质量、控制医疗成本、优化医疗服务流程的多功能管理工具[1]。而临床路径教学法(clinical pathway teaching method,CPTM)是将CP理念引入临床教学方法中,以循证医学证据和指南为指导来促进治疗组织和管理疾病的方法,起到规范医疗行为,提高医疗质量的作用[2]。CPTM的实施对于规范医疗服务、提高医疗质量、保证医疗安全方面具有明显优势。

关键词：医疗成本循证医学证据临床路径组织和管理临床教学方法应用体会牙体牙髓科临床诊疗

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CNV-seq技术在流产组织遗传病因学中的临床应用价值

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中国妇幼保健 2023年第9期38卷 1700-1705页

作者：孙雪晶张俊梅舒静周林魏娜席作明李有杰滨州医学院生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 聊城市东昌府区妇幼保健院检验科山东聊城252000

目的利用CNV-seq技术对流产组织或绒毛进行染色体异常分析,探讨早期流产和晚期流产患者的遗传学病因,为再生育提供指导。方法收集2015年7月—2021年8月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行流产手术患者的流产物绒毛或肌肉组织,采用CNV-seq... 详细信息

目的利用CNV-seq技术对流产组织或绒毛进行染色体异常分析,探讨早期流产和晚期流产患者的遗传学病因,为再生育提供指导。方法收集2015年7月—2021年8月在聊城市东昌府区妇幼保健院进行流产手术患者的流产物绒毛或肌肉组织,采用CNV-seq技术进行染色体异常检测。结果检测样本622例,共检出染色体异常369例(59.3%),包括常染色体非整倍体210例(33.8%),性染色体非整倍体60例(9.6%),染色体微缺失/微重复83例(13.3%),非整倍体合并微缺失/微重复16例(2.6%)。早期流产和晚期流产患者染色体异常比例分别为62.5%(324/518)和43.3%(45/104)。早期流产患者常染色体非整倍体发生率(37.3%)高于晚期流产患者(16.3%),差异有统计学意义(χ^(2)=19.50,P<0.05),早期流产患者性染色体非整备体、染色体微缺失/微重复发生率(9.8%、12.4%)与晚期流产患者(8.6%、18.3%)比较,差异均无统计学意义(χ^(2)=0.47、2.62,均P>0.05)。所有流产胚胎中共检测出83例CNVs,其中“致病性”35例(42.2%)、“可能致病性”4例(4.8%)、“临床意义不明”41例(49.4%)、“可能良性”和“良性”3例(3.6%),35例“致病性”CNVs中发现22例微缺失/微重复综合征。结论利用CNV-seq技术进行流产组织的遗传学病因分析可以明确流产原因,为遗传咨询提供依据,为再生育提供指导。

关键词：流产染色体异常病因学 CNV-seq 再生育指导

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齐墩果酸聚乙二醇修饰自组装及其对白血病细胞K562的增殖抑制作用

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山西医科大学学报 2022年第10期53卷 1227-1234页

作者：赵彬男毛晶葛堂栋张鹏霞王迪迪朴金花佳木斯大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室佳木斯154007 滨州医学院烟台附属医院医学美容科

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜... 详细信息

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜、动态光散射检测衍生物表征。CCK-8法检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞增殖抑制的影响,倒置显微镜检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞形态的影响,流式细胞术检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞凋亡的影响,Western blot检测K562细胞凋亡蛋白(Caspase-3、Caspase-9、PARP-1)及其剪切后蛋白表达。结果成功合成了齐墩果酸聚乙二醇自组装颗粒OAP5,粒径为(584.49±76.2)nm,结构为核-壳结构,电位趋近于0 mV。OAP5对白血病细胞K562具有增殖抑制作用,处理48 h后的IC_(50)为(16.10±0.64)μg/ml。OAP5处理K562细胞后,细胞密度降低,萎缩变形,折光性变差。OAP5能够促进K562细胞凋亡,剪切Caspase-3、剪切Caspase-9、剪切PARP-1表达增多(P<0.05)。结论OAP5能够通过诱导白血病细胞K562凋亡作用而抑制K562细胞增殖,为齐墩果酸抗肿瘤临床应用提供了依据。

关键词：齐墩果酸聚乙二醇自组装 K562 凋亡

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细胞自噬与肝细胞癌的研究进展

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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1514-1517页

作者：吴娜王东白咸勇滨州医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

细胞自噬是真核生物维持内环境稳态的一种保护性机制。同时,在维持肿瘤细胞存活及能量代谢方面具有重要作用,并通过不同机制影响肝癌的治疗效果。如肝细胞通过自噬维持肝内稳态,自噬引起肝癌细胞产生耐药性,以及自噬抑制剂和天然提取物... 详细信息

细胞自噬是真核生物维持内环境稳态的一种保护性机制。同时,在维持肿瘤细胞存活及能量代谢方面具有重要作用,并通过不同机制影响肝癌的治疗效果。如肝细胞通过自噬维持肝内稳态,自噬引起肝癌细胞产生耐药性,以及自噬抑制剂和天然提取物通过自噬途径发挥抗肝癌作用。对深入探讨自噬在肝癌预防和治疗中的调控具有重大意义。

关键词：自噬肝细胞癌治疗自噬相关基因

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羟基红花黄色素A抑制人肝癌细胞系Huh7发生上皮-间质转化

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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1423-1427页

作者：吴娜王东李京敏白咸勇滨州医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室山东烟台264003

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细... 详细信息

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞系Huh7迁移及侵袭的影响,并通过体内外实验探究其是否影响肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)。方法体外培养Huh7细胞,分为对照组、HSYA 80和160μmol/L实验组,分别处理24 h,用transwell小室法和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测细胞vimentin和E-cadherin蛋白表达;建立Huh7细胞裸鼠皮下移植瘤模型,HE染色观察移植瘤和肝脏组织形态;免疫组化检测移植瘤组织TGF-β1、vimentin和E-cadherin表达情况。结果与对照组相比,HSYA实验组Huh7细胞迁移与侵袭能力明显下降,E-cadherin蛋白表达升高,vimentin蛋白表达下降(P<0.05);与移植组相比,HSYA实验组(2.25 mg/kg)肝内无肿瘤细胞转移,移植瘤组织出现肿瘤细胞坏死,E-cadherin表达升高,vimentin和TGF-β1表达下降(P<0.05)。结论HSYA通过抑制肝癌细胞发生EMT,抑制肝癌细胞的迁移及侵袭能力。

关键词：羟基红花黄色素A 肝癌上皮-间质转化 TGF-β1

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比较四种机用镍钛锉根管预备后牙本质微裂的形成

比较四种机用镍钛锉根管预备后牙本质微裂的形成

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：王梓薛明中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病学教研室辽宁省口腔疾病重点实验室

目的:运用micro-CT技术比较四种机用镍钛锉(T-flex,Reciproc Blue,ProTaper Gold和ProTaper Universal)在体外根管预备后牙本质微裂形成方面的差异。方法:选用根管弯曲度不大于10°、初尖锉15#的新鲜离体双根管前磨牙32颗建立体外...

目的:运用micro-CT技术比较四种机用镍钛锉(T-flex,Reciproc Blue,ProTaper Gold和ProTaper Universal)在体外根管预备后牙本质微裂形成方面的差异。方法:选用根管弯曲度不大于10°、初尖锉15#的新鲜离体双根管前磨牙32颗建立体外根管预备模型。根据所用镍钛系统将其随机分为4组(n=8)预备至40#:T-flex组、Reciproc Blue(RB组)、ProTaper Gold(PTG组)、ProTaper Universal(PTU组)。设置micro-CT体素大小为17.18μm,扫描分析预备前、后牙根横断面图像(N=56940),观察牙本质微裂的存在。各组结果以存在裂纹的断层图像数量及百分比来表示,McNemar检验比较预备前、后牙本质裂纹的存在是否有显著差异,显著性水平设定为P<0.05。结果:总体有11.05%的图像显示有牙本质微裂(n=6288)。T-flex组、RB组、PTG组和PTU组在预备后观察到具有牙本质微裂截面的比例分别为9.82%、12.09%、12.27%和11.25%。所有在预备后断层图像上发现的牙本质裂纹在相应的预备前图像中均已存在。使用上述镍钛系统预备前磨牙根管未出现新的微裂纹。结论:未经根管预备的离体牙中预先即存在牙本质微裂纹;T-flex、RB、PTG和PTU四种机用镍钛器械对前磨牙直根管进行根管预备均不会导致新的牙本质微裂纹形成。

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