检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤 2018年第9期38卷 830-839页

作者：宋浩然王东李京敏杨艳艳牟新博白咸勇滨州医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室山东烟台264003

目的:探讨羟基红花黄色素A(hydroxysa or yellow A,HSYA)对人肝癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并判断是否通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,PKB,又称Akt)信号通路发挥作用。方法:HSYA和PI3K抑制剂LY294002处理人肝癌HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞后,分别采用CCK-8法、克隆形成实验和划痕愈合实验检测细胞增殖、克隆形成和迁移能力。FCM法检测HSYA和LY294002对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法检测HSYA和LY294002对人肝癌HepG2细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotein 2,MMP2)、caspase 3、cleaved-caspase 3和磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白表达的影响。结果:50μmol/L HSYA和10μmol/L LY294002均可抑制人肝癌HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞的增殖(P值均<0.05)。50μmol/L HSYA、10μmol/LLY294002和50μmol/LHSYA联合10μmol/LLY294002处理组HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞克隆形成率和迁移率均低于未处理的对照组(P值均<0.05),HSYA联合LY294002处理组HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞克隆形成率和迁移率低于HSYA和LY294002单独处理组(P值均<0.01)。HSYA、LY294002和HSYA联合LY294002处理组HepG2细胞凋亡率均高于未处理的对照组(P值均<0.05),HSYA联合LY294002处理组HepG2细胞凋亡率高于HSYA和LY294002单独处理组(P值均<0.01)。HSYA、LY294002和HSYA联合LY294002处理组HepG2细胞中p-Akt、MMP2和caspase 3蛋白表达水平均低于未处理的对照组(P值均<0.01),cleaved-caspase 3蛋白表达水平高于未处理的对照组(P <0.01),HSYA联合LY294002处理组的效果均好于HSYA和LY294002单独处理组(P值均<0.01)。结论:HSYA可以抑制肝癌HepG2、Hep3B和SMMC7721细胞的增殖和迁移,并可促进HepG2细胞凋亡。HSYA可能通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡。

关键词：肝肿瘤细胞增殖细胞凋亡羟基红花黄色素A PI3K/Akt通路 LY294002

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YBX3通过调节UCP1的表达调控棕色脂肪产热和能量消耗

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山东大学学报（医学版） 2024年第6期62卷 38-47页

作者：王文琴高贤龙巩永凤冯科滨州医学院基础医学院生理教研室山东烟台264003

目的探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制。方法将小鼠置于4℃环境作为冷刺激方法。用慢病毒侵染法构建过表达YBX3或者抑制YBX3表达的人血管... 详细信息

目的探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制。方法将小鼠置于4℃环境作为冷刺激方法。用慢病毒侵染法构建过表达YBX3或者抑制YBX3表达的人血管基质组分细胞系。测量细胞的耗氧率用于评估细胞的线粒体功能。向小鼠BAT注射YBX3的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)构建抑制小鼠BAT中YBX3表达的模型。检测小鼠的O_(2)消耗速率、CO_(2)释放速率和能量消耗速率用于评估小鼠能量代谢情况。采用qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光染色法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC-1α)、解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)和YBX3基因的表达。采用苏木精-伊红法染色检测BAT中脂肪细胞脂滴大小。采用RNA结合蛋白免疫沉淀提取与YBX3特异性结合的mRNA。采用二代测序方法鉴定mRNA。采用双荧光素酶报告基因系统检测YBX3与目的序列结合的情况。结果在寒冷刺激下野生型小鼠BAT中YBX3的表达显著增加(P<0.05)。过表达YBX3的人血管基质组分细胞系诱导为成熟棕色脂肪细胞后可以促进产热基因PGC-1α和UCP1的表达(P<0.05)。抑制YBX3表达的人血管基质组分细胞系诱导为成熟棕色脂肪细胞后可以抑制PGC-1α和UCP1的表达(P<0.05)、抑制线粒体氧化磷酸化(P<0.05)。与对照组相比,小鼠注射si-Ybx3之后能量消耗显著降低(P<0.05),在寒冷环境难以维持体温(P<0.05),产热基因表达被显著抑制(P<0.01),BAT中脂肪细胞脂滴大小显著增加(P<0.05)。与在25℃相比,4℃环境刺激下BAT中YBX3在细胞核中的表达显著增加(P<0.05)。YBX3能够特异性地与PGC-1αmRNA 3′非翻译区特定位点相结合(P<0.05)。YBX3能够特异性地与PGC-1α和UCP1启动子区域相结合(P<0.05)。结论BAT中YBX3能够通过调控PGC-1α和UCP1的表达影响产热和能量代谢。

关键词： Y-盒蛋白3 产热能量消耗棕色脂肪组织解偶联蛋白1

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杏仁核脑区硫化氢对创伤后应激障碍模型大鼠抑郁样行为的影响

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中国病理生理杂志 2017年第6期33卷 988-992页

作者：刘红霞潘虹王华蒋淑君曹璋辛文妤滨州医学院基础医学院生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院病理学教研室山东烟台264003 滨州医学院药理学教研室山东烟台264003

目的:探讨创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠抑郁样行为改变及杏仁核内胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)/硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)水平的变化,并研究补充H_2S对大鼠抑郁样行为的作用及机制。方法:应用连续单一应激方案制备PTSD动物模型,用强迫游泳实验和糖水偏好实验检测大鼠抑郁样行为,用Western blot技术和亚甲基蓝法检测杏仁核CBS/H_2S体系含量,用整体细胞外电生理方法记录杏仁核神经元放电情况。结果:与正常对照组比较,PTSD组大鼠强迫游泳不动时间显著延长(P<0.01),糖水偏好率显著降低(P<0.01);杏仁核脑区的CBS/H_2S体系含量显著降低(P<0.01)。与PTSD组比较,PTSD+硫氢化钠组大鼠强迫游泳不动时间显著减少(P<0.01),糖水偏好率显著升高(P<0.01)。微量压力注射L-半胱氨酸使杏仁核神经元自发放电频率显著升高(P<0.01)。结论:PTSD大鼠通过抑制杏仁核CBS/H_2S体系导致抑郁样行为加重。H_2S拮抗PTSD大鼠抑郁样行为的机制可能与其增加杏仁核神经元放电频率和兴奋性有关。

关键词：硫化氢创伤后应激障碍胱硫醚β-合成酶杏仁核

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抗大别班达病毒人源单克隆抗体Fab片段的噬菌体展示文库构建

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中国病原生物学杂志 2024年第11期19卷 1251-1254,1259页

作者：徐家馨王静静王琳徐睿杰吴玉龙李波清乔媛媛滨州医学院基础医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的构建具有潜在中和活性的人源抗大别班达病毒(SFTSV)抗体Fab片段的噬菌体展示文库。方法从具有交叉中和活性的SFTS恢复期患者血液样本中分离外周血单个核细胞(PBMC)并提取总RNA,逆转录PCR得到cDNA。以cDNA为模板进行第一轮PCR扩增,... 详细信息

目的构建具有潜在中和活性的人源抗大别班达病毒(SFTSV)抗体Fab片段的噬菌体展示文库。方法从具有交叉中和活性的SFTS恢复期患者血液样本中分离外周血单个核细胞(PBMC)并提取总RNA,逆转录PCR得到cDNA。以cDNA为模板进行第一轮PCR扩增,分别获得抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(Vκ和Vλ)序列。以pComb3XTT、pComb3Xλ质粒为模板,分别获得抗体重链恒定区(CH1)和轻链恒定区(Cκ、Cλ)序列。第二轮通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)扩增VH和CH1得到Fd重链,同样扩增Vκ和Cκ、Vλ和Cλ得到完整的κ和λ抗体轻链。第三轮以上述扩增产物为模板再次进行SOE-PCR,得到完整的抗体Fab基因片段。将Fab基因片段插入到pComb3XSS噬菌粒中,构建噬菌体展示抗体文库。结果通过三轮PCR扩增出抗体Fab片段的序列,成功构建库容量为1.875×10^(9)的噬菌体展示抗体文库。结论利用具有交叉中和活性的SFTS恢复期患者血源建立了人源抗SFTSV Fab片段的噬菌体展示抗体文库,为下一步筛选特异性单克隆中和抗体建立了可靠的前期基础。

关键词： SFTSV 噬菌体展示抗体文库库容量人源单克隆抗体

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信号肽类型对新布尼亚病毒SFTSV Gn蛋白靶向表达特征影响的研究

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中国病原生物学杂志 2023年第2期18卷 132-135,140页

作者：张凡张娟徐家馨吴玉龙李波清乔媛媛滨州医学院基础医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的研究不同类型信号肽对新布尼亚病毒(SFTSV)包膜蛋白Gn表达的影响。方法以SFTSV(SD4毒株)M段为模板PCR扩增Gn基因,双酶切后分别连接至A16H和pHL表达载体,连接产物转染293T细胞,收集细胞和上清进行Western blot、免疫荧光以及质谱检... 详细信息

目的研究不同类型信号肽对新布尼亚病毒(SFTSV)包膜蛋白Gn表达的影响。方法以SFTSV(SD4毒株)M段为模板PCR扩增Gn基因,双酶切后分别连接至A16H和pHL表达载体,连接产物转染293T细胞,收集细胞和上清进行Western blot、免疫荧光以及质谱检测,分析Gn重组蛋白的表达情况;ELISA检测Gn重组蛋白的结合活性。结果成功构建缺失载体信号肽的pA16H-Gn质粒和包含信号肽的sp-pA16H-Gn质粒,以及携带另一种载体信号肽的pHL-Fc-Gn质粒。缺失载体信号肽的pA16H-Gn质粒在细胞内外均不表达Gn重组蛋白(rGn-Fc),包含A16H载体信号肽的sp-pA16H-Gn质粒在细胞内表达Gn重组蛋白(rGn-Fc),但不能分泌表达,包含pHL载体信号肽的pHL-Fc-Gn质粒可将Gn重组蛋白(rGn-Fc)分泌表达到胞外,且具有结合活性。结论载体本身携带的信号肽会影响SFTSV Gn重组蛋白的表达,不同信号肽影响重组蛋白的表达定位。该研究为SFTSV Gn重组蛋白的开发奠定了基础,同时也为SFTSV重组疫苗的研究提供了新思路。

关键词：发热伴血小板减少综合征病毒信号肽分泌重组蛋白

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常见的病原微生物说课教学设计及体会

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科技信息 2012年第24期 154-154,156页

作者：孙旭红张玉梅袁文丹滨州医学院基础医学概论教研室

说课,是一项重要的教研活动,它能有效地提高教师素质、教学效果和教育质量,营造良好的教研活动气氛。本文以常见的病原微生物一节为例,从教材分析、教学目标、教学方法、教学流程各环节对说课进行分析阐述。

关键词：说课病原微生物教学设计

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穴位局部沉默对训练大鼠IL-2功能影响的研究

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中华中医药学刊 2017年第1期35卷 13-15页

作者：李琳金昌洙滨州医学院解剖教研室山东滨州256603 滨州医学院基础学院山东滨州256603

目的:研究阻断足三里穴对训练大鼠IL-2功能的影响。方法:将60只大鼠随机分为质粒组、阴性对照组、生理盐水组和空白组4组,并建立运动模型,对于质粒组大鼠足三里穴加压注射干扰质粒,20μg,阴性对照组大鼠足三里穴注射阴性对照质粒,每穴20... 详细信息

目的:研究阻断足三里穴对训练大鼠IL-2功能的影响。方法:将60只大鼠随机分为质粒组、阴性对照组、生理盐水组和空白组4组,并建立运动模型,对于质粒组大鼠足三里穴加压注射干扰质粒,20μg,阴性对照组大鼠足三里穴注射阴性对照质粒,每穴20μg;生理盐水组大鼠足三里穴注射生理盐水20μL;1天2次,连续注射14 d,并检测其淋巴细胞增值反应、IL-2的浓度等免疫学指标。结果:质粒组大鼠的淋巴细胞反应明显降低,质粒组(0.409±0.031)与阴性对照组(0.578±0.054)、生理盐水组(0.538±0.023)、空白组(0.552±0.042)相比较,差异均有显著性(P<0.05)。质粒组大鼠的IL-2浓度明显减少,质粒组(424.12±85.36)与阴性对照组(594.12±74.17)、生理盐水组(589.30±77.15)、空白组(578.30±87.25)相比较,差异均有显著性(P<0.05)。结论:经穴阻断可以降低训练大鼠的免疫功能,Cx43基因是经络活动的关键因素之一。

关键词： Cx43 免疫功能经穴阻断

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木犀草素对白血病K562/ADR细胞多药耐药的逆转作用及机制研究

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天津医药 2023年第12期51卷 1321-1325页

作者：周欣宇李京敏张婷贾秀红滨州医学院附属医院儿科 256603 滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室

目的探究木犀草素(Lut)对慢性髓系白血病K562/ADR细胞多药耐药性的逆转作用及其机制。方法K562和K562/ADR细胞经不同浓度阿霉素(ADR)处理24 h后,采用CCK-8实验检测K562/ADR细胞耐药倍数。Lut单独或联合ADR作用K562/ADR细胞24 h后,采用C... 详细信息

目的探究木犀草素(Lut)对慢性髓系白血病K562/ADR细胞多药耐药性的逆转作用及其机制。方法K562和K562/ADR细胞经不同浓度阿霉素(ADR)处理24 h后,采用CCK-8实验检测K562/ADR细胞耐药倍数。Lut单独或联合ADR作用K562/ADR细胞24 h后,采用CCK-8实验检测Lut的细胞毒性及对ADR的增敏作用。取对数生长期K562/ADR细胞分为0μmol/L Lut组、2μmol/L Lut组、4μmol/L Lut组,采用流式细胞术检测细胞内ADR蓄积量的变化;RT-PCR法和Western blot法分别检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶pi(GST-pi)mRNA和蛋白的表达;谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测细胞内GSH的含量。结果与K562细胞相比,K562/ADR细胞株对ADR具有明显的耐药性,耐药倍数为53.69倍。与0μmol/L Lut相比,不同浓度Lut作用于K562/ADR细胞后,细胞生长均受到不同程度的抑制(P<0.05),其中2、4μmol/L Lut对K562/ADR细胞的增殖抑制率<10%,为无毒性的Lut浓度。与0μmol/L Lut组相比,2、4μmol/L Lut组可明显增强ADR对K562/ADR的细胞增殖抑制率,增加细胞内ADR蓄积量,提高逆转耐药倍数,降低细胞内GSH含量,下调细胞中MRP1、P-gp、GST-pi、Nrf2 mRNA及蛋白的表达(P<0.05);且4μmol/L Lut作用效果较2μmol/L Lut更显著。结论Lut可抑制K562/ADR细胞增殖,逆转其对ADR的耐药性,其机制可能与Lut下调Nrf2、MRP1、P-gp、GST-pi表达,进而增加细胞内ADR蓄积量有关。

关键词：白血病髓系慢性 BCR-ABL阳性木犀草素抗药性多药核因子E2相关因子2 多药耐药相关蛋白1 P-糖蛋白谷胱甘肽-S-转移酶pi

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不同负荷规律运动对老年大鼠空间学习记忆能力的影响及其机制

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中国老年学杂志 2014年第10期34卷 2822-2824页

作者：王桂华栾海云马春蕾施真于腊梅滨州医学院基础学院生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院药学院

目的观察比较不同负荷运动对老年大鼠空间学习记忆能力的影响及其机制。方法将50只SD雄性大鼠分组为:青年对照组(3月龄)、老年对照组(16月龄)、15 min/d游泳组、30 min/d游泳组、力竭游泳组(16月龄,每周5 d,12 w),每组10只。以Morris水... 详细信息

目的观察比较不同负荷运动对老年大鼠空间学习记忆能力的影响及其机制。方法将50只SD雄性大鼠分组为:青年对照组(3月龄)、老年对照组(16月龄)、15 min/d游泳组、30 min/d游泳组、力竭游泳组(16月龄,每周5 d,12 w),每组10只。以Morris水迷宫实验、旷场实验结果和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性为指标观察运动对老年大鼠空间学习记忆能力的作用。结果老年对照组大鼠空间学习记忆能力较青年对照组显著下降(P<0.01);和老年对照组相比,15 min/d、30 min/d游泳组大鼠空间学习记忆能力均有增强(P<0.01或P<0.05),而力竭游泳组大鼠空间学习记忆能力有所降低(P>0.05)。老年对照组大鼠大脑皮层和海马AchE活性均高于青年对照组(P<0.01);与老年对照组比较,老年运动各组大鼠AchE活性均降低,尤以30 min/d游泳的作用效果明显(P<0.01)。结论适当规律运动对老年大鼠空间学习记忆能力下降有预防作用,其机制之一是基于对胆碱能系统的影响。

关键词：运动衰老空间学习记忆乙酰胆碱酯酶

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大鼠楔状核内微量注射吗啡、乙酰胆碱对中缝大核痛放电的影响

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同济医科大学学报 1994年第1期23卷 11-14页

作者：李韶张自东吴晓平滨州医学院生理学教研室山东滨州256603 同济医科大学基础医学院生理学教研室

用玻璃微电极细胞外记录神经元放电与脑核团注药方法，观察大鼠楔状核内微量注射吗啡、乙酸胆碱对中缝大核内痛兴奋性神经元痛放电频率的影响。结果表明；向楔状核分别注入吗啡和乙酰胆碱均能抑制中缝大核的痛放电；若预先向楔状核注射... 详细信息

用玻璃微电极细胞外记录神经元放电与脑核团注药方法，观察大鼠楔状核内微量注射吗啡、乙酸胆碱对中缝大核内痛兴奋性神经元痛放电频率的影响。结果表明；向楔状核分别注入吗啡和乙酰胆碱均能抑制中缝大核的痛放电；若预先向楔状核注射纳络酮和阿托品能分别拮抗吗啡及乙酰胆碱的抑制痛放电效应。单独注入纳络酮或阿托品可引起痛放电频率增加。结果提示：楔状核内某些神经元对中缝大核的痛兴奋性神经元活动起抑制作用，楔状核内的内源性阿片肽与乙酰胆碱参与这一过程，并分别由阿片受体及胆碱能M-受体介导。

关键词：楔状核中缝大核痛兴奋性神经元

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