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四川大学学报（医学版） 2008年第1期39卷 48-51页

作者：丁艳章为黄倩彭谨赵秀军徐爱丽周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 河北医科大学组织胚胎学教研室滨州医学院生理学教研室

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊... 详细信息

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊髓背角内检测Sema3A免疫阳性产物的平均光密度值(OD值),背根节内计数NP-1阳性中小神经元数。结果在L3脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.25±0.14)、14d(0.27±0.09)较正常对照组(0.37±0.87)减弱(P<0.05);在L5脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.26±0.11)较正常组减弱(P<0.05),术后14d(0.33±0.09)时有所恢复;L6脊髓节段各组Sema3A的表达无明显变化。背根节内,术后7dNP-1阳性中小神经元数(30.85±10.26)较正常组(45.06±12.47)减少(P<0.05),14d时阳性中小神经元数(40.73±12.25)较7d时有所增加(P<0.05)。结论脊髓部分去背根后,Sema3A及其受体NP-1表达的时空变化可能与脊髓损伤后可塑性有关。

关键词： Sema3A NP-1 部分去背根猫

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应用流式细胞技术检测不同方法处理的脾组织CD3含量

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首都医科大学学报 2008年第3期29卷 404-405页

作者：尚宏伟王兴翠张立新首都医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系组织与胚胎学教研室

流式细胞技术因操作简便、重复性好、结果可靠,已在免疫学和分子生物学等研究中得到广泛的应用.但流式细胞技术要求标本必须在短时间内新鲜制备,并快速标记抗体,这不利于大批量标本的流式细胞技术测定.本文应用流式细胞仪分别测定液氮... 详细信息

流式细胞技术因操作简便、重复性好、结果可靠,已在免疫学和分子生物学等研究中得到广泛的应用.但流式细胞技术要求标本必须在短时间内新鲜制备,并快速标记抗体,这不利于大批量标本的流式细胞技术测定.本文应用流式细胞仪分别测定液氮速冻脾组织和新鲜脾组织中T淋巴细胞(CD3)的含量,旨在探讨能否应用流式细胞仪对液氮速冻组织进行细胞免疫与分子生物学研究.

关键词：脾组织液氮速冻生理盐水细胞悬液流式细胞技术 CD3

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麦芽醇对AD大鼠空间记忆障碍的影响

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咸宁学院学报（医学版） 2008年第4期22卷 285-287页

作者：李成武李应续宋健武汉大学基础医学院湖北武汉430071 咸宁学院医学院解剖学教研室武汉大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系

目的探讨麦芽醇对AlCl3致阿尔茨海默病(AD)大鼠的影响。方法采用AlCl3灌胃制作AD大鼠模型,Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,免疫印迹检测tau蛋白磷酸化水平。结果麦芽醇明显缩短大鼠寻找平台的时间,降低tau蛋白磷酸化水平。结论麦芽... 详细信息

目的探讨麦芽醇对AlCl3致阿尔茨海默病(AD)大鼠的影响。方法采用AlCl3灌胃制作AD大鼠模型,Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,免疫印迹检测tau蛋白磷酸化水平。结果麦芽醇明显缩短大鼠寻找平台的时间,降低tau蛋白磷酸化水平。结论麦芽醇能有效改善因AlCl3所致的大鼠空间记忆障碍,其机制可能与抑制tau蛋白过度磷酸化有关。

关键词：麦芽醇阿尔茨海默病空间记忆 tau蛋白

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抗氧化剂对去卵巢大鼠骨密度和血清生化指标的影响

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中华内分泌代谢杂志 2008年第4期24卷 368-371页

作者：李明白晓春刘俊刘阳潘婷陈煜罗深秋南方医科大学基础医学院实验教学管理中心广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 中国人民解放军广州军区广州总医院泌尿外科南方医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室广州510515

目的研究抗氧化剂维生素C、E及还原型谷胱甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢大鼠骨密度及血清生化指标的影响。方法4月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧卵巢切除术，20只行假手术。3个月后随机从手术组和假手术组各取10只大鼠检... 详细信息

目的研究抗氧化剂维生素C、E及还原型谷胱甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢大鼠骨密度及血清生化指标的影响。方法4月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧卵巢切除术，20只行假手术。3个月后随机从手术组和假手术组各取10只大鼠检测体重、子宫湿重、左侧股骨及腰椎骨密度和血清生化指标Ca^2＋、肌酐、碱性磷酸酶（ALP）水平，以确定骨质疏松模型建立成功。确定模型建立成功后，其余动物分为A（假手术）、B（去卵巢生理盐水对照组）、C（维生素C＋维生素E）、D（GSH）、E（维生素C＋维生素E＋GSH）5组，每组10只。药物用量维生素C（750mg·kg^-1·d^-1）、GSH（125mg·kg^-1·d^-1）腹腔注射，维生素E（250mg·kg^-1·d^-1）灌胃，模型组每天以生理盐水腹腔注射。3个月后，检测各组动物左侧股骨及腰椎骨密度和血清生化指标。结果抗氧化剂治疗3个月后，与模型组相比，左侧股骨及腰椎骨密度三个治疗组均明显增加，其中D、E组增加最显著；血清ALP各组均显著降低；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）水平和血清抑制OH^-能力D、E组显著升高；丙二醛水平C、D组显著降低；各组血清Ca^2＋水平无明显改变。结论抗氧化剂维生素C、维生素E及GSH显著增加去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度，阻止血清抗氧化成分（SOD、GSH-Px）减少，提高血清抑制OH^-能力，降低脂质过氧化物丙二醛。

关键词：骨质疏松骨密度抗氧化剂

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改良混合酶消化法培养大鼠主动脉平滑肌细胞

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咸宁学院学报（医学版） 2008年第5期22卷 369-372页

作者：李成武李应续朱从丽宋健武汉大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系湖北武汉430071 咸宁学院基础医学院人体解剖学教研室武汉大学基础医学院医学研究中心

目的探讨改良酶消化法培养大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)的方法,为动脉粥样硬化等血管硬化性疾病的发病机制和防治研究提供帮助。方法提取大鼠的胸主动脉,采用混合酶消化后,采用含10%FCS RP-M I1640培养基培养。通过细胞计数观察细胞增殖... 详细信息

目的探讨改良酶消化法培养大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)的方法,为动脉粥样硬化等血管硬化性疾病的发病机制和防治研究提供帮助。方法提取大鼠的胸主动脉,采用混合酶消化后,采用含10%FCS RP-M I1640培养基培养。通过细胞计数观察细胞增殖,倒置相差显微镜观察血管平滑肌细胞的生物学性状,免疫组织化学进行细胞鉴定。结果消化肌平滑肌细胞24h后贴壁,平均贴壁率为76%,第5 d后细胞数迅速增加,至第11 d形成单层时,光镜下出现"峰-谷"样生长;传代后,细胞的生长特性无改变,α-SMA免疫组化染色检测,证实细胞是VSMC。结论改良后酶消化法能短时、高效地培养生物学特征稳定的VSMC。

关键词：酶消化法平滑肌细胞胸主动脉 SD大鼠血管硬化性疾病

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大鼠胚胎背部皮肤发育过程中毛囊干细胞的发育初探

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成都医学院学报 2008年第3期3卷 178-180页

作者：林森谢拥军李新枝宁加亮成都医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都610083 成都医学院基础医学院四队临床专业成都610083

目的探讨大鼠胚胎背部皮肤毛囊干细胞的发育规律。方法使用冰冻超薄切片后固定,结合免疫组织化学染色方法(IHC),显示出毛囊于细胞的位置和发育程度,然后对医学阳性程度表达区域使用软件分析和统计方法处理。结果大鼠胚胎背部皮肤呈现逐... 详细信息

目的探讨大鼠胚胎背部皮肤毛囊干细胞的发育规律。方法使用冰冻超薄切片后固定,结合免疫组织化学染色方法(IHC),显示出毛囊于细胞的位置和发育程度,然后对医学阳性程度表达区域使用软件分析和统计方法处理。结果大鼠胚胎背部皮肤呈现逐渐增厚的趋势,其中毛囊隆突区并不明显,但可明显观察到三种干细胞标记物在皮肤全层,尤其是基底层的表达变化。结论形态学观察说明毛囊发生初期毛囊干细胞(hair follicle stem cell,HFSC)不仅仅定位于毛囊上段,三种HFSC标志物的表达有差异。背部皮肤基底层细胞具有干细胞特性,未分化为表皮细胞或者毛囊中的各种细胞。β-integrin,CD34和K15的表达变化可能与毛囊干细胞以及毛囊的生物学特性有关。

关键词：大鼠胚胎背部皮肤毛囊干细胞

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抗氧化剂对去卵巢大鼠骨生物力学和血清生化指标的影响

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中华创伤骨科杂志 2008年第7期10卷 665-669页

作者：李明罗深秋刘俊刘阳潘婷陈煜白晓春南方医科大学基础医学院实验教学中心广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 南方医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科

目的研究抗氧化剂VitC、VitE及还原型谷光甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢骨质疏松症大鼠骨生物力学及血清生化指标的影响，探讨抗氧化剂不同方案对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法4个月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧... 详细信息

目的研究抗氧化剂VitC、VitE及还原型谷光甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢骨质疏松症大鼠骨生物力学及血清生化指标的影响，探讨抗氧化剂不同方案对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法4个月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧卵巢切除术，20只行假手术。3个月后随机从手术组和假手术组各取10只大鼠检测体质量、子宫湿重、左侧股骨及腰椎骨密度、生物力学特性和血清生化指标Ca^2＋、肌肝（Cr）、碱性磷酸酶（ALP）水平，以确定骨质疏松模型建立成功。确定模型建立成功后，其余动物分为A（假手术）、B（去卵巢生理盐水对照组，OVX control）、C（VitC＋VitE）、D（GSH）、E（VitC＋VitE＋GSH）五组，每组10只。VitC[750mg／（kg·d）]、GSH[125mg／（kg·d）]腹腔注射，VitE[250mg／（kg·d）]灌胃，模型组每天以生理盐水腹腔注射。3个月后，检测各组动物左侧股骨及第5腰椎生物力学特性和血清生化指标。结果检测骨质疏松模型实验中，模型组动物同假手术组相比，体质量明显增加，子宫萎缩，子宫湿重显著降低，左侧股骨及腰椎骨密度明显降低，左侧股骨生物力学最大载荷显著降低，血清Ca^2＋、ALP、Cr水平升高。抗氧化剂治疗3个月后，与模型组相比，治疗组D、E组左侧股骨最大载荷、弹性载荷以及第5腰椎最大载荷均明显增加；血清ALP各组均显著降低；超氧化物歧化酶（SOD）、谷光苷肽过氧化物酶（GSH—Px）水平和血清抑制OH能力D、E组显著升高；丙二醛水平C、D组显著降低；各组血清Ca^2＋水平无明显改变。结论抗氧化剂用药组合GSH和GSH＋VitC＋VitE能明显改善骨生物力学最大载荷和弹性载荷及血清抗氧化指标抑制OH^-能力、SOD和GSH—Px，对骨质疏松具有较显著改善作用。

关键词：骨质疏松生物力学抗氧化剂大鼠

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NIH3T3细胞及小鼠骨骼肌中人PH-20基因疫苗的表达

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郑州大学学报（医学版） 2007年第6期42卷 1080-1082页

作者：陈雪梅郝莉任秀花石冰涛曹靖赵青赞臧卫东郑州大学基础医学院人体解剖学教研室郑州450001 河南中医学院解剖与组织胚胎学教研室郑州450008

目的:研究人PH-20基因疫苗在体内外的表达。方法:以脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗导入NIH3T3细胞中,RT-PCR和原位杂交检测hPH-20mRNA的表达。以脂质体介导基因转染法将疫苗接种于BALB/C小鼠后腿股内侧肌,分别于接... 详细信息

目的:研究人PH-20基因疫苗在体内外的表达。方法:以脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗导入NIH3T3细胞中,RT-PCR和原位杂交检测hPH-20mRNA的表达。以脂质体介导基因转染法将疫苗接种于BALB/C小鼠后腿股内侧肌,分别于接种后第4、7、11、16天取小鼠股内侧肌进行RT-PCR检测。结果:体外转染的NIH3T3细胞阳性克隆经RT-PCR检测,可见1530bp目的条带;原位杂交结果显示阳性细胞胞浆中可见蓝紫色颗粒。取注射基因疫苗后的小鼠注射部位肌肉以RT-PCR法检测到1530bp的目的条带,空载体及生理盐水对照组未见目的条带。结论:人PH-20基因疫苗体内外均可表达。

关键词：人 PH-20 基因疫苗免疫避孕

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受致死剂量照射模型小鼠输注骨骼肌卫星细胞后造血功能的变化(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第42期11卷 8618-8620页

作者：汪涛王晓玲赵舒武唐军民天津中医药大学基础医学院组胚教研室天津市300193 北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系北京市100083

背景:骨骼肌卫星细胞是一种具有增殖、分化潜能的肌源性干细胞。近年,国外已有报道骨骼肌细胞具可被某种特定微环境因子激活分化为造血干细胞,从而具有造血重建的潜能。目的:初步验证肌源性的成体干细胞-骨骼肌卫星细胞分化为造血干细... 详细信息

背景:骨骼肌卫星细胞是一种具有增殖、分化潜能的肌源性干细胞。近年,国外已有报道骨骼肌细胞具可被某种特定微环境因子激活分化为造血干细胞,从而具有造血重建的潜能。目的:初步验证肌源性的成体干细胞-骨骼肌卫星细胞分化为造血干细胞的能力。设计:验证性动物实验。单位:天津中医药大学基础医学院组胚教研室。材料:选用雌性昆明种成年小鼠65只,体质量25～28g。出生5d昆明种乳鼠5只,均由北京大学医学部实验动物中心提供。方法:实验于2001-08/2003-08在北京大学医学部人体解剖学与组织胚胎学系细胞培养室完成。胶原酶、胰蛋白酶消化分离5只乳鼠骨骼肌卫星细胞,分离5只成年昆明种小鼠骨髓单个核细胞。取成年雌性小鼠60只作为受体,用60Coγ8.0Gy照射,然后随机分为4组:对照组不做任何处理;培养液输注组小鼠尾静脉注射DMEM/F-12培养液;卫星细胞输注组小鼠尾静脉注射卫星细胞悬液0.3mL(细胞浓度1×109L-1);骨髓细胞输注组小鼠尾静脉注射骨髓细胞悬液0.3mL(细胞浓度1×109L-1)。主要观察指标:①观察各组小鼠14d存活率。②照射后14d处死存活下来的受体小鼠:肉眼计数脾脏表面结节数;对骨髓单个核细胞涂片进行Wright-Gimesa染色。结果:①脾集落形成单位的测定:照射后14d,卫星细胞注射组小鼠脾结节数与骨髓细胞注射组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。②骨髓单个核细胞组织学鉴定结果:卫星细胞输注组与骨髓细胞输注组骨髓单个核细胞涂片中有相对较多的早期造血细胞出现,其形态符合早期造血细胞的生物学特性。③被照射鼠的存活情况:对照组和培养液输注组小鼠在被照射后9～13d全部死亡。照射后14d,卫星细胞输注组和骨髓细胞输注组分别有8和13只鼠存活。结论:骨骼肌卫星细胞具有诱导分化为造血干细胞的功能。

关键词：造血重建卫星细胞造血干细胞小鼠

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基因功能研究的方法

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四川解剖学杂志 2007年第1期15卷 57-59页

作者：李新枝蔡佩玲牟林春成都医学院基础医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室四川成都610083

1985年在加利福尼亚大学Santa Cruz分校举行的一次会议上,有人第一次提出了共同努力测出人类基因组序列的可能性,虽然这个主意引起了许多人的兴趣,但几乎没有强的支持者。1986年,诺贝尔奖获得者Renato Dulbecco于《Science》上率先提出... 详细信息

1985年在加利福尼亚大学Santa Cruz分校举行的一次会议上,有人第一次提出了共同努力测出人类基因组序列的可能性,虽然这个主意引起了许多人的兴趣,但几乎没有强的支持者。1986年,诺贝尔奖获得者Renato Dulbecco于《Science》上率先提出人类基因组计划(human genome project,HGP),旨在阐明人类基因组的3×10^9个碱基对的序列,发现人类所有基因并阐明其在染色体上的位置,破译人类的全部遗传信息,使人类第一次在分子水平上全面认识自我。自1990年正式启动以来,随着人类基因组计划和其它模式生物基因组研究的顺利进行,生命科学研究已进人后基因组时代。基因组学的研究也从结构基因组学转向功能基因组学的研究。基因组序列测定的完成仅仅是基因组计划的第一步,更大的挑战在于如何确定基因的功能和弄清全部的遗传信息。因而基因功能研究已成为生命科学领域中的重大课题,它将是21世纪生命科学研究的重要领域。经典的扣除杂交(subtractive hybridization)、差示筛选(diferential screening)、eDNA替代差异分析(representative diferential analysis,RDA)以及mRNA差异显示(diferential display)等技术已广泛应用于差异表达基因的鉴定和克隆,但这些技术和策略对于从基因组测序所获得的大量未知基因的功能研究来说是远远不够的。于是,随着后基因组时代的到来,一些能够对大量基因进行全面、系统分析的新技术应运而生。本文主要介绍近年来用于基因功能研究的较新方法。[第一段]

关键词：基因功能人类基因组序列人类基因组计划 mRNA差异显示后基因组时代功能基因组学诺贝尔奖获得者基因组序列测定

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