检索结果-内蒙古大学图书馆

生物学杂志 2024年第4期41卷 24-29页

作者：徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓湖北中医药大学、药学院、药物分析教研室武汉430071 武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学与组织胚胎学系武汉430071 武汉市蔡甸区人民医院检验科武汉430100

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳... 详细信息

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。

关键词： TLR2 慢病毒载体 B淋巴细胞 PI3K-AKT信号通路细胞增殖

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施万细胞样细胞对大鼠背根神经节细胞突起生长和神经生长因子表达的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2022年第3期48卷 684-691页

作者：杜元良任旺刘琳胡朔丹刘茗宇杜鹏飞付秀美承德医学院附属医院骨外科河北承德067000 承德医学基础医学院人体解剖学教研室河北承德067000 河北省神经损伤与修复重点实验室河北承德067000

目的:探讨施万细胞样细胞(SCLCs)对大鼠背根神经节(DRG)细胞突起生长和神经生长因子(NGF)表达的影响,阐明SCLCs促进DRG细胞生长的作用及其机制。方法:分离培养脂肪源性干细胞(ADSCs),茜素红染色检测细胞中钙化结节从而观察其分化能力,... 详细信息

目的:探讨施万细胞样细胞(SCLCs)对大鼠背根神经节(DRG)细胞突起生长和神经生长因子(NGF)表达的影响,阐明SCLCs促进DRG细胞生长的作用及其机制。方法:分离培养脂肪源性干细胞(ADSCs),茜素红染色检测细胞中钙化结节从而观察其分化能力,将其诱导分化为SCLCs,免疫荧光法检测SCLCs中S100蛋白的表达。分离培养DRG细胞,免疫组织化学染色检测DRG细胞中神经元核抗原(NeuN)蛋白的表达。建立SCLCs与DRG细胞共培养体系,将细胞分为单培养组和共培养组。HE染色观察2组DRG细胞的形态结构,计数2组DRG细胞数和DRG细胞突起数,免疫组织化学染色检测2组DRG细胞中NGF蛋白的表达,Western blotting法检测2组DRG细胞中NGF蛋白表达水平。结果:原代ADSCs培养7 d,倒置显微镜下可见数量较多、体积较大、呈长梭形的细胞类似旋涡状或铺路石样排列。茜素红染色,镜下可见钙化结节,即所培养细胞具有分化能力。免疫荧光染色,大多数细胞均呈S100染色阳性,即ADSCs可成功诱导分化为SCLCs。培养72 h后,DRG细胞突起细而长、呈花环样排列,7~8 d后,细胞数量进一步增加,胞体较大,呈圆形,突起细长,相互连接似栅栏样。免疫组织化学染色,几乎所有细胞核均被标记为棕褐色,呈NeuN染色阳性。与单培养组比较,共培养组DRG细胞数及细胞突起数均明显增加(P<0.05),共培养组DRG细胞中NGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:共培养条件下SCLCs可增加DRG细胞数和细胞突起数,提高DRG细胞中NGF蛋白的表达,发挥促进DRG细胞生长的作用。

关键词：施万细胞样细胞背根神经节细胞共培养神经生长因子神经元核抗原

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穿支形态学的层次解剖与3D定位

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中国临床解剖学杂志 2024年第5期42卷 575-580页

作者：周小兵张兴姚婕王潜熊振华丁茂超南华大学衡阳医学院人体形态实验中心湖南衡阳421001 平顶山市湛河骨伤科医院手显微外科河南平顶山467000 温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室浙江温州325035

目的基于数字解剖学技术构建穿支血管层次解剖及定位的标准方法,为穿支血管的形态学研究提供参考。方法新鲜成人标本5具,行全身动脉灌注,2具用红色乳胶-羧甲基纤维素混悬液灌注,另外3具用氧化铅-红色乳胶-羧甲基纤维素混悬液灌注。前者... 详细信息

目的基于数字解剖学技术构建穿支血管层次解剖及定位的标准方法,为穿支血管的形态学研究提供参考。方法新鲜成人标本5具,行全身动脉灌注,2具用红色乳胶-羧甲基纤维素混悬液灌注,另外3具用氧化铅-红色乳胶-羧甲基纤维素混悬液灌注。前者供大体层次解剖,后者进行多排螺旋CT扫描,应用图像工作站(Mimics,Materialise,Belgium)先行数字解剖,建立皮瓣数字解剖模型,然后大体层次解剖。结果标本的血管填充良好,边缘连续平滑,无空泡产生及中断现象。真皮下血管网,皮神经及其营养血管链清晰可见。三维图像的血管主干及大、小分支均饱满清晰,无齿状伪影,立体感强。结论①碱化、温控与混悬剂配比为数字化前期处理的三要素;②应用Mimics建立的皮瓣数字解剖模型,可对穿支进行精准的层次解剖与3D追踪定位。

关键词：穿支皮瓣血管造影数字解剖 Mimics 3D导航定位

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常规生物透射电镜无污染手工制样和染色的要点

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临床与实验病理学杂志 2023年第7期39卷 884-886页

作者：郑翔傅涛毕文杰四川大学华西基础医学与法医学院电子显微镜室成都610041 成都医学院人体解剖学教研室/发育与再生四川省重点实验室成都610500

生物常规透射电子显微镜超薄制片是必不可少的基础性技术[1]。制样过程中,预防和减少染色污染不容忽视。染色污染常见于制样的最后环节。文献报道的关注点是减少或避免铅污染或铀污染[2-4],问题尚未完全解决。近年随着染色仪的应用[5],... 详细信息

生物常规透射电子显微镜超薄制片是必不可少的基础性技术[1]。制样过程中,预防和减少染色污染不容忽视。染色污染常见于制样的最后环节。文献报道的关注点是减少或避免铅污染或铀污染[2-4],问题尚未完全解决。近年随着染色仪的应用[5],切片全自动化染色的污染现象基本排除。但全自动染色仪消耗试剂多,导致成本高、危害大[6]。相同条件下全自动染色的反差偏低。采用阵列缝硅胶染色板行批量手工染色,染色速度更快,反差更好,节省试剂的同时也减少了危害。为进一步避免手工制样的染色污染,本实验以小鼠组织为例,针对污染的主要环节,依次实验排除,总结出避免染色污染的理想条件,现介绍如下。

关键词：生物超薄切片染色污染乙酸铀柠檬酸铅四氧化锇

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Barx2和Axin2在ALS转基因小鼠脊髓中表达变化

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中国老年学杂志 2022年第14期42卷 3533-3537页

作者：郑怡雯周永佳罗梦秋刘金梦梁婵婵王巧真陈燕春王箐潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053 潍坊医学院神经疾病与再生修复实验室山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院人体解剖学教研室山东潍坊261053

目的探讨Bar家族同源域因子(Barx)2和轴向抑制蛋白(Axin)2在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠脊髓中的表达变化及其在ALS发病中的作用和意义。方法选用ALS转基因小鼠和同窝野生型(WT)小鼠,将33只成年ALS小鼠按照不同发病时期分为早(95 d... 详细信息

目的探讨Bar家族同源域因子(Barx)2和轴向抑制蛋白(Axin)2在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠脊髓中的表达变化及其在ALS发病中的作用和意义。方法选用ALS转基因小鼠和同窝野生型(WT)小鼠,将33只成年ALS小鼠按照不同发病时期分为早(95 d)、中(108 d)、晚(122 d)期ALS组各11只,并且每组配以同窝WT小鼠作为对比参照,分别为早(95 d)、中(108 d)、晚(122 d)期WT组各11只。应用免疫荧光技术检测Barx2和Axin2在ALS转基因小鼠脊髓内的表达变化规律及其与神经元的共定位关系。应用反转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测Barx2和Axin2 mRNA表达水平,应用Western印迹检测Barx2和Axin2蛋白表达。结果与早、中、晚期WT组相比,早、中、晚期ALS组脊髓内Barx2和Axin2 mRNA及蛋白表达均明显下降(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,晚期ALS及WT组脊髓中都能检测到Barx2和Axin2阳性细胞,且与神经元共表达,与晚期WT组相比,ALS组Barx2和Axin2免疫阳性反应均减弱。结论ALS转基因小鼠脊髓中Barx2和Axin2表达随病程的进展而降低,提示Barx2和Axin2与ALS密切相关。

关键词：肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脊髓 Bar家族同源域因子(Barx)2 轴向抑制蛋白(Axin)2

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基于盐酸脱钙法的兔神经解剖标本制作方法

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畜牧兽医科技信息 2023年第5期 14-16页

作者：陈云龙祖文轩霍威学陶绍国张浩轩蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院基础医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030

目的:探究家兔神经系统解剖标本的制作的解剖学方法以及不同浓度盐酸(5%、10%、15%、20%、25%)的骨骼脱钙效果差异。方法:选用15例体重以及月龄相仿的家兔,以3只为一组,共分成5组,以水合氯醛麻醉后空气栓塞处死。分别用37%甲醛溶液固定... 详细信息

目的:探究家兔神经系统解剖标本的制作的解剖学方法以及不同浓度盐酸(5%、10%、15%、20%、25%)的骨骼脱钙效果差异。方法:选用15例体重以及月龄相仿的家兔,以3只为一组,共分成5组,以水合氯醛麻醉后空气栓塞处死。分别用37%甲醛溶液固定处理,采用手术器械剥离皮肤毛发,沿腹正中线切开腹壁,取出可能会对盐酸处理液造成污染的内脏等,处理完毕后备用。分别配置5%、10%、15%、20%、25%的盐酸处理液,将以上制备的家兔分别完全浸没其中,并分别编号为A、B、C、D、E组。采用夹具将推拉测力计与l=2.25cm,r=0.5mm的钢针相连接,以家兔颅骨最厚的顶骨为采样区域,每4h针刺一次,并记录针刺透采样区域时的峰值力度,直至力度小于5N时停止,将5组数据导入SPSS进行对照分析与回归分析。取出并清洗残留盐酸处理液,对处理完毕的家兔进行解剖。结果:A~E的处理组分别耗时44h、40h、32h、28h、24h。通过解剖操作得到的标本清楚的展示了兔的中枢神经,包括大脑、小脑、延髓、脊髓;周围神经系统包括三叉神经、眼神经、面神经、8对颈神经、13对胸神经、7对腰神经、臂丛、腰丛。结论:利用基于盐酸处理骨骼脱钙法可以简便的制作出完整的兔神经系统标本,家兔颅骨盐酸脱钙模型为Y=57.085-1.072×X1-116.8×X2。

关键词：动物实验盐酸脱钙法兔神经解剖标本制作

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砷致肝细胞DNA损伤中RECQ解旋酶的表达

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环境与健康杂志 2022年第5期39卷 198-202页

作者：孙宝飞王恒张金芬何虹燕杨和平梁龙女贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室贵州贵阳550025 黔南民族医学高等专科学校

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞(L-02)的DNA损伤指标磷酸化组蛋白 2AX(γH2AX)及DNA解旋酶(RECQL1、RECQL4)的影响.方法 L-02 细胞以NaAsO2 染毒,采用MTT法检测细胞活力,设置量-效组浓度梯度为0(对照)、5、10、20 μmol/L,染... 详细信息

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞(L-02)的DNA损伤指标磷酸化组蛋白 2AX(γH2AX)及DNA解旋酶(RECQL1、RECQL4)的影响.方法 L-02 细胞以NaAsO2 染毒,采用MTT法检测细胞活力,设置量-效组浓度梯度为0(对照)、5、10、20 μmol/L,染毒 24 h.采用蛋白质印迹(WB)法检测γH2AX的蛋白表达.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(WB)法检测RECQL1、RECQL4 的mRNA和蛋白的表达.结果不同浓度染砷组L-02 的细胞活力随染砷浓度的增加细胞数量逐渐减少,细胞活力逐渐降低,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).γH2AX的蛋白表达量随染砷浓度的增加而增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).RECQL1、RECQL4 的mRNA和蛋白表达随染砷浓度的增减而减低,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论亚砷酸钠致L-02 细胞DNA损伤,可抑制RECQL1、RECQL4mRNA及蛋白的表达,进而可抑制DNA损伤修复..

关键词：砷肝损伤 DNA损伤修复 RECQL1 RECQL4

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雌激素处理的hBMSC对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

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中国应用生理学杂志 2022年第4期38卷 289-294页

作者：张晓东孙石磊王冠李霄凌姚立杰徐浩张鹏沈雷黑龙江省齐齐哈尔医学院解剖学教研室齐齐哈尔161006 北京市首都医科大学组织胚胎学系北京100069 上海复旦大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系上海200433 黑龙江省齐齐哈尔医学院基础医学院齐齐哈尔161006

目的:探讨雌激素处理人骨髓间充质干细胞(hBMSC)对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及机制。方法:采用30 mmol/L葡萄糖刺激hBMSC细胞建立高糖模型并分组:以无刺激者为高糖对照组(HG组)、以20μmol/L雌激素处理者为... 详细信息

目的:探讨雌激素处理人骨髓间充质干细胞(hBMSC)对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及机制。方法:采用30 mmol/L葡萄糖刺激hBMSC细胞建立高糖模型并分组:以无刺激者为高糖对照组(HG组)、以20μmol/L雌激素处理者为高糖雌激素组(HG+E2组)、以5μmo/L蛋白激酶B(PKB/Akt)抑制剂Triciribine预处理45 min后,再以20μmol/L雌激素处理者为高糖Akt抑制剂组(HG+E2+Triciribine组)和正常条件培养的hBMSC为正常对照组(NG组)。分别于处理12 h后,采用CCK8法检测各组hBMSC的细胞活力,硝酸还原酶法和ELISA法检测各组培养基上清中NO、VEGF和IL-8的含量(n=6),48 h后采用Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达水平(n=3)。此外,提取各组hBMSC的培养基上清作为条件培养基(CM)培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)并分组为:HG-CM组(HG组条件培养基处理)、HG+E2-CM组(HG+E2组条件培养液处理)、HG+E2+Triciribine-CM组(HG+E2+Triciribine组条件培养基处理)和HG-H组(高糖对照组,30 mmol/L葡萄糖终浓度处理),分别于12 h后,采用CCK8法检测各组HUVEC的细胞活力(n=6),24 h后采用流式细胞术检测各组HUVEC细胞的凋亡率(n=3);48 h后采用划痕实验观察各组HUVEC细胞的迁移率(n=3)。结果:与NG组相比,HG组中hBMSC细胞活力和细胞内eNOS蛋白磷酸化水平降低(P<0.05),细胞培养液上清中NO、VEGF和IL-8含量减少(P<0.05);与HG组相比,HG+E2组中hBMSC的细胞活力和细胞中eNOS蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05),细胞培养基上清中NO、VEGF和IL-8含量增加(P<0.05),而当hBMSC细胞中Akt蛋白活性被抑制后,HG+E2+Triciribine组中上述结果指标呈反向变化(P<0.05)。此外,与HG-CM组相比,HG+E2-CM组中HUVECs的细胞活力和迁移能力显著增加(P<0.05),细胞凋亡比例降低(P<0.05),而与HG+E2-CM组相比,HG+E2+Triciribine-CM组中HUVECs的细胞活力和迁移能力降低(P<0.05),细胞凋亡比例增加(P<0.05)。结论:雌激素可能通过激活hBMSC细胞Akt/eNOS信号通路,促进NO、VEGF和IL-8的分泌,进而增加HUVECs的细胞活力和迁移能力,并抑制细胞凋亡的发生,对高糖诱导的HUVECs细胞损伤发挥保护作用。

关键词：雌激素人骨髓间充质干细胞细胞损伤高糖条件人脐静脉血管内皮细胞,细胞培养

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糖皮质激素类药物在瘙痒性皮肤病治疗中的应用

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神经解剖学杂志 2024年第4期40卷 525-527页

作者：曹泽湘李雨西刘思涵王晓东李辉空军军医大学基础医学院学员一大队西安710032 武警内蒙古总队医院急诊医学科呼和浩特010010 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032

瘙痒是临床上最为常见的症状之一,可由皮肤病(如特应性皮炎、荨麻疹、皮肤干燥等)或非皮肤病引起。其中,非皮肤病引起的瘙痒又可分为系统性疾病源性瘙痒(如晚期慢性肾脏疾病、胆汁淤积、甲状腺功能亢进等)、神经疾病源性瘙痒和药物副作... 详细信息

瘙痒是临床上最为常见的症状之一,可由皮肤病(如特应性皮炎、荨麻疹、皮肤干燥等)或非皮肤病引起。其中,非皮肤病引起的瘙痒又可分为系统性疾病源性瘙痒(如晚期慢性肾脏疾病、胆汁淤积、甲状腺功能亢进等)、神经疾病源性瘙痒和药物副作用源性瘙痒等。皮肤瘙痒病因不同,其针对性治疗方法也不同。糖皮质激素类药物是治疗炎性皮肤病所致瘙痒的重要手段之一。本文就糖皮质激素类药物在瘙痒性皮肤病治疗中的应用及其作用机制进行综述。

关键词：糖皮质激素神经疾病源性瘙痒皮肤病

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高龄小鼠来源精原干细胞长期培养体系的建立

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湖北科技学院学报（医学版） 2023年第3期37卷 205-211,215页

作者：汤瑞玲范立青湖北科技学院医学部基础医学院人体解剖教研室湖北咸宁437100 中南大学湘雅医学院基础医学院生殖与干细胞工程研究所

目的建立高龄小鼠精原干细胞(SSC)体外长期培养体系。方法将5只8月龄昆明白小鼠用于本实验,组织形态学技术评估睾丸生精状态;优化睾丸体细胞去除流程、原代和传代中饲养层与生长因子组合条件,观察小鼠SSC克隆形成、增殖与传代;细胞生物... 详细信息

目的建立高龄小鼠精原干细胞(SSC)体外长期培养体系。方法将5只8月龄昆明白小鼠用于本实验,组织形态学技术评估睾丸生精状态;优化睾丸体细胞去除流程、原代和传代中饲养层与生长因子组合条件,观察小鼠SSC克隆形成、增殖与传代;细胞生物学与分子生物学技术检测小鼠SSC克隆的干细胞特征。结果高龄小鼠睾丸精曲小管存在生精损害,PLZF^(POS)精原细胞数量增加;优化实验条件后富集的精原细胞数量增加,体外成功培养传代高龄小鼠SSC克隆6个月;高龄小鼠SSC克隆具有AKP活性并表达THY-1、PLZF、OCT-4等精原干细胞标记物。结论本研究通过优化消化、富集、原代和传代培养的多个环节,成功建立高龄小鼠SSC体外长期培养体系。

关键词：高龄小鼠精原干细胞体外长期培养

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