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孕激素诱导cyclin G1在小鼠子宫内膜上皮细胞的表达及其对细胞增殖的影响

生理学报 2008年第4期60卷 541-546页

作者：马琰岩范轶白玛康卓张金虎何亚萍喻琳鳞岳利民四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

本文在体外培养条件下研究卵巢激素诱导小鼠子宫内膜上皮细胞cyclin G1的表达及细胞增殖和细胞周期进程的变化,以探讨孕激素依赖的细胞周期调控因子cyclin G1对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用。原代培养小鼠子宫内膜上皮细胞,待其生... 详细信息

本文在体外培养条件下研究卵巢激素诱导小鼠子宫内膜上皮细胞cyclin G1的表达及细胞增殖和细胞周期进程的变化,以探讨孕激素依赖的细胞周期调控因子cyclin G1对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用。原代培养小鼠子宫内膜上皮细胞,待其生长汇合后分为4组:对照组(C组)、雌激素组(E组)、孕激素组(P组)、雌、孕激素共同作用组(EP组)。加入相应激素作用24h后,用细胞免疫化学方法检测各组细胞cyclin G1的表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力,间接观察子宫内膜上皮细胞的增殖情况;用流式细胞仪检测分布在细胞周期各时相的子宫内膜上皮细胞所占百分数。细胞免疫化学结果显示,cyclin G1在C组和E组子宫内膜上皮细胞上无明显表达,而在P组和EP组子宫内膜上皮细胞中表达明显,且定位于细胞核内。MTT法结果显示,与C组相比,E组细胞活力明显增高,而P组和EP组的细胞活力均明显下降,表明雌激素能促进子宫内膜上皮细胞增殖,而孕激素则具有抑制子宫内膜上皮细胞增殖的作用。流式细胞术检测显示,与C组相比,E组中处于S期的子宫内膜上皮细胞百分数增多;P组与EP组中处于S期的子宫内膜上皮细胞百分数明显减少,而处于G1期的细胞百分数和G2/M期的细胞百分数则明显增加。上述结果提示,孕激素依赖的cyclin G1可能通过阻滞细胞周期进程来参与孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用。

关键词：细胞周期素G1 子宫内膜细胞周期孕激素

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缰核参与应激性高血压的形成及其机制研究

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生理科学进展 1998年第3期29卷 231-234页

作者：崔金娟白求恩医科大学基础医学院生理学教研室

电击大鼠足底形成应激性高血压（ＳＩＨ），研究了缰核（Ｈｂ）在其中的作用机制。损毁Ｈｂ可降低ＳＩＨ升高的幅度。ＳＩＨ鼠内外侧Ｈｂ（ＭＨｂ，ＬＨｂ）对谷氨酸（Ｇｌｕ）的敏感性高于正常鼠。足底电击使血浆和Ｈｂ内血管紧张素Ⅱ... 详细信息

电击大鼠足底形成应激性高血压（ＳＩＨ），研究了缰核（Ｈｂ）在其中的作用机制。损毁Ｈｂ可降低ＳＩＨ升高的幅度。ＳＩＨ鼠内外侧Ｈｂ（ＭＨｂ，ＬＨｂ）对谷氨酸（Ｇｌｕ）的敏感性高于正常鼠。足底电击使血浆和Ｈｂ内血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）明显升高。侧脑室和ＭＨｂ分别注射ＡｎｇⅡ或ｓａｒａｌａｓｉｎ，在ＳＩＨ鼠引起明显的血压变化。微电泳ＡｎｇⅡ、ｓａｒａｌａｓｉｎ可分别明显改变ＳＩＨ鼠Ｈｂ内神经元的放电活动。ＡｎｇⅡ可抑制Ｈｂ细胞膜上延迟整流Ｋ＋电流（Ｉｋ）通道的活动。以同样的方法观察了Ｎ－硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）和硝普钠（ＳＮＰ）在ＳＩＨ鼠中的作用。由以上可知，电击可使Ｈｂ尤其是ＭＨｂ神经元对ＡｎｇⅡ的反应性明显增强，同时也使ＡｎｇⅡ合成增多，这些变化对于敏感化了的Ｈｂ神经元的作用更强，最终发展为ＳＩＨ。

关键词：缰核应激性高血压血管紧张素Ⅱ 硝普钠钾通道

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小脑顶核损毁对淋巴细胞功能的影响

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中国应用生理学杂志 2006年第4期22卷 410-414页

作者：曹蓓蓓彭聿平邱一华南通大学基础医学院生理学教研室江苏南通226001

目的:研究小脑顶核对淋巴细胞功能的调节作用,并初步探讨介导这种调节的中枢途径。方法:用海人酸(KA)毁损大鼠双侧小脑顶核,于术后第8d,取动物肠系膜淋巴结细胞和脾脏自然杀伤(NK)细胞进行体外培养,分别用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测... 详细信息

目的:研究小脑顶核对淋巴细胞功能的调节作用,并初步探讨介导这种调节的中枢途径。方法:用海人酸(KA)毁损大鼠双侧小脑顶核,于术后第8d,取动物肠系膜淋巴结细胞和脾脏自然杀伤(NK)细胞进行体外培养,分别用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测由刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞的增殖反应,用流式细胞术测定NK细胞杀伤YAC-1肿瘤细胞的活性。同时用高效液相色谱法检测下丘脑中兴奋性神经递质谷氨酸的含量。结果:小脑双侧顶核注入KA后的第8d,小脑切片经Nissl染色,可见顶核内神经元胞体被有效破坏。此时,淋巴细胞对ConA诱导的增殖反应较双侧顶核注入生理盐水的对照组明显增强;而且NK细胞对YAC-1靶细胞的杀伤活性也明显高于对照组;同时下丘脑中谷氨酸含量较对照组明显减少。结论:小脑双侧顶核毁损可导致T和NK淋巴细胞功能明显增强,且下丘脑中谷氨酸含量显著下降,提示小脑顶核对淋巴细胞功能具有调节作用,小脑-下丘脑的谷氨酸能神经投射可能介导小脑顶核的免疫调节作用。

关键词：小脑顶核 T淋巴细胞 NK细胞下丘脑谷氨酸海人酸神经免疫调节

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头端延髓腹内侧部微量注射雌激素对大鼠内脏运动反应的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第6期30卷 674-678页

作者：聂培鹤董莉支建明戎伟芳上海交通大学基础医学院生理学教研室上海200025

目的探讨雌激素在延髓头端腹内侧部（RVM）对内脏痛的潜在调节作用。方法采用成年雌性大鼠,在浅麻醉状态下记录充胀直肠（CRD）引起的腹肌放电活动,即内脏运动反应（VMR）;RVM局部和小脑延髓池给予雌激素和（或）吗啡,观察VMR变化。结果... 详细信息

目的探讨雌激素在延髓头端腹内侧部（RVM）对内脏痛的潜在调节作用。方法采用成年雌性大鼠,在浅麻醉状态下记录充胀直肠（CRD）引起的腹肌放电活动,即内脏运动反应（VMR）;RVM局部和小脑延髓池给予雌激素和（或）吗啡,观察VMR变化。结果 RVM部位微量注射雌激素（0.01~1μmol/L,0.5μL）可剂量依赖性地增强CRD引起的VMR,这一作用的潜伏期〈2 min;小脑延髓池给予雌激素（0.1~1μmol/L,50μL）可以拮抗RVM部位给予吗啡对VMR的抑制效应,该拮抗效应随雌激素浓度的升高而增强。结论雌激素作用于RVM部位,不仅使VMR增强,还可以拮抗吗啡的中枢镇痛作用。

关键词：雌激素延髓头端腹内侧部内脏运动反应内脏痛

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铁转运相关蛋白在肌萎缩性侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化

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解剖学报 2021年第2期52卷 161-167页

作者：张雅雯高莹孙菡聪张皓云王凤斌潍坊医学院基础医学院生理学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院生命科学与技术学院山东潍坊261053 潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院基础医学概论教研室山东潍坊261053 潍坊医学院山东省神经疾病与再生修复重点实验室山东潍坊261053

目的探讨肌萎缩性侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓内铁转运相关蛋白表达变化与铁稳态失衡的关联。方法选取h SOD1G93A转基因鼠(ALS鼠)和同窝野生型鼠(WT鼠),分别于生后70、95和122 d分离脊髓,每时间点每组各9只实验动物。Western blotting... 详细信息

目的探讨肌萎缩性侧索硬化症(ALS)转基因鼠脊髓内铁转运相关蛋白表达变化与铁稳态失衡的关联。方法选取h SOD1G93A转基因鼠(ALS鼠)和同窝野生型鼠(WT鼠),分别于生后70、95和122 d分离脊髓,每时间点每组各9只实验动物。Western blotting检测脊髓组织内铁转运蛋白二价金属转运蛋白-1(DMT1)、铁转运蛋白-1(FPN1)及调节蛋白铁调节蛋白-1(IRP1)的表达;免疫荧光双重标记检测脊髓腰段前角内细胞共定位情况。结果Western blotting显示,与WT鼠比较,各时间点ALS鼠脊髓内DMT1表达均显著降低(P<0.05,P<0.01);70 d FPN1表达升高(P<0.05),95 d和122 d表达下降(P<0.01);95 d、122 d IRP1表达降低(P<0.01)。免疫荧光双重标记显示,在70 d WT鼠和ALS鼠腰段脊髓中DMT1主要与β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)共表达。与WT组相比,95 d ALS鼠脊髓腰段前角神经元内DMT1免疫反应强,而FPN1荧光强度减弱。随疾病进展,DMT1、FPN1与反应性胶质细胞共定位表达增多。IRP1随疾病进展表达强度降低。结论随ALS病程进展,发病早期神经元铁转入增加,转出减少,反应性神经胶质细胞铁转运活性增强,参与局部铁稳态失衡及脊髓前角运动神经元进行性丢失。IRP1表达降低,部分参与局部铁代谢调节。

关键词：肌萎缩侧索硬化症铁稳态二价金属转运蛋白-1 铁转运蛋白1 铁调节蛋白免疫印迹法小鼠

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白三烯B_4在类风湿关节炎发病中的作用

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中国免疫学杂志 2014年第5期30卷 689-693页

作者：吴丽梦叶剑芳谢文慧李红英詹雪琴林春平杨树龙南昌大学基础医学院生理教研室南昌330006

1 白三烯的生物合成白三烯（ Leukotrienes ， LTs ）是20世纪70年代才发现的一种脂质介质，是一类强效致炎脂质因子，而LTB4是其中一个非常重要的体内炎症调节因子。目前LTs合成机制已基本明确，系嗜酸性粒细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细... 详细信息

1 白三烯的生物合成白三烯（ Leukotrienes ， LTs ）是20世纪70年代才发现的一种脂质介质，是一类强效致炎脂质因子，而LTB4是其中一个非常重要的体内炎症调节因子。目前LTs合成机制已基本明确，系嗜酸性粒细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞或巨噬细胞等炎症细胞对各种生物信号包括致敏组织抗原激发的反应产物，这些炎症细胞膜、核膜脂质双分子层在磷脂酶A2作用下产生花生四烯酸（Arachidonic acid， AA）， AA通过环氧化酶（Cyclooxygenase，COX）和5-脂氧酶（5-lipoxygenase ，5-LO）代谢途径分别参与前列腺素（ PGI 2、PGE 2）、血栓素（ TXA 2）和LTs的生物合成。 AA通过5-、12-、15-脂氧化酶代谢为氧化二十碳烯酸（5-HPETE）后，经脱水酶迅速转换为不稳定的环氧化物LTA4，经水解酶或谷胱苷肽-5-转移酶的作用转换为二羟酸LTB4。

关键词：白三烯B4 类风湿关节炎炎症调节因子嗜酸性粒细胞发病嗜碱性粒细胞环氧化酶生物合成

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17β-雌二醇对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙的快速调节效应

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生理学报 2008年第2期60卷 169-174页

作者：王强岳利民张金虎田吉梅何亚萍四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

本文旨在研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙振荡的影响和机制,探讨E2对着床期子宫内膜基质细胞是否存在非基因组快速作用。实验的第一部分,小鼠分为6组,每组4只,即0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfox... 详细信息

本文旨在研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙振荡的影响和机制,探讨E2对着床期子宫内膜基质细胞是否存在非基因组快速作用。实验的第一部分,小鼠分为6组,每组4只,即0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)对照组、1×10-8mol/L牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)对照组、1×10-8mol/L E2组、1×10-8mol/L E2-BSA组、1×10-8mol/L E2+无钙液组、1×10-8mol/L E2+5μg/mL他莫西芬(tamoxifen)组。急性分离延迟着床小鼠孕第7天子宫内膜基质细胞,应用激光共聚焦显微镜技术实时检测各组基质细胞[Ca2+]i的变化。实验的第二部分,分离7只延迟着床小鼠孕第7天子宫内膜基质细胞,用免疫荧光法检测1×10-8mol/L E2作用前和作用后5min、15min、30min细胞内磷酸化磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的变化。基质细胞[Ca2+]i的变化结果显示,在E2,E2-BSA和E2+无钙液组中[Ca2+]i均明显升高,15min达到高峰,随后下降回到基础值。但DMSO和BSA组中[Ca2+]i未见明显变化;加入传统雌激素胞浆受体阻断剂tamoxifen不能抑制E2引起的[Ca2+]i升高。免疫荧光结果显示,加入1×10-8mol/L E2后,PLC的磷酸化水平升高,15min达高峰(P<0.001),然后逐渐下降回到基础值。结果提示,E2对延迟着床小鼠子宫内膜基质细胞[Ca2+]i的变化具有快速调节效应,该作用可能是通过非基因组途径实现的,与磷酸化PLC信号途径有关。

关键词：雌激素磷脂酶C 钙基质细胞

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不同还原性巯基氨基酸对人脐静脉内皮细胞的损伤作用研究

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华西医科大学学报 2002年第3期33卷 372-374页

作者：杨志梅王玉芳张霁顾玲王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医医学院物证教研室

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)... 详细信息

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)不仅促进脂质过氧化 ,而且可诱导细胞凋亡并可致细胞坏死。 2谷胱甘肽(GSH)呈还原性 ,对细胞有全面的保护作用。 3Hcy的氧化性最强 ,GSH则呈现出完全的还原性 ,半胱氨酸 (Cys)可能处于二者之间。结论　同型半胱氨酸可能是通过特异的抑制谷光甘肽过氧化物酶并减弱了细胞内的还原缓冲能力等机制 ,发挥与 Cys和 GSH不同的生物学效应 ,从而导致内皮细胞出现坏死和凋亡等损伤性的改变。

关键词：同型半胱氨酸半胱氨酸谷胱甘肽内皮细胞脐静脉

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乙酰胆碱对自然杀伤细胞活性的影响

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中国应用生理学杂志 2005年第3期21卷 330-333页

作者：姜建兰邱一华彭聿平南通大学基础医学院生理学教研室江苏南通226001

目的:观察乙酰胆碱(ACh)对自然杀伤(NK)细胞活性的影响,并初步探讨其作用的受体机制.方法:根据不同的实验目的,选择ACh、胆碱能受体激动剂和拮抗剂分别作用于NK细胞,以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)自然释放法检测不同实验条件... 详细信息

目的:观察乙酰胆碱(ACh)对自然杀伤(NK)细胞活性的影响,并初步探讨其作用的受体机制.方法:根据不同的实验目的,选择ACh、胆碱能受体激动剂和拮抗剂分别作用于NK细胞,以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)自然释放法检测不同实验条件下NK细胞杀伤肿瘤靶细胞(Yac)的活性.结果:ACh、M受体激动剂毛果芸香碱和N受体激动剂烟碱在10-10～10-6mol/L浓度范围内都能显著抑制NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性.M受体拮抗剂阿托品(10-8和10-7mol/L)能完全阻断同浓度ACh抑制NK细胞活性的作用;但N受体拮抗剂筒箭毒碱(10-8和10-7mol/L)不能阻断同浓度ACh抑制NK细胞活性的作用.结论:ACh可抑制NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,此作用主要由淋巴细胞上的M受体和N1受体介导.

关键词：乙酰胆碱自然杀伤细胞植物性神经神经递质神经免疫调节

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胚胎大鼠脊髓神经干细胞的培养及鉴定

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神经解剖学杂志 2009年第3期25卷 339-342页

作者：柴勇杨成石增立张丽霞张敏滨州医学院解剖学教研室滨州256603 滨州医学院病理生理学教研室滨州256603 滨州医学院实验医学研究中心滨州256603

为了探讨胚胎大鼠脊髓神经管神经干细胞体外培养、鉴定的方法,本实验在解剖显微镜下机械性分离11.5 d的胚胎大鼠脊髓神经管,并制备细胞悬液,无血清培养基培养。应用免疫荧光染色方法对原代和传代细胞进行巢蛋白(nestin)鉴定;加入胎牛血... 详细信息

为了探讨胚胎大鼠脊髓神经管神经干细胞体外培养、鉴定的方法,本实验在解剖显微镜下机械性分离11.5 d的胚胎大鼠脊髓神经管,并制备细胞悬液,无血清培养基培养。应用免疫荧光染色方法对原代和传代细胞进行巢蛋白(nestin)鉴定;加入胎牛血清诱导其分化后分别行神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)鉴定。结果显示:11.5 d胚胎大鼠脊髓神经管来源的神经干细胞经连续传代培养可形成较多克隆球,呈nestin免疫阳性;加入胎牛血清可诱导其分别向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化。本实验结果提示,利用E11.5的胚胎大鼠脊髓神经管可成功培养出大量稳定增殖并有多向分化潜能的神经干细胞,可用于进一步的研究。

关键词：神经干细胞脊髓细胞培养鉴定大鼠

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