目的:观察瓜子金皂苷己(Polygalasaponin F,PGSF)是否影响氧糖剥夺/复氧(Oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理的BV-2小胶质细胞炎性细胞因子及细胞因子信号抑制因子3(Suppressors of cytokine signaling3,SOCS3)表...
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目的:观察瓜子金皂苷己(Polygalasaponin F,PGSF)是否影响氧糖剥夺/复氧(Oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理的BV-2小胶质细胞炎性细胞因子及细胞因子信号抑制因子3(Suppressors of cytokine signaling3,SOCS3)表达,初步探讨PGSF对抗OGD/R炎症反应的机制。方法:构建BV-2小胶质细胞OGD/R体外模型,分为正常对照组、模型组、PGSF低剂量组、PGSF中剂量组及PGSF高剂量组。BV-2细胞氧糖剥夺2 h、复糖复氧6 h后提取总RNA,通过实时荧光定量多聚酶链式反应检测BV-2细胞炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及SOCS3的基因表达。结果:I/R后BV-2细胞中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及SOCS3的mRNA表达明显增加;给予PGSF处理可以逆转上述观察指标的改变。结论:PGSF在体外实验中具有抑制神经炎症的作用,SOCS3信号通路可能参与介导了PGSF的抗炎作用。
目的?探究CDP-二酰基甘油合酶1(CDS1)对小鼠海马神经细胞自噬和淀粉样蛋白沉积的影响及机制。方法 使用刚果红和免疫组织化学染色观察淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白1(PS1)双转基因小鼠海马组织淀粉样物质的沉积情况；慢病毒介导HT22细胞内APP过表达，刚果红染色观察细胞内淀粉样物质沉积情况；蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、P62蛋白表达情况；通过APP/PS1双转基因小鼠海马蛋白质组学结果，筛选出差异表达蛋白CDS1；蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中的CDS1蛋白表达情况；慢病毒介导HT22细胞APP过表达后，再过表达CDS1，采用蛋白质印迹法检测LC3-Ⅱ、P62蛋白表达情况。结果 APP/PS1双转基因小鼠海马组织及APP过表达HT22细胞中均有β-淀粉样蛋白的沉积。在APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中LC3-Ⅱ、P62蛋白均升高。从APP/PS1双转基因小鼠蛋白质组学结果中的京都基因与基因组百科全书通路分析筛选到其中一条差异代谢通路——甘油磷脂代谢通路，从该通路中获取到差异表达蛋白CDS1。与野生型C57BL/6小鼠相比，APP/PS1双转基因小鼠海马组织中CDS1 蛋白表达量下降(0.46±0.07 vs 1.00±0.25，P<0.01)；与感染空载病毒载体的HT22细胞相比，慢病毒过表达APP的HT22细胞中CDS1蛋白表达量下降(0.68±0.18 vs 1.00±0.13，P<0.01)。在APP过表达的HT22细胞过表达CDS1后，神经细胞的自噬流明显恢复(LC3-Ⅱ：1.00±0.15 vs 0.21±0.05，P<0.01；P62：1.00±0.16 vs 0.67±0.10，P<0.01)，并且Aβ沉积明显减少。结论 CDS1表达下调诱导自噬体与溶酶体融合障碍，促进阿尔茨海默病小鼠海马淀粉样物质沉积。
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