检索结果-内蒙古大学图书馆

小鼠肝癌细胞H（22）源exosomes的制备及其免疫相关蛋白的初步研究

中华肝脏病杂志 2007年第6期15卷 437-440页

作者：李静沈宜汤为学陈黎段红重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室 400016

目的分离提取和电镜观察小鼠肝癌细胞H22分泌的exosomes,并检测其含有的蛋白成分,为exosomes作为肿瘤疫苗提供理论依据。方法超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到exosomes,并经透射电镜观察鉴定,运用肽质量指纹谱质谱分析和Wester... 详细信息

目的分离提取和电镜观察小鼠肝癌细胞H22分泌的exosomes,并检测其含有的蛋白成分,为exosomes作为肿瘤疫苗提供理论依据。方法超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到exosomes,并经透射电镜观察鉴定,运用肽质量指纹谱质谱分析和Western blot检测exosomes含有的蛋白成分。结果从小鼠肝癌细胞H22中提取出exosomes,直径约为20-90 nm的膜性囊泡,呈圆形或椭圆形。该exosomes含有热休克蛋白（HSP）70、ICAM-1、延伸因子G2、动力蛋白轻链A、C-myc和Vav-2蛋白。结论超速分级离心和蔗糖密度梯度离心提取纯化exosomes的方法具有可行性,小鼠肝癌细胞H22源exosomes表达有与抗原呈递相关蛋白（HSP70、ICAM-1）,迁移相关蛋白（动力蛋白轻链A）,粘附相关蛋白（ICAM-1）,细胞骨架相关蛋白（延伸因子G2）,肿瘤相关蛋白（C-myC蛋白、Vav-2蛋白）,具有免疫原性。

关键词：癌肝细胞肿瘤治疗肽质量指纹谱 exosomes

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阿托伐他汀对ApoE基因敲除小鼠血管外膜成纤维细胞表型的影响

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中国病理生理杂志 2016年第9期32卷 1599-1607页

作者：徐芳刘颖齐洁石磊胡业佳王蔚琛蔡虹静刘巍李钰伶滨州医学院病理生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院山东滨州256603

目的:观察载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中血管外膜α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达变化,同时探讨阿托伐他汀抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:选择40只6周龄雄性ApoE^(-/-)... 详细信息

目的:观察载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中血管外膜α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达变化,同时探讨阿托伐他汀抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:选择40只6周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组和阿托伐他汀干预组,给予高脂饲料喂养。阿托伐他汀干预组给予阿托伐他汀(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。20只同龄C57BL/6小鼠给予普通饲料喂养作为正常对照组。各组小鼠喂养至10、15周龄,在各个时点处死动物,取升主动脉制备连续切片,通过Movat染色进行形态学观察,测量并计算血管外膜厚度及斑块相对面积;天狼星红染色检测胶原的表达;免疫组织化学染色检测不同时点血管外膜α-SMA及TGF-β1的表达变化。用实时荧光定量PCR检测胸主动脉外膜中TGF-β1 mRNA的表达水平,通过Western blot法检测主动脉外膜中TGF-β1蛋白的表达。结果:与模型组相比,阿托伐他汀干预组的斑块相对面积明显减小,血管外膜厚度及胶原合成明显下降;免疫组化结果显示15周龄模型组血管外膜α-SMA及TGF-β1的表达高于10周龄模型组;与模型组相比,阿托伐他汀干预组血管外膜α-SMA及TGF-β1的表达明显下降。各时点模型组的TGF-β1 mRNA和蛋白的表达明显高于对照组,给药干预后TGF-β1 mRNA和蛋白的表达明显降低。15周龄模型组血管外膜TGF-β1 mRNA和蛋白的表达高于10周龄模型组。结论:阿托伐他汀可能通过下调TGF-β1的表达调控血管外膜成纤维细胞表型的改变,进而延缓ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的进程。

关键词： ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化成纤维细胞表型阿托伐他汀

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氯通道ClC-2反义寡核苷酸对顺铂作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响

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吉林大学学报（医学版） 2009年第1期35卷 43-46,F0002页

作者：苏静周磊张宏宇孙连坤康劲松吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON... 详细信息

目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON组(转染ClC-2反义寡核苷酸)、DDP组(无义寡核苷酸与顺铂联用)和AON+DDP组(ClC-2反义寡核苷酸与顺铂联用)。应用RT-PCR检测相关基因ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达;Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭力;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移率。结果:与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达率降低(P<0.05);Transwell小室侵袭实验中对照组、AON组、DDP组和AON+DDP组侵袭细胞数分别为81.00±4.58、42.01±4.36、48.33±2.52和12.67±5.13;与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组穿透细胞数明显降低(P<0.05)。Transwell小室迁移实验中AON组、DDP组、AON+DDP组细胞迁移率(%)分别为72.40±2.20、51.48±1.29、37.87±1.50,与对照组比较均明显降低(P<0.05)。结论:①转染ClC-2反义寡核苷酸能有效抑制ClC-2 mRNA表达;②抑制ClC-2 mRNA能降低U251细胞的迁移力和侵袭力;③ClC-2 mRNA表达降低可促进顺铂对U251细胞迁移力和侵袭力的抑制作用。

关键词：氯通道ClC-2 反义寡核苷酸顺铂神经胶质瘤U251细胞肿瘤浸润

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肺炎衣原体感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用

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中华肿瘤杂志 2011年第1期33卷 18-22页

作者：张利军洪莉陈宁沈炳玲邓艳秋权伟王蓓蓓张丽莙天津医科大学基础医学院病理生理学教研室 300070

目的探讨肺炎衣原体（***）感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用,及其在肿瘤转移中的作用及机制.方法 ***增殖培养后感染HEp-2细胞,光镜下观察细胞病变,吖啶橙染色观察细胞内***包涵体的形态特点,透射电镜观察***包涵体超微结构.... 详细信息

目的探讨肺炎衣原体（***）感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用,及其在肿瘤转移中的作用及机制.方法 ***增殖培养后感染HEp-2细胞,光镜下观察细胞病变,吖啶橙染色观察细胞内***包涵体的形态特点,透射电镜观察***包涵体超微结构.采用细胞黏附实验观察***感染对HEp-2细胞黏附能力的影响.采用创伤修复实验和Transwell实验检测***感染HEp-2细胞后,细胞迁移能力的改变.结果 ***感染HEp-2细胞72 h后,细胞内的空泡状结构（即包涵体）几乎占据整个胞浆.吖啶橙染色结果显示,细胞内的包涵体呈黄绿色葡萄串状.透射电镜观察显示,包涵体内成熟的梨形原体明显增多,而圆形的网状体则较少.细胞黏附实验结果显示,***感染HEp-2细胞2 h后,***感染组黏附细胞的吸光度（A）值为0.669±0.011,明显高于对照组的A4值（0.558±0.005,P〈0.001）,***感染组的细胞黏附率为119.9%.创伤修复实验结果显示,***感染HEp-2细胞24 h后,细胞向划痕中央迁移的距离明显长于对照组（P〈0.05）.Transwell实验结果显示,***感染HEp-2细胞12 h后,***感染组和对照组的细胞迁移数目分别为（23.40±2.41）个/视野和（10.40±1.67）个/视野,差异有统计学意义（P〈0.001）.结论 ***感染能增强HEp-2细胞的黏附能力,同时还能促进HEp-2细胞迁移,提示***感染可能在喉癌转移过程中起促进作用.

关键词：喉肿瘤衣原体肺炎细胞黏附细胞迁移肿瘤转移

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人参二醇组皂苷对内毒素休克大鼠脑皮质ⅠκBα mRNA表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2005年第1期31卷 42-44页

作者：王志李金成刘潇刘喜春赵雪俭孙连坤吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的 :通过观察内毒素休克大鼠脑皮质中 L PO含量、 SOD活力和 κBα m RNA表达及人参二醇组皂苷 (PDS)对其的影响 ,探讨内毒素引起脑组织损伤的分子机制。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素休克 (L PS)组、地塞米松 (L PS+Dex)... 详细信息

目的 :通过观察内毒素休克大鼠脑皮质中 L PO含量、 SOD活力和 κBα m RNA表达及人参二醇组皂苷 (PDS)对其的影响 ,探讨内毒素引起脑组织损伤的分子机制。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素休克 (L PS)组、地塞米松 (L PS+Dex)组和人参二醇组皂苷 (L PS+PDS)组。大鼠静脉注射内毒素 (4mg· kg- 1 )4 h后测定脑组织中 L PO含量、 SOD活力及 κBα m RNA的表达。结果 :L PS+Dex组和 L PS+PDS组 L PO显著低于 L PS组 (P<0 .0 5 ) ,SOD活力明显高于 L PS组 (P<0 .0 5 )。 L PS+Dex组和 L PS+PDS组 κBαm RNA表达高于 L PS组 (P<0 .0 5 )。结论 :PDS能够上调脑组织中 κBα的表达 ,减轻内毒素引起的组织过氧化反应 ,对中枢神经系统具有保护作用 (P<0 .0 5 )。

关键词：内毒素类/副作用人参二醇/药理学休克,脓毒性/病理生理学地塞米松脂质过氧化作用

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黄芪注射液和维生素E联合使用对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

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中医杂志 2011年第17期52卷 1496-1499页

作者：蔡虹静苏庆国徐芳石磊王蔚琛胡业佳李瑞峰山东大学医学院病理生理教研室滨州医学院病理生理学教研室滨州医学院附属医院泌尿外科

目的观察黄芪注射液对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪注射液组、维生素E组、黄芪+维生素E组,每组15只,采用切除右肾、动脉夹夹闭左肾动脉1h后松开恢复血流方法复制肾缺血再灌注... 详细信息

目的观察黄芪注射液对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪注射液组、维生素E组、黄芪+维生素E组,每组15只,采用切除右肾、动脉夹夹闭左肾动脉1h后松开恢复血流方法复制肾缺血再灌注损伤动物模型。黄芪注射液组、维生素E组分别于术前1h腹腔注射黄芪注射液10mg/kg或维生素E100mg/kg,黄芪+维生素E组同时给予上述两种药物。于缺血1h,再灌注1h、24h分别检测各组血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量、尿液中肾损伤分子-1(KIM-1)、6-乙酰-β-D-氨基葡萄糖酐酶(NAG)、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平,并观察肾组织HE染色病理改变。结果与模型组比较,各治疗组血清BUN、Cr水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),尿液KIM-1、NAG水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),肾组织匀浆SOD活力升高、MDA含量降低(P<0.05或P<0.01),各治疗组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。肾组织切片镜下可见模型组大量肾小管上皮细胞肿胀、坏死,部分肾小管腔内可见蛋白性液体、红细胞或细胞碎片,治疗组肾组织病变减轻较明显。结论黄芪注射液和维生素E均可以增强SOD活性,清除氧自由基,减轻脂质过氧化作用,对缺血再灌注肾脏具有保护作用。黄芪注射液作用优于维生素E,二者联用效果更好。

关键词：肾缺血再灌注损伤黄芪注射液维生素E

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二甲双胍对STZ诱导小鼠AD样症状的保护作用的研究

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中国药理学通报 2013年第6期29卷 871-876页

作者：宋金芝熊慧丁玲郑晨王景景邓艳秋天津医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室天津300070

目的研究二甲双胍对侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)所诱导的阿尔采末病(Alzheimers disease,AD)动物模型的保护作用。方法选用Morris水迷宫试验评估二甲双胍对STZ侧脑室注射诱导的AD动物模型的学习记忆能力的影响;采用蛋白免疫印迹法分析... 详细信息

目的研究二甲双胍对侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)所诱导的阿尔采末病(Alzheimers disease,AD)动物模型的保护作用。方法选用Morris水迷宫试验评估二甲双胍对STZ侧脑室注射诱导的AD动物模型的学习记忆能力的影响;采用蛋白免疫印迹法分析二甲双胍对AD动物模型脑内细胞骨架蛋白神经丝蛋白及Tau蛋白磷酸化的表达水平的影响。结果二甲双胍对链脲佐菌素侧脑室注射所诱导的AD模型小鼠的学习记忆能力有明显的改善作用。①Morris水迷宫:定位航行试验中,STZ组平均逃避潜伏期和路径长度较对照组明显增加,二甲双胍治疗组平均逃避潜伏期和路径长度较STZ组明显减少;空间探索试验中,STZ组穿越隐匿平台次数较对照组明显减少,二甲双胍治疗组穿越隐匿平台次数较STZ组明显增加(P均<0.05)。②Westernblot:与对照组相比,STZ组细胞骨架神经丝和tau蛋白的磷酸化较正常组表达明显增多,二甲双胍治疗组细胞骨架神经丝和tau蛋白的磷酸化较STZ组明显减少(P均<0.05)。结论二甲双胍可以改善小鼠阿尔采末病(AD)样的学习记忆能力的减退和早期细胞骨架的病理学改变。

关键词：二甲双胍阿尔采末病链脲佐菌素侧脑室注射 tau蛋白神经丝磷酸化

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失血性休克大鼠淋巴管及血管压力对去甲肾上腺素反应的相关性研究

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中国应用生理学杂志 2010年第4期26卷 390-392页

作者：刘志权牛春雨赵自刚张玉平魏艳玲张静河北北方学院基础医学院病理生理学教研室张家口075000

目的:观察失血性休克(HS)大鼠淋巴管与血管对去甲肾上腺素(NE)反应性的变化,探讨淋巴管与血管反应性的关系。方法:大鼠行左侧腹部手术,分离胸导管,测量淋巴管压力(LP);股部手术,经股动脉测量平均动脉血压(MAP)。休克组经股动脉放血复制H... 详细信息

目的:观察失血性休克(HS)大鼠淋巴管与血管对去甲肾上腺素(NE)反应性的变化,探讨淋巴管与血管反应性的关系。方法:大鼠行左侧腹部手术,分离胸导管,测量淋巴管压力(LP);股部手术,经股动脉测量平均动脉血压(MAP)。休克组经股动脉放血复制HS模型(维持MAP40mmHg左右,3h),假手术(sham)组仅手术。在休克不同时间点(或相当),股静脉注射NE(5μg/***),观察给予NE前后两组大鼠LP以及MAP的变化。结果:休克即刻淋巴管对NE的反应性与sham组无明显差异,到休克0.5h时淋巴管对NE的升压反应开始减弱,至休克3h依然维持低反应性;与sham组相比,休克组血管对NE反应性呈双相表现,休克即刻血管高反应性,休克1h后对NE的升压作用开始减弱,表现为血管低反应性;休克后二者的反应性相关。结论:大鼠HS后淋巴管出现低反应性,且出现在血管低反应性之前;休克发展进程中淋巴管与血管对NE的低反应性呈正相关。

关键词：失血性休克淋巴管压力血压去甲肾上腺素

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Bestrophin 3高表达促进人肝癌细胞株HepG2的凋亡

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第4期22卷 448-453页

作者：王雷王煜霞姬明丽薛会朝新乡医学院第一附属医院普外科河南新乡453100 新乡医学院基础医学院病理生理学教研室河南新乡453003 新乡医学院基础医学院生理学教研室河南新乡453003

目的:研究Bestrophin 3高表达对人肝癌细胞株HepG2凋亡能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将Bestrophin 3腺病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI)10、20、40、80转染HepG2细胞株,Western blotting检测转染细胞内Bestrophin 3的表达,确定最佳MOI值。设对照组(未转染病毒)、LacZ组(转染携带LacZ的对照腺病毒载体)、Ad-Best3组(以最佳MOI值转染Bestrophin 3腺病毒),CCK-8法和流式细胞术分别检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞增殖、凋亡的影响,Western blotting检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞内Bcl-2、Bax以及细胞色素C表达的影响,JC-1染色观察Bestrophin 3过表达对HepG2细胞线粒体膜电位的影响。结果:Bestrophin 3腺病毒转染HepG2细胞的最佳MOI为40,转染后细胞过表达Bestrophin 3。Ad-Best3组的细胞存活率显著低于对照组和Lac Z组[(79.37±1.76)%vs(98.67±3.02)%、(99.67±3.25)%,均P<0.05],而其细胞凋亡率显著升高[(29.47±2.37)%vs(5.47±0.37)%,(4.95±0.44)%,均P<0.05]。AdBest3组HepG2细胞内Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bax的蛋白表达显著增加,导致Bcl-2/Bax比值显著降低(0.32±0.047 vs1.00±0.00,P<0.05);Ad-Best3组HepG2细胞的线粒体膜电位显著降低[(0.64±0.09)%vs(1.00±0.00)%,P<0.05],同时线粒体中细胞色素C明显减少(P<0.05),而细胞质中细胞色素C水平显著升高(P<0.05)。结论:过表达Bestrophin 3可能通过促使线粒体释放细胞色素C从而促进肝癌细胞株HepG2的凋亡。

关键词： Bestrophin 3 肝癌 HepG2细胞凋亡细胞色素c

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EGb761对脑缺血大鼠脑组织的保护作用及机制

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中国病理生理杂志 2009年第6期25卷 1217-1218页

作者：冯飞玲卢慧玲吴秋慧苏敏杨俊浩谷翠芝桂林医学院基础医学院病理生理学教研室广西桂林541004

目的:研究标准银杏叶提取物(EGb761)预先给药对脑内eNOS表达的影响,探讨EGb761脑保护作用机制。方法:96只SD大鼠随机分为4组(n=24)。正常对照组;大脑中动脉栓塞(MCAO)组;EGb 1组(EGb76130 ***-1.d-1,腹腔注射给药,连续3 d后行MCAO);EGb ... 详细信息

目的:研究标准银杏叶提取物(EGb761)预先给药对脑内eNOS表达的影响,探讨EGb761脑保护作用机制。方法:96只SD大鼠随机分为4组(n=24)。正常对照组;大脑中动脉栓塞(MCAO)组;EGb 1组(EGb76130 ***-1.d-1,腹腔注射给药,连续3 d后行MCAO);EGb 2组(EGb761 60 ***-1.d-1,其余同上)。每组动物均在手术后24 h进行神经功能评分并过度麻醉取脑计算大脑含水率、TTC染色计算梗死灶大小和免疫组化测定脑组织eNOS表达。结果:与MCAO组比较EGb761预先给药能明显减轻缺血后大鼠神经功能缺损程度(P<0.01)、降低大脑含水率(P<0.05)、缩小脑梗死灶体积(P<0.01)和显著升高脑组织eNOS表达(P<0.01)。结论:EGb761预先给药对MCAO后脑组织具有保护作用,其机制可能与上调eNOS表达有关。

关键词：脑缺血银杏叶提取物一氧化氮合酶

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