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4th International Neuroscience Symposium in China(第四届海内外华人神经科学研讨会)

作者：曾园山中山大学基础医学院组织胚胎学教研室

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RNA干涉(RNAi)及其应用

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四川解剖学杂志 2006年第1期14卷 34-37页

作者：蔡佩玲牟林春李新枝成都医学院基础医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室四川成都610083

基因沉默(gene silencing)是指生物体内的特定基因由于种种原因不表达的遗传现象,它有两方面的功能:一方面,它是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物(genetically modified organisms)的障碍;另一方面,它是植物抵御外来核酸入侵(如病毒)... 详细信息

基因沉默(gene silencing)是指生物体内的特定基因由于种种原因不表达的遗传现象,它有两方面的功能:一方面,它是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物(genetically modified organisms)的障碍;另一方面,它是植物抵御外来核酸入侵(如病毒)的一种反应,为植物抗病毒的遗传育种提供了具有实用价值的策略。近年来,不同的研究领域和生物中发现了许多新的使基因关闭或者沉默的类型,并赋予其不同的名称:植物中称为RNA共抑制(co-suppression),真菌中叫RNA压制(RNA quelling),动物中则为RNA干涉(RNA interference,RNAi)。[第一段]

关键词： RNA干涉生物体内基因沉默遗传现象遗传修饰遗传操作实用价值遗传育种基因关闭抗病毒

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红景天多糖对骨髓抑制贫血小鼠外周血及骨髓细胞周期的影响

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四川解剖学杂志 2006年第3期14卷 4-6页

作者：李静祝彼得陈永锋陈志伟成都中医药大学基础医学院解剖学与组织胚胎学教研室成都610075 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室

目的观察红景天多糖对骨髓抑制贫血小鼠外周血及骨髓细胞周期的影响,并探讨其造血调控作用机制。方法用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、流式细胞术(FCM)分别检测红景天多糖对骨髓抑制贫血小鼠外周血、骨髓有核细胞、骨髓细胞周期的... 详细信息

目的观察红景天多糖对骨髓抑制贫血小鼠外周血及骨髓细胞周期的影响,并探讨其造血调控作用机制。方法用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、流式细胞术(FCM)分别检测红景天多糖对骨髓抑制贫血小鼠外周血、骨髓有核细胞、骨髓细胞周期的影响。结果中剂量和高剂量红景天多糖能明显升高外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)及骨髓有核细胞(BMCs)数,但对血小板的作用不明显。高剂量组可促进骨髓G0/G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,增殖指数(PI)也明显升高。结论红景天多糖可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞通过G1期的限制点,进入细胞增殖周期,加速骨髓G0/G1期细胞向S期细胞、S期细胞向G2/M期细胞的转化,促进骨髓造血细胞增殖,提高外周血象,促进骨髓造血功能的恢复。

关键词：红景天多糖骨髓抑制骨髓有核细胞细胞周期

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ES细胞源性表皮干细胞与类真皮构建组织工程皮肤的体内分化

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解剖学研究 2006年第3期28卷 161-164,F0002页

作者：刘爱军黄锦桃李海标广州中医药大学组织胚胎学教研室广州510405 中山大学基础医学院组织胚胎学教研室广州510080

目的以ES细胞源性表皮干细胞为种子细胞与类真皮构建组织工程皮肤,探讨其在体内的分化。方法胎鼠皮肤成纤维细胞和大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),分别与复合凝胶-明胶海绵构建类真皮(类真皮Ⅰ、Ⅱ),植入小鼠全层皮肤缺损创面,以生物膜为载... 详细信息

目的以ES细胞源性表皮干细胞为种子细胞与类真皮构建组织工程皮肤,探讨其在体内的分化。方法胎鼠皮肤成纤维细胞和大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),分别与复合凝胶-明胶海绵构建类真皮(类真皮Ⅰ、Ⅱ),植入小鼠全层皮肤缺损创面,以生物膜为载体,把羊膜诱导后带有核标记的表皮干细胞覆盖在类真皮上,术后1～8周连续取材,苏木精-伊红染色,β1整合素、CK15、CK19、CK10和CEA免疫荧光双标和免疫组化观察。结果两组组织工程皮肤植入皮肤缺损3～4周后,创面完全长合,较厚新生皮完全覆盖创面,基底层细胞增生,形成短的细胞柱突向真皮层。新生表皮中可见核标记的细胞呈β1整合素、CK15、CK19阳性,真皮中的管腔样结构呈核荧光和CEA免疫组化双标阳性,4～8周新生表皮基底层细胞呈CK19、CK10阳性,新生表皮下可见毛囊样、皮脂腺样结构。结论ES细胞源性表皮干细胞为种子细胞与类真皮构建的两种组织工程皮肤在体内具有修复缺损皮肤及分化为表皮及毛囊样、皮脂腺样和汗腺样等皮肤附属结构的潜能。

关键词：胚胎干细胞表皮干细胞皮肤附属结构组织工程类真皮

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镁与糖尿病

镁与糖尿病

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中国微量元素科学研究会第十三届学术研讨会

作者：李相伍文永植延边大学基础医学院解剖学与组织胚胎学教研室

本文综述了低血镁与糖尿病的关系。

关键词：糖尿病胰岛素抵抗镁

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T7启动子介导体外构建Nucleostem in特异性短发夹状干扰RNA

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中国药理学通报 2006年第6期22卷 731-735页

作者：岳保红朱晓燕孙玲赵小强陈艳丽王清霞刘帅张钦宪郑州大学第一附属医院检验科郑州大学医学检验系河南郑州450052 郑州大学基础医学院组织胚胎学教研室郑州大学第一附属医院血液科河南郑州450052

目的体外构建合成针对Nuc leostem in(核干细胞因子,NS)基因的短发夹状干扰RNA(shRNA),用于进一步研究以该基因为靶目标、RNA干扰(RNA interference,RNA i)为手段的白血病基因治疗可行性。方法从Nuc leostem in基因的三个变异体cDNA共... 详细信息

目的体外构建合成针对Nuc leostem in(核干细胞因子,NS)基因的短发夹状干扰RNA(shRNA),用于进一步研究以该基因为靶目标、RNA干扰(RNA interference,RNA i)为手段的白血病基因治疗可行性。方法从Nuc leostem in基因的三个变异体cDNA共同序列中筛选出2个3′端为AA的21个碱基片段作为shRNA合成的对应序列,9个碱基的5′-UCUCUUGAA-3′作为Loop环。以23个碱基的5-′GGATC-CTAATACGACTCACTATA-3′作为T7启动子(T7 Promoter)序列,构建shRNA的体外合成双链DNA模板,一条链5′端无AA,顺序为启动子、shRNA正义信息链、Loop环、shRNA反义信息链,共70个碱基;另一条是该链的互补链,5′端带有AA,共72个碱基。在T7 RNA聚合酶(T7 RNA polym erase)作用下合成shRNA,纯化后通过凝胶电泳比较灰度值确定shRNA浓度;shRNA作用于HL-60细胞,通过观察细胞形态变化和NS-mRNA抑制率验证干扰效果。结果体外合成的两条shRNA电泳无降解和弥散现象,浓度分别为5.24μmol.L-1和3.35μmol.L-1;干扰HL-60细胞48 h后,细胞密度和聚集程度下降,细胞之间大小相差悬殊,经shRNA-NS-2作用的HL-60细胞一部分由圆形变成了梭形并有明显的伪足;与对照组相比NS-mRNA抑制率分别达到37.82%和71.88%。结论体外成功构建和合成了两条针对Nu-c leostem in基因的shRNA,且抑制该基因表达的作用明显,shRNA-NS-2使HL-60细胞形态发生了改变。所合成的shR-NA-NS-2可作为进一步研究该基因和探索白血病的基因治疗的工具。

关键词： T7启动子核干细胞因子体外构建 DNA模板短发夹状干扰RNA

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用辩证唯物主义观点指导《组织学》教学

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新疆医科大学学报 2006年第10期29卷 1012-1013页

作者：白生宾刘春燕周世雄陈红香新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830054

高等医学教育的目标是要培养一大批既有扎实专业知识又有丰富思维能力的医学专业人才,只有这样的人才才能适应人民群众日益增长的对医疗保健服务的需求.近年来我们尝试将辩证唯物主义的思想贯穿于日常的医学教学中,在教学中不只片面地... 详细信息

高等医学教育的目标是要培养一大批既有扎实专业知识又有丰富思维能力的医学专业人才,只有这样的人才才能适应人民群众日益增长的对医疗保健服务的需求.近年来我们尝试将辩证唯物主义的思想贯穿于日常的医学教学中,在教学中不只片面地讲授专业知识,同时也注重培养学生认识事物和思考问题的能力,这样不仅能增加学生的学习兴趣,提高教学效果,而且为学生将来的临床、科研工作打下良好的思维方法基础.

关键词：辩证唯物主义观点医学教学《组织学》医学专业人才高等医学教育医疗保健服务思维能力专业知识

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大鼠脊髓半横断损伤后Versican及其受体CD44的表达变化

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四川解剖学杂志 2006年第1期14卷 19-23页

作者：赵伟章为彭谨丁艳黄倩陈思秀周雪四川大学华西基础医学院组织胚胎学与神经生物学教研室 610041

目的探讨大鼠脊髓半横断（hemisected spinal cord injury，hSCI）损伤后14d硫酸软骨素蛋白多糖Versican及其受体CD44的表达变化。方法10只成年SD大鼠随机分为正常对照组和术后14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断（T9-T10）模型。14d后取... 详细信息

目的探讨大鼠脊髓半横断（hemisected spinal cord injury，hSCI）损伤后14d硫酸软骨素蛋白多糖Versican及其受体CD44的表达变化。方法10只成年SD大鼠随机分为正常对照组和术后14d组。建立成年SD大鼠脊髓半横断（T9-T10）模型。14d后取损伤位点头尾段T9、T10节段制作冰冻切片，运用Versican、CD44抗血清进行免疫组化ABC法染色。分别观察并计数脊髓腹角和Ⅰ、Ⅱ板层内Versican、CD44的免疫反应阳性细胞数。结果Vetsican主要分布于正常大鼠脊髓腹角，CD44主要分布于正常大鼠脊髓Ⅰ、Ⅱ板层和腹角。损伤后14d腹角Versican阳性细胞数较正常组明显下降（P〈0．05），Ⅰ、Ⅱ板层和腹角的CD44阳性细胞数也较正常组明显下降（P〈0．05）。而手术组损伤侧与未损伤侧Versican和CD44表达水平均无明显差异（P〉0．05）。结论大鼠脊髓半横断损伤14d后Versican、CD44表达均明显下降，提示脊髓半横断损伤对脊髓灰质内细胞表达Versican、CD44有影响。

关键词：脊髓半横断损伤 Versican CD44硫酸软骨素蛋白多糖

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针刺干预金黄地鼠视交叉上核γ-氨基丁酸的表达变化

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中国临床康复 2006年第47期10卷 164-165页

作者：刘志超宋开源王蕾刘旭光梁冬妮周奇志赵连花赵纪岚马玉琼魏焦禄欧可群蔡定均陈文玉四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室四川省成都市610041 成都中医药大学针灸推拿学院四川省成都市610075

实验于2005-10/2006-05在成都中医药大学针灸推拿学院和四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室完成。选用健康雄性叙利亚金黄地鼠10只,按随机抽签法分为电针组和捆绑对照组,每组5只。动物经驯化后进入自由运转状... 详细信息

实验于2005-10/2006-05在成都中医药大学针灸推拿学院和四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室完成。选用健康雄性叙利亚金黄地鼠10只,按随机抽签法分为电针组和捆绑对照组,每组5只。动物经驯化后进入自由运转状态,在恒定黑暗第3天于近似昼夜时间9:00分别给予电针(固定动物后,选百会、长强穴,电压1～3V,频率10～20Hz,15min)和捆绑(固定动物,不予其他处理)刺激,2h后用免疫组织化学方法检测各组金黄地鼠视交叉上核内γ-氨基丁酸免疫阳性细胞并对此进行计数。10只动物全部进入结果分析,无脱失。与捆绑对照组比较,电针组动物视交叉上核单位面积内γ-氨基丁酸阳性神经元计数增加(109.450±11.445,66.520±21.119,t=3.9963,P<0.05)。提示于近似昼夜时间9:00进行针刺可使视交叉上核γ-氨基丁酸表达增加,说明在主观白天针刺可影响视交叉上核γ-氨基丁酸的表达。

关键词：针刺疗法上交叉核 γ氨基丁酸言

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纹状体内注射胶质细胞源神经营养因子对帕金森病模型大鼠多巴胺能神经元剂量依赖性的保护

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中国临床康复 2006年第2期10卷 104-107页

作者：张思源齐建国章为何毅毕锋四川大学华西临床医学院信号转导与分子靶向治疗研究室四川省成都市610041 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室四川省成都市610041 美国贝勒医学院神经科休斯顿tx77030

目的:探讨不同剂量胶质细胞源神经营养因子对6-羟多巴制造的偏侧帕金森病大鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法:实验于2005-04/10在四川大学华西医学中心组织胚胎学与神经生物学教研室及信号转导与分子靶向治疗研究室完成。选取... 详细信息

目的:探讨不同剂量胶质细胞源神经营养因子对6-羟多巴制造的偏侧帕金森病大鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法:实验于2005-04/10在四川大学华西医学中心组织胚胎学与神经生物学教研室及信号转导与分子靶向治疗研究室完成。选取雄性SD大鼠(鼠龄1.5个月)20只。大鼠前脑内侧束注射6-羟多巴,4周后应用免疫组织化学法检测中脑黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元、小胶质细胞及星形胶质细胞数量的变化,建立帕金森病大鼠模型;取SD大鼠15只分为3组,分别为对照组、10,100μg胶质细胞源性神经营养因子处理组,每组5只。右侧前脑内侧束注射5g/L6-羟多巴4mL,制备帕金森病模型,将不同剂量的胶质细胞源性神经营养因子(5g/L或25g/L,用生理盐水溶解)注入同侧的纹状体内,对照组纹状体内用等量生理盐水替代。手术后4周,取实验动物,麻醉,灌注,切片,再行中脑抗酪氨酸羟化酶免疫组织化学反应。镜下细胞计数;应用配对T检验、ANOVA,及SNK法进行统计。结果:所有实验动物生存状况良好,未发生死亡现象,全部进入结果分析。①损伤侧酪氨酸羟化酶阳性神经元形态未见明显的改变,但数量明显减少,明显低于对侧细胞数,差异有显著性[(11.36±3.85),(115.12±17.06),t=3.078,P<0.01]。②损伤侧大多数小胶质细胞胞体变圆增大,突起变短增粗,染色变深。损伤侧明显高于对侧,差异有显著性[(292.20±19.73),(80.40±10.00),t=2.832,P<0.01]。③中脑黑质损伤侧星形胶质细胞数量显著增加,增生的GFAP阳性星形胶质细胞胞体肥大,突起变短、增粗,染色变深。损伤侧显著高于对侧,差异有显著性[(507.64±19.99),(226.88±20.30),t=2.971,P<0.01]。④损伤侧黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元细胞数明显低于对侧,差异有显著性[(10.16±2.90),(116.84±15.92),t=3.975,P<0.01]。10μg胶质细胞源性神经营养因子处理组损伤侧明显高于对侧,差异有显著性[(114.60±18.71),(66.24±17.19),t=3.811,P<0.01];100μg胶质细胞源性神经营养因子处理组损伤侧明显高于对侧,差异有显著性[(114.88±19.211),(92.72±16.29),t=3.725,P<0.01]。⑤胶质细胞源性神经营养因子处理组存活的酪氨酸羟化酶阳性神经元数量均明显高于对照组(P<0.01)。100μg胶质细胞源性神经营养因子处理组神经元存活率显著高于10μg胶质细胞源性神经营养因子处理组,差异亦具有显著性(P<0.01)。结论:纹状体内运用胶质细胞源性神经营养因子,对多巴胺能神经元具有明显的保护作用,该作用在10～100μg范围内呈剂量依赖性。

关键词：帕金森病羟多巴胺脑源性神经营养因子

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