检索结果-内蒙古大学图书馆

中国解剖学会2010年年会

作者：蔡玉文蔡朔王旭辽宁中医药大学基础医学院解剖学及组织胚胎学教研室沈阳 110032

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钟基因hClock、hBmal1在结直肠肿瘤中的表达

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肿瘤防治研究 2010年第11期37卷 1288-1291页

作者：邓香群刘保安杨军张运良贺印旎邵阳医学高等专科学校组织胚胎学教研室湖南邵阳422000 中南大学湘雅基础医学院病理学系中南大学湘雅三医院病理科湖南邵阳医学高等专科学校化学教研室湖南邵阳医学高等专科学校预防医学教研室

目的探讨人类生物钟基因hClock及hBmal1在不同Dukes分期结直肠肿瘤中的表达,研究它们的表达与结直肠肿瘤侵袭及转移的关系。方法采用原位杂交法检测结直肠肿瘤与相应瘤旁组织中hClock及hBmal1基因mRNA的表达,并采用免疫组织化学检测相... 详细信息

目的探讨人类生物钟基因hClock及hBmal1在不同Dukes分期结直肠肿瘤中的表达,研究它们的表达与结直肠肿瘤侵袭及转移的关系。方法采用原位杂交法检测结直肠肿瘤与相应瘤旁组织中hClock及hBmal1基因mRNA的表达,并采用免疫组织化学检测相应标本中hClock基因蛋白产物(CLOCK蛋白)的表达。结果 32例结直肠肿瘤中hClock mRNA阳性表达率93.75%(30/32),中或强阳性表达率78.13%(25/32);hBmal1mRNA阳性表达率71.88%(23/32),中或强阳性表达率40.63%(13/32)。两者的中或强阳性率与Dukes分期相关(P<0.05)。阳性表达的肿瘤组织对应肿瘤旁组织hClock及hBmal1基因mRNA的弱阳性表达。CLOCK蛋白中或强阳性表达率87.50%(28/32),瘤旁组织中CLOCK蛋白弱阳性率93.75%(30/32)(P<0.01)。结论 hClock、hBmal1基因与结直肠肿瘤的发生、发展及侵袭、转移有一定的相关性。

关键词： hClock基因 hBmal1基因结直肠肿瘤侵袭转移

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大鼠缺血再灌注ICAM-1表达与小动脉损伤关系的实验研究

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新疆医科大学学报 2010年第6期33卷 634-636页

作者：张丽李秀梅李龙新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室乌鲁木齐市慈善医院外科新疆乌鲁木齐830011

目的探讨大鼠缺血再灌注(I/R)时细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesion molecule-1,ICAM-1)表达与小动脉形态学改变的关系及意义。方法 70只Wistar大鼠随机分为3组:Ⅰ组:正常对照组(10只),Ⅱ组:缺血组(10只),Ⅲ组:I/R组(50只)。Ⅰ组... 详细信息

目的探讨大鼠缺血再灌注(I/R)时细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesion molecule-1,ICAM-1)表达与小动脉形态学改变的关系及意义。方法 70只Wistar大鼠随机分为3组:Ⅰ组:正常对照组(10只),Ⅱ组:缺血组(10只),Ⅲ组:I/R组(50只)。Ⅰ组由三通管放血立即处死。Ⅱ、Ⅲ组10min内放血至血压为40mmHg,并维持45min。Ⅱ组缺血45min后处死,Ⅲ组缺血45min后进行输血输液治疗,分别于再灌注1、3、6、12、24h时点处死。免疫组化染色观测ICAM-1在各组大鼠脑、肾、四肢肌肉的小动脉内皮和平滑肌细胞表达的阳性细胞数,并用光镜和透射电镜观察小动脉形态学改变。结果 (1)Ⅰ组脑、肾及四肢肌肉的小动脉ICAM-1不表达;与Ⅰ组比较,Ⅱ组ICAM-1在大鼠脑、肾及四肢肌肉的小动脉的表达变化差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ组再灌注1h脑、肾及四肢肌肉的小动脉ICAM-1表达上调(P<0.05),再灌注3h肾及四肢肌肉的小动脉ICAM-1表达达高峰,再灌注6h脑的小动脉ICAM-1表达达高峰,持续至24h;(2)光镜和电镜下Ⅱ组小动脉内皮和平滑肌轻微损伤,Ⅲ组损伤加重,以再灌注3h损伤最为显著。结论 ICAM-1在大鼠小动脉表达上调介导了I/R小动脉的损伤。

关键词：缺血再灌注损伤 ICAM-1 小动脉

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内源性神经营养因子-3在脊髓损伤后期大神经元轴突出芽中的作用

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中华实验外科杂志 2010年第12期27卷 1957-1957页

作者：王旭阳李晓莉郑伟明吴近森诸葛启钏王特为王廷华刘芬温州医学院附属第一医院神经外科 325000 温州医学院附属第一医院神经内科 325000 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室温州医学院组织胚胎学教研室

脊髓是中枢神经系统极易受损的部位，致瘫率高，严重危及人类健康，损伤后的修复也一直是医学领域的难点。神经营养因子-3（NT-3）不仅能为损伤神经元的修复提供有利的微环境，且具有维持和促进神经元存活、分化和再生等多方面的作用。... 详细信息

脊髓是中枢神经系统极易受损的部位，致瘫率高，严重危及人类健康，损伤后的修复也一直是医学领域的难点。神经营养因子-3（NT-3）不仅能为损伤神经元的修复提供有利的微环境，且具有维持和促进神经元存活、分化和再生等多方面的作用。前期研究显示，脊髓部分去传人术后早期，脊神经节（DRG）中主要是中、小型神经元表达NT-3增加。本研究旨在观察内源性神经营养因子-3在脊髓损伤后期大神经元轴突出芽中的作用。

关键词：神经营养因子-3 神经元存活损伤后期轴突出芽脊髓部内源性中枢神经系统人类健康

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衣霉素抑制细胞周期蛋白D1表达而强化TRAIL诱发凋亡的实验研究

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中国医科大学学报 2010年第7期39卷 521-524页

作者：解继胜张海燕都镇先邓娓娓王华芹右江民族医学院组织胚胎学教研室广西百色533000 中国医科大学附属第一医院老年病干诊科中国医科大学附属第一医院内分泌科沈阳110001 中国医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室沈阳110001

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合衣霉素促甲状腺未分化癌细胞株凋亡的作用机制。方法通过单用TRAIL(TRAIL组)、衣霉素(衣霉素组)、联合用药组(TRAIL+衣霉素组)对多种甲状腺未分化癌细胞株进行作用,并以正常甲状腺上皮... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合衣霉素促甲状腺未分化癌细胞株凋亡的作用机制。方法通过单用TRAIL(TRAIL组)、衣霉素(衣霉素组)、联合用药组(TRAIL+衣霉素组)对多种甲状腺未分化癌细胞株进行作用,并以正常甲状腺上皮细胞株HTori-3作对照,利用流式细胞仪分析各组细胞周期变化及各组细胞凋亡状态;采用蛋白印迹杂交法检测衣霉素处理前后各组细胞细胞周期蛋白D1蛋白表达水平;利用微小RNA干扰技术及质粒转染技术探讨细胞周期蛋白D1对依霉素增敏TRAIL效应的影响。结果 TRAIL与衣霉素单用对甲状腺癌细胞均无明显杀伤作用,最高细胞凋亡率分别为10.68%、10.14%;联合用药组细胞凋亡率最大达54.77%,与TRAIL组和衣霉素组相比,具有统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,衣霉素组和联合用药组细胞周期蛋白D1水平明显降低。微小RNA干扰可以特异性下调细胞周期蛋白D1进而增加ARO细胞对TRAIL的敏感性;而细胞周期蛋白D1过表达ARO细胞中细胞凋亡率降低22.7%。结论在体外单用TRAIL对甲状腺癌细胞增殖无明显抑制作用,衣霉素明显增加肿瘤细胞对TRAIL敏感性,其增敏机制至少部分与下调细胞周期蛋白D1水平有关。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体衣霉素甲状腺肿瘤细胞周期蛋白D1

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基于肾组织连续切片的三维实体构建

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中华生物医学工程杂志 2010年第1期16卷 33-37页

作者：常世杰沙宪政翟效月中国医科大学基础医学院生物医学工程系沈阳110001 中国医科大学基础医学院组织胚胎学教研室肾学研究室沈阳110001

目的采用肾组织连续切片探索组织三维实体构建的方法和可行性.方法 C57/BL/6J小鼠,腹主动脉灌流同定,垂直于肾长轴取组织块,锇酸后固定,Epon 812包埋,获取2.5 μm半薄连续切片400张,所有切片采用甲苯胺蓝染色.数字显微图像摄取后进行配... 详细信息

目的采用肾组织连续切片探索组织三维实体构建的方法和可行性.方法 C57/BL/6J小鼠,腹主动脉灌流同定,垂直于肾长轴取组织块,锇酸后固定,Epon 812包埋,获取2.5 μm半薄连续切片400张,所有切片采用甲苯胺蓝染色.数字显微图像摄取后进行配准,检验配准正确性,之后进行色彩校正并转化为灰度图像,并做导入前预处理.最后用MIMICS软件进行肾组织三维构建.结果间隔采用拍摄的400张光学显微切片图像作为原始数据,通过主观和客观两方面验证配准结果符合三维重构要求,使用MIMICS软件获得肾组织三维实体,三维实体的体积为51 205 497.02μm^3,表面积为18 650 385.47μm^2.生成的三维实体文件可以用于有限元分析.其组织微细结构经形态学分析正确.结论利用本方法生成的三维实体不仅可以用于可视化、形态学参数的测量等,还可以构建有限元分析的几何模型.

关键词：肾成像,三维图像处理,计算机辅助连续切片可视化

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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NSPc1-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

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山西医科大学学报 2010年第9期41卷 775-779页

作者：李辉龚燕华胡光宇阴彬武警医学院组织胚胎学教研室天津300162 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室武警医学院生物化学教研室

目的构建并鉴定NSPc1-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术以及慢病毒感染系统进一步研究NSPc1的功能。方法设计针对NSPc1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶粘/平末端的双链后,与酶切后的... 详细信息

目的构建并鉴定NSPc1-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术以及慢病毒感染系统进一步研究NSPc1的功能。方法设计针对NSPc1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶粘/平末端的双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化。用双酶切及DNA测序鉴定重组克隆。提取阳性克隆质粒并转染293T细胞,收集细胞全蛋白用Western检测RNAi效果。结果重组克隆经酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,Western检测证实设计的三条RNA干扰序列有效敲低了293T细胞中的内源性NSPc1。结论 3个NSPc1-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用基于慢病毒系统的RNAi技术来研究NSPc1基因的功能打下了基础。

关键词： RNA干扰 NSPc1 小发夹状RNA 慢病毒载体多梳家族

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利用Cre/loxp技术构建血管内敲除cdc42基因杂合子小鼠

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实用医学杂志 2010年第24期26卷 4483-4486页

作者：胡国栋陈英华张琳张磊兰雨杨晓孟莹蔡绍曦南方医科大学南方医院呼吸内科广州市510515 南方医科大学基础医学院组织胚胎学教研室广州市510515 军事医学科学院生物工程研究所遗传与发育研究室北京市100853

目的:利用Cre/loxp条件性基因敲除技术构建血管内敲除cdc42基因杂合子小鼠,并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究cdc42在维持微血管屏障中的作用提供研究平台。方法:将引进的cdc42flox/flox小鼠和血管内皮细胞特异性表达Cre重组酶的... 详细信息

目的:利用Cre/loxp条件性基因敲除技术构建血管内敲除cdc42基因杂合子小鼠,并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究cdc42在维持微血管屏障中的作用提供研究平台。方法:将引进的cdc42flox/flox小鼠和血管内皮细胞特异性表达Cre重组酶的小鼠分别进行繁殖和鉴定,然后两种小鼠进行杂交,并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为Cdc42flox/+Cre+的小鼠即为本实验所构建的血管内敲除/-cdc42基因杂合子小鼠。结果:从引进这两种小鼠开始繁殖5个月,共繁殖cdc42flox/flox小鼠40只,取其21只进行鉴定,均为cdc42flox纯合的子小鼠。血管内皮细胞特异性表达Cre重组酶的小鼠和野生型C57小鼠杂交后繁殖,共得到子代小鼠36只,其中表达Cre重组酶的小鼠17只,基因型为cdc42flox/flox与表达Cre重组酶的杂合子小鼠杂交并繁殖,得到基因型为Cdc42flox/+Cre+的小鼠10只,基因型为Cdc42/-flox/+Cre-13只。这/-两种基因型小鼠其身高、体重无明显差异。结论:本研究利用Cre/loxp技术成功构建了血管内敲除cdc42基因杂合子小鼠,为进一步构建血管内敲除cdc42基因小鼠奠定基础,为在整体动物水平研究cdc42在维持微血管屏障中的作用提供研究平台。

关键词：小鼠,基因敲除 Cre/loxp技术 cdc42 杂合子

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哈萨克族食管癌中survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体

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新疆医科大学学报 2010年第7期33卷 739-742页

作者：刘玲张丽萍陈艳李卉姜孝芳李秀梅谌宏鸣赵学信李惠武新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院科研中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院形态中心新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院组织胚胎学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DN... 详细信息

目的构建survivin基因启动子区CpG岛及全基因共构建真核表达载体,研究survivin基因启动子区的甲基化状态对该基因表达及功能的影响。方法采用PCR方法从新疆哈萨克族食管癌的cDNA表达阳性的标本中扩增出survivin基因,以阳性组织基因组DNA扩增出survivin基因启动子区CpG岛,survivin基因经双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1相连,并转入甲基化酶缺陷的大肠杆菌***1793中扩增。经测序正确后,将重组质粒及survivin基因启动子区CpG岛用HindⅢ酶切,连接后再次转入***1793中扩增。将重组质粒转染至食管癌细胞株Eca-109中,荧光显微镜观察结果。结果 DNA测序证明获得了包含ORF全长的survivin基因及其启动子区CpG岛,并将双序列成功克隆入真核表达载体pEGFP-N1中。转染后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白。结论成功构建真核表达载体,为进一步探讨survivin基因启动子区CpG岛甲基化状态对该基因在哈萨克族食管癌细胞株中的表达及功能的影响奠定了基础。

关键词： survivin 启动子区哈萨克族食管癌载体构建

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