检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2013年第3期29卷 256-260页

作者：芦永良申利红李红丽胡代曦张锡峰胡斌冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学细胞生物学遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝前体细胞株,检测对肝前体细胞增殖,细胞周期及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法重组质粒pSEB-Flag-HBx与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组... 详细信息

目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝前体细胞株,检测对肝前体细胞增殖,细胞周期及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法重组质粒pSEB-Flag-HBx与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组逆转录病毒,并感染小鼠肝前体细胞HP14.5,稻瘟菌素(blasticidin)筛选出稳定表达HBx基因的细胞克隆并扩大培养(HP14.5/HBx组),设HP14.5/Rv(空质粒pSEEB-Flag感染组)及空细胞组HP14.5组为对照组。MTS比色法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞周期中各时相所占的比例,荧光定量PCR检测cyclin D1和c-myc mRNA的表达量,Western blot法检测HBx、GSK3β、p-GSK3β(ser-9)、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等蛋白的表达。结果 RT-PCR和Westernblot法检测到HBx基因和蛋白阳性表达,与对照组相比,HP14.5/HBx细胞增殖活力显著增加(P<0.05);G1细胞比例明显减少(P<0.05),S期和G2细胞比例显著升高(P<0.05);cyclin D1和c-myc mRNA的表达量显著升高(P<0.05);GSK3β蛋白水平表达无明显变化(P>0.05),p-GSK3β、β-catenin、cyclin D1和c-myc蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。结论成功筛选出稳定表达HBx的肝前体细胞株,HBx通过活化Wnt/β-catenin信号途径促进肝前体细胞的增殖。

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝前体细胞细胞增殖 wnt β-catenin信号途径

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苯并(a)芘对体外培养小胶质细胞炎性因子和P38的影响

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山西医科大学学报 2013年第2期44卷 117-119页

作者：单士刚包永芬马萍陈贤均湖北科技学院基础医学院医学细胞生物学与遗传学教研室咸宁437100

目的研究苯并(a)芘[B(a)P]对体外培养小胶质细胞系(BV-2)分泌细胞因子影响及其与p38信号通路的关系。方法将处于对数生长期的BV-2,分别加入终浓度0(空白对照和溶剂对照),1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μmoL/L B(a)P溶液染毒细胞16 h,分别应用EL... 详细信息

目的研究苯并(a)芘[B(a)P]对体外培养小胶质细胞系(BV-2)分泌细胞因子影响及其与p38信号通路的关系。方法将处于对数生长期的BV-2,分别加入终浓度0(空白对照和溶剂对照),1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μmoL/L B(a)P溶液染毒细胞16 h,分别应用ELISA法和Western blot法研究B(a)P对体外培养的小胶质细胞炎性因子IL-1β分泌和P38表达情况的影响。结果 1L-1β分泌随着染毒浓度的增加而增加,呈现剂量-效应关系,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。P38随着染毒浓度的增加,呈现增加趋势。结论 B(a)P可能通过上调P38表达,激活炎性因子IL-1β分泌,从而对神经系统产生毒性作用。

关键词：苯并(a)芘小胶质细胞细胞因子 P38

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探索医学遗传学教学方法,提高课堂教学效果

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基础医学教育 2013年第3期15卷 210-212页

作者：陈贤均焦铭吴喆湖北科技学院基础医学院细胞生物学与遗传学教研室咸宁437100

为了提高医学遗传学课堂教学效果,对教学方法进行了一系列探索与改进。通过深刻分析教学内容和教学目标,精心设计教学方法和技巧,将由浅入深法、逐步递进法、辨析归纳法、列表比较法、树形结构图法、问题教学法、直观教学法等多种教学... 详细信息

为了提高医学遗传学课堂教学效果,对教学方法进行了一系列探索与改进。通过深刻分析教学内容和教学目标,精心设计教学方法和技巧,将由浅入深法、逐步递进法、辨析归纳法、列表比较法、树形结构图法、问题教学法、直观教学法等多种教学方法与技巧恰当地应用于教学实践中,激发了学生学习兴趣,提高了课堂教学效果。

关键词：医学遗传学教学方法教学效果

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46,X,i(Xq)型Turner综合征一例报告

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中国优生与遗传杂志 2013年第1期21卷 42-43页

作者：陈贤均陈姣娥湖北科技学院基础医学院细胞生物学与遗传学教研室咸宁437100

病例：女,26岁,未婚。因原发闭经、身材矮小和第二性征未发育就诊。病史：患者系第二胎第二产,足月顺产,出生体重3000余克。出生时母亲22岁,父亲25岁。患者18岁时仍无月经来潮,就诊后以倍美力和孕酮治疗,人工周期方有月经。在治疗之初... 详细信息

病例：女,26岁,未婚。因原发闭经、身材矮小和第二性征未发育就诊。病史：患者系第二胎第二产,足月顺产,出生体重3000余克。出生时母亲22岁,父亲25岁。患者18岁时仍无月经来潮,就诊后以倍美力和孕酮治疗,人工周期方有月经。在治疗之初的两年多时间里疗效较好，此后疗效逐渐变差，经期缩短，经量渐少，患者失去治疗信心，加之服药后感觉头昏不适，未坚持治疗，从断断续续用药到最近3年已放弃治疗。

关键词： Turner综合征坚持治疗月经来潮原发闭经第二性征身材矮小足月顺产出生体重

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提高医学遗传学教学效果的策略探讨

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基础医学教育 2013年第2期15卷 104-106页

作者：陈贤均吴喆焦铭湖北科技学院基础医学院细胞生物学与遗传学教研室咸宁437100

为了激发学生对医学遗传学的学习兴趣,提高教学效果,从教学策略层面采取了重构课程内容体系、开发利用声像图片教学资源、教学与医学实践相结合、精心设计教学方法、改革考核方式等一系列综合措施,从而调动了学生学习兴趣和积极性,提高... 详细信息

为了激发学生对医学遗传学的学习兴趣,提高教学效果,从教学策略层面采取了重构课程内容体系、开发利用声像图片教学资源、教学与医学实践相结合、精心设计教学方法、改革考核方式等一系列综合措施,从而调动了学生学习兴趣和积极性,提高了教学效果和教学质量。

关键词：医学遗传学教学方法教学策略教学效果

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亨廷顿舞蹈病家系APEX基因及mtDNA突变的分析

亨廷顿舞蹈病家系APEX基因及mtDNA突变的分析

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第十二次全国医学遗传学学术会议

作者：肖海刘春华王骑凤李晓文郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室

目的探讨线粒体DNA(mtDNA)调控区、编码区的大片段缺失和APEX基因与HD的关系。方法采用PCR-DNA测序法检测3个HD家系中10名患者和26名正常人的D环高突变区、编码区进行检测,采用PCR-SSCP的方法检测检测家系成员的APEX基因的外显子。结果... 详细信息

目的探讨线粒体DNA(mtDNA)调控区、编码区的大片段缺失和APEX基因与HD的关系。方法采用PCR-DNA测序法检测3个HD家系中10名患者和26名正常人的D环高突变区、编码区进行检测,采用PCR-SSCP的方法检测检测家系成员的APEX基因的外显子。结果3家系成员mtDNAD环未见大片段缺失,6名患者和16名正常人都存在mtDNA编码区大片段缺失,未发现APEX的3个外显子上存在点突变。结论mtDNA调控区、编码区的大片段重组以及APEX基因可能不是HD发病机制中的重要因素。

关键词：亨廷顿舞蹈病线粒体DNA 编码区大片段缺失

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小RNA技术干扰p21联合环磷酰胺对HepG_2细胞增殖及凋亡的影响

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山西医科大学学报 2013年第11期44卷 837-840页

作者：刘红云包永芬单士刚湖北科技学院基础医学院医学免疫学教研室咸宁437100 湖北科技学院基础医学院医学微生物学教研室湖北科技学院基础医学院医学细胞生物学与遗传学教研室

目的探讨小RNA干扰p21表达联合环磷酰胺对HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。方法将化学合成的针对p21的siRNA序列转染至HepG2细胞,将HepG2细胞分为5组:空白对照组、阴性对照组、RNA抑制组、环磷酰胺组、联合组(RNA抑制+环磷酰... 详细信息

目的探讨小RNA干扰p21表达联合环磷酰胺对HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。方法将化学合成的针对p21的siRNA序列转染至HepG2细胞,将HepG2细胞分为5组:空白对照组、阴性对照组、RNA抑制组、环磷酰胺组、联合组(RNA抑制+环磷酰胺)。采用MTT比色法、流式细胞术和分光光度法分别检测HepG2细胞增殖、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族成员caspase-9、caspase-3和caspase-6的活化程度。结果 p21 siRNA转染后,相对于环磷酰胺单独处理组,联合处理组HepG2细胞增殖率显著降低,而细胞凋亡率则率明显升高(P<0.01);caspase-9、caspase-3和caspase-6的活化程度显著升高(P<0.01)。结论 p21靶向RNA抑制作用联合环磷酰胺处理显著促进了HepG2细胞凋亡,p21可作为肝癌基因治疗的后选新靶点。

关键词： HepG2细胞 p21 RNA抑制环磷酰胺 caspase家族

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c-ski基因重组腺病毒质粒的构建及其对肿瘤相关成纤维细胞增殖的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第12期26卷 1738-1742页

作者：王黎阳赵浏阳彭琼乐孙艳柳满然重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdT... 详细信息

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdTrack-c-ski,经PmeⅠ线性化后,转化感受态大肠埃希菌BJ5183,获得重组腺病毒质粒,经PacⅠ线性化后,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒,经扩增及纯化后测定病毒滴度。将纯化的重组腺病毒感染乳腺癌CAFs,采用Western blot法检测感染细胞中c-Ski蛋白的表达水平;MTT法和细胞计数法检测重组腺病毒对CAFs细胞增殖活力的影响。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定证明构建正确;转染HEK-293细胞48 h后可见大量绿色荧光蛋白的表达,纯化的重组腺病毒的滴度为3.11×1010IFU/ml;感染重组腺病毒的乳腺癌CAFs中c-Ski蛋白的表达水平明显高于空病毒组和空白对照组(P<0.001),且增殖活力明显高于空白对照组(P<0.05)。结论成功构建了表达c-ski基因的重组腺病毒质粒,其可明显促进CAFs的增殖,为进一步研究c-Ski对CAFs增殖分化等生物学功能的影响及作用机制提供了实验依据。

关键词： c-ski基因腺病毒成纤维细胞细胞增殖

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河南汉族肺结核患者PTPN22基因多态性检测

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郑州大学学报（医学版） 2013年第2期48卷 207-210页

作者：肖海杨洪毅张照婧张言鹏李晓文郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 郑州大学第一附属医院生殖医学中心郑州450052 郑州大学临床医学系郑州450052

目的:检测河南汉族肺结核患者蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因rs33996649与rs2488457位点的多态性。方法:采用PCR-RFLP方法检测河南汉族205例正常人和214肺结核患者PTPN22基因rs33996649与rs2488457位点的多态性,并进行基因型... 详细信息

目的:检测河南汉族肺结核患者蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因rs33996649与rs2488457位点的多态性。方法:采用PCR-RFLP方法检测河南汉族205例正常人和214肺结核患者PTPN22基因rs33996649与rs2488457位点的多态性,并进行基因型频率、等位基因频率的比较。结果:河南汉族群体中未发现rs33996649位点多态性;肺结核组和对照组rs2488457位点等位基因频率差异无统计学意义(χ2=2.134,P=0.144),G/G基因型频率差异有统计学意义(χ2=4.976,P=0.026)。结论:PTPN22基因rs33996649多态性与河南汉族肺结核发生无关;rs2488457的G/G基因型与河南汉族肺结核易感性有一定关系。

关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22基因肺结核基因多态性河南汉族

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大蒜多糖对甲醛所致人胚肝细胞损伤的保护作用

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河北医药 2013年第1期35卷 16-17页

作者：包永芬单士刚咸宁学院基础医学院医学微生物学教研室湖北省咸宁市437100 医学细胞生物学与遗传学教研室

目的探讨大蒜多糖对甲醛致人胚肝细胞L02氧化损伤和遗传损伤的保护作用。方法采用体外常规培养L02,取对数生长期的细胞进行实验。实验设对照组、甲醛组和低、中、高剂量大蒜多糖保护组,其中大蒜多糖先与细胞预孵8h后加入0.1mmoL/L甲醛,... 详细信息

目的探讨大蒜多糖对甲醛致人胚肝细胞L02氧化损伤和遗传损伤的保护作用。方法采用体外常规培养L02,取对数生长期的细胞进行实验。实验设对照组、甲醛组和低、中、高剂量大蒜多糖保护组,其中大蒜多糖先与细胞预孵8h后加入0.1mmoL/L甲醛,置CO2培养箱培养4h,用单细胞琼脂糖凝胶电泳评价大蒜多糖各浓度实验组处理L02细胞4hDNA的损伤程度;检测细胞培养液中SOD和GSH活力及LDH、MDA和AST的含量。结果大蒜多糖各保护组与甲醛组比较,Tail Moment和Tail DNA都明显减少,并与大蒜多糖浓度增加呈剂量一效应关系,其差异均有统计学意义(P<0.05);SOD和GSH-Px活力明显升高,LDH、AST和MDA含量均降低(P<0.05)。结论大蒜多糖可提高L02细胞抗氧化酶的活性,减轻甲醛所致的氧化损伤和遗传损伤。

关键词：大蒜多糖 L02细胞甲醛

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