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内质网应激PERK-eIF2α-ATF4信号通路在延缓APP/PS1小鼠移植瘤生长中的作用

吉林大学学报（医学版） 2022年第2期48卷 324-330页

作者：董营郭家女王思懿郭丹王力可温旭刘立峰曲萌于春艳刘楠楠王丹陈昌捷北华大学基础医学院病理教研室吉林吉林132013 北华大学基础医学院人体解剖学教研室吉林吉林132013 北华大学基础医学院分子生物教研室吉林吉林132013 北华大学附属医院检验科吉林吉林132013

目的:探讨内质网应激(ERS)及内质网自噬对移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)小鼠移植瘤生长的抑制作用,并阐明蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核翻译起始因子2α(eIF2α)-活化转录因子4(ATF4)通路在其抑制作用中的... 详细信息

目的:探讨内质网应激(ERS)及内质网自噬对移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)小鼠移植瘤生长的抑制作用,并阐明蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核翻译起始因子2α(eIF2α)-活化转录因子4(ATF4)通路在其抑制作用中的可能机制。方法:体外培养B16细胞,通过皮下注射分别植入C57和APP/PS1小鼠背部皮下,建立C57BL/6J和APP/PS1雄性小鼠移植黑色素瘤模型,作为C57移植瘤组(n=7)和APP/PS1移植瘤组(n=7)。观察2组小鼠出瘤时间并计算肿瘤体积,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组小鼠移植瘤组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、PERK和溶酶体组织蛋白酶L(cathepsin L)mRNA表达水平,Western blotting法检测2组小鼠移植瘤组织中GRP78、PERK、磷酸化PERK(p-PERK)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)和内质网自噬标志蛋白FAM134B蛋白表达水平,免疫组织化学法检测移植瘤组织中蛋白质二硫异构酶(PDI)蛋白表达情况,免疫荧光法测定2组小鼠移植瘤组织中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平。结果:与C57移植瘤组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠出瘤时间晚,肿瘤体积小(P<0.05),移植瘤组织中ERS相关基因GRP78和PERK mRNA表达水平升高(P<0.05),移植瘤组织中GRP78、p-eIF2α/eIF2α和ATF4蛋白表达水平及p-PERK/PERK比值均升高(P<0.05)。C57移植瘤组肿瘤细胞胞质内多见黑色素颗粒,为移植瘤组织的形态特征,可见少量棕黄色颗粒,为PDI阳性颗粒;APP/PS1移植瘤组肿瘤细胞胞质内可见少量黑色素颗粒和广泛表达的棕黄色颗粒。与C57移植瘤组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠移植瘤组织中内质网自噬标志蛋白FAM 134B蛋白表达水平升高(P<0.05),cathepsin L mRNA表达水平升高(P<0.05),ATP水平降低(P<0.05)。结论:APP/PS1移植瘤模型小鼠肿瘤生长缓慢,其机制可能与ERS的PERK-eIF2α-ATF4信号通路被激活有关。

关键词：蛋白激酶R样内质网激酶内质网应激内质网自噬淀粉蛋白前体蛋白早老素1 移植黑色素瘤

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直肠癌保留盆腔自主神经的解剖学概念及临床意义

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中华胃肠外科杂志 2023年第1期26卷 68-74页

作者：翟志超张卫光顾晋北京大学首钢医院胃肠外科北京100144 北京大学基础医学院人体解剖学教研室北京100191 北京大学肿瘤医院胃肠三科北京100142

结直肠癌是全球常见的恶性肿瘤之一,其主要治疗策略是以手术为核心的综合治疗。直肠癌根治术后常见的泌尿生殖系统功能障碍成为困扰患者的重要问题,特别是男性功能的损伤,严重影响手术后患者的生活质量。部分患者因为担心性功能和泌尿... 详细信息

结直肠癌是全球常见的恶性肿瘤之一,其主要治疗策略是以手术为核心的综合治疗。直肠癌根治术后常见的泌尿生殖系统功能障碍成为困扰患者的重要问题,特别是男性功能的损伤,严重影响手术后患者的生活质量。部分患者因为担心性功能和泌尿功能受损而放弃直肠癌的根治手术。造成这一问题的原因,是术中盆腔自主神经的损伤。其中骨盆自主神经的保留主要是下腹神经,其主要负责男性射精功能。骨盆内脏神经主要司男性阴茎的勃起。本文对这两种神经的解剖来源、分布及其对相关的泌尿生殖功能的影响进行详细阐述,并介绍有关保留自主神经的手术分类、操作要点和效果评估。在微创外科快速发展的今天,在实施直肠癌根治手术的同时,充分了解盆腔自主神经的解剖学概念,应用现代微创外科手术技术实现对患者骨盆自主神经的保留,是结直肠外科医师的重要必修课程,也是直肠癌外科手术规范化的重要体现。

关键词：结直肠肿瘤盆腔自主神经解剖

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降低T细胞DAPK1表达以促进BCG疫苗诱导的抗结核菌感染反应的机制

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解剖学研究 2025年第2期47卷 105-114页

作者：刘子炫刘敏潘勤武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学教研室湖北武汉430071 武汉大学泰康医学院(基础医学院)免疫学系湖北武汉430071

目的探讨死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)促进CD4^(+)T细胞死亡的机制;并在小鼠结核病疫苗BCG免疫过程中下调CD4^(+)T细胞DAPK1水平,评估以上干预提升疫苗效能以对抗结核菌(***)感染的效果。方法体外实验:利用慢病毒载体系统对CD4^(+)T细胞系M... 详细信息

目的探讨死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)促进CD4^(+)T细胞死亡的机制;并在小鼠结核病疫苗BCG免疫过程中下调CD4^(+)T细胞DAPK1水平,评估以上干预提升疫苗效能以对抗结核菌(***)感染的效果。方法体外实验:利用慢病毒载体系统对CD4^(+)T细胞系MOLT‑4进行DAPK1过表达、敲低或敲低后回补,同时使用CD3、CD28抗体活化细胞后行流式细胞术检测细胞死亡,免疫印迹验证凋亡蛋白Caspase‑3的表达水平;利用腺相关病毒载体(AAV)‑shDapk1系统敲低小鼠脾脏CD4^(+)T细胞DAPK1,RT‑qPCR以及WB检测敲低效果。动物实验:利用AAV‑shDapk1敲低小鼠脾脏CD4^(+)T细胞DAPK1,BCG免疫小鼠后,FCM检测小鼠体内记忆性CD4^(+)T细胞水平和细胞因子水平;进行*** H37Ra感染实验,通过病理切片和肺组织菌落计数,验证下调DAPK1对BCG疫苗效能的提升作用。结果DAPK1敲低后MOLT‑4细胞死亡率由(2.36±0.38)%降至(0.94±0.11)%(P<0.01),并且Caspase‑3蛋白水平也因DAPK1的敲低而减少;同样地,过表达DAPK1后细胞死亡率由(2.00±0.10)%增加至(5.54±0.23)%(P<0.01);在敲低DAPK1细胞中回补DAPK1后死亡率由(0.90±0.35)%增加至(3.04±0.14)%(P<0.01)。AAV‑shDapk1体外转染小鼠脾淋巴细胞后WB以及RT‑qPCR结果显示DAPK1表达水平降低。动物实验,AAV‑shDapk1处理组小鼠体内CD4^(+)中央记忆性T细胞(T_(CM))死亡率由(23.74±2.22)%降至(18.46±2.89)%(P<0.01),AAV‑shDapk1处理小鼠相比空载对照组CD4^(+)T细胞中T_(CM)百分率由(8.93±0.52)%升至(10.94±0.71)%(P<0.01);AAV‑shDapk1处理小鼠TNF‑α、IFN‑α、IL‑2的上升水平较为明显,相比于AAV空载对照组,shDapk1处理组CD4^(+)T细胞中TNF‑α百分率由(0.21±0.04)%升至(1.99±0.20)%(P<0.01);IFN‑α百分率由(0.33±0.06)%升至(0.77±0.15)%(P<0.01);IL‑2百分率由(0.71±0.10)%升至(2.48±0.08)%(P<0.01);*** H37Ra攻毒后,菌落计数显示AAV‑shDapk1处理小鼠体内感染细菌数量显著减少,病理组织切片显示该组肺脏坏死程度较轻,脾脏中淋巴样白髓和红髓更加明显,AAV‑shDapk1处理小鼠的肺脏和肝脏病理组织评分相比空载对照组也有所改善。结论DAPK1可在T细胞中提高凋亡蛋白Caspase‑3表达水平并抑制T细胞存活,将小鼠体内CD4^(+)T细胞的DAPK1敲低有利于CD4^(+)T细胞存活以及CD4^(+)T_(CM)的增多,这有助于提升BCG疫苗效能以帮助宿主对抗***感染。

关键词：死亡相关蛋白激酶1 CD4^(+)T细胞腺相关病毒载体中央记忆性T细胞

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脑血管发育的分子机制

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解剖学报 2022年第5期53卷 680-686页

作者：张思琦康晨曦张佩艳雒海霞李飞史娟李云庆空军军医大学基础医学院学员六大队人体解剖学和组织学胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032

作为大脑中营养和氧气的输送管道,脑血管对大脑的发育及正常功能的发挥具有重要意义。脑血管系统的发育分为原始血管发生和血管生成两个过程。我们针对在上述过程中扮演重要角色的重要分子,如血管内皮生长因子(VEGF)、Neuropillin、Wnt... 详细信息

作为大脑中营养和氧气的输送管道,脑血管对大脑的发育及正常功能的发挥具有重要意义。脑血管系统的发育分为原始血管发生和血管生成两个过程。我们针对在上述过程中扮演重要角色的重要分子,如血管内皮生长因子(VEGF)、Neuropillin、Wnt、Notch、Hedgehog家族成员等在脑血管发生、形成和维持中的作用、调控机制和相互影响进行综述,以期为脑血管的基础研究和临床研究以及有关疾病的防治提供参考。

关键词：脑血管生成血管再生血管内皮生长因子 Wnt信号通路 Notch信号通路

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前列地尔治疗老年慢性肾小球肾炎疗效及对患者肾功能、血流动力学的影响

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中国老年学杂志 2023年第24期43卷 5951-5954页

作者：王琳琳李志鹏冯佳莉刘圣君乔振华贾秀玲韩小丽河北北方学院附属第一医院肾内科河北张家口075000 河北北方学院基础医学院人体解剖学教研室河北张家口075000

目的探讨前列地尔在老年慢性肾小球肾炎治疗中应用价值及对患者肾功能、血流动力学的改善情况。方法选取90例老年慢性肾小球肾炎患者依据随机数字表法分为观察组和对照组,各45例。两组均予以常规治疗,对照组在常规治疗基础上予以氯沙坦... 详细信息

目的探讨前列地尔在老年慢性肾小球肾炎治疗中应用价值及对患者肾功能、血流动力学的改善情况。方法选取90例老年慢性肾小球肾炎患者依据随机数字表法分为观察组和对照组,各45例。两组均予以常规治疗,对照组在常规治疗基础上予以氯沙坦钾治疗,观察组在对照组基础上予以前列地尔治疗。两组均给予为期3个月的治疗。对两组治疗后的临床疗效、治疗前后的肾功能指标、血流动力学指标、炎性因子指标进行比较。结果观察组临床总有效率相较于对照组显著更高(P<0.05);相较于治疗前,两组治疗后尿液24 h尿蛋白定量(24 h Upro)、血清血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平、全血高切黏度、全血低切黏度、血清纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂(PAI)-1、白细胞介素(IL)-1、可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1)、胱抑素(Cys)C、C反应蛋白(CRP)水平均显著降低(P<0.05),且相较于对照组,观察组显著更低(P<0.001);两组血清组织型纤溶酶原激活物(t-PA)水平、肾小球滤过率(eGFR)均显著升高(P<0.05),且相较于对照组,观察组更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论前列地尔治疗老年慢性肾小球肾炎可明显减轻患者的炎症反应,促进肾功能改善,调节血流动力学指标,临床疗效显著,且不会增加不良反应,安全性良好。

关键词：慢性肾小球肾炎前列地尔氯沙坦钾肾功能血流动力学炎性因子

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寒证ED大鼠模型动脉差异表达蛋白质的TMT技术筛查与生物信息学分析

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中国男科学杂志 2023年第2期37卷 20-27页

作者：王冰华斯依提·阿木提阿地力江·伊明谢毅沙丽帕·艾尼瓦尔侯鹏程刘文娟新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的筛查寒证勃起功能障碍(ED)大鼠模型动脉差异表达蛋白质,并进行生物信息学分析,为研究寒证ED发病机制提供新的思路与实验依据。方法将100只雄性性成熟SD大鼠随机分为正常对照组(N组,15只)、寒证造模组(M组,85只),分别在正常环境(22&#... 详细信息

目的筛查寒证勃起功能障碍(ED)大鼠模型动脉差异表达蛋白质,并进行生物信息学分析,为研究寒证ED发病机制提供新的思路与实验依据。方法将100只雄性性成熟SD大鼠随机分为正常对照组(N组,15只)、寒证造模组(M组,85只),分别在正常环境(22±2)℃及冷环境(4±0.5)℃饲养,干预24周并建立稳定的寒证模型后,通过APO勃起实验筛选出ED大鼠并分为寒证ED组(ED组)和寒证ED干预组(用于其它研究),剩余大鼠为寒证证候组(S组)。采用TMT技术筛查并鉴定寒证ED大鼠动脉差异表达蛋白质,并进行功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果(1)模型的建立:1)生物学表征结果为:与N组相比,M组大鼠反应迟钝,舌苔苍白,大便湿软,小便色淡,体重增长显著减缓(P<0.05),饮食量、饮水量显著升高(P<0.05);2)APO实验结果为:与N组相比,M组大鼠勃起潜伏期显著延长,勃起次数显著减少(P<0.05),ED成模率为47.95%;(2)蛋白质组学:通过TMT技术共鉴定出差异蛋白质364种,其中上调蛋白281种,下调蛋白83种。GO分析显示差异蛋白质主要参与小分子代谢,氧化还原过程,在线粒体和线粒体外膜均有分布,且具有催化活性、氧化还原酶活性等。KEGG信号通路分析发现差异蛋白质涉及氧化磷酸化通路、PPAR信号通路、铁死亡通路等152条信号通路。结论(1)长期冷刺激可成功诱导建立寒证ED证候与病证结合大鼠模型,其生物学表征符合中医临床证候特点;(2)寒证ED大鼠动脉差异表达蛋白质涉及到复杂的生物学过程、分子功能与信号通路,为进一步基于动脉病理改变层面开展寒证ED发病机制研究奠定了基础。

关键词：寒证勃起功能障碍 TMT技术蛋白质组学

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小鼠中央内侧核向前额叶和岛叶皮质发出分支投射的形态学研究

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空军军医大学学报 2024年第12期45卷 1387-1391,1398页

作者：薛美琪窦雪瑛刘楚涵王珊杨彦玲董玉琳延安大学基础医学院人体解剖学教研室陕西延安716000 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心陕西西安710032

目的观察小鼠丘脑中央内侧核(CM)向不同皮层区域的分支投射情况,并为其参与伤害性信息传递提供形态学证据。方法将荧光金(FG)分别注射到前额叶皮质(PFC)或岛叶皮质(IC)并建立完全弗氏佐剂(CFA)炎性痛模型,观察FG逆标神经元在CM中的分布... 详细信息

目的观察小鼠丘脑中央内侧核(CM)向不同皮层区域的分支投射情况,并为其参与伤害性信息传递提供形态学证据。方法将荧光金(FG)分别注射到前额叶皮质(PFC)或岛叶皮质(IC)并建立完全弗氏佐剂(CFA)炎性痛模型,观察FG逆标神经元在CM中的分布,以及CM内向PFC或IC投射的神经元是否参与伤害性信息传递;继而将FG注射到PFC,同时将四甲基罗达明(TMR)注入IC,并建立CFA模型,观察CM内FG与TMR双标神经元的分布及其与FOS蛋白的共标。结果(1)将FG注射到PFC后,在CM的吻侧和中部可观察到大量逆标神经元,尾侧的FG逆标神经元相对较少;将FG注射到IC后,可观察到CM的中尾侧有大量的FG逆标神经元分布,而在CM的吻段较少;(2)CM-IC或CM-PFC通路在CFA模型下均可观察到激活的神经元,但前者激活数量较后者多;(3)CM吻中段少量神经元可同时向PFC和IC发出分支投射,且偶见共标神经元在疼痛状态下被激活。结论CM可以分别向PFC和IC发出大量投射,且参与伤害性信息的传递,但分支投射的情况较少见。

关键词：中央内侧核分支投射前额叶皮质岛叶疼痛神经通路

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系统解剖学实验课线上教学效果评价

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解剖学杂志 2023年第5期46卷 440-442页

作者：吕晓红孙亮郑晓琳李会平齐秀英李雪梅许凤燕杨慧科刘宝全张雅芳哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室哈尔滨150081

线上教学因其组织形式灵活,可以突破时间、空间局限^([1]),在疫情防控期间的应急教学中发挥重要作用。与大多数的线上教学研究相一致^([2]),疫情期间笔者教研室进行的理论线上教学效果较好。实验课能否也采用线上授课的教学模式呢?众所... 详细信息

线上教学因其组织形式灵活,可以突破时间、空间局限^([1]),在疫情防控期间的应急教学中发挥重要作用。与大多数的线上教学研究相一致^([2]),疫情期间笔者教研室进行的理论线上教学效果较好。实验课能否也采用线上授课的教学模式呢?众所周知,系统解剖学实验课以人体实物标本为观察对象,融入素质教育,培养学生的综合能力,是系统解剖学教学的重要组成部分。

关键词：线上教学教学效果评价素质教育实物标本疫情防控观察对象实验课教学模式

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青年教师进行解剖教学课程思政的实践与思考

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医学理论与实践 2024年第17期37卷 3046-3048页

作者：吕颖黄婉丹叶秉坤李佳楣宣爱国广州医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省广州市511436

高等教育的根本目标是立德树人,课程思政是落实立德树人的重要举措。人体解剖学是医学专业的重要基础学科,蕴含海量思政元素,有利于进行课程思政,但在青年教师的教学实践中尚存在较多不足。本文将结合人体解剖学学科特点与教育现状,从... 详细信息

高等教育的根本目标是立德树人,课程思政是落实立德树人的重要举措。人体解剖学是医学专业的重要基础学科,蕴含海量思政元素,有利于进行课程思政,但在青年教师的教学实践中尚存在较多不足。本文将结合人体解剖学学科特点与教育现状,从青年教师角度出发分析问题,探索课程思政能力提升路径,总结课程思政的实践经验,以促进青年教师课程思政教学能力与质量的提高,深化思政教育改革与发展,为我国培养德才兼备的高素质人才。

关键词：课程思政人体解剖学青年教师实践探索

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周围神经系统教学设计的创新与实践

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解剖学研究 2023年第3期45卷 278-280页

作者：沃吟晴乔梁霍奕鸣杨向群刘芳海军军医大学基础医学院人体解剖学教研室上海200433

系统解剖学是医学科学的基础课程,传统教学方法单一枯燥,学习难度大。本文以周围神经系统为例,分析总结了信息化教学手段与启发式教学、角色扮演、PBL教学等方法相结合,充分运用于课前任务式预习、课中学习以及课后的巩固提升过程。旨... 详细信息

系统解剖学是医学科学的基础课程,传统教学方法单一枯燥,学习难度大。本文以周围神经系统为例,分析总结了信息化教学手段与启发式教学、角色扮演、PBL教学等方法相结合,充分运用于课前任务式预习、课中学习以及课后的巩固提升过程。旨在提高学生学习自主性,调动学习积极性,改善学习效果。在教学中总结经验,反思实施过程中存在的问题,对今后系统解剖学课程教学实践提供新的思路。

关键词：系统解剖学信息化教学启发式教学角色扮演 PBL教学

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