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细胞与分子免疫学杂志 2021年第12期37卷 1132-1137页

作者：彭蕾叶迎春陈涵年四季吴桐于红袁青邬于川西南医科大学基础医学院免疫学教研室四川泸州646000

目的构建靶向金黄色葡萄球菌α溶血素(α-HL)的全人源重组抗体互补片段融合单链抗体(scFv-Fc),并进行表达及功能鉴定。方法将前期筛选的抗金黄色葡萄球菌α-HL的全人源scFv538通过同源重组的方式插入pcDNA3.1-人IgG1 Fc质粒,构建成scFv5... 详细信息

目的构建靶向金黄色葡萄球菌α溶血素(α-HL)的全人源重组抗体互补片段融合单链抗体(scFv-Fc),并进行表达及功能鉴定。方法将前期筛选的抗金黄色葡萄球菌α-HL的全人源scFv538通过同源重组的方式插入pcDNA3.1-人IgG1 Fc质粒,构建成scFv538-Fc/pcDNA3.1重组载体,瞬时转染HEK293F细胞表达重组抗体蛋白并纯化。纯化后的scFv538-Fc抗体通过ELISA检测抗体与金黄色葡萄球菌的结合活性及特异性;CCK-8法检测A549细胞增殖活性以及抗兔红细胞溶血实验验证scFv538-Fc抗体对金黄色葡萄球菌α-HL的中和作用。结果成功构建了抗金黄色葡萄球菌α-HL的scFv-Fc抗体,HEK293F细胞表达的抗体蛋白相对分子质量(M_(r))约为55000。表达纯化的scFv538-Fc能够特异性和金黄色葡萄球菌α-HL结合,并具备中和金黄色葡萄球菌α-HL的毒性作用,减轻α-HL对A549细胞的毒性作用和对兔红细胞的细胞裂解作用。结论成功制备有效中和金黄色葡萄球菌α-HL的全人源重组scFv。

关键词：重组抗体金黄色葡萄球菌 α溶血素(α-HL) 毒素中和

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单核细胞在病毒性出血热中的作用研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第8期39卷 748-752页

作者：石红妍唐康郑煦暘张颖空军军医大学第二附属医院传染科陕西西安710038 延安大学医学院陕西延安716000 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

单核细胞是多种出血热病毒感染的重要靶细胞,在病毒性出血热(VHF)发病过程中产生多种细胞因子,参与抗病毒免疫应答和免疫病理损伤。在多种VHF发病过程中(发病早期),单核细胞计数、亚群分布、表面功能分子表达出现变化,整体呈现激活表型... 详细信息

单核细胞是多种出血热病毒感染的重要靶细胞,在病毒性出血热(VHF)发病过程中产生多种细胞因子,参与抗病毒免疫应答和免疫病理损伤。在多种VHF发病过程中(发病早期),单核细胞计数、亚群分布、表面功能分子表达出现变化,整体呈现激活表型;多种出血热病毒可感染单核细胞并引起免疫反应,可能在免疫病理损伤中起重要作用;同时,单核细胞及其产生的细胞因子等可与血小板、血管内皮细胞等相互作用,推动疾病进展。

关键词：病毒性出血热病毒感染单核细胞固有免疫综述

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病原感染与免疫教学AI视频动画的制作与思考

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基础医学教育 2024年第3期26卷 249-254页

作者：夏丹丹郭萍刘伯玉张俊玲张林杰王林定王明丽安徽医科大学临床医学院基础医学部病原生物学与免疫学教研室合肥230031 安徽医科大学临床医学院临床医学系安徽医科大学基础医学院微生物学教研室

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系... 详细信息

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系。实施方案根据病原感染与免疫三门临床医学生必修课程为主线梳理出40个重难点,制作出30个具有综合内容的教学脚本,依据脚本完成AI化视频动画的制作与表现。在安徽医科大学临床医学院小范围使用后盲评教学效果,99%的学生都认为该教学动画能够加深对相应知识点的理解和记忆。71.71%学生认为画面非常有趣。全体参加该教学动画制作的学生的专业技能与理论联系实际能力显著提升。教师在教学过程使用该视频动画可以提高教学效率。

关键词：基础医学病原感染与免疫教学AI视频动画线上教育教学方法

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ralb34k2-1刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞对蛋白质PTM代谢物修饰及DENV-2易感性的影响

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贵州医科大学学报 2024年第9期49卷 1259-1268页

作者：代薇露胡欢覃燕春吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫教研室贵州贵阳550025

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白34k2-1(ralb34k2-1)刺激的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7细胞)胞内蛋白翻译后代谢修饰(PTMs)的变化及对2型登革病毒(DENV-2)易感性的影响。方法利用抗乙酰化、乳酰化、琥珀酰化、巴豆酰化和丙二酰化的... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白34k2-1(ralb34k2-1)刺激的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7细胞)胞内蛋白翻译后代谢修饰(PTMs)的变化及对2型登革病毒(DENV-2)易感性的影响。方法利用抗乙酰化、乳酰化、琥珀酰化、巴豆酰化和丙二酰化的泛特异性抗体,通过免疫印迹法(Western blot)检测ralb34k2-1蛋白刺激后不同时相的RAW264.7细胞蛋白质翻译后代谢物修饰的情况,酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测细胞内外的乳酸含量;用2 mg/L ralb34k2-1预处理RAW264.7细胞24 h后、继续培养2 d、再用DENV-2感染细胞,通过实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)检测感染18 h和36 h后的病毒核酸变化,分析ralb34k2-1预处理后对病毒易感性的影响;检测感染前后胞内白细胞介素1β-(IL-1β)、白细胞介素10-(IL-10)、肿瘤坏死因子β-(TGF-β)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)mRNA的相对表达情况,分析ralb34k2-1预处理对细胞免疫状态及细胞极化的影响。结果胞内不同的代谢物对蛋白质的修饰程度主要表现为乳酰化修饰>乙酰化修饰>琥珀酰化修饰;在时相上,除琥珀酰修饰外,随时间的延长其余代谢物对蛋白质的修饰有增多的趋势,其中以6 h乳酰化修饰最多;ralb34k2-1刺激对细胞的乳酸产生无明显影响;经ralb34k2-1预处理后胞内DENV-E相对表达量较对照组高5倍以上,IL-10 mRNA的相对表达在感染前后均保持高水平(6~8倍);在感染前iNOS/Arg比值为3.46±1.59,但受ralb34k2蛋白预处理的细胞在感染后表现iNOS表达下调的趋势。结论蚊唾液ralb34k2蛋白可能通过调控PTM代谢物修饰的方式,改变细胞的免疫状态从而增强登革病毒的易感性。

关键词：白纹伊蚊蚊唾液蛋白34k2-1 巨噬细胞 RAW264.7细胞蛋白翻译后修饰 2型登革病毒免疫调控

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屋尘螨提取物激活气道上皮细胞EphA2-STAT3/p38 MAPK信号通路介导气道炎症

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第1期37卷 31-38页

作者：黄国平袁青叶迎春于红谢翔徐文峰年四季西南医科大学基础医学院免疫学教研室四川泸州646000

目的探讨受体酪氨酸激酶肝配蛋白A型受体2(EphA2)对屋尘螨提取物(HDM)诱导气道上皮细胞表达炎症细胞因子的作用及其机制。方法用EphA2小干扰RNA(siRNA)转染气道上皮细胞株16HBE细胞建立EphA2敲减的细胞模型,HDM刺激16HBE细胞后,采用实... 详细信息

目的探讨受体酪氨酸激酶肝配蛋白A型受体2(EphA2)对屋尘螨提取物(HDM)诱导气道上皮细胞表达炎症细胞因子的作用及其机制。方法用EphA2小干扰RNA(siRNA)转染气道上皮细胞株16HBE细胞建立EphA2敲减的细胞模型,HDM刺激16HBE细胞后,采用实时定量PCR检测EphA2、白细胞介素6(IL-6)和IL-8 mRNA水平,细胞因子微球检测技术(CBA)检测IL-6、 IL-8、 IL-17A、 IL-17F和肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平;Western blot法检测EphA2、磷酸化的EphA2(p-EphA2)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、 p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)、核因子κB p65(NF-κB p65)及磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白水平。STAT3抑制剂Stattic联合HDM或p38 MAPK抑制剂SB203580联合HDM刺激16HBE细胞,实时定量PCR检测IL-6和IL-8 mRNA水平、 CBA检测IL-6和IL-8蛋白水平。结果敲低EphA2显著抑制HDM诱导16HBE细胞表达IL-6和IL-8,降低STAT3及p38 MAPK的总蛋白及磷酸化水平,但对NF-κB p65总蛋白及磷酸化水平均无明显影响。Stattic抑制STAT3表达及活化后,显著抑制HDM诱导16HBE细胞中IL-6和IL-8 mRNA和蛋白表达;而SB203580抑制p38 MAPK信号通路后,抑制HDM诱导16HBE细胞中IL-6和IL-8 mRNA表达水平,而对其蛋白水平无影响。结论 HDM通过激活EphA2-STAT3/p38 MAPK通路诱导16HBE细胞表达IL-6和IL-8参与气道炎症。

关键词：哮喘屋尘螨提取物(HDM) 肝配蛋白A型受体2(EphA2) 信号通路

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细胞因子在非结核分枝杆菌(NTM)病中的作用研究进展

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中国病原生物学杂志 2021年第3期16卷 368-370页

作者：高婧华吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

非结核分枝杆菌(Non-tuberculous Mycobacteria)进入机体后,机体免疫功能的一系列变化导致不同细胞因子的改变,从而在NTM病的发病机制中发挥重要作用。本文就不同细胞因子在NTM病中的作用做一综述,为细胞因子变化在非结核分枝杆菌感染... 详细信息

非结核分枝杆菌(Non-tuberculous Mycobacteria)进入机体后,机体免疫功能的一系列变化导致不同细胞因子的改变,从而在NTM病的发病机制中发挥重要作用。本文就不同细胞因子在NTM病中的作用做一综述,为细胞因子变化在非结核分枝杆菌感染中的预测、诊断、疗效观察、预后评估等提供依据。

关键词：细胞因子非结核分枝杆菌发病机制综述

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鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2021年第2期16卷 150-154页

作者：高婧华陈晓文陈越吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的应用生物信息学分析软件预测鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的结构和功能。方法利用在线uniprot蛋白数据库、ProtParam蛋白分析网站、在线Protcale、TMHMM(TMHMM Server V 2.0)和SignalP 5.0、Softberry和PSORTⅡ Server,以及SOPMA和SWISS-MODEL等生物信息学预测软件对MAV-2052蛋白的理化性质、疏水性分析、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及二级结构进行分析预测并对其三级结构进行模型构建;登录网站http://***/services/netrhos/对蛋白磷酸化位点进行预测,运用uniprot蛋白数据库的Blast工具对氨基酸进行比对,采用MEGA-X软件构建进化树。结果MAV-2052基因全长933 bp,编码310个氨基酸的蛋白质。该蛋白与鸟分枝杆菌亚型起源于同一物种,与结核分枝杆菌的半胱氨酸合酶k1同源性较高。MAV-2052为稳定的疏水性蛋白,无跨膜区、无信号肽;预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中,蛋白序列中存在13个丝氨酸磷酸化位点,二级结构以α-螺旋为主且有两个结构域;三级结构模型显示该蛋白可形成同源二聚体,但无其他配体结合空间位置。MAV-2052蛋白为半胱氨酸合酶,属于半胱氨酸合酶/半胱氨酸β合成酶家族,是调控鸟分枝杆菌生长中的重要蛋白之一。结论生物信息学预测鸟分枝杆菌MAV-2052为半胱氨酸合成酶,是调控细菌生长的重要蛋白,可为鸟分枝杆菌的靶向治疗提供新思路。

关键词：鸟分枝杆菌结构功能生物信息学分析

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医学研究生课程《分子病理学》多维度思政教学的思考

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中国继续医学教育 2023年第11期15卷 173-176页

作者：喻姗姗彭莉唐怡肖明杨雅莹巫静娴陈全王娅兰重庆医科大学基础医学院病理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016

如何打破“课程思政”时间和空间的限制,将其自然融入常态化课程教学中,已经成为当前医学研究生教育领域关注的热点和改革的难点之一。《分子病理学》作为重庆医科大学校级硕士研究生必修的公共课程,目前在课程思政教学的理论和实践结... 详细信息

如何打破“课程思政”时间和空间的限制,将其自然融入常态化课程教学中,已经成为当前医学研究生教育领域关注的热点和改革的难点之一。《分子病理学》作为重庆医科大学校级硕士研究生必修的公共课程,目前在课程思政教学的理论和实践结合、考核评价模式、知识传授和价值引领有机的统一中还存在一些具体问题。课程组拟通过收集素材、完善课程教学体系建设。同时,通过利用网络工具、强化价值评价,探索评价模式。并且,循序渐进、深挖课程思政的多元性,提升教师思政能力,推动师资队伍建设,努力拓展课程思政的深度、宽度和温度。

关键词：医学研究生分子病理学课程思政多元化评价模式网络环境教师思政能力

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结核分枝杆菌BfrA蛋白的生物信息学分析

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医学信息 2022年第6期35卷 81-85页

作者：逄亚宁王聪刘奇张雷李光华大理大学基础医学院医学微生物与免疫学教研室

目的运用生物信息学方法预测和分析结核分枝杆菌BfrA蛋白的结构和功能。方法从NCBI数据库中检索基因Rv1876及其编码蛋白Bfr A的基本信息，通过NCBI Blastp工具分析BfrA蛋白与人类蛋白的同源性，采用ProtParam、ProtScale、SOSUI、 TM... 详细信息

目的运用生物信息学方法预测和分析结核分枝杆菌BfrA蛋白的结构和功能。方法从NCBI数据库中检索基因Rv1876及其编码蛋白Bfr A的基本信息，通过NCBI Blastp工具分析BfrA蛋白与人类蛋白的同源性，采用ProtParam、ProtScale、SOSUI、 TMHMM、 SignalP、 TargetP、 PSORT、 Motif Scan、 SOPMA、 SWISS-MODEL、 BepiPred、 ABCpred、 NetMHCII、NetMHCIIpan、NetCTL、SYFPEITHI和STRING生物信息学在线软件预测及分析其理化性质、亲疏水性、可溶性、跨膜区、信号肽、亚细胞定位、翻译后修饰位点、二级结构、三级结构、B细胞及T细胞抗原表位、蛋白相互作用网络。结果 BfrA蛋白分子式为C802H1276N218O259S7，含有159个氨基酸，理论PI值为4.50，具有稳定性，是一种亲水性可溶性蛋白质；不具有信号肽和跨膜区域，是定位于细胞质的非分泌蛋白；BfrA蛋白二级结构包含α-螺旋（Hh）、β-转角（Tt）、无规则卷曲（Cc）、β-折叠（Ee）；含有4个CK2-磷酸化位点、1个豆蔻酰化位点、3个PKC-磷酸化位点、1个TYR-磷酸化位点；该蛋白含有多个B细胞、Th细胞及CTL细胞抗原优势表位；与hemZ、mmcO、Rv1877、bfrB等蛋白形成相互作用网络。结论通过生物信息学技术预测到BfrA蛋白具有多个B细胞及T细胞抗原表位，在结核病的预防和诊断方面具有应用前景。

关键词：结核分枝杆菌 BfrA Rv1876 生物信息学

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基于建构要素的微生物虚拟仿真实验教学评价

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基础医学教育 2023年第2期25卷 147-149页

作者：缪珠雷杨贵珍姚超姜昕孙锦霞郑月娟朱诗国刘丹上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203

微生物与免疫是上海中医药大学针对中医专业国际学生开设的以介绍病原微生物为主,兼有理论和实验教学的专业基础选修课。文章围绕基于建构主义实验教学理论的直观、建构、情境认知三要素,引入基于虚拟仿真实验的线上教学模式,从教学资... 详细信息

微生物与免疫是上海中医药大学针对中医专业国际学生开设的以介绍病原微生物为主,兼有理论和实验教学的专业基础选修课。文章围绕基于建构主义实验教学理论的直观、建构、情境认知三要素,引入基于虚拟仿真实验的线上教学模式,从教学资源的评估、课程的设计和实施等方面进行了探索,最后对教学效果反馈信息进行了深入分析和思考。

关键词：微生物与免疫虚拟仿真实验教学评价

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