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教育教学论坛 2022年第4期 160-163页

作者：张锐钢罗海兵吴嫦丽徐明锋张秀娟广东医科大学基础医学院生理学教研室广东湛江524023 广东医科大学基础医学院广东湛江524023

生理科学实验是一门融合了生理学实验、病理生理学实验和药理学实验三大模块的实践性的实验操作课程,旨在锻炼医学生的操作水平。为了更好地让学生掌握相关技能,完成实验操作,促进学习自主性,广东医科大学生理学教研室率先在生理学实验... 详细信息

生理科学实验是一门融合了生理学实验、病理生理学实验和药理学实验三大模块的实践性的实验操作课程,旨在锻炼医学生的操作水平。为了更好地让学生掌握相关技能,完成实验操作,促进学习自主性,广东医科大学生理学教研室率先在生理学实验模块中探索重构教学过程,在机能学的实验中引入翻转课堂。经过教师实际上课感受反馈及分析前后两届学生的实验操作完成情况,在生理科学实验中运用翻转课堂取得了良好的教学效果,学生操作明显改善,学习自主性显著增强。

关键词：生理科学实验翻转课堂教学改革

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砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响

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中国药理学通报 2021年第1期37卷 131-135页

作者：李成楼迪栋齐晓岚范海琼朱卫潘际刚贵州医科大学基础医学院生理学教研室贵州贵阳550025 贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州医科大学分子生物学重点实验室贵州贵阳550025

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因... 详细信息

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。

关键词：亚砷酸钠内质网应激 3-巯基丙酮酸硫转移酶硫化氢葡萄糖调节蛋白78 环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白 SH-SY5Y细胞

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氧化苦参碱通过抑制CHK1/2磷酸化改善糖尿病大鼠肾组织的纤维化和炎症

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南方医科大学学报 2021年第10期41卷 1519-1526页

作者：李志阳梁丹肖雅文代云莉艾福军丁菁石明隽肖瑛郭兵贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室//贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550025

目的探讨氧化苦参碱(OMT)抗炎抗纤维化是否是通过影响细胞周期检测点激酶1/2(CHK1/2)来发挥。方法SD大鼠采用完全随机设计分为正常对照组(NC)、糖尿病模型组(DM)和氧化苦参碱治疗组(OMT),6只/组,尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)(55 mg/kg)复... 详细信息

目的探讨氧化苦参碱(OMT)抗炎抗纤维化是否是通过影响细胞周期检测点激酶1/2(CHK1/2)来发挥。方法SD大鼠采用完全随机设计分为正常对照组(NC)、糖尿病模型组(DM)和氧化苦参碱治疗组(OMT),6只/组,尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)(55 mg/kg)复制糖尿病模型。HE、Masson染色观察病理组织形态学变化;免疫组织化学染色观察CHK1、CHK2、p-CHK1、p-CHK2的表达部位;ELISA检测肾组织上清中IL-6和IL-1β的含量;Western blot检测CHK1、CHK2、p-CHK1、p-CHK2、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)蛋白的表达水平;NRK-52E细胞按处理方式分为正常糖对照组(NG组)、高糖模型组(HG组)、正常糖用药组(NG+OMT组)、高糖用药组(HG+OMT组)、正常糖空载组(NG+con组)、正常糖敲低组(NG+siCHK1/2)、高糖空载组(HG+con组)、高糖敲低组(HG+siCHK1/2),Western blot检测CHK1、CHK2、p-CHK1、p-CHK2、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、FN蛋白的表达水平。结果OMT可降低大鼠血糖、血肌酐和24 h尿蛋白(P<0.05);DM组大鼠肾脏已出现炎性细胞浸润和纤维化表型,OMT组有所改善;OMT有明显抗炎作用(P<0.05);CHK1/2主要表达在肾小管胞浆及胞核,DM组CHK1/2磷酸化水平高于NC组、OMT组;大鼠肾组织和NRK-52E细胞中经OMT治疗后p-CHK1、p-CHK2、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、FN蛋白表达含量均明显下降(P<0.05);敲低CHK1/2后p-CHK1/2、Col-Ⅲ、Col-Ⅳ、FN蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论OMT在糖尿病大鼠肾脏中发挥抗炎、抗纤维化的作用机制可能是通过影响CHK1、CHK2的表达从而影响其磷酸化水平,减少下游炎症介质的释放,减轻细胞外基质的分泌和沉积。

关键词：糖尿病肾病氧化苦参碱细胞周期检测点激酶1/2 炎症纤维化

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转录因子E2F1与肿瘤预后和肿瘤免疫的泛癌研究

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武汉大学学报（医学版） 2021年第6期42卷 941-947页

作者：徐靓婧邵尤城龚鹏举陈芳芳张京伟武汉大学中南医院甲状腺乳腺外科湖北武汉430071 武汉大学基础医学院病理生理学教研室湖北武汉430071

目的:揭示E2F1在肿瘤中重要的免疫调节因子的地位,为肿瘤的免疫治疗和预后预测提供新的靶点。方法:利用ONCOMINE数据库、UCSC Xena数据库综合分析E2F1在肿瘤组织以及癌旁组织中的表达。在GEPIA数据库中,测试E2F1表达和泛癌分期之间的相... 详细信息

目的:揭示E2F1在肿瘤中重要的免疫调节因子的地位,为肿瘤的免疫治疗和预后预测提供新的靶点。方法:利用ONCOMINE数据库、UCSC Xena数据库综合分析E2F1在肿瘤组织以及癌旁组织中的表达。在GEPIA数据库中,测试E2F1表达和泛癌分期之间的相关性以及泛癌组织和癌旁组织之间E2F1的表达水平差异。Kaplan-Meier Plotter分析E2F1在泛癌中的差异生存曲线。并综合分析各个肿瘤中E2F1与肿瘤突变负荷(TMB)和微卫星不稳定性(MSI)的相关性。随后使用TISIDB数据库重点研究了每种肿瘤中E2F1与肿瘤免疫浸润细胞之间的相关性。结果:E2F1在多种肿瘤中普遍高表达,且E2F1可以预测多种肿瘤患者的生存率。在多种肿瘤中,E2F1与肿瘤突变负荷和微卫星不稳定性明显相关。E2F1和ACT-CD4淋巴细胞的关系最为明显,尤其是在乳腺浸润癌(BRCA)、肾透明细胞癌(KIRC)和肝细胞肝癌(LIHC)这三种肿瘤中。结论:E2F1是至关重要的肿瘤预后预测因子,并在一定程度上调节多种肿瘤相关的免疫反应。

关键词： E2F1 ACT-CD4淋巴细胞泛癌预后肿瘤微环境

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利用加权基因共表达网络分析挖掘促进乳腺癌循环肿瘤细胞转移的关键基因

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武汉大学学报（医学版） 2021年第1期42卷 72-77页

作者：曾祎凡张京伟邵尤城龚鹏举陈芳芳武汉大学中南医院甲状腺乳腺外科湖北武汉430071 武汉大学基础医学院病理生理学教研室湖北武汉430071

目的:通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法筛选促进乳腺癌循环肿瘤细胞转移的基因,为乳腺癌转移的早期预警提供循环肿瘤细胞标志物,也为乳腺癌发展动态监测提供新策略。方法:利用WGCNA筛选出数据集GSE9893中与乳腺癌转移相关的基因,... 详细信息

目的:通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法筛选促进乳腺癌循环肿瘤细胞转移的基因,为乳腺癌转移的早期预警提供循环肿瘤细胞标志物,也为乳腺癌发展动态监测提供新策略。方法:利用WGCNA筛选出数据集GSE9893中与乳腺癌转移相关的基因,将所选基因与在循环肿瘤细胞数据库中高表达的基因取交集作为候选基因,最后在肿瘤基因组计划(TCGA)数据库中验证候选基因的表达水平。结果:1024个基因在伴转移的乳腺癌中高表达,WGCNA从中得到与乳腺癌转移相关的67个基因,其中ACTB和DDX5基因在乳腺癌循环肿瘤细胞中呈现出高表达的状态,并且DDX5在TCGA伴转移的乳腺癌样本中也高表达。结论:DDX5可作为乳腺癌发展动态监测的循环肿瘤细胞标志物,并可能为乳腺癌治疗提供新的靶点。

关键词：乳腺癌加权基因共表达网络分析循环肿瘤细胞转移

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黄杞苷对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用

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滨州医学院学报 2021年第1期44卷 1-6页

作者：刘慧闫冬徐洋洋李淑翠张树平滨州医学院基础医学院药理学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院药学部山东滨州256603

目的探讨黄杞苷对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用与分子机制。方法黄杞苷(5、10、20、40、80和160μmol·L-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h,MTT法检测黄杞苷对H_(2)O_(2)诱导损伤后细胞活力的影响;通过氮蓝四唑(NBT)法总超氧化... 详细信息

目的探讨黄杞苷对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用与分子机制。方法黄杞苷(5、10、20、40、80和160μmol·L-1)预处理SH-SY5Y细胞12 h,MTT法检测黄杞苷对H_(2)O_(2)诱导损伤后细胞活力的影响;通过氮蓝四唑(NBT)法总超氧化物歧化酶(SOD)活力检测试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶(NADPH)检测试剂盒测定黄杞苷对H_(2)O_(2)诱导损伤后SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响;通过流式细胞术对SH-SY5Y细胞进行活性氧(ROS)水平的测定。黄杞苷(20μmol·L^(-1))预处理SH-SY5Y细胞12 h,H2O2孵育6、12和24 h或用黄杞苷(5、10和20μmol·L^(-1))预处理细胞12 h,H2O2孵育12 h,采用Western blot法分别检测Nrf2及HO-1表达情况。结果与模型组比较,黄杞苷能够提高SH-SY5Y细胞的活力,显著提高SOD和GSH水平,减少ROS产生(P<0.05)。黄杞苷能够促进Nrf2蛋白由细胞质向细胞核内转移,黄杞苷(20μmol·L^(-1))预处理SH-SY5Y细胞12 h时转移达到顶峰。H_(2)O_(2)损伤模型下,黄杞苷浓度依赖性地促Nrf2的核内转移(P<0.05),并促进下游蛋白HO-1的表达(P<0.05)。结论黄杞苷对H2O2诱导SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其作用机制与抗氧化,促进Nrf2、HO-1的表达有关。

关键词：黄杞苷 SH-SY5Y 氧化应激损伤 Nrf2 HO-1

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LncRNA GATA3-AS1促进乳腺癌细胞的增殖迁移及其机制

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医学新知 2022年第2期32卷 127-137页

作者：江琪习一清魏蕾武汉大学基础医学院病理生理学教研室武汉430071 武汉大学中南医院甲乳外科武汉430071

目的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)与多种肿瘤的发生发展密切相关。本研究旨在探讨LncRNA GATA3-AS1在乳腺癌进展中的生物学作用及其机制。方法使用starBase等在线数据库预测GATA3-AS1的下游靶基因GATA3,采用qRT-PCR技... 详细信息

目的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)与多种肿瘤的发生发展密切相关。本研究旨在探讨LncRNA GATA3-AS1在乳腺癌进展中的生物学作用及其机制。方法使用starBase等在线数据库预测GATA3-AS1的下游靶基因GATA3,采用qRT-PCR技术检测正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中LncRNA GATA3-AS1的表达水平,通过在线数据库预测其表达与乳腺癌不同临床病理特征的关系。利用质粒转染实验获得低表达GATA3-AS1的细胞株,使用Cell Counting Kit-8(CCK8)实验、划痕实验、Transwell实验评估GATA3-AS1在乳腺癌进展中的功能,并采用蛋白印迹实验验证GATA3-AS1和GATA3的表达相关性。结果 GATA3-AS1在乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中显著高表达,通过bc-GenExMiner数据库在线分析,GATA3-AS1在年龄> 51岁、人类表皮生长因子受体2阴性(HER2-)、雌激素受体阳性(ER+)、孕激素受体阳性(PR+)、激素受体A阳性型(luminal A)的乳腺癌患者中表达量更高,且GATA3-AS1的表达与乳腺癌的总生存期呈显著负相关。体外实验表明,沉默GATA3-AS1可显著降低乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7的增殖迁移能力。此外,在MDA-MB-231和MCF-7细胞系中敲低GATA3-AS1后,GATA3蛋白水平显著升高,提示GATA3-AS1的促癌作用可能是通过其蛋白编码基因GATA3的表达来介导。结论 LncRNA GATA3-AS1可能通过调节GATA3的表达促进乳腺癌肿瘤细胞的增殖与迁移。

关键词：长链非编码RNA GATA3-AS1 乳腺癌增殖迁移调控机制

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柚皮素通过Nrf2/HO-1通路减轻链脲佐菌素诱导的SH-SY5Y细胞损伤

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神经解剖学杂志 2020年第5期36卷 553-559页

作者：向辉秦晶晶茶喆李玉林余华荣重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016

目的:研究柚皮素(Nar)能否通过核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路减轻链脲佐菌素(STZ)诱导的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞损伤。方法:将SH-SY5Y细胞分为3组:对照组(control)、STZ处理组(STZ)和STZ与Nar联合处理... 详细信息

目的:研究柚皮素(Nar)能否通过核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路减轻链脲佐菌素(STZ)诱导的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞损伤。方法:将SH-SY5Y细胞分为3组:对照组(control)、STZ处理组(STZ)和STZ与Nar联合处理组(STZ+Nar)。STZ组为用8 mmol/L STZ处理SH-SY5Y细胞,STZ+Nar组为用8 mmol/L STZ与200μmol/L Nar共同处理SH-SY5Y细胞。利用CCK-8试剂盒检测细胞活性;Annexin-V/PI染色检测细胞凋亡情况;活性氧(ROS)染色检测细胞ROS水平;Western Blot检测Nrf2与HO-1蛋白的表达情况;Real time RT-PCR检测Nrf2与HO-1的mRNA表达水平。结果:与control组相比,STZ组在8 mmol/L STZ处理4 h后达到半数致死量,ROS水平显著提升,细胞凋亡率达到约50%,Nrf2蛋白水平有所提高(P <0.05),Nrf2的mRNA水平未见显著性差异,HO-1蛋白水平未见显著性差异而mRNA水平明显升高(P <0.01)。当Nar与STZ共同处理细胞后,与STZ组相比,细胞活性显著提升(P <0.01),ROS水平明显下降,细胞凋亡率显著下降(P <0.01),Nrf2蛋白与mRNA水平显著升高(P <0.01),HO-1蛋白水平显著升高(P <0.01),HO-1 mRNA水平有所升高(P <0.05)。结论:Nar能通过增强Nrf2/HO-1信号通路的活性减轻STZ诱导的SH-SY5Y细胞损伤。

关键词：柚皮素链脲佐菌素氧化应激 Nrf2/HO-1 SH-SY5Y细胞

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案例融合优秀科研资源在病理生理学教学中的应用

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继续医学教育 2021年第12期35卷 79-81页

作者：徐芳王蔚琛刘巍李钰伶石磊滨州医学院病理生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院附属医院检验科山东烟台264003

高等医学教育的根本目的是为社会提供优质的医药卫生人力资源,在基础医学教育阶段让学生早期接触临床和科研,建立起良好的临床思维和科研思维学习模式是高等医学教育发展的重要要求。病理生理学教学中以案例教学为主体,将优秀科研资源... 详细信息

高等医学教育的根本目的是为社会提供优质的医药卫生人力资源,在基础医学教育阶段让学生早期接触临床和科研,建立起良好的临床思维和科研思维学习模式是高等医学教育发展的重要要求。病理生理学教学中以案例教学为主体,将优秀科研资源融入案例教学过程,使教学内容得以丰富和升华,形成教学与科研的良性互动。案例教学融合优秀科研资源的教学模式不仅培养了学生的临床思维,发现问题解决问题的能力,而且启发了学生的科研思维,培养了严谨的科学态度和较强的科研探索创造精神。

关键词：病理生理学案例教学科研资源教学质量科研思维创新人才

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脑小血管病MRI规范化应用专家共识

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中华放射学杂志 2024年第1期58卷 6-17页

作者：中华医学会放射学分会神经学组马林陈峰黎海涛金光暐胡晓飞赵艺蕾禹智波刘衡姚忠祥刘涛不详解放军总医院第一医学中心放射诊断科北京100853 海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)放射科海口570311 陆军军医大学西南医院放射科重庆400038 应急管理部应急总医院影像科北京100028 浙江大学医学院附属第一医院放射科解放军陆军第九五八医院放射科遵义医科大学附属医院放射科陆军军医大学基础医学院生理学教研室海南省人民医院老年医学中心

脑小血管病(CSVD)是严重危害健康的常见疾病,临床表现具有非特异性和主观性,诊断高度依赖于神经影像学特征。目前关于CSVD的MRI诊断标准及报告规范亟待统一,为临床诊断治疗及疾病监测提供有价值的影像资料。为此,《脑小血管病MRI规范化... 详细信息

脑小血管病(CSVD)是严重危害健康的常见疾病,临床表现具有非特异性和主观性,诊断高度依赖于神经影像学特征。目前关于CSVD的MRI诊断标准及报告规范亟待统一,为临床诊断治疗及疾病监测提供有价值的影像资料。为此,《脑小血管病MRI规范化应用专家共识》本着“统一标准、规范认识、指导实践”的目的,将基础知识、影像诊断、临床科研成果相结合,着重阐述CSVD的MRI扫描与报告规范化应用,以期指导临床实践,全面提升我国CSVD诊治同质化水平。

关键词：磁共振成像脑小血管病规范化诊断共识

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