检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2017年第11期33卷 1987-1992页

作者：郝瑞敏谢书阳韩婉虹阎云飞孙允霄岳真马颖李有杰滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003

目的:探讨千金藤素对人肺癌A549细胞生长的影响及可能机制。方法:千金藤素处理A549细胞后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡;real-time PCR检测微小RNA(miR)-150、miR-182、p53 mRNA和FO... 详细信息

目的:探讨千金藤素对人肺癌A549细胞生长的影响及可能机制。方法:千金藤素处理A549细胞后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡;real-time PCR检测微小RNA(miR)-150、miR-182、p53 mRNA和FOXO1 mRNA的表达变化;通过软件预测miR-150和miR-182的下游靶基因;采用Western blot法分析细胞中p53和FOXO1蛋白表达的变化。结果:在千金藤素作用下,A549细胞生长受到抑制,凋亡率明显增加;千金藤素作用后,细胞内miR-150和miR-182的表达水平显著下降;在10μmol/L的千金藤素作用后,细胞内p53和FOXO1的表达水平升高,而在30μmol/L时,细胞内p53和FOXO1的表达水平降低;在细胞内转染miR-150后,p53表达明显减少,而转染miR-182后,FOXO1表达显著降低。结论:千金藤素能够抑制A549细胞生长,促进A549细胞凋亡,可能是通过抑制miR-150和miR-182表达发挥作用;而miR-150和miR-182可能分别通过下调p53和FOXO1的表达发挥作用。

关键词：千金藤素微小RNA-150 微小RNA-182 p53 FOXO1

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千金藤素诱导人肺腺癌LTEP-a-2细胞中miRNA表达变化的研究

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中国病理生理杂志 2015年第8期31卷 1412-1416页

作者：张亚龙张菡菡阎云飞庞敏谢书阳李有杰滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003

目的:观察千金藤素对人肺腺癌LTEP-a-2细胞生长的影响,探讨细胞中相关微小RNA(miRNA)的表达变化,为明确千金藤素的抗肿瘤机制提供科学依据。方法:在0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L的千金藤素作用后,MTT法检测LTEP-a-2细胞... 详细信息

目的:观察千金藤素对人肺腺癌LTEP-a-2细胞生长的影响,探讨细胞中相关微小RNA(miRNA)的表达变化,为明确千金藤素的抗肿瘤机制提供科学依据。方法:在0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L的千金藤素作用后,MTT法检测LTEP-a-2细胞的生长抑制率;光镜下观察千金藤素作用后LTEP-a-2细胞的形态学变化;流式细胞术分析不同浓度千金藤素对LTEP-a-2细胞凋亡的影响;提取细胞miRNA,real-time PCR检测不同浓度千金藤素作用之后细胞中的let-7c、miR-34a和miR-34b的表达情况。结果:MTT法检测结果表明,千金藤素能够抑制LTEP-a-2细胞活力,呈现剂量依赖性;倒置显微镜下可见,随着千金藤素浓度的升高,细胞固缩的程度逐渐加深;流式细胞术分析发现,不同浓度千金藤素均可导致的LTEP-a-2细胞凋亡率增加;real-time PCR结果表明,千金藤素可以使LTEP-a-2细胞中的let-7c、miR-34a和miR-34b表达升高。结论:千金藤素可以抑制LTEP-a-2细胞生长,诱导细胞凋亡;千金藤素升高细胞中let-7c、miR-34a和miR-34b表达,提示这些miRNA在LTEP-a-2细胞具有抑癌基因的功能。

关键词：千金藤素 LTEP-a-2细胞微小RNA

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siRNA沉默CDX2基因联合化疗药物对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2016年第2期23卷 218-222页

作者：孙维梅李建厂贾秀红李有杰唐慎华滨州医学院附属医院儿科山东烟台264003 滨州医学院山东省肿瘤分子生物学重点实验室山东烟台264003

目的:探讨siRNA靶向沉默CDX2基因联合长春新碱(vincristine,VCR)对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响。方法:设计靶向沉默CDX2基因表达的特异性siRNA序列CDX2-siRNA-921和相应的阴性对照序列CDX2-siRNA-NC,分别转染K562细胞,同时设正常细... 详细信息

目的:探讨siRNA靶向沉默CDX2基因联合长春新碱(vincristine,VCR)对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响。方法:设计靶向沉默CDX2基因表达的特异性siRNA序列CDX2-siRNA-921和相应的阴性对照序列CDX2-siRNA-NC,分别转染K562细胞,同时设正常细胞组做对照。分别应用Real-time PCR和Western blotting法检测转染CDX2-siRNA-921对细胞内CDX2、BCR-ABL mRNA和蛋白表达的影响;siRNA和VCR单独或联合作用于K562细胞后,应用MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖抑制率、凋亡率的变化。结果:与正常细胞组相比,CDX2-siRNA-921能够显著降低目的基因CDX2和BCR-ABL mRNA与蛋白的表达(均P<0.05),而CDX2-siRNA-NC组CDX2和BCR-ABL mRNA与蛋白表达量无明显变化;与VCR组、CDX2-siRNA-NC组和VCR+CDX2-siRNA-NC组相比,VCR+CDX2-siRNA-921组细胞增殖抑制率降低,凋亡率明显增加(均P<0.05)。结论:CDX2-siRN-921能显著降低K562细胞内CDX2 mRNA和蛋白的表达,并能够下调BCR-ABL融合基因表达水平,同时增强VCR对K562细胞增殖抑制、凋亡诱导作用。

关键词：小干扰RNA 白血病 CDX2 长春新碱 BCR-ABL 增殖凋亡

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Cyclin D1调控肺癌细胞的浸润和转移

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生理学报 2012年第1期64卷 55-61页

作者：李尊岭邵淑红焦飞岳真马颖滨州医学院生物化学与分子生物学教研室分子遗传学研究所山东省教育厅肿瘤分子生物学重点实验室烟台264003 滨州医学院基础心理学教研室烟台264003

Cyclin D1作为细胞周期的一个调控因子,许多肿瘤细胞都过表达Cyclin D1基因,比如肺癌、乳腺癌、甲状腺癌等。但是Cyclin D1在肿瘤细胞浸润和转移中的作用报道较少。本研究旨在研究Cyclin D1对肺癌细胞浸润、转移的调控作用。以肺腺癌细... 详细信息

Cyclin D1作为细胞周期的一个调控因子,许多肿瘤细胞都过表达Cyclin D1基因,比如肺癌、乳腺癌、甲状腺癌等。但是Cyclin D1在肿瘤细胞浸润和转移中的作用报道较少。本研究旨在研究Cyclin D1对肺癌细胞浸润、转移的调控作用。以肺腺癌细胞A549(高表达Cyclin D1)和肺鳞癌细胞SK-MES-1(低表达Cyclin D1)为研究对象。取裸鼠尾静脉注射A549或SK-MES-1细胞,4周后处死,从肺脏中分离出肿瘤细胞再接种另外的裸鼠,如此经过2次循环接种构建裸鼠高转移动物模型。向A549细胞转染Cyclin D1的干扰RNA抑制Cyclin D1的表达,同时向SK-MES-1细胞转染Cyclin D1的表达载体促进Cyclin D1的表达,随后通过细胞迁移实验观察基因处理后A549和SK-MES-1细胞的转移能力变化。用Western blot检测亲本细胞、不同转移层次裸鼠的癌组织中Cyclin D1和WNT/TCF信号通路相关蛋白因子的表达。结果显示,随着转移次数增加,从动物癌组织中分离出的癌细胞转移能力显著增强,Cyclin D1表达也明显升高;在A549细胞中,干扰Cyclin D1的表达可使细胞迁移能力变弱;在SK-MES-1细胞中,过表达Cyclin D1可使细胞迁移能力增强。高转移肺癌动物模型肿瘤组织中β-catenin、LEF、TCF蛋白表达高于低转移肿瘤组织,而二者的上述蛋白表达均高于亲本肺癌细胞。以上结果提示,Cyclin D1的表达与肺癌的浸润和转移密切相关,推测WNT/TCF信号通路能够促进Cyclin D1的表达。

关键词：肺肿瘤 Cyclin D1 干扰RNA 肿瘤转移 WNT信号通路

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结肠癌中相关miRNA对NRP2调控的预测及鉴定

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世界华人消化杂志 2014年第5期22卷 624-629页

作者：李明连海峰刘成霞马锋振谢书阳滨州医学院附属医院消化内科山东省滨州市256603 滨州医学院肿瘤分子生物学重点实验室山东省烟台市264003

目的:预测可能调控神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2)的微小RNA(microRNA,miRNA),鉴定其对NRP2的调控作用及可能的调控机制.方法:使用生物信息学软件预测可能调控NRP2的miRNA,选择可能性最大的miRNA-486-5p进一步研究,构建miRNA-486-5p... 详细信息

目的:预测可能调控神经纤毛蛋白2(neuropilin-2,NRP2)的微小RNA(microRNA,miRNA),鉴定其对NRP2的调控作用及可能的调控机制.方法:使用生物信息学软件预测可能调控NRP2的miRNA,选择可能性最大的miRNA-486-5p进一步研究,构建miRNA-486-5p过表达质粒,采用脂质体法将质粒转染入人结肠癌细胞株SW620,实时定量PCR(qRT-PCR)验证miRNA-486-5p的表达丰度,Western blot检测NRP2的表达,双荧光素酶实验验证miRNA-486-5p对NRP2的调控机制.结果:生物信息学技术预测共有25条miRNA可能调控NRP2的表达,结合文献选择miR-486-5p进一步研究;miR-486-5p过表达质粒转染SW620细胞后,表达丰度升高,NRP2蛋白表达明显下调,双荧光素酶实验证实miRNA-486-5p可与NRP2 mRNA 3'非转录区(3'untranslated region,3'UTR)直接结合,从而发挥对NRP2转录后翻译的抑制作用.结论:miRNA-486-5p可调控的NRP2的表达,其作用机制是通过结合NRP2 3'UTR而抑制NRP2 mRNA的正常翻译.

关键词： NRP2 miRNA-486-5p 转染生物信息学技术

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慢病毒介导的RASSF1A表达抑制小细胞肺癌H446细胞的生长~

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中国病理生理杂志 2014年第7期30卷 1209-1213页

作者：孔丽君张立霞栾希英张丽沙王绪菡于恒运张月芝滨州医学院山东省肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室山东烟台264003 滨州医学院烟台附属医院山东烟台264003

目的:探讨Ras相关结构域家族1A(Ras-association domain family 1A,RASSF1A)抑制小细胞肺癌细胞生长的机制。方法:构建含有RASSFlA基因的慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒,感染H446小细胞肺癌细胞。MTT测细胞生长曲线;流式细胞术测细胞周... 详细信息

目的:探讨Ras相关结构域家族1A(Ras-association domain family 1A,RASSF1A)抑制小细胞肺癌细胞生长的机制。方法:构建含有RASSFlA基因的慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒,感染H446小细胞肺癌细胞。MTT测细胞生长曲线;流式细胞术测细胞周期;real-time PCR和Western blotting分别检测细胞周期相关蛋白mRNA和蛋白水平的表达。结果:成功获取稳定表达RASSF1A的H446细胞(RASSF1A-H446)。RASSF1A-H446细胞生长缓慢,细胞周期阻滞在G_1期。Real-time PCR和Western blotting结果显示在RASSF1A-H446细胞中,p21和p27的表达明显升高,E2F1的表达明显降低。结论:RASSF1A通过升高p21、p27和降低E2F1的表达,抑制H446细胞的生长。

关键词：慢病毒肺肿瘤细胞周期

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RASSF1A与Elf-1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

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中国癌症防治杂志 2012年第3期4卷 246-251页

作者：孔丽君胡金霞张菡菡滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室烟台264003

目的利用组织芯片技术结合免疫组化方法探讨RASSF1A和Elf-1基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的蛋白表达及与临床病理学特征的关系。方法构建含有72例非小细胞肺癌及10例正常肺组织标本的组织芯片,以免疫组织化学PowerVisionTM-900(PV-90... 详细信息

目的利用组织芯片技术结合免疫组化方法探讨RASSF1A和Elf-1基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的蛋白表达及与临床病理学特征的关系。方法构建含有72例非小细胞肺癌及10例正常肺组织标本的组织芯片,以免疫组织化学PowerVisionTM-900(PV-9000)法检测RASSF1A和Elf-1在NSCLC与正常肺组织中的蛋白表达。结果 RASSF1A和Elf-1在肺癌组织中均呈异质性表达。RASSF1A在NSCLC组织中的阳性率为47.22%(34/72),显著低于正常肺组织100%(10/10),两组间的蛋白表达差异具有统计学意义(P=0.002);RASSF1A在有淋巴结转移组的表达强度显著低于无淋巴结转移组(χ2=4.379,P=0.036);RASSF1A的表达在不同的临床分期间差异有统计学意义(χ2=17.979,P=0.000)。Elf-1在NSCLC及正常肺组织中的阳性表达率分别为73.61%(53/72)及20.00%(2/10),两组间的表达差异具有统计学意义(P=0.001),其表达强度与NSCLC的分化程度有关(χ2=7.116,P=0.028);有淋巴结转移组Elf-1的表达强度高于无淋巴结转移组(χ2=5.304,P=0.021);Elf-1的表达在不同的临床分期间亦有差异(χ2=6.791,P=0.034)。NSCLC组织中RASSF1A和Elf-1蛋白的表达强度呈负相关(r=-0.433,P=0.000)。结论在NSCLC组织中RASSF1A表达下调和Elf-1过度表达可能与NSCLC的发生、发展及预后不良有关,RASSF1A及Elf-1基因表达的检测有望作为NSCLC早期诊断、评估其侵袭性及转移性的重要参考指标。

关键词：肺肿瘤 RASSF1A Elf-1 非小细胞肺癌蛋白质阵列分析免疫组化

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人RASSF1A基因慢病毒表达载体的构建及鉴定

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滨州医学院学报 2013年第3期36卷 161-165,168页

作者：孔丽君胡金霞于媛庞敏滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室生物化学与分子生物学教研室烟台264003

目的应用***3d.P/neo构建人RASSF1A基因的慢病毒表达载体并对其进行鉴定。方法采用Oligo核酸软件对Genbank上所发表的RASSF1A序列进行分析,设计一对RASSF1A基因上下游引物,利用Gateway克隆方法,分别在其两端添加attB重组位点,运用PCR扩... 详细信息

目的应用***3d.P/neo构建人RASSF1A基因的慢病毒表达载体并对其进行鉴定。方法采用Oligo核酸软件对Genbank上所发表的RASSF1A序列进行分析,设计一对RASSF1A基因上下游引物,利用Gateway克隆方法,分别在其两端添加attB重组位点,运用PCR扩增RASSF1A和IRES/eGFP,将PCR产物进行BP反应然后转化到Stbl3感受态菌,通过卡那霉素抗性筛选、PCR鉴定,选取鉴定正确的pDown-RASSF1A和pTail-IRES/eGFP克隆测序。将pDown-RASSF1A和pTail-IRES/eGFP与***3d.P/neo混合进行LR反应,构建慢病毒载体***3d.P/neo-EF1A>RASSF1A>IRES/eGFP,再次进行PCR、测序鉴定。结果成功地构建了hRASSF1A基因的重组慢病毒表达载体***3d.P/neo-EF1A>RASSF1A>IRES/eGFP。结论基因序列克隆正确,为进一步探讨RASSF1A在肿瘤基因治疗中的作用奠定了基础。

关键词： RASSF1A基因人目的载体pLV Des3d P neo 慢病毒

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miR-196a2单核苷酸多态性与白血病发病风险的初步研究

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中国癌症杂志 2016年第10期26卷 826-830页

作者：张文娟田喆李有杰商文静谢宁常靖肖静鲍雪临烟台山医院血液内科山东烟台264008 滨州医学院临床医学系山东烟台264003 滨州医学院高校肿瘤分子生物学重点实验室山东烟台264003 烟台山医院心胸外科山东烟台264008 烟台山医院肾内科山东烟台264008

背景与目的:mi R-196a2在肿瘤的发生、发展中起类似于原癌基因的生物学功能。其表达升高会促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,有望成为重要的肿瘤标志物。该研究旨在探讨mi R-196a2基因多态性位点rs11614913与白血病发病风险的关系。方法... 详细信息

背景与目的:mi R-196a2在肿瘤的发生、发展中起类似于原癌基因的生物学功能。其表达升高会促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,有望成为重要的肿瘤标志物。该研究旨在探讨mi R-196a2基因多态性位点rs11614913与白血病发病风险的关系。方法:采用病例-对照分析方法,收集2009年1月—2015年7月在烟台山医院检查确诊的210例白血病患者(病例组)及同期体格检查健康的250名正常体检者(对照组)的骨髓血或外周血,限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测mi R-196a2基因多态性位点rs11614913的基因型,应用χ2检验比较各基因型频率在病例组和对照组中的差异,采用Logistic回归分析计算SNP的等位基因的比值比(odds ratio,OR)和95%CI表示各基因型发生白血病的风险度。结果:病例组和对照组相比,mi R-196a2 rs11614913的T/T、C/C、C/T基因型频率的分布差异有统计学意义(P<0.05),携带突变型纯合子C/C基因型的个体患白血病风险是野生纯合子T/T基因型个体的2.661倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:mi R-196a2基因多态性位点rs11614913与白血病发病风险有关,突变型纯合子C/C或携带C等位基因可能是白血病发生的危险因素。

关键词： mi R-196a2 rs11614913 单核苷酸多态性限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术白血病

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青年型非小细胞肺癌的预后影响因素及列线图构建

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滨州医学院学报 2022年第3期45卷 165-170页

作者：梁东敏洪嘉源谢宁李艳梅谢书阳滨州医学院基础医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室山东烟台264003 滨州医学院附属烟台山医院山东烟台264003

目的研究青年型非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后影响因素,构建可视化预后列线图,以期改善其预后,为个体化预后干预提供科学依据。方法从监测、流行病学和最终结果(SEER)数据库获取临床患者资料后,随机划分训练集和验证集,对训练集应用多因... 详细信息

目的研究青年型非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后影响因素,构建可视化预后列线图,以期改善其预后,为个体化预后干预提供科学依据。方法从监测、流行病学和最终结果(SEER)数据库获取临床患者资料后,随机划分训练集和验证集,对训练集应用多因素Cox比例风险模型分析影响因素,构建列线图模型,从区分度、校准度和临床价值三方面对模型进行全面评价。结果美国癌症联合委员会(AJCC)分期、手术、病理类型、肿瘤大小、骨转移、放疗等是青年型NSCLC患者预后的影响因素。构建的列线图模型区分度较高,训练集3年和5年总生存率(OS)的曲线下面积(AUC)分别为0.911和0.926,验证集分别为0.882和0.856。模型预测的OS与实际OS均具有较高的一致性。决策曲线分析(DCA)结果表明临床净获益较高。结论构建的青年型NSCLC患者可视化预后列线图模型,经评价模型较好,可用于临床实践中青年型NSCLC个体化预后干预。

关键词：非小细胞肺癌 SEER数据库预后列线图

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