检索结果-内蒙古大学图书馆

中国现代医学杂志 2014年第33期24卷 39-42页

作者：朱伟涛刘萍萍杜英邵明明亮郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001 郑州大学第一附属医院河南郑州450052

目的比较酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印迹法(WB)检测抗核小体抗体(Anu A)的差异,为临床工作寻找合适的检测方法。方法收集818例临床血标本,其中系统性红斑狼疮(SLE)360例,其他自身免疫性疾病458例,同时采用ELISA和WB两种方法检测样本... 详细信息

目的比较酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印迹法(WB)检测抗核小体抗体(Anu A)的差异,为临床工作寻找合适的检测方法。方法收集818例临床血标本,其中系统性红斑狼疮(SLE)360例,其他自身免疫性疾病458例,同时采用ELISA和WB两种方法检测样本血清中Anu A,计算每种方法的敏感度、特异度、ROC曲线,并运用SPSS 17.0进行统计学分析。结果 ELISA与WB检测Anu A的阳性率分别为35.1%和31.1%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。准确度、敏感度和特异度无差异。结论 ELISA与WB检测Anu A的总一致率高,对SLE诊断的准确度较高,敏感度和特异度均较好。提示临床监测时,可应用WB进行Anu A检测的初筛,需要时应用ELISA进行复检,可以提高6.4%的Anu A检测阳性率,为临床提供更好的SLE诊断及疾病活动度的信息。

关键词：酶联免疫吸附法免疫印迹法抗核小体抗体

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MSCs及其上清液预防大鼠佐剂性关节炎的实验研究

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安徽医科大学学报 2014年第1期49卷 22-26页

作者：许键炜何志旭申长清赵芳芳贵阳医学院药理学教研室贵阳550004 贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心贵阳550004 济宁医学院附属医院儿科济宁272029 蚌埠医学院微生物学教研室蚌埠233030

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)及其上清液对大鼠佐剂性关节炎(AA)的预防作用。方法培养扩增SD大鼠骨髓MSCs,收集MSCs及其上清液。将健康雄性SD大鼠右后足跖皮内一次性注射弗氏完全佐剂0.1 ml/只造模。造模后行MSCs及其上清液干预。造... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)及其上清液对大鼠佐剂性关节炎(AA)的预防作用。方法培养扩增SD大鼠骨髓MSCs,收集MSCs及其上清液。将健康雄性SD大鼠右后足跖皮内一次性注射弗氏完全佐剂0.1 ml/只造模。造模后行MSCs及其上清液干预。造模前1 d、造模后7、14、21、28 d测量大鼠体重和后足爪体积,同时观察大鼠生存状况。干预后第28天,行四肢关节X线片及病理检查。结果 MSCs干预组和上清液干预组大鼠,原发性炎症和继发病变均不明显,关节X线片和病理检查均未见明显异常,与模型组大鼠相比,体重和足爪体积差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MSCs及其上清液可有效干预弗氏完全佐剂诱导的大鼠AA的进展。

关键词：骨髓间充质干细胞上清液佐剂性关节炎

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宫颈肿瘤组织高危型HPV新分型检测方法的建立及应用

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肿瘤学杂志 2015年第11期21卷 889-894页

作者：谢旺凯王慧静肖兰兰计苏惠王俭陈向敏邹阮敏陈俊薛向阳温州医科大学第二临床学院浙江温州325035 温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江温州325035 温州医科大学附属第一医院浙江温州325000 温州医科大学微生物学与免疫学教研室分子病毒与免疫研究所热带医学研究所浙江温州325035

[目的]建立一种新型宫颈肿瘤组织高危型人乳头瘤病毒(HPV)检测及分型方法,并评价其临床应用。[方法]基于我国人群流行的5种高危型HPV(HPV 16、18、31、33、51)的E6/E7早期基因序列,设计特异性引物,以明确HPV型别的宫颈癌细胞株及宫颈肿... 详细信息

[目的]建立一种新型宫颈肿瘤组织高危型人乳头瘤病毒(HPV)检测及分型方法,并评价其临床应用。[方法]基于我国人群流行的5种高危型HPV(HPV 16、18、31、33、51)的E6/E7早期基因序列,设计特异性引物,以明确HPV型别的宫颈癌细胞株及宫颈肿瘤组织为模板,进行PCR检测,结合基因测序验证引物的特异性。进一步优化条件,建立高危型HPV多重PCR检测方法,检测65例宫颈肿瘤组织标本,与临床上使用的流式荧光杂交HPV检测法比较,评价其敏感性和特异性。[结果]成功建立可同时检测5种高危型HPV的多重PCR检测方法,对65例宫颈肿瘤组织进行高危型HPV检测,检出率为72.3%,明显高于临床流式荧光杂交检测法的检出率(32.31%)(χ2=3.86,P<0.05)。[结论 ]基于HPV E6/E7早期基因的高危型HPV多重PCR检测方法是特异、灵敏的高危型HPV检测方法。

关键词：人乳头瘤病毒多聚酶链反应基因分型宫颈肿瘤

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NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

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第九届全国免疫学学术大会

作者：胡为民郭亚平朱红付茂勇王朝莉李倩倩川北医学院微生物学与免疫学教研室

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca1 09细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达。Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组... 详细信息

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca1 09细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达。Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组中已发现包括Nek1～11共11个成员。其中,Nek2、Nek6、Nek7和Nek9与有丝分裂有关,Nek1和Nek8与纤毛形成有关,Nek1、Nek2和Nek11参与DNA损伤反应。越来越多的研究表明,Nek家族部分成员的表达或功能异常与肿瘤的发生发展高度相关,其中以Nek2、Nek6研究最多。目前关于Nek8的研究较少,多集中在与囊性肾病的关系,本研究初步探索了Nek8与食管鳞癌的关系。目的:探讨食管鳞癌组织和细胞系中Nek8的表达及其与食管鳞癌临床病理特征和术后生存的关系,寻找新的抗肿瘤治疗的靶标。方法:采用RT-PCR的方法,检测食管鳞癌细胞系Eca109细胞、两例配对的食管鳞癌组织和癌旁粘膜上皮中Nek8 mRNA表达情况;应用免疫组织化学方法检测Nek8蛋白在食管鳞癌组织芯片中的表达情况,并结合临床病理资料和生存率进行统计学分析。结果:Nek8 mRNA在Eca109细胞、两食管鳞癌病人的癌组织均有表达,而癌旁食管粘膜上皮中均未见明显的表达。组织芯片结果示Nek8蛋白主要表达于胞浆,在78例配对的标本中,Nek8在食管鳞癌组织中的表达显著高于其在癌旁粘膜组织的表达(P=2.16E-13)。其表达与肿瘤大小有关(P=0.008),而与性别、年龄、分化程度、浸润深度、淋巴结转移无关(P>0.05)。生存分析显示高表达和低表达Nek8的患者生存率无显著差异(P>0.05)。结论:Nek8在食管鳞癌组织和细胞中表达上调,可能参与了食管鳞癌的发生发展,可作为诊断的标志物和治疗的靶标。

关键词： Nek8 食管鳞癌免疫组织化学药物靶标

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siRNA沉默SIRT1基因对宫颈癌细胞HeLa增殖和凋亡的影响

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微生物学杂志 2014年第3期34卷 47-51页

作者：吴琦于红张文卿青岛大学医学院医学微生物学教研室山东青岛266071

化学合成靶向SIRT1基因的小干扰RNA,脂质体法转染人宫颈癌细胞株HeLa,观察小干扰RNA沉默SIRT1基因对HeLa增殖及细胞凋亡的影响。在优化siRNA SIRT1转染条件的基础上,应用RT-PCR和Western blot分别检测各组SIRT1 mRNA、SIRT1蛋白及凋亡... 详细信息

化学合成靶向SIRT1基因的小干扰RNA,脂质体法转染人宫颈癌细胞株HeLa,观察小干扰RNA沉默SIRT1基因对HeLa增殖及细胞凋亡的影响。在优化siRNA SIRT1转染条件的基础上,应用RT-PCR和Western blot分别检测各组SIRT1 mRNA、SIRT1蛋白及凋亡相关蛋白的表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Hoechst荧光染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明,siRNA SIRT1转染细胞组SIRT1 mRNA水平和蛋白表达量明显低于对照组;siRNA SIRT1转染组细胞增殖受抑制,细胞凋亡率明显增加;凋亡相关蛋白P53、P21表达上调,Survivin表达下调。上述结果表明:siRNA SIRT1诱导的HeLa细胞凋亡与P53、P21、Survivin通路关系密切,但siRNA SIRT1诱导HeLa细胞凋亡的详尽机制有待进一步研究。

关键词：宫颈癌 SIRT1 小干扰RNA 细胞增殖细胞凋亡

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肝硬化大鼠TGF-α和TGF-β1变化及丹参素的作用

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长治医学院学报 2014年第3期28卷 165-168页

作者：田小霞张慧英冀菁荃贾建桃陈云霞李宝红长治医学院病理生理学教研室 046000 长治医学院微生物学教研室

目的:探讨复合致病因素诱导的肝硬化大鼠TGF-α和TGF-β1改变及丹参素的保护作用。方法:取24只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(8只)、肝硬化组(8只)、丹参素干预组(8只)。采用复合致病因素法复制大鼠肝硬化模型,丹参素干预组采用丹... 详细信息

目的:探讨复合致病因素诱导的肝硬化大鼠TGF-α和TGF-β1改变及丹参素的保护作用。方法:取24只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(8只)、肝硬化组(8只)、丹参素干预组(8只)。采用复合致病因素法复制大鼠肝硬化模型,丹参素干预组采用丹参素进行干预[0.05g/(kg·w),每日灌胃]。于实验第8周末取材;检测血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和内毒素水平;检测血浆和肝组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-α(TGF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;肝组织切片行HE染色,观察病理学变化。结果:与正常对照组相比,肝硬化组脂肪变性明显,有典型的假小叶形成;血浆ALT、AST和内毒素水平显著升高(P<0.05);血浆和肝组织匀浆TNF-α和TGF-β1水平也显著升高(P<0.05),而TGF-α水平无明显变化。与肝硬化组相比,丹参素干预组大鼠肝纤维化程度明显减轻;血浆ALT、AST和内毒素水平显著降低(P<0.05);血浆和肝组织匀浆TNF-α和TGF-β1水平也显著降低(P<0.05),而TGF-α水平显著增高(P<0.05)。结论:在持续的肠源性内毒素作用下,TNF-α大量产生,TGF-α和TGF-β1之间失平衡,可能是复合致病因素诱导的大鼠肝硬化发病的重要机制,丹参素可以通过某种机制降低内毒素水平,减少TNF-α的产生,在一定程度上维持TGF-α和TGF-β1之间的平衡,对肝脏发挥促再生和保护作用。

关键词：内毒素肝硬化肝再生肝纤维化丹参素

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NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

NIMA相关激酶家族成员Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：胡为民郭亚平朱红付茂勇王朝莉李倩倩川北医学院微生物学与免疫学教研室

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca109细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达.Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组中... 详细信息

研究背景:在一项食管癌相关的研究中,我们意外发现Nek8基因在食管鳞癌细胞系Eca109细胞中高表达,而正常食管粘膜上皮不表达.Nek8属NIMA相关激酶家族(Never-in-mitosis A-related kinase,Nek),该家族为丝氨酸/苏氨酸激酶,在人类基因组中已发现包括Nek1～11共11个成员.其中,Nek2、Nek6、Nek7和Nek9与有丝分裂有关,Nek1和Nek8与纤毛形成有关,Nek1、Nek2和Nek11参与DNA损伤反应.越来越多的研究表明,Nek家族部分成员的表达或功能异常与肿瘤的发生发展高度相关,其中以Nek2、Nek6研究最多.目前关于Nek8的研究较少,多集中在与囊性肾病的关系,本研究初步探索了Nek8与食管鳞癌的关系.

关键词： Nek8 食管鳞癌免疫组织化学药物靶标

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基于DENV-prM/E基因构建DENV-VLP及其免疫学特性

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中山大学学报（医学科学版） 2014年第4期35卷 494-499页

作者：方丹云刘岩喻治准罗雅艳江丽芳周俊梅中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080

[目的]构建和表达登革病毒4型病毒样颗粒,初步研究其免疫学特性.[方法]用RT-PCR法扩增DENV4-prM/E基因,构建重组质粒pGAPZ-sprM/E-D4,转化X33酵母菌株,SDS-PAGE、Western Blot鉴定目的蛋白表达.切片电镜检测病毒样颗粒,蔗糖密度梯度离... 详细信息

[目的]构建和表达登革病毒4型病毒样颗粒,初步研究其免疫学特性.[方法]用RT-PCR法扩增DENV4-prM/E基因,构建重组质粒pGAPZ-sprM/E-D4,转化X33酵母菌株,SDS-PAGE、Western Blot鉴定目的蛋白表达.切片电镜检测病毒样颗粒,蔗糖密度梯度离心纯化.免疫三组Balb/C小鼠,每组15只.采用间接ELISA检测抗原特异性抗体,间接免疫荧光法检测免疫血清与天然病毒粒子的结合,流式细胞术分析小鼠脾淋巴细胞表型,酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测脾分泌IFN-γ、TNF-α和IL-10的细胞.[结果]重组质粒在酵母中以病毒样颗粒形式表达,为直径20～ 30hm的球形颗粒,VLP免疫组刺激小鼠产生抗体与灭活病毒组相似,流式及ELISPOT结果提示DENV4-VLP与灭活病毒组相似,用登革病毒抗原刺激后,分泌IFN-γ,TNF-α的细胞数目明显增加,各组分泌IL-10细胞数目的整体水平均不高.[结论]应用毕赤酵母表达系统成功表达获得了DENV4-VLP,具有良好的免疫原性,可诱导Balb/C小鼠产生有效的体液免疫应答,并能诱导Th1型免疫应答而诱导Th2型免疫应答较弱.

关键词：登革病毒病毒样颗粒免疫应答

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伊曲康唑对白色念珠菌生物膜形成不同时期抑制作用分析

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青岛大学医学院学报 2014年第4期50卷 330-332页

作者：李鹏军张汝叶志鹏吕欣丁守怡青岛大学医学院医学微生物学教研室山东青岛266071

目的观察白色念珠菌生物膜生长动力学特征,分析伊曲康唑对其生物膜形成不同时期的抑制作用。方法用微孔板法建立白色念珠菌生物膜模型,采用CCK-8法检测生物膜不同时期的细胞活性;分别测定伊曲康唑对白色念珠菌临床株游离态和生物膜态的... 详细信息

目的观察白色念珠菌生物膜生长动力学特征,分析伊曲康唑对其生物膜形成不同时期的抑制作用。方法用微孔板法建立白色念珠菌生物膜模型,采用CCK-8法检测生物膜不同时期的细胞活性;分别测定伊曲康唑对白色念珠菌临床株游离态和生物膜态的半数抑制浓度（MIC50、SMIC50）,比较生物膜形成不同时期对伊曲康唑的敏感性。结果白色念珠菌生物膜态在4～8h内,细胞代谢活性逐渐升高,18h时代谢水平趋于稳定;不同浓度的伊曲康唑对白色念珠菌有抑制作用,随着伊曲康唑浓度的增加,A值逐渐减小;白色念珠菌生物膜态对不同浓度伊曲康唑产生明显的耐药性;伊曲康唑对生物膜形成有抑制作用,随着生物膜形成,耐药性逐渐增强。结论形成生物膜的白色念珠菌对伊曲康唑的抵抗力比游离菌强。伊曲康唑对早期生物膜抑制率较高,到了中晚期生物膜则产生明显的耐药性。

关键词：伊曲康唑念珠菌,白色生物膜微生物敏感性试验

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登革病毒和登革热

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首都医科大学学报 2014年第6期35卷 683-688页

作者：崔晓云吴艳花安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

登革热(Dengue fever,DF)是由登革病毒(Dengue virus,DV)引起的一种虫媒传染病,主要在热带亚热带地区流行,全世界将近一半的人口有罹患DF的风险。DF在临床上分为DF和重症登革(severe Dengue),后者包括登革出血热(Dengue hemorrhagic fev... 详细信息

登革热(Dengue fever,DF)是由登革病毒(Dengue virus,DV)引起的一种虫媒传染病,主要在热带亚热带地区流行,全世界将近一半的人口有罹患DF的风险。DF在临床上分为DF和重症登革(severe Dengue),后者包括登革出血热(Dengue hemorrhagic fever,DHF)和登革休克综合征(Dengue shock syndrome,DSS)。每年重症登革病例达500 000例,其中大多数患者为儿童。2014年DF在我国的南方地区出现历史上最严重的疫情,对人类健康和社会经济造成了严重损失。为此,本文对DV和DF的概况作一综述,供广大同行参考。

关键词：登革热登革病毒重症登革感染

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