检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第4期26卷 343-347页

作者：严华李国才陈红菊龚卫娟季明春扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

目的制备基因转染(D3)细胞并测定能引起先天性感染的几种病原体的敏感性。方法HEP-2细胞的DNA转染人胚肺细胞(HEL),得到基因转染细胞,命名为D3细胞。分析D3细胞的核型。研究丹参对D3细胞促增殖作用和丹参对病原体不同的促增殖作用。普... 详细信息

目的制备基因转染(D3)细胞并测定能引起先天性感染的几种病原体的敏感性。方法HEP-2细胞的DNA转染人胚肺细胞(HEL),得到基因转染细胞,命名为D3细胞。分析D3细胞的核型。研究丹参对D3细胞促增殖作用和丹参对病原体不同的促增殖作用。普通显微镜观察病原体感染D3细胞后的细胞病变。免疫荧光试验研究D3细胞对病原体的敏感性。电子显微镜观察由D3 细胞培养物纯化的病原体形态。在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,分别纯化病原体制作抗原,检测 1196份孕妇血清特异性抗体(IgG、IgM)。结果传代5-100代的D3细胞的染色体数均是96。丹参 (SMB,100 μg／ml)对D3细胞和病原体有明显的促增殖作用。D3细胞感染病原体后72 h,均出现明显的细胞病变效应(CPE)和荧光阳性细胞。电镜下见到了病原体典型的形态。结论永生性的D3细胞可用于培养病原体,所培养的病原体可制备用于诊断的抗原。

关键词：先天性感染 DNA转染 HEL HEP-2 丹参

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第10期24卷 807-811页

作者：曾焱华吴移谋余敏君朱翠明曾铁兵刘安元南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化... 详细信息

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化氮合酶的表达和NO的产生。用间接免疫荧光和Westernblot检测经穿透支原体脂质相关膜蛋白处理的小鼠巨噬细胞中NF κB的激活和NF κB抑制剂PDTC(吡咯啉烷二甲基硫脲 )对iNOS的表达和NO产生的影响。结果　穿透支原体脂质相关膜蛋白以时间和剂量依赖方式刺激小鼠巨噬细胞产生NO ,且能激活NF κB诱导巨噬细胞表达i NOS的mRNA和蛋白 ,其mRNA和蛋白的表达水平能被PDTC所抑制。结论　由于穿透支原体脂质相关膜蛋白能通过激活NF κB诱导巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 ,因而可能是一个重要的致病因素。

关键词：巨噬细胞支原体脂质表达小鼠一氧化氮合酶膜蛋白 RNA 体脂 NF-κB

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应用抑制性消减杂交技术分析淋球菌染色体介导的耐药相关核苷酸序列

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 388-392页

作者：季明春陈红菊严华申厚凤扬州大学医学院微生物学及免疫学教研室 225001

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ... 详细信息

目的　克隆耐药性淋病奈瑟球菌菌株与标准参考菌株之间的差异核苷酸序列。方法应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库。结果　成功地构建了高特异性的淋球菌耐药菌株DNA消减文库。经对消减文库初步筛选 ,对其中 5个克隆插入的DNA片段进行测序 ,经GenBank和淋球菌基因组序列库检索分析 ,证明 5个片段均为未知新序列。结论　淋球菌耐药性相关核苷酸序列的发现将为防治淋球菌感染和研究抗淋球菌抗生素提供新的实验工具。

关键词：淋球菌核苷酸序列耐药性抗生素抑制性消减杂交技术

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贵州汉族人群HLA-DM基因多态性分析

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遗传 2008年第9期30卷 1153-1156页

作者：蒋红梅王永霞王勇贵阳医学院临床微生物学和免疫学教研室贵阳550004

为了探讨贵州汉族人群HLA-DM基因多态性的分布情况,采用PCR-RFLP法对125例贵州汉族人进行HLA-DM基因分型。结果显示,贵州汉族人群DMA＊0101~0103等位基因频率依次是0.720、0.244、0.036,DMB＊0101~0104等位基因频率分布依次是0.620、0.... 详细信息

为了探讨贵州汉族人群HLA-DM基因多态性的分布情况,采用PCR-RFLP法对125例贵州汉族人进行HLA-DM基因分型。结果显示,贵州汉族人群DMA＊0101~0103等位基因频率依次是0.720、0.244、0.036,DMB＊0101~0104等位基因频率分布依次是0.620、0.156、0.188和0.036;贵州汉族人群中DMA的基因型以DMA＊0101/0101和0101/0102为主,而DMB的基因型以DMB＊0101/0101、0101/0102和0101/0103为主。结果表明,HLA-DM基因多态性具有地区性、民族性的遗传特征。

关键词： HLA-DM 基因多态性汉族人群

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用聚合酶链反应检测食管癌组织中人乳头瘤病毒DNA

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中华实验和临床病毒学杂志 1997年第2期11卷 150-152页

作者：庄坚余秀葵董菁黎妙娟汕头大学医学院微生物学教研室

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对汕头市区６８例食管癌的石蜡包埋标本进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ序列检测，结果显示，ＨＰＶＤＮＡ总阳性率为６６．１８％（４５／６８），检出型别主要为ＨＰＶ６、１１、１６，检出率分别为... 详细信息

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对汕头市区６８例食管癌的石蜡包埋标本进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ序列检测，结果显示，ＨＰＶＤＮＡ总阳性率为６６．１８％（４５／６８），检出型别主要为ＨＰＶ６、１１、１６，检出率分别为２７．９４％、３６．７６％和２７．９４％，经统计学处理三型间无显著性差异；ＨＰＶ－１８及未定型别各占８．８２％。值得注意的是ＨＰＶ感染中多重感染占阳性病例的５３．３３％（２４／４５）。初步结果表明，汕头市食管癌高发区有较高的ＨＰＶ感染率，此与食管癌的发生，可能有密切关系。

关键词：乳头状瘤病毒食管肿瘤病毒学聚合酶链反应

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人胆汁诱导伤寒杆菌L型及其生物学性状观察

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中国实用内科杂志 1991年第9期 473-475页

作者：宋秀宇,黄谷良,林特夫蚌埠医学院微生物学教研室蚌埠医学院微生物学教研室蚌埠医学院微生物学教研室 233003 233003 233003

应用人胆汁及胆盐作用于伤寒杆菌获得了L型变异菌株,并对其生物学性状进行了观察。结果可见本法诱导的伤寒杆菌L型与原菌的形态染色、培养特性、生化反应、药物敏感性、菌体结构及抗原性均有明显区别;而回复型则与原菌相同。由于伤寒杆... 详细信息

应用人胆汁及胆盐作用于伤寒杆菌获得了L型变异菌株,并对其生物学性状进行了观察。结果可见本法诱导的伤寒杆菌L型与原菌的形态染色、培养特性、生化反应、药物敏感性、菌体结构及抗原性均有明显区别;而回复型则与原菌相同。由于伤寒杆菌L型的培养特性发生改变而常被漏诊。L型一旦脱离胆汁又可回复细菌型并导致疾病传播。

关键词：胆汁诱导伤寒杆菌L型

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SV40转化的人胃黏膜上皮细胞与胃癌细胞间的比较蛋白质组学研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第3期24卷 226-229页

作者：贾继辉陈春燕于修平郭辉玉张茂修周亚滨栾怡齐眉赵蔚明山东大学医学院微生物学教研室山东大学第二医院中山大学中山医学院微生物学教研室

目的　研究猴病毒 4 0 (SV4 0 )转化的人胃黏膜上皮细胞GES 1与人胃癌细胞MGC 80 3的差异蛋白质组。方法　运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术比较两者差异蛋白 ,差异蛋白用胰酶进行胶内酶切 ,肽混合物使用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间... 详细信息

目的　研究猴病毒 4 0 (SV4 0 )转化的人胃黏膜上皮细胞GES 1与人胃癌细胞MGC 80 3的差异蛋白质组。方法　运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术比较两者差异蛋白 ,差异蛋白用胰酶进行胶内酶切 ,肽混合物使用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱仪 (MALDI TOF MS)进行质谱分析 ,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果　获得 17个GES 1和MGC 80 3细胞间表达差异蛋白质的明确信息 ,涉及细胞骨架、细胞调控、细胞凋亡和生物氧化等种类蛋白质。结论　SV4 0转化的人胃黏膜上皮细胞GES 1与人胃癌细胞MGC 80 3间的表达蛋白具有差异 ,这些差异蛋白分析有助于深入研究胃癌发生发展机制。

关键词：胃黏膜上皮细胞癌比较蛋白质组学猴病毒40 早期诊断病原微生物

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促进乳头状瘤病毒L1蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第6期26卷 516-520页

作者：王红赵蔚明齐眉周亚滨栾怡程轶喆于修平山东大学医学院医学微生物学教研室济南250012

目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达... 详细信息

目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达质粒共转染人角质形成细胞HaCAT,荧光显微镜及Western blot方法观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况。半定量RT-PCR分析不同PV L1基因mRNA的表达。BALB／c小鼠股四头肌内分别接种野生型、优化密码L1 DNA疫苗,同时将L1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合后接种小鼠,观察诱导产生的体液免疫反应。结果野生型WL1-GFP融合基因在HaCAT细胞中未能有效表达,优化密码HL1-GFP基因在HaCAT细胞中的蛋白表达水平明显增强;但两者在mRNA水平差异无统计学意义。WL1-GFP与tRNAser真核表达质粒共转染细胞中L1蛋白的表达较单独转染WL1-GFP基因时增强。动物DNA免疫结果表明,优化密码HL1 DNA疫苗接种可使小鼠特异性L1中和抗体水平明显升高;而野生型WL1 DNA疫苗接种组小鼠仅产生低滴度的L1抗体,WL1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合接种使小鼠的L1抗体水平增加。结论优化密码能显著促进乳头状瘤病毒晚期基因L1在哺乳动物细胞中的表达和DNA疫苗的免疫反应;补充外源tRNAser基因能够提高野生型L1基因的蛋白表达和DNA疫苗诱导的体液免疫应答。

关键词：乳头状瘤病毒 L1基因 tRNA 蛋白表达 DNA免疫

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IFN-γ和TNF-α对HLA-DR表达的影响

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免疫学杂志 1993年第2期9卷 90-93页

作者：祁小平姚堃周瑶玺南京医学院微生物学教研室南京210029

本文采用ELISA方法,研究了rHuIFN-γ(IFN-γ)和rHuTNF-α(TNF-α)对体外培养的正常人外周血单核细胞表达HLA-DR抗原的影响。结果表明:二者都能提高单核细胞DR抗原的表达,但IFN-γ的作用明显较TNF-α强。另外,TNF-α对IFN-γ提高DR抗原... 详细信息

本文采用ELISA方法,研究了rHuIFN-γ(IFN-γ)和rHuTNF-α(TNF-α)对体外培养的正常人外周血单核细胞表达HLA-DR抗原的影响。结果表明:二者都能提高单核细胞DR抗原的表达,但IFN-γ的作用明显较TNF-α强。另外,TNF-α对IFN-γ提高DR抗原表达作用的影响可因二者加入培养系统的先后顺序不同而异。

关键词：单核细胞人白细胞抗原

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单纯疱疹病毒体外诱导特异性抗体应答的实验研究

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中华实验和临床病毒学杂志 1994年第1期8卷 41-44页

作者：季明春周瑶玺姚堃童鲲扬州医学院微生物学教研室南京医学院微生物学教研室

用灭活的单纯疱疹病毒（Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ，ＨＳＶ１）为致敏原，体外诱导成人外周血淋巴细胞产生特异性抗体应答，特异性抗体诱生水平与血清抗体无相关性（Ｒ＝０．４５，Ｐ＞０．０５），抗体类型为ＩｇＧ。同法... 详细信息

用灭活的单纯疱疹病毒（Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ，ＨＳＶ１）为致敏原，体外诱导成人外周血淋巴细胞产生特异性抗体应答，特异性抗体诱生水平与血清抗体无相关性（Ｒ＝０．４５，Ｐ＞０．０５），抗体类型为ＩｇＧ。同法致敬新生儿淋巴细胞则不能诱生任何类型的特异抗体，表明此体外抗体应答属继发性免疫应答。特异性抗体应答有明显的ＨＳＶ１抗原剂量依赖性，且需要Ｔ、Ｂ细胞的相互作用。ＨＳＶ１体外致敏的实验研究，为探讨正常和疾病状态下体外特异性抗体应答和免疫调节提供一个有用的实验模型。

关键词：单纯疱疹病毒抗体免疫应答

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