检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2021年第6期56卷 980-985页

作者：高越刘伯玉任翠平高勇朱禹杨莉温萌钱振芦宝静柳燕安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 阜阳市第二人民医院阜阳236015

目的建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法。方法以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼... 详细信息

目的建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法。方法以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼吸道病毒感染患者咽拭子标本进行初步评价。结果该研究建立的方法分别检测SARS-CoV-2两种基因的所需时长均在20 min以内,检测2种基因的灵敏度均为2拷贝数/反应管,特异性为100%,2种引物的最低检出限3次重复实验扩增反应起峰时间一致,曲线形态接近。结论该研究建立的方法灵敏性高,特异性强,重复性良好,临床标本检测结果符合率高,且不需要昂贵的仪器,适用于现场快速检测。

关键词： SARS-CoV-2 RT-RAA 核酸快速检测

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生物技术专业生物安全与生物伦理学课程小班课教学探讨

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微生物学通报 2021年第12期48卷 4954-4962页

作者：李刚张克斌胡晓梅饶贤才卢曙光陆军军医大学基础医学院微生物学教研室重庆400038 陆军军医大学新桥医院临床医学研究中心重庆400037

生物安全与生物伦理问题近年时有发生,如何给生物技术专业学生上好生物安全与生物伦理学课程值得研究与探讨。小班课教学是近年来国内高校教学改革的新举措,可拉近师生距离、增加师生互动,更为灵活且有针对性,有助于教学质量的提高。本... 详细信息

生物安全与生物伦理问题近年时有发生,如何给生物技术专业学生上好生物安全与生物伦理学课程值得研究与探讨。小班课教学是近年来国内高校教学改革的新举措,可拉近师生距离、增加师生互动,更为灵活且有针对性,有助于教学质量的提高。本文结合生物技术专业生物安全与生物伦理学课程特点及小班课教学实践,探讨小班课教学经验,反思不足并提出改进建议。

关键词：生物技术专业生物安全与生物伦理学小班课教学教学经验

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补体分子C1s对食管鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

补体分子C1s对食管鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

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第十四届全国免疫学学术大会

作者：任玲陈昱伶徐凤敏蒙春梅李倩倩唐茂林胡为民川北医学院微生物学与免疫学教研室

目的:探讨补体分子C1s对人食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞系TE-1、Eca-109增殖和迁移的影响。方法:利用GEO和ONCOMINE等生物信息学数据库分析ESCC癌组织及癌旁组织C1s的表达差异。应用RTqPCR检测人ESCC细胞系TE-1、Eca-109及KYSE-150中C1s... 详细信息

目的:探讨补体分子C1s对人食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞系TE-1、Eca-109增殖和迁移的影响。方法:利用GEO和ONCOMINE等生物信息学数据库分析ESCC癌组织及癌旁组织C1s的表达差异。应用RTqPCR检测人ESCC细胞系TE-1、Eca-109及KYSE-150中C1s的表达水平。用Lipofectamine2000将C1s siRNA转染TE-1和Eca-109细胞。通过慢病毒感染并进行筛选,构建C1s稳定下调表达的TE-1细胞株（TE-1-C1s shRNA）和Eca-109细胞株（Eca-109-C1s shRNA）。采用RT-qPCR和Western blot验证沉默效率,CCK8法和细胞划痕实验检测敲低C1s的表达对TE-1和Eca-109细胞增殖及迁移的影响。结果:通过对GEO和ONCOMINE数据库中的数据进行统计分析后发现,ESCC癌组织C1s的表达明显高于癌旁组织（P<0.0001）。RT-qPCR结果显示,在三种细胞中C1s mRNA的表达量由高到低依次为TE-1、Eca-109、KYSE-150。CCK8法检测结果显示,转染了C1s siRNA1、C1s siRNA2的TE-1和Eca-109细胞其增殖能力均低于NC siRNA组（P<0.05,P<0.001;P<0.01,P<0.01）;同样,与对照细胞株比较,TE-1-C1s shRNA稳定株和Eca-109-C1s shRNA稳定株其增殖能力也受到抑制（P<0.05;P<0.001）。细胞划痕实验结果显示,转染了C1s siRNA1、C1s siRNA2的TE-1和Eca-109细胞其迁移能力受到明显抑制（P<0.0001,P<0.001;P<0.001,P<0.001）;同样,与对照细胞株相比,TE-1-C1s shRNA稳定株和Eca-109-C1s shRNA稳定株其迁移能力也受到明显抑制（P<0.001,P<0.0001）。结论:C1s在ESCC癌组织中的表达明显高于癌旁组织。下调C1s的表达可显著抑制人ESCC细胞系TE-1、Eca-109的增殖和迁移。

关键词：补体C1s 食管鳞状细胞癌增殖迁移

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结核分枝杆菌Rv2107基因编码蛋白PE22的原核表达及生物信息学分析

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现代医药卫生 2022年第22期38卷 3816-3822页

作者：李玉洁杨雨婷杨国平大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000

目的原核表达结核分枝杆菌(MTB)Rv2107基因编码蛋白PE22,并对PE22蛋白进行生物信息学分析。方法以卡介苗(BCG)基因组为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增Rv2107基因,克隆至表达载体pET-32a获得重组质粒PE22-pET-32a,对含重组质粒PE22-pET-32a... 详细信息

目的原核表达结核分枝杆菌(MTB)Rv2107基因编码蛋白PE22,并对PE22蛋白进行生物信息学分析。方法以卡介苗(BCG)基因组为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增Rv2107基因,克隆至表达载体pET-32a获得重组质粒PE22-pET-32a,对含重组质粒PE22-pET-32a的BL-21菌诱导表达后,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,亲和层析法纯化PE22蛋白并蛋白质印迹法(Western bolt)鉴定。采用Expasy ProtParam、TMHMM Server v.2.0、SignalP 5.0 Server、NetPhos-3.1、Cell-PLoc 2.0、SOPMA、SWISS MODEL、ABCpred、SYFPEITHI等软件分析PE22蛋白的相关生物信息学。结果成功构建重组质粒PE22-pET-32a,并获得以包涵体形式表达的PE22蛋白。生物信息学分析显示PE22蛋白相对分子质量为10373.77,理论等电点为6.82,由98个氨基酸组成,为疏水性蛋白,无跨膜区与信号肽,定位于细胞壁,二级结构主要由α-螺旋构成。抗原表位预测分析显示PE22蛋白含有10个B细胞抗原表位、13个T细胞抗原表位与12个限制性CTL细胞表位。结论PE22蛋白的原核表达主要以包涵体形式表达,具有多个潜在的T、B细胞抗原表位,可作为研发新型免疫诊断试剂的候选分子靶标或TB疫苗的候选蛋白。

关键词：结核分枝杆菌 Rv2107基因 PE22蛋白原核表达生物信息学

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“临床微生物学检验技术”考核评估体系的构建与实践

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实验与检验医学 2021年第1期39卷 250-253页

作者：肖光文蔡国雄陈美任罗慈雁徐美兰嘉应学院医学院临床微生物学与免疫学教研室广东梅州514031

目的为了激发医学检验技术专业学生对“临床微生物学检验技术”实验课的学习兴趣,训练其实验技能、增强其临床分析能力、拓展其创新思维,培养应用型医学检验技术人才。方法我们建立了以实验全过程管理为基础、以合理评价指标为核心、以... 详细信息

目的为了激发医学检验技术专业学生对“临床微生物学检验技术”实验课的学习兴趣,训练其实验技能、增强其临床分析能力、拓展其创新思维,培养应用型医学检验技术人才。方法我们建立了以实验全过程管理为基础、以合理评价指标为核心、以科学评价学生综合实验能力为目标的实验考核评价体系,分层次考核学生的实验基本操作技能掌握情况、综合性实验的临床鉴定分析能力及设计性实验的科研探究能力,同时通过问卷调查表及访谈的形式和与未实施教改班级的各项考核指标等进行比较,探讨教改实施的效果。结果教改实施班的人均缺课率明显低于教改未实施班(P<0.05),同时在课后实验室人均练习次数、操作技能考核成绩、病原菌鉴定的考核成绩、毕业论文开题报告成绩、毕业论文写作成绩和考研录取人数都明显高于教改未实施班(均P<0.05);从问卷调查表及访谈情况来看,学生对于实验考核评估体系的评价有较高的认可度和积极性。结论考核评价体系能较科学地反映学生的实验能力、综合能力,具有比传统的实验考核评价体系更好的优越性。

关键词：临床微生物学应用型实验考核评估体系设计性实验

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弓形虫优势表位融合于HPV16L1“N端”的融合体可显著提高表位免疫反应性

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生物工程学报 2021年第1期37卷 290-300页

作者：谭晓淳林中民吕金辉谢自新陈薪安李文姝温州医科大学微生物学与免疫学教研室浙江温州325000 温州医科大学附属第一医院病理科浙江温州325000 同济大学医学院东方医院转化医学研究中心上海200000

弓形虫和人乳头瘤病毒(HPV)具有共同的免疫保护人群,选择HPV16型晚期结构蛋白1(HPV16L1)为载体,携带弓形虫多表位(RSepitope)以期提高表位免疫原性同时可实现共免疫效应。文中分别以构建的融合体RSepitope-HPV16L1(RSepitope融合于HPV16... 详细信息

弓形虫和人乳头瘤病毒(HPV)具有共同的免疫保护人群,选择HPV16型晚期结构蛋白1(HPV16L1)为载体,携带弓形虫多表位(RSepitope)以期提高表位免疫原性同时可实现共免疫效应。文中分别以构建的融合体RSepitope-HPV16L1(RSepitope融合于HPV16L1"N"端)以及HPV16L1-RSepitope(RSepitope融合于HPV16L1"C"端),脂质体转染COS-7细胞后,RSepitope-HPV16L1融合体形式可以在转染细胞中得到有效转录和翻译,分别可检测到相应的RSepitope和HPV16L1的mRNA和蛋白,但HPV16L1-RSepitope融合体形式在转染细胞中检测不到目标抗原的mRNA和蛋白。融合体采用"DNA初免-蛋白质加强免疫"的方案免疫BALB/c小鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)和酶联免疫斑点试验(ELISPOT)分别检测到RSepitope-HPV16L1免疫鼠血清中显著升高的体液和细胞免疫反应(即最高水平的RSepitope特异性抗体IgG和IFN-γ),且比较单独RSepitope免疫组(不与HPV16L1融合),产生的是显著升高的Th1和Th2免疫反应类型,提示HPV16L1作为表位载体的优势效应。而HPV16L1-RSepitope融合体形式体内也未能诱导有效的免疫反应。以上研究提示,HPV16L1"N"端可能是较为合适的表位融合位置,融合体表位特异性免疫学效应显著提高,研究结果为提高表位疫苗的免疫原性提供了一个合理的载体融合策略。

关键词：弓形虫 HPV16L1 融合体免疫效应

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医学微生物学教学方法探讨

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药店周刊 2021年第9期 174-175页

作者：张蓓陈锋孙玉萍新疆医科大学基础医学院微生物学教研室新疆乌鲁木齐 830000 新疆医科大学基础医学院微生物学教研室新疆乌鲁木齐 830000 新疆医科大学基础医学院微生物学教研室新疆乌鲁木齐 830000

本文通过分析乡村医学专业学生及医学微生物学的特点,从激发学生的兴趣出发,灵活运用多种教学手段,探索针对乡村医学专业学生的医学微生物学教学方法,为医学微生物学乡村医学专业学生教学改革提供依据.

关键词：医学微生物学乡村医学专业教学方法

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结核分枝杆菌与树突状细胞相互作用的研究进展

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微生物学免疫学进展 2021年第2期49卷 78-84页

作者：杨雨婷(综述) 杨国平李光华孟余(审校) 云南大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室云南大理671000

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染引起的结核病是严重威胁人类健康的慢性传染病。树突状细胞(dendritic cell, DC)是重要的抗原提呈细胞及连接机体固有免疫和适应性免疫应答的桥梁细胞。DC通过表面表达受体识别并吞... 详细信息

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染引起的结核病是严重威胁人类健康的慢性传染病。树突状细胞(dendritic cell, DC)是重要的抗原提呈细胞及连接机体固有免疫和适应性免疫应答的桥梁细胞。DC通过表面表达受体识别并吞噬病原体,参与抗原提呈,并发育成熟,同时分泌不同类型的细胞因子,决定T细胞分化方向,最终影响细胞免疫应答效应。在MTB感染过程中各成分与DC相互作用的特性研究,是分析MTB毒力基因及致病机理的基础,并可为结核疫苗研究提供候选优势抗原。现对目前MTB与DC的相互作用机制的研究进展作一概述。

关键词：结核分枝杆菌树突状细胞细胞因子受体

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新型冠状病毒PLpro蛋白酶结构与功能的生物信息学分析

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病毒学报 2021年第1期37卷 43-51页

作者：杜倩倩张智慧廉政张庆媛薛向阳张丽芳蒋朋飞温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室分子病毒与免疫研究所温州325035 温州医科大学病毒研究院温州325035

2019年12月,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在中国武汉暴发。SARS-CoV-2的基因组编码2种病毒蛋白酶,即木瓜样蛋白酶(Papain-like protease,PLpro)和3C样蛋白酶(3C-like protease)。其中PLpro是SARS-CoV-2复制酶复合体(RC)形成的重要调节蛋白分子,对于病毒基因组转录和复制至关重要。因此,将SARS-CoV-2 PLpro作为药物的靶点对COVID-19的治疗具有积极意义。本研究应用生物信息学工具分析新型冠状病毒的木瓜样蛋白酶的结构和功能,首先利用BLAST和BioEdit获取SARS-CoV-2 PLpro蛋白酶(SC2-PLpro)及其同源蛋白的氨基酸序列,并利用BLAST和MEGA 6.0进行同源性分析。之后,利用ProParam和Proscale分别对SC2-PLpro蛋白酶的理化性质、亲水性和疏水性进行分析。然后,通过SOMPA、ScanProsite和InterPro分别预测SC2-PLpro蛋白酶的二级结构和功能区域,进一步利用SignalP 4.0和TMHMM对SC2-PLpro蛋白酶的信号肽和跨膜区进行分析。最后,通过SWISS-MODEL对SARS-CoV-2 PLpro蛋白酶进行三级结构同源建模。结果显示,对SARS-CoV-2 PLpro蛋白酶与已报道的PLpro蛋白酶进行多序列比对后,发现SARS-CoV-2 nsp3的746~1063段氨基酸与多种冠状病毒PLpro蛋白酶氨基酸序列高度相似。同时,同源性分析发现SARS-CoV-2与蝙蝠冠状病毒的PLpro蛋白酶具有同源性,其中与QHR63299、AVP78030相似性最高。对SC2-PLpro进行理化性质预测结果显示,其由318个氨基酸所组成,为稳定亲水性蛋白。二级结构预测结果显示SC2-PLpro主要含有α-螺旋、延伸链、β-转角、无规卷曲,四种结构贯穿整条氨基酸链。进一步进行功能分析,发现其具有完整的催化三联体、锌结合域、泛素样N末端结构域,故推测该蛋白具有去泛素化的功能。然后,信号肽假说和跨膜结构域分析结果表明,SC2-PLpro既不是分泌蛋白,也不属于跨膜蛋白。本研究提示,生物信息学分析SC2-PLpro为稳定性亲水蛋白,属于非跨膜蛋白,比较保守,具有去泛素化的功能,利用此功能可以进一步规避宿主的固有免疫反应。通过制备PLpro蛋白酶小分子抑制剂,可能有助于治疗新型冠状病毒肺炎。

关键词：新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 木瓜样蛋白酶(PLpro蛋白酶) 结构功能生物信息学新型冠状病毒肺炎(COVID-19)

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新冠疫情背景下基础医学线上教学总结与探索

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甘肃科技 2021年第3期37卷 68-69,107页

作者：李倩倩彭丽娟川北医学院微生物学与免疫学教研室四川南充637000

2019年末新型冠状病毒肺炎(COVID-19)爆发后,全国各高校延迟开学,并采用线上教学的方式,实现“停课不停学”。这场COVID-19危机同时带来了医学教育领域的一种持久变革,推动未来医学教育和学习的改革发展。高校师生面对这样的挑战和机遇... 详细信息

2019年末新型冠状病毒肺炎(COVID-19)爆发后,全国各高校延迟开学,并采用线上教学的方式,实现“停课不停学”。这场COVID-19危机同时带来了医学教育领域的一种持久变革,推动未来医学教育和学习的改革发展。高校师生面对这样的挑战和机遇,在积极应对,从容经历,成功实践后,及时总结并紧随趋势进一步深入探索将是很有意义的方向。

关键词：新冠疫情线上教学医学教育

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