检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学教育 2020年第10期22卷 726-728页

作者：杨成吴艳红厉荣玉熊延靖刘辉皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002

实验教学作为教学的重要组成部分,对于培养训练学生动手能力、解决问题的能力具有重要的意义。为了激发学生对医学微生物学实验的学习兴趣,提高教学质量,对医学微生物学实验教学内容、形式与手段进行合理优化与安排,从而调动了学生学习... 详细信息

实验教学作为教学的重要组成部分,对于培养训练学生动手能力、解决问题的能力具有重要的意义。为了激发学生对医学微生物学实验的学习兴趣,提高教学质量,对医学微生物学实验教学内容、形式与手段进行合理优化与安排,从而调动了学生学习积极性,提高了实验教学效果。

关键词：医学微生物学实验教学教学质量

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PD-1/PD-L1信号通路与肿瘤免疫逃逸

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现代免疫学 2020年第4期40卷 329-333,340页

作者：黄聪白丽大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

PD-1及其配体PD-L1、PD-L2广泛表达于多种细胞表面,是一组与免疫负调控有关的共刺激分子。PD-1/PD-L1信号通路的激活有利于肿瘤逃脱机体免疫监视,但具体的肿瘤免疫逃逸机制尚未清楚。就抗PD-1和抗PD-L1抗体疗效而言,仍然需要对肿瘤免疫... 详细信息

PD-1及其配体PD-L1、PD-L2广泛表达于多种细胞表面,是一组与免疫负调控有关的共刺激分子。PD-1/PD-L1信号通路的激活有利于肿瘤逃脱机体免疫监视,但具体的肿瘤免疫逃逸机制尚未清楚。就抗PD-1和抗PD-L1抗体疗效而言,仍然需要对肿瘤免疫逃逸机制做更深入的研究。文章就现有研究成果作一综述如下。

关键词：程序性死亡受体-1 程序性死亡受体-配体1 肿瘤免疫

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表达表皮生长因子酿酒酵母对长江水系中华绒螯蟹生长性能·免疫功能和肠道发育的影响

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安徽农业科学 2023年第6期51卷 78-80,87页

作者：徐文俊李凤华周炜夏兵兵赵俊芜湖英特菲尔生物制品产业研究院有限公司安徽芜湖241000 山东迅达康兽药有限公司山东济南250000 华中农业大学动物科学技术学院动物医学院湖北武汉430070 安徽医科大学微生物学教研室安徽合肥230000

[目的]研究表达表皮生长因子酿酒酵母对长江绒螯蟹生长性能、免疫功能以及肠道发育的影响。[方法]试验分为2组,对照组饲喂基础日粮,试验组在1 kg基础日粮基础上添加5 mL表达表皮生长因子酿酒酵母发酵液,螃蟹按照15 000只/hm^(2)进行投放... 详细信息

[目的]研究表达表皮生长因子酿酒酵母对长江绒螯蟹生长性能、免疫功能以及肠道发育的影响。[方法]试验分为2组,对照组饲喂基础日粮,试验组在1 kg基础日粮基础上添加5 mL表达表皮生长因子酿酒酵母发酵液,螃蟹按照15 000只/hm^(2)进行投放,试验周期为9个月。[结果]与对照组相比,添加酿酒酵母能够显著提高螃蟹存活率(P<0.05),存活率提高了6.1%;但添加酿酒酵母对螃蟹血液中溶菌酶含量和组织中SOD和MDA含量没有显著性影响;而添加酿酒酵母能够显著提高螃蟹后肠肠道上皮细胞高度(P<0.05)。[结论]在长江绒螯蟹饲料中添加表达EGF酿酒酵母能够提高机体非特异性免疫力,促进肠道生长发育,提高螃蟹平均体重和存活率。

关键词：酿酒酵母表皮生长因子中华绒螯蟹生长性能免疫功能肠道发育

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肿瘤坏死因子α刺激基因/诱导蛋白-6的抗炎作用研究进展

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微生物与感染 2021年第1期16卷 57-62页

作者：束金辉张俊玲赵俊王明丽安徽医科大学第一临床医学院安徽合肥230032 安徽医科大学微生物学教研室安徽合肥230032

炎症损伤是众多临床疾病的病理学基础,常可引起严重并发症甚至导致死亡。然而传统临床治疗不仅方法有限,且效果不佳。近年研究报道,肿瘤坏死因子α刺激基因/诱导蛋白-6(tumor necrosis factor alpha stimulated gene/inducible protein ... 详细信息

炎症损伤是众多临床疾病的病理学基础,常可引起严重并发症甚至导致死亡。然而传统临床治疗不仅方法有限,且效果不佳。近年研究报道,肿瘤坏死因子α刺激基因/诱导蛋白-6(tumor necrosis factor alpha stimulated gene/inducible protein 6,TSG-6)可通过与体内相应的配体结合参与炎症反应的多个过程,并发挥抗炎和促进细胞外基质重塑等重要作用。本文就TSG-6的生物学特性、作用机制及其在病理性瘢痕、神经炎症、动脉粥样硬化和关节炎等多种疾病中发挥的抗炎作用作一综述。

关键词：肿瘤坏死因子α刺激基因/诱导蛋白-6 病理性瘢痕神经炎症动脉粥样硬化关节炎抗炎作用

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黄芪多糖对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2020年第6期46卷 1162-1168,I0004页

作者：柳叶陈龙云湖北中医药大学检验学院临床微生物学教研室湖北武汉430065 湖北中医药大学基础医学院生物化学教研室湖北武汉430065

目的:探讨黄芪多糖(APS)对人肺癌顺铂(DDP)耐药A549/DDP细胞耐药性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:将对数生长期A549/DDP细胞分为对照组(不经药物干预)、APS组(给予25、50、100、200和400 mg·L^-1 APS)、DDP组(给予2、4、8... 详细信息

目的:探讨黄芪多糖(APS)对人肺癌顺铂(DDP)耐药A549/DDP细胞耐药性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:将对数生长期A549/DDP细胞分为对照组(不经药物干预)、APS组(给予25、50、100、200和400 mg·L^-1 APS)、DDP组(给予2、4、8、16和32 mg·L^-1 DDP)及APS+DDP组(给予100 mg·L^-1 APS和2、4、8、16和32 mg·L^-1 DDP),药物处理A549/DDP细胞24 h,采用CCK-8法检测各组A549/DDP细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度(IC50)。将A549/DDP细胞分为对照组(不经药物干预)、APS组(给予100 mg·L^-1 APS)、DDP组(给予11.46 mg·L^-1 DDP)及APS+DDP组(给予100 mg·L^-1 APS和11.46 mg·L^-1 DDP),药物处理细胞24 h,采用Transwell小室法检测各组A549/DDP细胞迁移情况,流式细胞术检测各组A549/DDP细胞凋亡率和线粒体膜电位,Western blotting法检测各组A549/DDP细胞中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、P糖蛋白(P-gp)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,与DDP组比较,APS+DDP组的A549/DDP细胞IC50降低。Transwell小室法检测,与对照组比较,APS组A549/DDP细胞迁移能力无明显变化;与DDP组比较,APS+DDP组A549/DDP细胞迁移数降低。流式细胞术检测,与对照组比较,APS组A549/DDP细胞凋亡率和线粒体膜电位差异无统计学意义(P>0.05),DDP组A549/DDP细胞凋亡率升高,线粒体膜电位降低(P<0.05);与DDP组比较,APS+DDP组A549/DDP细胞凋亡率升高,线粒体膜电位降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,APS组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与APS组比较,DDP组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05);与DDP组比较,APS+DDP组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:APS能逆转A549/DDP细胞耐药性,其机制可能与其阻断PI3K/AKT信号通路和诱导线粒体损伤有关联。

关键词：黄芪多糖 A549/DDP细胞耐药性磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B

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冠突曲霉Ac-nsdD基因鉴定分析及抗盐胁迫功能分析

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西南农业学报 2022年第6期35卷 1282-1288页

作者：余春芳曹广鑫张亭笛吴炅臻杨靖谭玉梅刘永翔刘作易位秀丽湖北医药学院基础医学院微生物学教研室湖北十堰442000 湖北医药学院药护学院湖北十堰442000 湖北医药学院第一临床学院湖北十堰442000 湖北医药学院第三临床学院湖北十堰442000 贵州省农业生物技术重点实验室贵阳550006 贵州省生物技术研究所贵阳550006

【目的】进一步探讨GATA转录因子Ac-nsdD在茯砖茶的冠突曲霉中的调控作用。【方法】根据基因组注释结果及构建系统进化对冠突曲霉Ac-NsdD蛋白序列分析。运用同源重组和根癌农杆菌介导的方法构建Ac-nsdD基因敲除的突变体,对突变体进行表... 详细信息

【目的】进一步探讨GATA转录因子Ac-nsdD在茯砖茶的冠突曲霉中的调控作用。【方法】根据基因组注释结果及构建系统进化对冠突曲霉Ac-NsdD蛋白序列分析。运用同源重组和根癌农杆菌介导的方法构建Ac-nsdD基因敲除的突变体,对突变体进行表型分析。【结果】根据基因组注释结果分析冠突曲霉Ac-nsdD编码一个假定的具有保守DNA结合结构域ZnF GATA的转录因子。系统进化分析表明,Ac-nsdD与其它真菌同源的NsdD有较为紧密的亲缘关系。进一步运用同源重组的方法,获得一个该基因敲除的突变体。与野生型菌株比较,突变体在M3Y培养基培养,表现为产闭囊壳量明显减少;然而在5%NaCl M3Y培养基培养,突变体表现产闭囊壳量变少,产分生孢子量显著变多,中间培养物黑色色素形成显著增加,生长速度变小;在17%NaCl M3Y培养基培养,突变体表现闭囊壳数目几乎为零,分生孢子量变少,生长速度变小。【结论】Ac-nsdD基因在无盐环境下可能激活有性发育。该基因在应答低渗透压盐胁迫条件下,可能激活有性发育和抑制无性发育,平衡有性和无性发育,且参与色素的生物合成;在应答高渗透压盐胁迫条件下,可能激活有性发育、无性发育和营养生长。本试验为进一步研究与Ac-nsdD基因相偶联的一些信号通路及其下游基因,为丝状真菌的有性及无性发育的一些共有的和独特的信号转导途径提供实验室数据。

关键词：冠突曲霉 Ac-NsdD 同源重组基因敲除盐胁迫

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FDFT1基因重组慢病毒表达载体的构建及其表达测定

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右江民族医学院学报 2021年第2期43卷 169-173页

作者：陈晓颖易雪丽陆飞燕曾怡右江民族医学院附属医院广西百色533000 右江民族医学院病原微生物学与免疫学教研室广西百色533000

目的构建法尼基二磷酸法尼基转移酶1(farnesyl diphosphate farnesyl transferase 1,FDFT1)基因重组质粒并在人胚肾上皮细胞(293T)验证质粒表达。方法设计FDFT1基因引物并经两次PCR扩增获取FDFT1目的基因;用相应的限制性内切酶将pCDH-CM... 详细信息

目的构建法尼基二磷酸法尼基转移酶1(farnesyl diphosphate farnesyl transferase 1,FDFT1)基因重组质粒并在人胚肾上皮细胞(293T)验证质粒表达。方法设计FDFT1基因引物并经两次PCR扩增获取FDFT1目的基因;用相应的限制性内切酶将pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP(pCDH-GFP)质粒线性化;FDFT1基因及线性化载体经纯化后以同源重组反应连接构建重组质粒;重组质粒通过菌落PCR、双酶切验证并测序做进一步验证;在293T细胞中利用三质粒共转染法包装FDFT1目的质粒并收集含病毒的上清液;以病毒液感染293T细胞验证FDFT1基因表达。结果菌落PCR及双酶切说明目的基因成功插入载体质粒,测序结果说明重组质粒中FDFT1基因与NCBI中登记的相应基因同源。构建成功的pCDH-GFP-FDFT1质粒包装为慢病毒后感染293T细胞,可检测到细胞中FDFT1基因表达与对照病毒感染相比升高15.13倍。结论本研究成功构建高表达FDFT1基因的重组慢病毒表达载体,为进一步研究FDFT1基因在肿瘤中的作用机制提供了实验基础。

关键词： FDFT1 293T细胞慢病毒基因重组

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结核分枝杆菌低氧反应蛋白的原核表达及对巨噬细胞ANA-1功能的影响

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微生物学免疫学进展 2021年第5期49卷 7-13页

作者：杨雨婷李玉洁杨国平云南大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000

目的原核表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)Rv2626c基因编码的低氧反应蛋白(hypoxic response protein 1, HRP1),并分析该蛋白对小鼠巨噬细胞ANA-1(简称ANA-1细胞)功能的影响及作用机理。方法将Rv2626c基因克隆至表达... 详细信息

目的原核表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)Rv2626c基因编码的低氧反应蛋白(hypoxic response protein 1, HRP1),并分析该蛋白对小鼠巨噬细胞ANA-1(简称ANA-1细胞)功能的影响及作用机理。方法将Rv2626c基因克隆至表达载体pET-28a,构建重组表达质粒pET-28a-Rv2626c,转入表达菌株BL21,诱导表达HRP1,经亲和层析法纯化和Western blot鉴定。使其作用于ANA-1细胞,用CCK8法检测ANA-1细胞的增殖活力,流式细胞术检测ANA-1细胞凋亡情况,Griess法及ELISA法分别检测一氧化氮(nitric oxide, NO)产生水平和肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)的分泌情况,同时采用核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)抑制剂Bay 11-7082、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPK)抑制剂U0126、SB 203580预处理ANA-1细胞后,检测NO、TNF-α、IL-1β变化情况。结果成功构建重组表达质粒pET-28a-Rv2626c,获得目的蛋白HRP1。与空白组相比,不同浓度的HRP1作用于ANA-1细胞后,细胞增殖活力未受抑制(P<0.05),凋亡率无明显差异,但培养细胞上清液中的NO、TNF-α及IL-1β含量均显著增加(P<0.05);若用Bay 11-7082及U0126预处理的ANA-1细胞,其NO及TNF-α的分泌量明显减少(P<0.001)。结论 HRP1对ANA-1细胞无细胞毒性,并可通过激活ANA-1细胞内NF-κB及MAPK信号通路促进其分泌具有抗菌效应的NO及TNF-α,增强其固有免疫效应,可作为结核疫苗候选优势抗原。

关键词：结核分枝杆菌低氧反应蛋白巨噬细胞ANA-1 细胞因子

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解纤维梭菌脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统构建

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微生物学通报 2021年第9期48卷 2982-2990页

作者：崔古贞花登雄管玉祝鲍江舰张馨月谷俊莹陈峥宏洪伟贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院贵州贵阳550004

【背景】解纤维梭菌是发酵木质纤维素生产乙醇的中温模式菌株,构建可控诱导的基因打靶技术是研究解纤维梭菌遗传调控的重要手段。【目的】在解纤维梭菌中构建脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统。【方法】首先,分析解纤维梭菌对脱水... 详细信息

【背景】解纤维梭菌是发酵木质纤维素生产乙醇的中温模式菌株,构建可控诱导的基因打靶技术是研究解纤维梭菌遗传调控的重要手段。【目的】在解纤维梭菌中构建脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统。【方法】首先,分析解纤维梭菌对脱水四环素的敏感性,筛选合适的诱导剂浓度,并以β-葡萄糖苷酶为报告基因,检测其在解纤维梭菌中的诱导效果。然后,将脱水四环素诱导型操纵子与II型内含子元件组合,构建脱水四环素诱导的ClosTron质粒。最后,以解纤维梭菌mspI、ldh和ack为例,检测其在解纤维梭菌中的打靶效率。【结果】脱水四环素诱导系统在解纤维梭菌中能够诱导ClosTron元件表达,在mspI、ldh和ack这3个基因位点的打靶效率分别为29.48%±15.51%、23.61%±7.08%和28.09%±6.97%。【结论】在解纤维梭菌中成功构建脱水四环素诱导的ClosTron基因打靶系统,为梭菌基因工程改造奠定了基础。

关键词：解纤维梭菌脱水四环素诱导系统 ClosTron Ⅱ型内含子

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家蝇抗真菌衍生肽Mt6-21DLeu抗白色念珠菌活性及其机制研究

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中国病原生物学杂志 2020年第7期15卷 761-767页

作者：花璇王涛毕言伟陶裕凯孔德龙汤仁仙吴建伟江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州贵阳550025

目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(M... 详细信息

目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)以及不同环境中Mt6-21DLeu对Ca抑菌活性的变化;通过时间-杀菌曲线反映Mt6-21DLeu对Ca的杀菌动力学;通过结晶紫染色测定Mt6-21DLeu对Ca不同阶段生物被膜的清除作用;采用多功能酶标仪检测荧光探针DPH的相对荧光密度;荧光显微镜观察Mt6-21DLeu的细胞膜通透性;采用流式细胞仪检测Mt6-21DLeu影响Ca活性氧ROS生成的影响。结果与MAF-1A相比,Mt6-21DLeu抑制Ca生长的效果提高近5倍,其MIC和MFC分别为0.128 mg/ml和0.256 mg/ml。在盐离子环境中,Mt6-21DLeu活性几乎不受影响,胰酶环境对Mt6-21DLeu有所抑制但远小于对MAF-1A活性的干扰。时间-杀菌曲线结果显示在MIC和2 MIC浓度下,Mt6-21DLeu于9 h后逐渐抑制Ca的生长;4 MIC浓度时Mt6-21DLeu的杀菌能力增强。Mt6-21DLeu在4、24、48 h时均能部分清除Ca已形成的生物被膜,清除效果与Mt6-21DLeu的浓度有关;4 MIC浓度的Mt6-21DLeu能显著增加Ca细胞膜的流动性(P<0.01)及通透性,进而引起Ca菌体内ROS的积累。结论衍生肽Mt6-21DLeu能高效、持久、稳定地抑杀Ca,其抗菌作用可能通过增强细胞膜通透性、促进胞内ROS积累的多靶点模式实现。因此,可将Mt6-21DLeu作为治疗Ca感染的候选药物分子。

关键词：家蝇抗菌肽衍生肽白色念珠菌抑菌活性活性氧

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