检索结果-内蒙古大学图书馆

趋化因子CXCL14在SLE患者外周血单个核细胞中的表达及启动子甲基化分析

中国应用生理学杂志 2017年第3期33卷 197-201页

作者：王金丹黄茜茜叶璐璐范超凡郭刚强徐玲娟薛向阳盛秀胜温州医科大学检验医学院、生命科学院浙江温州325035 温州医科大学第二临床医学院浙江温州325035 温州医科大学微生物学和免疫学教研室分子病毒与疫苗研究所热带医学研究所浙江温州325035 金华市中医医院检验科浙江金华321017 金华职业技术学院医学院浙江金华321017

目的:分析趋化因子CXCL14在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其启动子甲基化特征。方法:收集28例SLE患者和20名健康人外周血单个核细胞(PBMC)标本,抽提细胞中RNA,逆转录后,以GAPDH为内参,通过定量PCR检测PBMC中... 详细信息

目的:分析趋化因子CXCL14在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其启动子甲基化特征。方法:收集28例SLE患者和20名健康人外周血单个核细胞(PBMC)标本,抽提细胞中RNA,逆转录后,以GAPDH为内参,通过定量PCR检测PBMC中CXCL14的表达,统计分析CXCL14表达水平与SLE各种临床资料的相关性,探讨PBMC中CXCL14表达与SLE的关系,通过重亚硫酸盐修饰的全基因组DNA用以BSP测序来明确不同标本中CXCL14启动子中甲基化位点的甲基化率。结果:CXCL14在SLE患者和正常人PBMC中的表达量存在显著差异(P<0.05)。与健康人PBMC中CXCL14的含量相比较,CXCL14在SLE患者PBMC中表达量显著降低。与进一步CXCL14表达水平与SLE各种临床资料的相关性分析显示,CXCL14表达水平与SSB抗体(干燥综合征B抗体)、蛋白尿及血小板计数相关。与SSB抗体阴性SLE患者比较,SSB抗体阳性患者CXCL14表达水平更低(P<0.05);与蛋白尿阴性SLE患者相比,蛋白尿阳性患者CXCL14表达水平更低(P<0.05);而血小板升高患者的CXCL14表达水平更高(P<0.05)。CXCL14表达水平与SLE活动、肾损害指标、抗ds-DNA、C反应蛋白(CRP)、补体C3水平等指标未见显著相关性。CXCL14启动子区甲基化分析显示,SLE患者Cp G岛甲基化明显高于正常对照。结论:PBMC中低表达的CXCL14与SLE发生发展相关,其启动子区Cp G岛过度甲基化是SLE患者CXCL14低表达的重要机制。

关键词：系统性红斑狼疮趋化因子 CXCL14 甲基化

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2014-2016年淄博市食源性疾病中致泻性大肠埃希菌的检测与结果分析

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中国卫生检验杂志 2017年第22期27卷 3239-3241页

作者：张苗刘军吴莹王银平青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021 淄博市疾病预防控制中心山东淄博255026

目的了解淄博市食源性疾病患者中致泻性大肠埃希菌(DEC)的分布特点,为食源性疾病的防治提供依据。方法对2014年-2016年淄博市两家哨点医院1 535例食源性疾病患者粪便中分离的可疑DEC354株进行毒力基因检测,确定DEC的致病型别及毒力基因... 详细信息

目的了解淄博市食源性疾病患者中致泻性大肠埃希菌(DEC)的分布特点,为食源性疾病的防治提供依据。方法对2014年-2016年淄博市两家哨点医院1 535例食源性疾病患者粪便中分离的可疑DEC354株进行毒力基因检测,确定DEC的致病型别及毒力基因。结果 1 535例食源性疾病患者粪便中共检出DEC73株,其中肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)51株、肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)11株、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)9株、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)1株、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)1株。0岁~12岁患者检出10例;13岁~44岁患者检出49例;45岁~59岁患者检出8例;≥60岁患者检出6例。DEC导致的食源性疾病多发于夏秋季,6月-11月检出66例,占90.41%。结论淄博地区DEC致病型别以EAEC为主;不同年龄人群检出率有差异,13岁~44岁检出率最高,好发于夏秋季。DEC携带有不同的毒力基因,表明其侵袭力和致病力具有多样性与复杂性。

关键词：致泻性大肠埃希菌毒力基因分布特点

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葛根素靶向EGFR-TK抗Lewis肺癌机制研究

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中药药理与临床 2016年第4期32卷 28-31页

作者：马玉龙赵林静刘秀兰郭晓芳新乡医学院微生物学教研室新乡453003 新乡医学院第一附属医院NICU 卫辉453100

目的:探讨葛根素对Lewis肺癌细胞中表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)特异性抑制机理。方法:不同浓度葛根素组加入到EGFR-TK、Lewis肺癌细胞株中,利用ELISA法研究葛根素对EGFR-TK的抑制作用机理,利用MTT法测定葛根素对Lewis肺癌细胞... 详细信息

目的:探讨葛根素对Lewis肺癌细胞中表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)特异性抑制机理。方法:不同浓度葛根素组加入到EGFR-TK、Lewis肺癌细胞株中,利用ELISA法研究葛根素对EGFR-TK的抑制作用机理,利用MTT法测定葛根素对Lewis肺癌细胞株生长的抑制作用,利用CD光谱法监测葛根素对EGFR-TK二级结构的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Transwell小室法检测细胞侵袭率。结果:葛根素是可逆的竞争性EGFR-TK抑制剂(半抑制率IC50和抑制常数Ki分别为4.18±0.34μg/ml和2.12±0.21μg/ml),此外葛根素对Lewis肺癌细胞生长和侵袭具有良好的抑制能力,并能够明显的诱导Lewis肺癌细胞的凋亡;CD光谱分析表明葛根素诱导EGFR-TK的构象发生部分改变,α-螺旋含量逐渐增加,无规则卷曲逐渐减少。结论:葛根素能够特异性的抑制EGFR-TK的活性,表现出来良好的抗Lewis肺癌细胞生长、侵袭和诱导细胞凋亡的药理活性。

关键词：葛根素表皮生长因子受体酪氨酸激酶 Lewis肺癌细胞株凋亡侵袭

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WtCosmc质粒转染对Tn^+肿瘤细胞恶性行为的影响

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解剖学杂志 2016年第3期39卷 262-267页

作者：杜镇镇刘栋孙旭红于晓锋石传芹徐雪胡涛滨州医学院病原生物学实验室烟台264003 滨州医学院基础医学概论教研室烟台264003 滨州医学院免疫学教研室烟台264003 附属医院创伤骨科滨州256600 淄博市临淄区人民医院临床微生物科淄博255400

目的：以Tn＋肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc（WtCosmc）质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法：流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn＋与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn＋肿瘤细胞经Fugene ... 详细信息

目的：以Tn＋肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc（WtCosmc）质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法：流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn＋与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn＋肿瘤细胞经Fugene 6转染WtCosmc质粒,并用免疫荧光检测细胞表面Tn抗原表达状况.分别采用荧光法、CCK-8和Transwell检测转染前后Tn＋肿瘤细胞的T-synthase活性、细胞增殖、迁移能力及对Apo2L/TRAIL的敏感性.结果：与Tn-细胞相比,Tn＋肿瘤细胞T-synthase活性及对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性较低;细胞增殖、迁移能力较强.经WtCosmc质粒转染后,Tn＋细胞T-synthase活性及其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性明显增高;Tn抗原表达受抑;细胞增殖及迁移能力明显下降.结论：转染WtCosmc可恢复Tn＋细胞T-synthse活性,抑制Tn抗原的表达,进而增强其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性,降低细胞增殖、迁移能力,有效抑制Tn＋肿瘤细胞的恶性行为.

关键词： WtCosmc Tn抗原细胞增殖细胞凋亡 ApO2L/TRAIL

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PCR-反向点杂交法在外阴阴道念珠菌病诊断及白念珠菌耐药基因突变检测中的应用

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临床检验杂志 2017年第7期35卷 495-498页

作者：刘秀卿王革非李卓成黄磊汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041 深圳市第二人民医院检验科广东深圳518035

目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速... 详细信息

目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速培养鉴定药敏试剂)进行药敏试验;采用PCR-反向点杂交法(深圳亚能念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测试剂)进行菌种鉴定和耐药基因突变检测;采用PCR及测序方法进行耐药基因的检测。分别以培养鉴定法、MIC法、核酸序列测定法为对比方法,评价PCR-反向点杂交法念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的敏感性、特异性及准确性。结果与培养鉴定法相比,PCR-反向点杂交法检测6种念珠菌菌种的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为95%、96%、96%、98%、97%以上,2种方法检测6种念珠菌(白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和季也蒙念珠菌)结果的差异无统计学意义(χ~2值分别为0.44、0、0、0、0和0,P均>0.05),一致性较好(Kappa均>0.9)。与MIC法相比,PCR-反向点杂交法检测白念珠菌耐药的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为98%、88%、98%、88%和96%,2种方法检测结果的差异无统计学意义(χ~2=0.17,P>0.05),一致性较好(Kappa>0.8)。PCR-反向点杂交法与核酸序列测定法相比,对6种白念珠菌耐药基因突变位点的检测结果完全一致。结论PCR-反向点杂交法在念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测上与培养鉴定法以及核酸序列测定法的一致性高,比传统检测方法更早期更快速,可应用于外阴阴道念珠菌病(VVC)的辅助诊断。

关键词：外阴阴道念珠菌病白念珠菌 PCR-反向点杂交法 ERG11点突变

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硝酸甘油并酚妥拉明治疗急性左心衰病人的效果

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齐鲁医学杂志 2017年第2期32卷 214-216页

作者：卢纪杰赵国曲彦青岛大学基础医学院微生物学教研室山东青岛266021 莒南县人民医院呼吸内科青岛市市立医院重症医学科

目的探讨硝酸甘油联合酚妥拉明治疗急性左心衰病人的临床效果。方法选择2014年1月—2016年6月在莒南县人民医院心血管内科、重症医学科住院的急性左心衰病人110例,随机分为研究组(n=54)和对照组(n=56)。对照组给予半卧位、吸氧、镇静等... 详细信息

目的探讨硝酸甘油联合酚妥拉明治疗急性左心衰病人的临床效果。方法选择2014年1月—2016年6月在莒南县人民医院心血管内科、重症医学科住院的急性左心衰病人110例,随机分为研究组(n=54)和对照组(n=56)。对照组给予半卧位、吸氧、镇静等常规治疗,并给予呋塞米40mg、西地兰0.4mg静推。研究组在对照组治疗的基础上应用硝酸甘油10mg、酚妥拉明30mg,加入生理盐水至50mL,微量输液泵泵入。结果研究组病人在用药后15、30、60、90、120min的临床症状缓解率均高于对照组(H=5.00,P<0.05),研究组的疗效明显高于对照组(H=4.97,P<0.05)。结论在应用硝酸甘油和酚妥拉明治疗的基础上联合强心、利尿治疗,可以提高急性左心衰的临床治疗效果,快速有效地缓解病人的临床症状。

关键词：硝酸甘油,酚妥拉明心室功能障碍,左心力衰竭,收缩性治疗结果

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微RNA-92a在系统性红斑狼疮血浆中的表达及临床意义

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中华风湿病学杂志 2017年第12期21卷 837-840页

作者：黄茜茜叶璐璐范超凡郭刚强章慧娣尤小寒林巧爱薛向阳孙莉温州医科大学第二临床医学院 325035 温州医科大学微生物学和免疫学教研室温州医科大学第一临床医学院温州医科大挚附属第一医院肾内科温州医科大挚附属第一医院风湿免疫科

目的分析微RNA（miR）-92a在SLE患者血浆中的表达及临床意义。方法收集44例SLE患者、16例RA患者和20名健康对照血浆标本，抽提血浆中小RNA，逆转录后，以cel-miR．39为外参，通过定量PCR检测血浆miR-92a的表达，通过实时荧光定量PCR和... 详细信息

目的分析微RNA（miR）-92a在SLE患者血浆中的表达及临床意义。方法收集44例SLE患者、16例RA患者和20名健康对照血浆标本，抽提血浆中小RNA，逆转录后，以cel-miR．39为外参，通过定量PCR检测血浆miR-92a的表达，通过实时荧光定量PCR和琼脂糖凝胶电泳对miR-92a和***-39的特异性分析；受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析血浆miR-92a作为SLE诊断的敏感性和特异性。采用***检验、***检验、r检验和Pearson相关分析进行统计分析。结果miR．92a在SLE患者49．20（5．33，95．17）、健康者411．30（320．84，504．69）和RA患者25．59（11．20，30．54）血浆中的相对表达量差异有统计学意义（x2=40．77，P〈0．01）。与健康对照相比，SLE患者血浆中miR-92a表达水平明显下调（49．20和411．30，P〈0．01），RA患者血浆中miR-92a相对表达水平较健康人，也明显下调（25．59与411．30，P〈0．01）。SLE患者血浆miR-92a区分健康对照及RA患者血浆miR-92a区分健康对照的ROC曲线下面积（AUC）分别为0．958和1．00。血浆miR-92a表达水平以198．59区别SLE患者和健康对照的特异性和敏感性达90％，93．2％；以85．35临界值区别RA患者与健康对照的特异性和敏感性达100％和100％。血浆miR-92a的表达水平在低补体c3，高血肌酐、高血尿素氮，高ALT及高LDH的SLE患者进一步降低（P均〈o．05）。结论SLE患者血浆中下调表达的miR-92a可能与其发病和病情进展相关，是SLE及终末期肾功能损害临床诊断一个新的生物学指标。

关键词：红斑狼疮系统性 miR-92a 微小RNA

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BCG新应用研究进展

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国际生物制品学杂志 2017年第4期40卷 180-182,186页

作者：崔子宸裴杰薛庆节济宁医学院法医学与医学检验学院 272067 济宁医学院病原微生物学教研室 272067 济南大学、山东省医学科学院医学与生命科学学院 250200

近年来人们围绕BCG开展了新应用研究。此文对重组BCG抗结核病、抗寄生虫病和抗肿瘤，BCG多糖核酸与临床药物联合应用以及BCG作为佐剂的研究进展做一综述。

关键词：卡介苗药物疗法,联合佐剂免疫

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呼吸道合胞病毒空斑形成实验的条件优化

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安徽医科大学学报 2016年第4期51卷 595-598页

作者：于莉吴璇汪旻旻黄升海安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

采用空斑形成实验方法测定呼吸道合胞病毒（RSV）的滴度,加入覆盖层倒置培养27、30、34、40h后经固定染色、剔除覆盖层后,可见清晰透明空斑,边缘清晰、形态均为圆形或类圆形,空斑直径分别为1、1.5、3、5mm左右。加入覆盖层后培养病毒的... 详细信息

采用空斑形成实验方法测定呼吸道合胞病毒（RSV）的滴度,加入覆盖层倒置培养27、30、34、40h后经固定染色、剔除覆盖层后,可见清晰透明空斑,边缘清晰、形态均为圆形或类圆形,空斑直径分别为1、1.5、3、5mm左右。加入覆盖层后培养病毒的时间可以影响RSV最终所形成的空斑大小,并且随着时间的延长空斑逐渐增大,在30～34h所形成的空斑大小最佳,易于计数。病毒的稀释度也会影响空斑最终形成的数量,且随着稀释度的增加,空斑数量逐渐减少。

关键词：呼吸道合胞病毒空斑形成实验甲醛-结晶紫

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冠突散囊菌nsdD基因超表达菌株的构建及表型分析

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基因组学与应用生物学 2017年第3期36卷 900-905页

作者：余春芳熊庆李文仿谭玉梅刘永翔刘作易欧琴湖北医药学院基础医学院微生物学教研室十堰442000 贵州省科学技术厅贵阳550002 十堰市太和医院普外科十堰442000 贵州省农业生物技术重点实验室贵阳550006 贵州省生物技术研究所贵阳550006 贵州省农业科学院贵阳550006

为了研究冠突散囊菌nsdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化... 详细信息

为了研究冠突散囊菌nsdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化到冠突散囊菌进行功能验证。结果显示向基因组随机插入外源质粒DNA,随机挑选11个nsd D基因超表达转化子,对nsdD基因超表达转化子菌株培养观察并与野生型菌株相比发现,在5%和17%NaCl培养基中菌落差异不显著,而且仍能产生成熟的有性孢子。本实验为冠突散囊菌有性发育调控机制的研究提供了技术基础。

关键词：冠突散囊菌表达质粒构建 nsdD基因超表达农杆菌介导

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