检索结果-内蒙古大学图书馆

2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

作者：李潇左志斌李静唐伟杨丕山山东大学口腔医学院山东省口腔组织再生重点实验室济南市口腔医院牙周粘膜诊疗中心山东大学基础医学院微生物学教研室

目的:TNF-α在牙周炎的发病过程中具有重要意义,可以通过激活相关炎性通路如NF-κB信号通路从而促进下游因子表达,继而导致炎症发生。颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种多功能生长因子,可以通过与TNF-α的细胞表面受体竞争性结合,抑... 详细信息

目的:TNF-α在牙周炎的发病过程中具有重要意义,可以通过激活相关炎性通路如NF-κB信号通路从而促进下游因子表达,继而导致炎症发生。颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种多功能生长因子,可以通过与TNF-α的细胞表面受体竞争性结合,抑制TNF-α诱导的炎症反应。并有研究报道重组PGRN有效抑制了类风湿性关节炎动物模型的炎症反应,具有保护性作用。PGRN的这种抗炎作用可以为牙周炎的防治提供新的思路。目前PGRN在慢性牙周炎中的作用尚无报道,PGRN是否在牙周炎中起抗炎作用尚不清楚。本研究拟探讨PGRN在牙周局部组织中的表达及其与牙周组织局部炎症状态之间的关系,并通过动物实验,研究PGRN对大鼠实验性牙周炎炎症反应的影响。方法:1、采用实时定量RT-PCR法和免疫组化法检测PGRN在慢性牙周炎患者牙龈组织和正常对照者牙龈组织中m RNA水平及蛋白水平的表达情况。实时定量RT-PCR法检测牙龈组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达。统计学分析各组间牙周组织PGRN的表达水平,及其与炎症因子的相关性。2、建立大鼠实验性牙周炎模型,牙周局部注射r PGRN,无菌PBS注射作为对照,采用实时定量RT-PCR法和酶联免疫吸附试验检测r PGRN治疗后牙周组织中炎症因子TNF-α、IL-1β的表达水平,并采用H&E染色的方法观察注射局部牙龈组织炎症细胞的浸润程度。结果 1、牙龈组织切片免疫组化染色结果显示,慢性牙周炎患者牙龈组织中PGRN的表达明显高于正常牙龈组织。实时定量RT-PCR检测结果表明,慢性牙周炎患者组PGRN在m RNA水平表达较正常对照组明显增高,并且PGRN与炎症因子TNF-α、IL-6 m RNA表达呈正相关性。2、动物实验的结果表明,大鼠牙周局部注射r PGRN 4周后,r PGRN注射组牙周组织中炎症因子TNF-α、IL-1β在m RNA和蛋白水平均明显低于PBS注射对照组,H&E染色结果示r PGRN注射组牙龈组织炎症细胞浸润数量较对照组减少。结论:我们研究发现,PGRN在慢性牙周炎牙龈组织中表达水平明显增高,外源性r PGRN局部注射可有效抑制大鼠实验性牙周炎的炎症反应,说明PGRN在牙周炎中具有抗炎保护作用。

关键词：颗粒蛋白前体慢性牙周炎实验性牙周炎肿瘤坏死因子-α

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一种基于香豆素咪唑鎓盐的新型高选择性线粒体双光子荧光探针及其在硫醇检测中的应用

一种基于香豆素咪唑鎓盐的新型高选择性线粒体双光子荧光探针及其...

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中国化学会第30届学术年会

作者：李毅朱博琛薛姗姗黎孟枫计亮年毛宗万生物无机与合成化学教育部重点实验室中山大学化学与化学工程学院微生物学教研室中山大学中山医学院

线粒体在真核细胞的新陈代谢过程中发挥着重要作用,发展线粒体靶向的荧光探针对研究其功能具有重要意义。我们设计了系列基于香豆素咪唑(?)盐的新型线粒体靶向双光子荧光探针1-3,它们具有优异的光物理性质、良好的生物相容性和对线粒体... 详细信息

线粒体在真核细胞的新陈代谢过程中发挥着重要作用,发展线粒体靶向的荧光探针对研究其功能具有重要意义。我们设计了系列基于香豆素咪唑(?)盐的新型线粒体靶向双光子荧光探针1-3,它们具有优异的光物理性质、良好的生物相容性和对线粒体的高选择性,证实了咪唑(?)盐基团可以作为一个有效的线粒体靶向基团。为进一步拓展其应用,分别设计合成了能够硫醇响应的化合物1b-3b,实现了活细胞中线粒体内硫醇的检测。

关键词：香豆素咪唑鎓盐线粒体双光子探针

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油菜叶绿体乙酰辅酶A羧化酶单交换表达载体的构建

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广西植物 2015年第4期35卷 609-617页

作者：武玉永谭秀华马立新滨州医学院医学遗传学教研室山东烟台264003 湖北大学生命科学学院分子微生物学与基因工程实验室武汉430062

根据已知序列设计引物,通过PCR扩增获得质体定位的乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因序列。先将该酶4个亚基的基因进行拼接,然后将这4个拼接好的片段,克隆到pMD18-T载体上,得到质粒pH BM714。再以质粒pHBM714 DNA为模板,用分别带有CpoI和A... 详细信息

根据已知序列设计引物,通过PCR扩增获得质体定位的乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因序列。先将该酶4个亚基的基因进行拼接,然后将这4个拼接好的片段,克隆到pMD18-T载体上,得到质粒pH BM714。再以质粒pHBM714 DNA为模板,用分别带有CpoI和Asc I酶切位点的引物进行PCR扩增,PCR产物在dTTP的保护下经T4 DNA聚合酶处理,与将质粒pHBM720DNA纯化后经CpoI和AscI双酶切后得到的大片段连接,连接产物转化大肠杆菌Xl_(10)-gold,得到正确的重组子命名为pHBM726。此质粒pH BM726,即为带有壮观霉素抗性基因(aadA)筛选标记的质体定位的乙酰辅酶A羧化酶基因油菜叶绿体单交换表达载体;在此载体中壮观霉素抗性基因(aadA)、乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因(ACC)和绿色荧光蛋白基因(gfp)共6个基因串联在一起,共用一个启动子序列,一起来进行表达;通过酶切检测、PCR验证和测序验证,均表明该表达载体构建成功。最后此载体在大肠杆菌中表达时,发现重组菌能够在含壮观霉素的培养基上生长,且在可见光下,能看到绿色荧光,表明壮观霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因均在大肠杆菌中成功表达;表达产物通过Western印迹验证表明组成乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因在大肠杆菌中成功表达。以上结果表明,该表达载体中串联排列的这6个基因均在大肠杆菌中成功表达。该研究结果可为质体定位的乙酰辅酶A羧化酶转叶绿体的研究奠定基础,为油菜油脂代谢研究提供参考。

关键词：油菜叶绿体乙酰辅酶A羧化酶单交换表达载体构建

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贵州省不同职业人群胃幽门螺杆菌感染状况调查

贵州省不同职业人群胃幽门螺杆菌感染状况调查

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第三届临床微生物学与感染病学国际论坛暨全国微生物与人体健康学术会议

作者：王琼陈颖婷杨杰陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵阳市 550025 贵州医科大学附属医院消化内科贵阳市 550004

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埃博拉病毒研究进展

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中山大学学报(医学科学版) 2015年第2期36卷 161-166页

作者：曾谷城中山大学中山医学院微生物学教研室∥热带病防治研究教育部重点实验室

埃博拉病毒(EBOV)是能够导致人和灵长类动物埃博拉出血热的一种高致病率及高致死率病毒。埃博拉病毒从发现以来已经造成了数次大规模流行,主要集中在非洲地区。2014年在西非地区暴发了历史上最为严重的埃博拉出血热疫情,引起了全球的广... 详细信息

埃博拉病毒(EBOV)是能够导致人和灵长类动物埃博拉出血热的一种高致病率及高致死率病毒。埃博拉病毒从发现以来已经造成了数次大规模流行,主要集中在非洲地区。2014年在西非地区暴发了历史上最为严重的埃博拉出血热疫情,引起了全球的广泛关注。本文就埃博拉病毒的流行病学、传播特点、分子病毒学、致病的分子基础、感染及致病的免疫机制及埃博拉出血热的临床特征和防治措施等方面的研究进展进行综述,为人们能够有效预防及治疗埃博拉出血热,遏制埃博拉出血热疫情的扩散提供科学参考。

关键词：埃博拉病毒(EBOV) 埃博拉出血热

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卡波氏肉瘤相关疱疹病毒ORF65抗体的制备及其特异性检测

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重庆医学 2015年第8期44卷 1091-1093,1096页

作者：陈源红赵丽娟梁有龙张卓华曾怡右江民族医学院微生物学与免疫学教研室广西百色533000 右江民族医学院

目的制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化,在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共4次。末次免疫后1周取兔血清,ELISA法检测兔免... 详细信息

目的制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化,在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共4次。末次免疫后1周取兔血清,ELISA法检测兔免疫血清抗体IgG抗体水平。进一步采用免疫荧光、Western blot检测制备的抗血清中与ORF65结合的特异性。结果家兔在全程免疫后产生了高效价的特异性抗体,最高滴度达1∶12 800。免疫荧光检测显示,与未经佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1细胞相比,兔抗血清主要结合于BCBL-1细胞胞质,与ORF65蛋白在细胞内表达位置一致。Western blot结果显示在21kD处有特异性蛋白条带,其大小与预期的ORF65蛋白大小相符,同时经TPA刺激的BCBL-1细胞中ORF65蛋白表达量高于对照组,与ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。结论用ORF65衣壳蛋白抗原肽段免疫家兔,可成功制备高效价的特异性抗血清,该抗体可与KSHV病毒ORF65蛋白特异性结合。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 ORF65 抗体免疫性

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间充质干细胞对系统性红斑狼疮T淋巴细胞的免疫调节作用

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免疫学杂志 2016年第8期32卷 681-686页

作者：罗利梅骆辑周晓泉蒋红梅陈琨安宇匡颖骆姝琳聂瑛洁刘泽星贵州省遵义市第一人民医院检验科 563002 贵州大学药学院贵阳550002 贵州省血液中心办公室贵阳550002 贵州医科大学检验系临床微生物学和免疫学教研室贵阳550000 贵州省人民医院中心实验室贵阳550000 贵州省人民医院中国际交流合作部贵阳550000 香港大学医学院内科 008000

目的研究正常健康捐献者骨髓来源的间充质干细胞(MSC)对系统性红斑狼疮(SLE)患者来源的T淋巴细胞的免疫调节作用。方法共培养MSC与正常对照或SLE患者来源的T淋巴细胞,检测MSC对T细胞的作用,包含T细胞增殖能力,细胞表型及其产生的细胞因... 详细信息

目的研究正常健康捐献者骨髓来源的间充质干细胞(MSC)对系统性红斑狼疮(SLE)患者来源的T淋巴细胞的免疫调节作用。方法共培养MSC与正常对照或SLE患者来源的T淋巴细胞,检测MSC对T细胞的作用,包含T细胞增殖能力,细胞表型及其产生的细胞因子等。实验分为健康对照组(C组)与SLE组(S组)。每一大组又分为T细胞组(C1组、S1组)、T细胞+植物血凝素组(C2组、S2组)、T细胞+植物血凝素+MSC组(C3组、S3组)。结果 MSC能抑制SLE患者来源的T淋巴细胞增殖[S2:(2 615.7±582.3)cpm;S3:(784.7±417.5)cpm;P<0.05],促使SLE T细胞向调节性CD4+CD25+Foxp3+T细胞转化增加(S2:11.85%±1.99%;S3:24.17%±5.82%,P<0.05)。MSC还能促使SLE T细胞分泌IFN-γ[S2:(14.13±11.16)pg/ml;S3:(39.68±26.73)pg/ml,P<0.05]与IL-10[S2:(5.09±2.96)pg/ml;S3:(17.15±3.61)pg/ml,P<0.05]。结论 MSC能抑制SLE患者来源的T细胞增殖,促进T细胞向调节性T细胞转化,诱导免疫耐受,有望成为治疗SLE的细胞疗法。

关键词：自身免疫性疾病系统性红斑狼疮间充质干细胞调节性T细胞

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重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究

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四川大学学报（医学版） 2015年第3期46卷 354-358页

作者：王保宁潘兴黄筱钧周永君祝捷高礼珍牛晓娟李婉宜李明远王红仁四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 四川万可泰生物技术有限责任公司成都610041

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内... 详细信息

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内佐剂序列ctB,按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,即为BIB序列。人工合成之后,插入原核表达质粒pET28a(+)中,构建pET28a(+)/ctB-ureI-ureB〔pET28a(+)/BIB〕重组质粒。经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定正确后,将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。BIB工程菌经乳糖诱导表达后,SDS-PAGE检测重组蛋白BIB的表达情况,并对其N端氨基酸序列和相对分子质量进行测定,Western blot对其进行抗原性鉴定。结果原核表达质粒pET28a(+)/BIB经双酶切和测序鉴定构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量33×103处有一条明显条带,其N端氨基酸序列和相对分子质量与设计序列100%一致,Western blot结果显示BIB可以与抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)小鼠血清及鼠抗CTB单抗产生特异性反应。结论成功构建了幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌,该工程菌表达的BIB蛋白抗原性良好。

关键词：幽门螺杆菌多表位疫苗尿素酶B亚单位尿素酶I亚单位霍乱毒素B亚单位

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贵州地区结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB突变特征分析

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中国临床药理学杂志 2015年第10期31卷 833-835页

作者：欧维正骆科文陈峥宏陈静王燕秦万蒙俊贵阳市肺科医院检验科贵阳医学院微生物学教研室贵阳市肺科医院结核科

目的了解贵州地区结核分枝杆菌(MTB)对利福平耐药相关基因rpo B突变特征以便探讨适合本地区MTB对利福平耐药的快速筛选方法。方法用PCR-荧光探针法检测临床标本MTB核酸,阳性者(低浓度除外)用基因芯片检测rpo B基因,异常检测者再进行测... 详细信息

目的了解贵州地区结核分枝杆菌(MTB)对利福平耐药相关基因rpo B突变特征以便探讨适合本地区MTB对利福平耐药的快速筛选方法。方法用PCR-荧光探针法检测临床标本MTB核酸,阳性者(低浓度除外)用基因芯片检测rpo B基因,异常检测者再进行测序分析。结果 MTB核酸阳性患者3966例,阳性率22.72%(3966/17452)。基因芯片检测2738例中,552例有rpo B基因突变,突变率为20.16%(552/2738);9例异常检测者,经基因测序验证,分别为位点缺失、密码子插入、同密码子双碱基突变和多位点突变。rpo B基因突变类型有26种,以531,526,516,511,533,513和512位点突变为主,分别占56.23%,18.09%,9.67%,8.61%,4.57%,1.76%和0.18%。结论贵州地区MTB对利福平耐药相关基因rpo B突变特征与文献报道基本一致,基因芯片可作为本地区MTB利福平耐药的快速筛选方法。

关键词：结核分枝杆菌利福平 rpoB基因基因芯片基因突变

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浅谈香港高等教育发展经验及其借鉴意义

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教育界（高等教育） 2016年第7期 118-118页

作者：李水红段元润南华大学医学院微生物学教研室

本文根据个人亲身体会，简述了香港高等教育的办学优势与发展经验，为我国高等教育的改革与发展提供一定的参考与借鉴。

关键词：香港高等教育发展经验借鉴意义

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