检索结果-内蒙古大学图书馆

青岛大学医学院学报 2015年第3期51卷 261-263,266页

作者：杨颖沈智超刘芡芡罗兵王云青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021

目的探讨EB病毒(EBV)编码基因BARF1对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响。方法构建BARF1基因慢病毒表达载体,转染EBV阴性鼻咽癌细胞系CNE,杀稻瘟菌素筛选稳定感染细胞克隆,RT-PCR鉴定目的基因表达。以不含目的基因的慢病毒感染细胞为对照,进行... 详细信息

目的探讨EB病毒(EBV)编码基因BARF1对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响。方法构建BARF1基因慢病毒表达载体,转染EBV阴性鼻咽癌细胞系CNE,杀稻瘟菌素筛选稳定感染细胞克隆,RT-PCR鉴定目的基因表达。以不含目的基因的慢病毒感染细胞为对照,进行MTT细胞增殖实验、细胞周期检测和细胞迁移实验。结果与对照组比较,转染BARF1基因的细胞增殖能力和增殖指数无明显变化(P>0.05),但是迁移能力显著增强(t=9.71,P<0.05)。结论 EBV BARF1基因可通过增强鼻咽癌细胞迁移能力而增强其肿瘤原性。

关键词：疱疹病毒4型,人基因表达鼻咽肿瘤细胞运动

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TLR9-1486和TLR9-2848基因多态性与胃癌易感性关系

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齐鲁医学杂志 2015年第3期30卷 260-262,265页

作者：石源源韩璐舒君王笑峰罗兵青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021

目的探讨Toll样受体9(TLR9)编码基因TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性以及EB病毒(EBV)感染与胃癌易感性的关系。方法选取131例胃癌病人为研究对象,包括43例EBV相关胃癌(EBVaGC)和88例EBV阴性胃癌(EBVnGC),同时随机抽取66例健康人外周血... 详细信息

目的探讨Toll样受体9(TLR9)编码基因TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性以及EB病毒(EBV)感染与胃癌易感性的关系。方法选取131例胃癌病人为研究对象,包括43例EBV相关胃癌(EBVaGC)和88例EBV阴性胃癌(EBVnGC),同时随机抽取66例健康人外周血标本作为对照。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TLR9基因-1486位点T/C和-2848位点G/A多态性。结果 TLR9-1486T/C位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与携带T等位基因者相比较,C等位基因携带者胃癌和EBVaGC发病风险无明显升高趋势。TLR9-2848G/A位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与G等位基因携带者比较,A等位基因携带者胃癌和EBVaGC易感性无明显升高。结论 TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性与胃癌易感性无关,且在EBVaGC发生中与EBV感染无协同关系。

关键词：胃肿瘤 Toll样受体9 多态性,单核苷酸疱疹病毒4型,人

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猪胆囊中沙门菌L型的分离培养与invA基因检测

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动物医学进展 2015年第3期36卷 25-28页

作者：佘晓玲王涛丁文静吴文娟潘耀振汤可立王丹霓王和贵阳医学院微生物学教研室贵州贵阳550004 贵阳医学院附属医院外科贵州贵阳550004 贵州省人民医院外科贵州贵阳550002 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

为了解猪胆囊中沙门菌L型携带情况,在贵阳市屠宰场采集970例健康生猪的胆囊组织与胆汁标本,用常规细菌学方法和非高渗分离培养法分离沙门菌及其细菌L型,用PCR和核酸序列分析方法对稳定L型纯培养物进行沙门菌的invA基因检测。结果显示,97... 详细信息

为了解猪胆囊中沙门菌L型携带情况,在贵阳市屠宰场采集970例健康生猪的胆囊组织与胆汁标本,用常规细菌学方法和非高渗分离培养法分离沙门菌及其细菌L型,用PCR和核酸序列分析方法对稳定L型纯培养物进行沙门菌的invA基因检测。结果显示,970例生猪胆囊标本未检出沙门菌细菌型,细菌L型检出率为8.25%;80例细菌L型分离物中有50例invA检测阳性,占5.15%;占细菌L型阳性分离物62.50%。研究结果为生猪胆囊沙门菌L型感染的流行病学及其检查提供了依据。

关键词：猪胆囊沙门菌细菌L型基因检测

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基于科研能力培养的医学微生物学实验教学改革初探

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基础医学教育 2015年第7期17卷 610-613页

作者：吕杰刘从森陈勇王天宏孙慧管俊昌蚌埠医学院微生物学教研室蚌埠233000 蚌埠医学院形态实验中心

在蚌埠医学院微生物教研室原有传统医学微生物实验教学模式基础上,通过增加综合性、设计性和研究性实验等多种手段,采用多种教学方法,以多种方式对改进教学体系的实际教学和应用效果进行考核、调查、分析及客观评价,进一步完善医学微生... 详细信息

在蚌埠医学院微生物教研室原有传统医学微生物实验教学模式基础上,通过增加综合性、设计性和研究性实验等多种手段,采用多种教学方法,以多种方式对改进教学体系的实际教学和应用效果进行考核、调查、分析及客观评价,进一步完善医学微生物实验教学体系建设。试图通过对传统医学微生物实验教学模式的改进,培养适应新时期国家经济建设与社会发展需要、高素质创新型高级医务人才。

关键词：医学微生物学实验教学科研能力

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APOBEC-3F和APOBEC-3G与乙肝核心抗原的相互作用研究

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癌变．畸变．突变 2015年第3期27卷 182-186页

作者：王革非曾祥兴李蕊苏景华刘俊周艳琳李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

目的:人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽APOBEC-3F(A3F)和APOBEC-3G(A3G)可抑制HBV复制,并参与HBV基因组的超突变,其中HBc Ag被认为是潜在作用位点,为此本文研究A3F和A3G与HBcAg可能存在的蛋白相互作用方式。方法:RT-PCR克隆人A3F和A3G的c... 详细信息

目的:人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽APOBEC-3F(A3F)和APOBEC-3G(A3G)可抑制HBV复制,并参与HBV基因组的超突变,其中HBc Ag被认为是潜在作用位点,为此本文研究A3F和A3G与HBcAg可能存在的蛋白相互作用方式。方法:RT-PCR克隆人A3F和A3G的cDNA,并构建相应酵母双杂交表达载体pGADT7-A3F/-A3G;PCR克隆HBV ayw亚型HBcAg基因,构建其酵母双杂交表达载体p GBKT7-HBc Ag。p GBKT7-HBc Ag分别与p GADT7-3G和p GADT7-3F共转化AH109酵母菌,利用营养二缺平板及四缺平板培养及α-半乳糖苷酶活性测试,检测HBc Ag与A3F和A3G的直接作用情况。构建含有HBcAg、人A3F和A3G基因的多种标签融合真核表达质粒,脂质体法转染HeLa细胞后进行免疫共沉淀实验(Co-IP),并通过Western blot检测免疫共沉淀产物确定HBcAg与A3F和A3G之间是否存在间接相互作用。结果:酶切及DNA测序分析表明成功克隆HBcAg、人A3F和A3G,并成功构建酵母双杂交、真核表达及亚细胞定位相关的表达质粒。通过酵母双杂交实验对α-半乳糖苷酶定性和定量检测显示,A3F和A3G与HBcAg无显著的直接相互作用。Western blot及Co-IP实验结果表明A3F和A3G与HBcAg均存在相互作用。结论:A3F和A3G蛋白与HBcAg蛋白之间确实存在相互作用,推测这种作用不是通过两个蛋白直接结合实现的。

关键词： APOBEC-3F APOBEC-3G 乙肝核心抗原酵母双杂交免疫共沉淀

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稳定表达重组人CD317细胞系的构建及其对流感病毒的抗性研究

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汕头大学医学院学报 2015年第2期28卷 86-87,F0003页

作者：王革非张驰李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

目的:研究表达重组人CD317细胞系对流感病毒的抵抗作用。方法:将CD317基因真核表达质粒转染MDCK细胞,用含有G418培养基进行筛选,挑取抗性细胞克隆扩大培养,免疫荧光检测重组CD317表达。用流感病毒PR8感染稳定表达重组人CD317;MTT法检测... 详细信息

目的:研究表达重组人CD317细胞系对流感病毒的抵抗作用。方法:将CD317基因真核表达质粒转染MDCK细胞,用含有G418培养基进行筛选,挑取抗性细胞克隆扩大培养,免疫荧光检测重组CD317表达。用流感病毒PR8感染稳定表达重组人CD317;MTT法检测细胞活力并评价其对流感病毒的抗性作用,收集感染细胞提取RNA,用定量RT-PCR检测流感病毒在细胞中的载量。结果:免疫荧光结果表明挑取抗性细胞克隆稳定表达重组人CD317;CCK-8检测显示PR8感染后,CD317活性高于对照的空载体表达细胞。定量RT-PCR表明,PR8在该稳定表达CD317的细胞中基因载量高于空载体细胞。结论:稳定表达重组人CD317可抵抗流感的破坏作用,提示CD317可抑制PR8释放。

关键词：重组表达 CD317 流感病毒细胞活性

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Nek8在食管鳞癌中的表达及意义

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重庆医学 2015年第5期44卷 597-599,604页

作者：郭亚平朱红付茂勇王朝莉李倩倩胡为民川北医学院微生物学与免疫学教研室四川南充637000 川北医学院附属医院胸心外科四川南充637000 川北医学院免疫学与分子生物学研究所四川南充637000

目的探讨食管鳞癌组织和细胞系中Nek8的表达及其与食管鳞癌临床病理特征和术后生存的关系。方法采用RT-PCR法检测食管鳞癌细胞系Eca109细胞、2例配对的食管鳞癌组织和癌旁黏膜上皮中Nek8mRNA表达情况;应用免疫组织化学法检测Nek8蛋白在... 详细信息

目的探讨食管鳞癌组织和细胞系中Nek8的表达及其与食管鳞癌临床病理特征和术后生存的关系。方法采用RT-PCR法检测食管鳞癌细胞系Eca109细胞、2例配对的食管鳞癌组织和癌旁黏膜上皮中Nek8mRNA表达情况;应用免疫组织化学法检测Nek8蛋白在食管鳞癌组织芯片中的表达情况,并结合临床病理资料和生存率进行统计学分析。结果 Nek8mRNA在Eca109细胞、2例食管鳞癌患者的癌组织均有表达,而癌旁食管黏膜上皮中均未见明显的表达。组织芯片结果示Nek8蛋白主要表达于细胞质,在78例配对的标本中,Nek8在食管鳞癌组织中的表达显著高于其在癌旁黏膜组织的表达(P=2.16E-13)。其表达与肿瘤大小有关(P=0.008),而与性别、年龄、分化程度、浸润深度、淋巴结转移无关(P>0.05)。生存分析显示高表达和低表达Nek8的患者生存率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Nek8在食管鳞癌组织和细胞中表达上调,可能参与了食管鳞癌的发生、发展,可作为诊断的标志物和治疗的靶点。

关键词：免疫组织化学 Nek8 食管鳞癌 Eca109细胞

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流感病毒在神经元细胞中的感染与复制研究

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汕头大学医学院学报 2015年第2期28卷 88-89,F0003页

作者：王革非蒋治武李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室广东汕头515041

目的:研究流感病毒在体外对神经元的感染及活性影响,检测流感病毒在神经元内的复制效率。方法:原代培养小鼠神经元细胞,β-tubulin III抗体进行免疫荧光鉴定小鼠神经元纯度,流感病毒吸附、培养;荧光定量PCR检测神经元内病毒载量;CCK-8... 详细信息

目的:研究流感病毒在体外对神经元的感染及活性影响,检测流感病毒在神经元内的复制效率。方法:原代培养小鼠神经元细胞,β-tubulin III抗体进行免疫荧光鉴定小鼠神经元纯度,流感病毒吸附、培养;荧光定量PCR检测神经元内病毒载量;CCK-8检测流感病毒对神经元活性的影响。结果:免疫荧光结果表明,神经元纯度大于95%。CCK-8检测结果显示,流感病毒对神经元感染可显著抑制神经元细胞活性。荧光定量PCR结果表明,流感病毒可感染神经元并在其细胞内进行病毒复制。结论:流感病毒可在体外感染小鼠原代神经元进行病毒复制,并影响神经元活性。

关键词：流感病毒神经元复制

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一株抗JEV单抗可变区的计算机建模及其与JEVE蛋白的分子对接

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中国病原生物学杂志 2015年第4期10卷 289-292页

作者：寇甜甜杨滨王媛丁天兵第四军医大学基础医学院微生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学生物医学工程学院医学电子工程教研室

目的利用计算机建模获得单克隆抗体2F2可变区三维结构,再与日本脑炎病毒(JEV)E蛋白进行模拟分子对接,了解JEV E蛋白上与2F2作用的关键氨基酸位点,为阐明2F2的中和作用机制奠定基础。方法利用BLASTP软件在蛋白质数据库(PDB)中搜索2F2同... 详细信息

目的利用计算机建模获得单克隆抗体2F2可变区三维结构,再与日本脑炎病毒(JEV)E蛋白进行模拟分子对接,了解JEV E蛋白上与2F2作用的关键氨基酸位点,为阐明2F2的中和作用机制奠定基础。方法利用BLASTP软件在蛋白质数据库(PDB)中搜索2F2同源蛋白。以同源蛋白为模板,用Modeller软件对2F2可变区主链、侧链进行建模,组装出完整的2F2可变区三维结构模型并进行一系列分子动力学优化,得到能量最低的单抗可变区三维结构。最后利用Discovery Studio软件模拟2F2可变区与JEV E蛋白的分子对接。结果获得2F2可变区三维结构模型。模拟分子对接结果显示JEV E蛋白上与2F2可变区相互接触、作用的氨基酸位点有9个,即Ⅰ区的13位谷氨酸、16位丝氨酸、37位天冬氨酸和300位苏氨酸,Ⅲ区的336位赖氨酸、347位天冬氨酸、354位亮氨酸、387位精氨酸和388位甘氨酸残基。其中Ⅰ区13位谷氨酸、16位丝氨酸和37位天冬氨酸可能是中和表位必需的氨基酸。Ⅲ区的387位精氨酸和388位甘氨酸位于优势中和抗原表位区域,336位赖氨酸与已报道的337位中和表位非常接近。结论通过计算机建模确定JEV E蛋白上有9个与单克隆抗体2F2作用的主要氨基酸位点,为利用E蛋白突变体阐明2F2单抗的中和机制提供了依据。

关键词：日本脑炎病毒 E蛋白单克隆抗体可变区计算机建模分子对接

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医院检出阴沟肠杆菌耐药性及耐药基因

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中国老年学杂志 2015年第19期35卷 5441-5443页

作者：方先松焦会园温小云宋矿余王力薇李蓉赣南医学院第一附属医院检验科南昌大学基础医学院微生物学教研室江西南昌330066 赣南医学院第一附属医院输血科

目的了解临床分离阴沟肠杆菌耐药性与耐药基因情况,为临床合理选用抗菌药物提供理论依据。方法收集赣南医学院第一附属医院临床分离的阴沟肠杆菌40株,琼脂稀释法与纸片扩散法检测常用抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对12种耐药基因进行检... 详细信息

目的了解临床分离阴沟肠杆菌耐药性与耐药基因情况,为临床合理选用抗菌药物提供理论依据。方法收集赣南医学院第一附属医院临床分离的阴沟肠杆菌40株,琼脂稀释法与纸片扩散法检测常用抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对12种耐药基因进行检测。将该院检出的40株阴沟肠杆菌作为研究样本,采用琼脂稀释法与纸片扩散法行药敏试验,而后采用序列分析法与PCR(聚合酶反应)对12种耐药相关基因进行分析。结果经分析后的药物敏感结果显示,40株阴沟肠杆菌标本对头孢吡肟耐药率以15.0%为最低,而对美罗培南与亚胺培南敏感率均为100%,其他抗菌耐药率范围为42.0%~92.5%;耐药基因共8类,分别为sull、Int I 1、aac(3,’)-I、Amp C、CTX-M-9、CTX-M-3、SHV-2a、TEM-1,sull+Int I1为大部分菌株所携带;耐药谱分为9型(A-I),其中以A、D占比较高,且基因分型与其分型存在一定的相关性。结论阴沟肠杆菌有高度与多重耐药性特征,其耐药机制较为复杂且为多种耐药机制共同作用。

关键词：医院感染阴沟肠杆菌耐药性耐药基因

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