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靶向VEGF小干扰RNA协同5-FU诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡机制的研究

微生物学杂志 2015年第2期35卷 22-26页

作者：王誉静王学祥于红王静张文卿青岛大学医学院医学微生物学教研室山东青岛266071 苏州大学唐仲英血液学研究中心江苏苏州215002

探讨慢病毒介导的靶向VEGF小干扰RNA联合应用化疗药物5-FU诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制。以携带VEGF siRNA的慢病毒载体感染MCF-7细胞,应用RT-PCR和Western blot分别检测各组VEGF mRNA、VEGF蛋白及凋亡相关蛋白的表达,流式细胞术检... 详细信息

探讨慢病毒介导的靶向VEGF小干扰RNA联合应用化疗药物5-FU诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制。以携带VEGF siRNA的慢病毒载体感染MCF-7细胞,应用RT-PCR和Western blot分别检测各组VEGF mRNA、VEGF蛋白及凋亡相关蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡。结果表明,慢病毒VEGF siRNA干扰组细胞VEGF mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,凋亡相关蛋白P53及P21表达上调,而SIRT1、Bcl-2及Survivin表达下调。流式细胞术检测显示慢病毒干扰组及5-FU组细胞凋亡率显著升高,联合治疗组的协同作用更为明显。上述结果表明:慢病毒介导的RNA干扰能明显抑制MCF-7细胞VEGF的表达,通过下调SIRTI蛋白的表达,导致P53蛋白表达上调,并调控其下游P21、bcl-2和Survivin的表达,从而诱导MCF-7细胞的凋亡,并且提高了MCF-7对5-FU的敏感性。

关键词： VEGF RNA干扰乳腺癌细胞 5-FU 细胞凋亡

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调强放疗同期顺铂时辰化疗联合西妥昔单抗对局部晚期鼻咽癌患者的影响

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中国临床研究 2015年第5期28卷 551-555页

作者：刘清壮赵毅王燕高州市人民医院肿瘤放疗科广东高州525200 广东医学院微生物学与免疫学教研室广东湛江524023

目的探讨调强适形放射治疗(IMRT)同期正弦曲线式顺铂时辰化疗联合西妥昔单抗方案治疗局部晚期鼻咽癌的疗效、不良反应和对细胞免疫功能的影响。方法将2009年4月至2012年12月收治的68例局部晚期鼻咽癌患者随机分为实验组(35例)和对照组(3... 详细信息

目的探讨调强适形放射治疗(IMRT)同期正弦曲线式顺铂时辰化疗联合西妥昔单抗方案治疗局部晚期鼻咽癌的疗效、不良反应和对细胞免疫功能的影响。方法将2009年4月至2012年12月收治的68例局部晚期鼻咽癌患者随机分为实验组(35例)和对照组(33例),实验组采用IMRT同期顺铂正弦曲线式时辰化疗联合西妥昔单抗方案治疗,对照组采用IMRT同期顺铂常规化疗联合西妥昔单抗方案治疗。统计两组的疗效及化疗、放疗引起的急慢性不良反应和T细胞亚群变化。结果两组的完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)、进展(PD)和有效(CR+PR)、疾病控制(CR+PR+SD)的构成比在任何时间段差异均无统计学意义(P均>0.05)。在急性不良反应中,黏膜炎、消化道反应、血红蛋白下降、肝功能异常的发生率实验组低于对照组(P均<0.05)。在放疗引起的慢性不良反应中,实验组黏膜炎的发生率低于对照组(P<0.05)。治疗前两组T细胞亚群水平相近(P均>0.05),治疗后两组T细胞亚群水平有不同程度的下降,而对照组的CD4水平和CD4/CD8比值均低于实验组(P均<0.05)。结论 IMRT同期顺铂正弦曲线式时辰化疗联合西妥昔单抗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效明确,可减少急性不良反应和放疗引起的慢性不良反应发生率,减轻对细胞免疫功能的损害,但疗效与IMRT同期顺铂常规化疗联合西妥昔单抗无差别。

关键词：鼻咽癌时辰化疗调强适形放射治疗顺铂西妥昔单抗

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仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒对荷瘤小鼠的抑瘤作用

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中华肿瘤杂志 2014年第3期36卷 177-182页

作者：石立莹陈骏钟启平耿鹏何建民天津医科大学基础医学院微生物学教研室 300070

目的通过小鼠结肠癌动物模型探讨仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒（DIP）的抗肿瘤作用及其机制。方法将CT26细胞悬液0．1ml皮下注射BalB／c小鼠背部，建立小鼠结肠癌模型，将小鼠随机分为Tianjin株DIP组（注射CT26后第4、7、10和13天，... 详细信息

目的通过小鼠结肠癌动物模型探讨仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒（DIP）的抗肿瘤作用及其机制。方法将CT26细胞悬液0．1ml皮下注射BalB／c小鼠背部，建立小鼠结肠癌模型，将小鼠随机分为Tianjin株DIP组（注射CT26后第4、7、10和13天，每天瘤内注射1次Tianjin株DIP0．1m1）和生理盐水对照组（瘤内注射生理盐水0．1ml），每组10只。通过测量肿瘤大小和观察小鼠存活率确定DIP的抑瘤作用。采用流式细胞仪和酶联免疫吸附（ELISA）法检测DIP在体外对小鼠树突状细胞（DCs）成熟及分泌白细胞介素6（IL-6）、干扰素Q（IFN-α）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的促进作用。采用realtimeRT—PCR和免疫组化法检测DIP对小鼠肿瘤组织中CD4＋、CD8＋T细胞及CD11c＋DCs表达的影响。结果至注射CT26后第22天，Tianjin株DIP组小鼠的肿瘤体积为（33．2±2．0）mm3，与生理盐水对照组[（2376．0±130．8）mm3]比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。至注射CT26后第50天，Tianjin株DIP组小鼠的存活率为90．0％，明显高于生理盐水对照组（30．0％，P〈0．01）。流式细胞仪检测显示，小鼠DCs表面CIM0、CD80和CD86标志分子的表达率随病毒剂量的升高而升高，且Tianjin株DIP组和完整病毒组之间的差异无统计学意义（均P〉0．05）。ELISA法检测显示，DIP能够促进小鼠DCs分泌IL-6、IFN-α和TNF-α，且呈剂量依赖性。realtimeRT-PCR检测结果显示，停止给药后24、48和120h取得的小鼠肿瘤组织中CD4、CD8和CDllcmRNA的表达水平均有所升高，且在120h表达达高峰。免疫组化检测结果显示，Tianjin株DIP组肿瘤组织中CD4＋T细胞、CD8＋T细胞和CD11c＋DCs占总细胞的百分比分别为（21．60±1．49）％、（22．12±2．84）％和（23．05±2．91）％，而生理盐水对照组分别为（2．62±0．60）％、（4．05±0．12）％和（3．10±0．09）％，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论Tianjin株DIP可以在小鼠体内发挥抗肿瘤作用，其作用机制与激活DCs和T细胞诱导的抗肿瘤免疫有关。

关键词：仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒树突状细胞 T淋巴细胞免疫小鼠

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医院患者深部真菌感染的临床分布与耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2015年第22期25卷 5122-5124页

作者：彭丽娟胡妮娅杜经纬朱红李雪璐常晋霞杨健川北医学院微生物学与免疫学教研室四川南充637000 南昌大学第一附属医院检验科江西南昌330006 南充市中心医院耳鼻咽喉科四川南充637000

目的了解医院临床分离的真菌分布及耐药性,指导临床合理用药。方法收集医院2013年1-12月临床真菌培养标本,采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact全自动细菌分析仪进行分离、鉴定和药物敏感试验,采用SPSS16.0进行数据分析。结果 1 024... 详细信息

目的了解医院临床分离的真菌分布及耐药性,指导临床合理用药。方法收集医院2013年1-12月临床真菌培养标本,采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact全自动细菌分析仪进行分离、鉴定和药物敏感试验,采用SPSS16.0进行数据分析。结果 1 024株真菌中白色假丝酵母菌分离率最高为448株占43.8%,最低的是新型隐球酵母菌占0.8%;送检标本以尿液为主占78.1%;送检科室以内科为主,主要为消化内科、重症医学和呼吸内科,其次是泌尿外科;深部真菌感染率年龄段分布构成比差异不大,深部真菌感染率最高的是>60岁老年患者占36.0%;假丝酵母菌属对两性霉素B敏感率最高为100.0%,氟康唑耐药率最高占24.2%,新型隐球酵母菌对伏立康唑和伊曲康唑耐药;伊曲康唑的耐药率随年龄的增加耐药率下降。结论临床标本中真菌感染以白色假丝酵母菌为主,真菌感染主要发生于老年患者,耐药性具有种属间差异,应重视真菌病原学检查和药敏监测。

关键词：深部真菌临床分布耐药性

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马尔尼菲青霉基于pkuB基因缺失的高效基因打靶系统构建

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基因组学与应用生物学 2015年第4期34卷 754-762页

作者：卢姗蓝秀万陶玉婷王超梁晓乐梁莹黄勇奇贺菽嘉何志义广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室南宁530021 广西医科大学基础医学中心实验室南宁530021 广西医科大学基础医学研究重点实验室南宁530021 广西医科大学生物分子医学研究重点实验室南宁530021 广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021 广西医科大学第一附属医院呼吸科南宁530021

马尔尼菲青霉是温度依赖双相性条件性致病真菌,可感染免疫缺陷人群,区域流行于东南亚和我国南方。马尔尼菲青霉已成为研究真菌双相形态转换和病原-宿主相互作用分子机制的模式系统。功能基因组学研究为深入探讨马尔尼菲青霉双相转换和... 详细信息

马尔尼菲青霉是温度依赖双相性条件性致病真菌,可感染免疫缺陷人群,区域流行于东南亚和我国南方。马尔尼菲青霉已成为研究真菌双相形态转换和病原-宿主相互作用分子机制的模式系统。功能基因组学研究为深入探讨马尔尼菲青霉双相转换和致病分子机制提供了线索,大量的候选基因功能需要高通量的基因修饰方法验证。在许多真菌中已建立基于阻断DNA非同源重组修复途径提高基因打靶效率的实验研究模型。本文报道在马尔尼菲青霉中通过缺失马尔尼菲青霉非同源重组修复途径的关键组分PKUB同源基因pkuB构建了一个高效基因打靶系统。结果表明,以pkuB基因缺失菌株(△pkuB)为出发菌株能降低外源DNA片段的非同源末端连接重组的概率而显著提高基因打靶效率,pkuB基因缺失不影响菌落形态和双相转换能力。高效基因打靶分子遗传实验模型的建立为大规模进行马尔尼菲青霉基因功能研究提供了有力的工具。

关键词：马尔尼菲青霉 pkuB 基因打靶同源重组非同源重组末端链接

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大蒜素对小鼠脾细胞雌激素和雄激素受体影响的实验研究

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天然产物研究与开发 2014年第6期26卷 961-966页

作者：刘灵燕董群皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002

本研究旨在探讨大蒜素对小鼠脾细胞雌激素和雄激素受体的影响。将健康ICR清洁小鼠,按性别随机分成三组实验组和三组对照组。实验组分别连续灌服大蒜素14、21和28 d,对照组同期分别灌服等量生理盐水。采用RT-PCR法检测雌性各组小鼠脾细... 详细信息

本研究旨在探讨大蒜素对小鼠脾细胞雌激素和雄激素受体的影响。将健康ICR清洁小鼠,按性别随机分成三组实验组和三组对照组。实验组分别连续灌服大蒜素14、21和28 d,对照组同期分别灌服等量生理盐水。采用RT-PCR法检测雌性各组小鼠脾细胞雌激素受体(ERα和ERβ)的mRNA表达水平和雄性各组小鼠脾细胞雄激素受体(AR)的mRNA水平。实验结果显示,雌性小鼠连续灌服大蒜素第14和21 d时实验组ERαmRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),第14 d时ERβmRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)。雄性小鼠连续灌服大蒜素第14、21和28 d时实验组AR mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。综上提示大蒜素可增强小鼠脾细胞雌激素受体(ERα和ERβ)和雄激素受体(AR)mRNA的表达水平。

关键词：大蒜素雌激素受体雄激素受体

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免疫治疗鼠获得性免疫缺陷综合征相关性淋巴瘤

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免疫学杂志 2014年第9期30卷 753-758页

作者：莫冰刘金辉宋况余黎帆曾姝余克花李文南昌大学基础医学院微生物学教研室 330006

目的本研究通过T细胞输注方法阻断程序凋亡因子-1(programmed death-1,PD-1)抑制性信号在CD8+T细胞上的表达,来治疗鼠获得性免疫缺陷综合征(MAIDS)相关性B细胞淋巴瘤。方法为了选择性阻断PD-1抑制性信号通路在CD8 T细胞中的表达,采用***... 详细信息

目的本研究通过T细胞输注方法阻断程序凋亡因子-1(programmed death-1,PD-1)抑制性信号在CD8+T细胞上的表达,来治疗鼠获得性免疫缺陷综合征(MAIDS)相关性B细胞淋巴瘤。方法为了选择性阻断PD-1抑制性信号通路在CD8 T细胞中的表达,采用***-1-/-小鼠作为CD8 T细胞的供体,与来自野生型B6小鼠的CD8 T细胞做比较。定期测量肿瘤直径大小,来检测PD-1-/-和野生型的CD8 T细胞抗肿瘤功能。结果我们的研究结果发现未接受CD8 T细胞输注的Rag-1-/-受体小鼠,肿瘤持续增大。接受***-1-/-CD8 T细胞输注的受体小鼠肿瘤缩小/消失的时间和速度均比接受野生型B6 CD8 T细胞输注的受体小鼠显著性缩短和加快。结论阻断CD8 T细胞中的PD-1抑制性信号通路能够增强保护性CD8 T细胞抗肿瘤的功能,可达到控制和治疗逆转录病毒感染导致MAIDS相关肿瘤的发生和发展。

关键词：逆转录病毒获得性免疫缺陷综合征 B细胞淋巴瘤 CD8 T细胞输注凋亡因子-1

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2型糖尿病患者血浆甘露聚糖结合凝集素与血糖糖化血红蛋白的相关性分析

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检验医学与临床 2015年第4期12卷 452-453页

作者：王燕翁玉玲李国明刘仿米娜赵毅广东医学院微生物学与免疫学教研室广东东莞523808 广东省东莞市人民医院检验科 523059

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血浆甘露聚糖结合凝集素(MBL)水平及其与血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)的关系。方法选取T2DM患者及健康人各60例,测定血浆MBL、空腹血糖(FPG)和HbA1c水平,观察MBL水平变化及与FPG、HbA1c的关系。结果 T2DM患者... 详细信息

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血浆甘露聚糖结合凝集素(MBL)水平及其与血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)的关系。方法选取T2DM患者及健康人各60例,测定血浆MBL、空腹血糖(FPG)和HbA1c水平,观察MBL水平变化及与FPG、HbA1c的关系。结果 T2DM患者血浆MBL、FPG、HbA1c水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Pearson相关性分析显示,血浆MBL水平与HbA1c呈明显正相关(r=0.257,P=0.047)。结论 MBL在T2DM患者血浆中明显增高,可能参与了T2DM的发病过程,检测MBL对T2DM的诊断和预后具有潜在的临床价值。

关键词： 2型糖尿病甘露聚糖结合凝集素血糖糖化血红蛋白

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人巨细胞病毒调控免疫逃逸相关基因的功能及其机制研究

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微生物与感染 2015年第2期10卷 111-115页

作者：陶微微赵俊王明丽安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

人巨细胞病毒(HCMV)是一个广泛传播的机会致病原,也是不断利用和操控机体免疫系统致慢性持续性病毒感染的典型代表。在病毒与宿主共同漫长进化过程中,HCMV产生了许多逃避宿主免疫系统识别的机制,其基因组编码了大量产物,通过抑制自然杀... 详细信息

人巨细胞病毒(HCMV)是一个广泛传播的机会致病原,也是不断利用和操控机体免疫系统致慢性持续性病毒感染的典型代表。在病毒与宿主共同漫长进化过程中,HCMV产生了许多逃避宿主免疫系统识别的机制,其基因组编码了大量产物,通过抑制自然杀伤细胞和树突细胞功能,下调被感染细胞表面主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类和Ⅱ类分子表达以减少病毒抗原呈递,损伤IgG介导的体液免疫,调节多种趋化因子和细胞因子的作用,从而控制宿主天然免疫应答和适应性免疫应答的核心功能。本文就HCMV的免疫逃避机制进行综述,探讨病毒与宿主相互作用的发生、发展与结局。

关键词：天然免疫细胞免疫体液免疫细胞因子趋化因子

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维吾尔族妇女子宫颈癌组织中IFITM1、Ki-67和PCNA的表达

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临床与实验病理学杂志 2015年第6期31卷 690-692页

作者：赵志敏王红英木拉提郑威楠杨昕李玉华左强强龙海晨张金莉潘泽民新疆石河子大学医学院生物化学教研室石河子832002 新疆医科大学基础医学院微生物学教研室乌鲁木齐830000 新疆石河子大学医学院第一附属医院普外科石河子832000 新疆医科大学自治区中医医院病理科乌鲁木齐830000 新疆喀什地区第一人民医院病理科喀什844000

目的探讨维吾尔族妇女子宫颈癌组织中IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白的表达。方法采用免疫组化SP法检测IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白在维吾尔族妇女子宫颈癌和慢性子宫颈炎组织中的表达。结果 IFITM1蛋白在子宫颈鳞癌组织中的表达低于慢性子宫颈... 详细信息

目的探讨维吾尔族妇女子宫颈癌组织中IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白的表达。方法采用免疫组化SP法检测IFITM1、PCNA和Ki-67蛋白在维吾尔族妇女子宫颈癌和慢性子宫颈炎组织中的表达。结果 IFITM1蛋白在子宫颈鳞癌组织中的表达低于慢性子宫颈炎组织,差异有统计学意义(P=0.003);子宫颈癌组织中Ki-67和PCNA蛋白表达高于慢性子宫颈炎组织,差异有统计学意义(P=0.019,P=0.000)。结论 IFITM1蛋白在子宫颈癌组织中的表达降低,Ki-67和PCNA蛋白在子宫颈癌组织中的表达水平增高,可能与维吾尔族妇女子宫颈癌的发生有关。

关键词：子宫颈肿瘤 IFITM1 Ki-67 PCNA 免疫组织化学

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