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郑州大学学报（医学版） 2014年第1期49卷 4-8页

作者：唐悦轩小燕柳璐璐李敏郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001

目的:观察沉默谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因的表达对食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系EC9706/cDDP细胞耐药性的影响。方法:构建靶向GST-π基因的siRNA重组慢病毒GSTsi1、GSTsi2和无义对照GSTsiC,转染EC9706/cDDP细胞。通过RT-PCR及Weste... 详细信息

目的:观察沉默谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因的表达对食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系EC9706/cDDP细胞耐药性的影响。方法:构建靶向GST-π基因的siRNA重组慢病毒GSTsi1、GSTsi2和无义对照GSTsiC,转染EC9706/cDDP细胞。通过RT-PCR及Western blot法检测GSTsi1、GSTsi2和GSTsiC感染前后EC9706/cDDP细胞中GST-πmRNA和蛋白的表达;MTT法检测感染GSTsi2、GSTsiC与未感染的EC9706/cDDP细胞对顺铂敏感性的变化。结果:感染GSTsi1、GSTsi2后EC9706/cDDP细胞GST-πmRNA的表达下调(F=3.490,P<0.001),其蛋白表达也减弱。感染GSTsi2的EC9706/cDDP细胞对顺铂的耐药指数较感染GSTsiC和未感染的EC9706/cDDP细胞降低(F=50.510,P<0.001)。结论:沉默GST-π基因的表达可降低EC9706/cDDP细胞的顺铂耐药性。

关键词： EC9706 cDDP细胞耐药谷胱甘肽S转移酶-π RNA干扰

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质子泵抑制剂与抗生素对幽门螺杆菌的联合抗菌作用

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世界华人消化杂志 2014年第23期22卷 3547-3551页

作者：毕红燕陈峥宏綦廷娜王菲毕雅坤王琼贵阳医学院微生物学教研室贵州省贵阳市550004

目的:了解抗生素和质子泵抑制剂联合应用对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)的联合抗菌效应.方法:采用界值法检测***临床菌株对克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林的敏感性,选取***克拉霉素敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5)、左氧氟沙星... 详细信息

目的:了解抗生素和质子泵抑制剂联合应用对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)的联合抗菌效应.方法:采用界值法检测***临床菌株对克拉霉素、左氧氟沙星和阿莫西林的敏感性,选取***克拉霉素敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5)、左氧氟沙星敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5)或阿莫西林敏感菌株(n=5)和耐药菌株(n=5),采用棋盘格法检测3种抗生素分别与两种质子泵抑制剂(奥美拉唑、雷贝拉唑)联合应用对***的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)的影响,通过公式计算FIC指数(fractional inhibitory concentration index,FICI),判断药物联合抗菌效应;比较奥美拉唑和雷贝拉唑分别与3种抗生素联合应用时的FICI,采用两小样本t检验的方法进行统计学处理.结果:克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林分别与奥美拉唑、雷贝拉唑配伍对敏感菌株和耐药菌株的联合抗菌作用FICI均<0.75;雷贝拉唑和左氧氟沙星对敏感菌株的联合抗菌作用FICI比奥美拉唑和左氧氟沙星的联合抗菌试验的FICI小;雷贝拉唑和阿莫西林对耐药菌株的联合抗菌试验FICI比奥美拉唑和阿莫西林的联合抗菌试验的FICI小.结论:(1)奥美拉唑或雷贝拉唑分别与克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林联合应用均有协同抗菌作用;(2)雷贝拉唑和左氧氟沙星对敏感株的联合抗菌作用比奥美拉唑和左氧氟沙星的联合抗菌作用强;(3)雷贝拉唑和阿莫西林对耐药菌株的联合抗菌作用比奥美拉唑和阿莫西林的联合抗菌作用强.

关键词：幽门螺杆菌奥美拉唑雷贝拉唑抗生素

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RNAi沉默polβ基因部分逆转食管鳞癌细胞顺铂耐药性

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第二军医大学学报 2014年第3期35卷 279-284页

作者：唐悦王黎柳璐璐李敏郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院寄生虫学教研室郑州450052

目的通过RNA干扰(RNAi)技术沉默DNA聚合酶polβ的表达,观察其对食管癌细胞顺铂(cDDP)耐药性的影响。方法构建靶向polβ基因的siRNA重组慢病毒pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1、pRNAT-U6.2/Lenti-polβ2及阴性对照载体pRNAT-U6.2/Lenti-polβC,将其感染人食管鳞癌顺铂耐药细胞系EC9706/cDDP,通过RT-PCR、蛋白质印迹分析和免疫荧光实验观察细胞polβ的表达情况,采用MTT法观察不同浓度顺铂对细胞生长的抑制作用并计算50%细胞生长抑制所需的药物浓度(IC50)和耐药指数(RI)。结果靶向polβ的siRNA重组慢病毒pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1和pRNAT-U6.2/Lenti-polβ2感染EC9706/cDDP后均可下调polβ的mRNA和蛋白表达水平,其中前者效果更为显著。顺铂以剂量依赖方式抑制EC9706/cDDP细胞增殖,感染pRNAT-U6.2/Lenti-polβ1、pRNAT-U6.2/Lenti-polβC的EC9706/cDDP细胞及未感染EC9706/cDDP细胞对顺铂的IC50分别为55.71、62.41、63.11μg/mL,耐药指数分别为13.9、15.5、15.7,其中前者与后二者相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 polβ的表达与食管鳞癌细胞系EC9706/cDDP顺铂耐药性有关,沉默其表达可部分逆转EC9706/cDDP细胞对顺铂的耐药性。

关键词：食管肿瘤肿瘤抗药性顺铂 polβ RNA干扰

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2000-2011年大肠埃希菌对抗菌药物耐药性荟萃分析

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中华医院感染学杂志 2014年第10期24卷 2428-2430页

作者：李丽汪莉萍王世轶彭继世王玥王和贵阳医学院计算机教研室贵州贵阳550004 贵阳医学院数学教研室贵州贵阳550004 贵阳医学院微生物学教研室贵州贵阳550004

目的分析中国内地2000-2011年大肠埃希菌对头孢菌素和喹诺酮类药物的耐药性,探讨细菌耐药性发展趋势及其防治措施。方法搜集2000-2013年中国内地期刊报道的大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢曲松、左氧氟沙星、环丙沙星耐药数据,应用荟萃分析... 详细信息

目的分析中国内地2000-2011年大肠埃希菌对头孢菌素和喹诺酮类药物的耐药性,探讨细菌耐药性发展趋势及其防治措施。方法搜集2000-2013年中国内地期刊报道的大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢曲松、左氧氟沙星、环丙沙星耐药数据,应用荟萃分析法,使用EXCEL软件进行数据合并汇总与统计分析。结果大肠埃希菌对4种抗菌药物耐药性呈年度上升趋势,2008年前增长较快,2008年后维持高耐药性;2008年前对喹诺酮类左氧氟沙星、环丙沙星耐药率高于头孢菌素类头孢曲松和头孢呋辛(P<0.05),2008年后两者接近;对头孢呋辛的耐药率高于头孢曲松(P<0.05),对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率差异无统计学意义;大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率呈逐年上升趋势(P<0.01),产ESBLs大肠埃希菌耐药率高于非产ESBLs大肠埃希菌耐药率(P<0.01);中国内地以华东地区分离的大肠埃希菌对4种抗菌药物总耐药率最低,其他各地区分离的大肠埃希菌耐药率差异无统计学意义。结论大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢曲松、左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率逐年升高;加强抗菌药物的管理和规范使用,高度重视医院感染的防治和产ESBLs大肠埃希菌的连续监测,有助于控制大肠埃希菌耐药性的形成与扩散。

关键词：大肠埃希菌耐药性荟萃分析法

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芳香烃受体对肠易激综合征小鼠模型Th17细胞活化的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第4期34卷 299-303页

作者：王钰莹陈东晖郑鹏远李付广郑州大学第二附属医院消化内科 450014 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

目的：探讨肠易激综合征（ IBS）小鼠模型Th17细胞活化水平变化及芳香烃受体（Ahr）对Th17细胞活化的影响。方法雄性BALB/c小鼠30只，随机分为3组。一次性结肠灌注三硝基苯磺酸（ TNBS）诱导小鼠IBS模型，对照组等体积生理盐水结肠灌注... 详细信息

目的：探讨肠易激综合征（ IBS）小鼠模型Th17细胞活化水平变化及芳香烃受体（Ahr）对Th17细胞活化的影响。方法雄性BALB/c小鼠30只，随机分为3组。一次性结肠灌注三硝基苯磺酸（ TNBS）诱导小鼠IBS模型，对照组等体积生理盐水结肠灌注。小鼠腹腔注射Ahr拮抗剂进行干预。评估小鼠内脏敏感程度及结肠黏膜炎症情况。分离肠系膜淋巴结及外周血单个核细胞，流式细胞仪测定Th17细胞比例的变化水平。免疫荧光双染检测结肠Ahr与IL-17 A分布情况及Ahr活化的Th17细胞数量变化。结果（1）实验组和Ahr拮抗剂组肠系膜淋巴结中Th17细胞均较对照组明显增加（ P均＜0.05），而Ahr拮抗剂组Th17细胞较实验组明显减少（ P＜0.05），仍高于对照组（ P＜0.05）。（2）实验组和Ahr拮抗剂组外周血中Th17细胞均较对照组明显增加（P均＜0.05），而Ahr拮抗剂组Th17细胞与实验组相比差异无统计学意义（ P＝0.642）。（3）实验组结肠黏膜Ahr活化的Th17细胞（Ahr＋IL-17A＋）数目为（10.00±1.58），Ahr 拮抗剂组数目为（5.80±0.83），均较对照组（3.80±0.83）显著增加（P均＜0.05）；而Ahr拮抗剂组（5.80±0.83）较实验组（10.00±1.58）显著降低（ P＜0.05）。结论 IBS小鼠肠系膜淋巴结及外周血中Th17细胞活化增加；Ahr在IBS小鼠肠道Th17细胞活化中具有重要作用，阻断Ahr能够明显减少肠黏膜内Ahr活化的Th17细胞及肠系膜淋巴结中Th17细胞比例。

关键词：肠易激综合征黏膜低度炎症 Th17 芳香烃受体

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结核分枝杆菌特异性蛋白抗原研究进展及其应用策略探讨

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中国病原生物学杂志 2014年第2期9卷 180-182,187页

作者：聂恒吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋... 详细信息

结核病是当今世界主要的致死疾病之一,早期诊断是控制结核病的关键,血清学实验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。本文概述了38ku蛋白、Ag85复合体、MPT64蛋白、ESAT-6蛋白、CFP-10蛋白、16ku蛋白、MTB81、MTB84和U1蛋白等9种结核分枝杆菌重要抗原的研究进展,并对其应用策略进行了探讨。

关键词：结核分枝杆菌蛋白抗原诊断综述

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大肠癌组织白细胞介素-6表达与其甲基化之间的关系

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武汉大学学报（医学版） 2014年第1期35卷 50-55页

作者：赵琼赵娇李冬青李一鸣刘娟叶梅武汉大学中南医院消化内科武汉大学基础医学院微生物学教研室湖北武汉430071

目的:检测大肠癌中白细胞介素-6(IL-6)表达及启动子甲基化状态,进一步阐明大肠癌(CRC)的发病机制。方法:实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测20例CRC癌组织及癌旁组织IL-6mRNA水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-6蛋白浓度,亚硫酸氢盐测序(B... 详细信息

目的:检测大肠癌中白细胞介素-6(IL-6)表达及启动子甲基化状态,进一步阐明大肠癌(CRC)的发病机制。方法:实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测20例CRC癌组织及癌旁组织IL-6mRNA水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-6蛋白浓度,亚硫酸氢盐测序(BSP)检测IL-6启动子甲基化状态。结果:与癌旁组织相比,癌组织中IL-6mRNA及蛋白表达均显著增高(P<0.05),并且其蛋白表达随着Dukes分期逐渐升高,差异具有显著性(P<0.05);癌组织中,IL-6启动子-633、-611、-575、-575bp位点甲基化水平均低于相应癌旁组织(P<0.05),且非甲基化概率随着Dukes分期和分化程度增加而增高(P<0.05)。结论:IL-6在大肠癌中表达增加,并与Duke分期相关,其启动子区低甲基化或去甲基化可能是其表达增高的机制之一;初步筛选出IL-6基因启动子区低甲基化位点,为后续研究奠定基础。

关键词：大肠癌白细胞介素-6 DNA甲基化 BSP

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大理地区结核分枝杆菌MIRU-VNTR位点的多态性分析

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中国病原生物学杂志 2014年第4期9卷 312-315页

作者：董毅吴利先大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的了解大理地区结核分枝杆菌基因组中的数目可变串联重复序列(variable number tandem repeat,VNTR)即MIRU(mycobacterium interspersed repetitive unit)基因多态性,探讨MIRU-VNTR位点多态性的应用价值。方法采用PCR和琼脂糖凝胶电泳检测大理地区临床分离的60株结核分枝杆菌7个VNTR位点,采用MIRU-VNTR技术进行分型,利用Hunter-Gaston指数(HGI)对各MIRU进行分辨力评价,并应用Quantity one软件和BioNumerics6.6软件进行数字化和聚类分析。结果 60株结核分枝杆菌分为5个基因群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ群)52个基因型。Ⅰ群占56.77%,含有29个基因型;Ⅱ群占25.00%,含有13个基因型;Ⅲ群占8.33%,含有5个基因型;Ⅳ群占6.67%,含有3个基因型;Ⅴ群占3.33%,含有2个基因型。7位点组合总分辨力为0.900,最高ETR-E位点0.735,最低ETR-C位点0.455。结论大理地区分离株结核分枝杆菌存在基因多态性,7位点MIRU-VNTR分型简便快速,分辨力高,适合用于大理地区结核分枝杆菌的基因分型检测。

关键词：结核分枝杆菌基因分型多位点可变串联重复序列多态性 Hunter-Gaston指数

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GST-π表达水平与人食管鳞癌耐顺铂的关系研究

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中国现代医学杂志 2014年第8期24卷 30-34页

作者：唐悦龚光明柳璐璐李敏郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450052

目的拟通过调控GST-π的表达水平,观察其对食管癌细胞耐药性的影响。方法构建GST-π基因的真核表达载体,转染入亲本细胞EC9706细胞后观察GST-π的过表达是否会促使食管癌细胞耐药性的产生。结果 GST-π的表达载体pIRES2-AcGFP1-GST-π... 详细信息

目的拟通过调控GST-π的表达水平,观察其对食管癌细胞耐药性的影响。方法构建GST-π基因的真核表达载体,转染入亲本细胞EC9706细胞后观察GST-π的过表达是否会促使食管癌细胞耐药性的产生。结果 GST-π的表达载体pIRES2-AcGFP1-GST-π转染入EC9706细胞后,RT-PCR检测GST-πmRNA表达增强,Western blotting见其蛋白表达增强,MTT实验显示该细胞针对顺铂的耐药性增强,耐药指数达2.36。结论该实验说明增加食管癌细胞内GST-π的表达会促使食管癌细胞的耐药性产生。

关键词：食管鳞癌顺铂耐药 GST-π pIRES2-AcGFP1

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斜链拟青霉菌丝体粗提物体内外抗氧化作用

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中国老年学杂志 2014年第13期34卷 3690-3691页

作者：杨成陈名君董群皖南医学院微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002 安徽农业大学微生物防治省重点实验室

目的探讨斜链拟青霉菌丝体粗提物体内外抗氧化活性。方法应用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)法测斜链拟青霉菌丝体粗提物的体外抗氧化能力。制备D-半乳糖衰老模型,考察其体内抗氧化效应。结果斜链拟青霉菌丝体粗提物体外具有较强... 详细信息

目的探讨斜链拟青霉菌丝体粗提物体内外抗氧化活性。方法应用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)法测斜链拟青霉菌丝体粗提物的体外抗氧化能力。制备D-半乳糖衰老模型,考察其体内抗氧化效应。结果斜链拟青霉菌丝体粗提物体外具有较强抗氧化能力,且与浓度呈一定的量效关系,IC50为1.81 mg/ml;通过灌胃斜链拟青霉菌丝体粗提物能显著提高血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低小鼠肝组织中丙二醛(MDA)含量。结论斜链拟青霉菌丝体粗提物具有较好的体内外抗氧化作用。

关键词：斜链拟青霉 D-半乳糖抗氧化

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