检索结果-内蒙古大学图书馆

Akkermansia muciniphila对大鼠高温运动后器官损伤的影响

中国微生态学杂志 2024年第2期36卷 125-134,146页

作者：杨展孙学伟秦明珂崔茜张昕蕊张若男路寒张明燕朱进郑峰唐成亮东部战区疾病预防控制中心江苏南京210002 滨州医学院基础医学院陆军军医大学军事预防医学系军队劳动卫生学教研室东部战区空军医院南京中医药大学医学院整合医学学院南京医科大学病原生物学系南京医科大学第二附属医院南京中医药大学金陵临床医学院

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(... 详细信息

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(AKK干预组,n=8)、高温粪菌移植组(HT.R组,n=4)和***粪菌移植组(AKK.R组,n=4),在力竭运动后采集大鼠的血液、组织及粪便样本,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的变化。通过16S rRNA基因测序和GC-MS方法分析粪便中菌群和代谢产物的改变,对结肠组织和肝脏组织进行病理检测,采用免疫组化方法评估肠道屏障功能。结果HT组和AKK干预组大鼠在(35±2)℃、湿度(55±5)%的环境下平均运动时间分别为(13.76±3.454)和(19.55±1.997)min,差异有统计学意义(t=4.104,P=0.0011)。***干预后,大鼠血清的AST(U/mL)、ALT(U/mL)、BUN(mmol/L)和Cr(μmol/L)平均水平(3.953±1.877、2.622±1.086、10.040±1.088、65.800±12.010)均低于HT组(6.358±1.436、4.335±1.304、15.010±1.913、93.980±39.110),其中AST、ALT、BUN水平检测差异均有统计学意义(t=2.878、2.856、6.381,P=0.0122、0.0127、<0.0001)。肠道菌群组成结构在属水平上发生变化,粪便中代谢产物水平有不同程度的改变。病理结果显示,AKK干预组大鼠的肝脏损伤较HT组有显著缓解。AKK干预组大鼠的肠道屏障相关连接蛋白ZO-1和Occludin表达量的累积光密度值(6330±481.8、6140±281.7)较HT组(3425±257.0、3943±242.1)上调(t=9.216、10.250,P=0.0008、0.0005)。结论***能够在一定程度上通过维持肠道屏障功能,改善肠道微生态,减轻高温运动带来的肠道及肝脏损伤。

关键词：运动高温嗜黏蛋白阿克曼菌肠道菌群器官损伤

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微生态制剂对化疗不良反应的影响

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中国微生态学杂志 2023年第7期35卷 860-863页

作者：杜宇桐邹积宏李明黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高校微生物重点实验室黑龙江哈尔滨150000 大连医科大学基础医学院微生态学教研室

化疗是恶性肿瘤治疗的重要组成部分,是提高患者的生活质量和生存率的一种治疗手段。目前化疗的不良反应并不局限于恶心呕吐、腹痛、腹泻、乏力和贫血等常见的反应,更主要的是化疗药物会对胃肠道、肠黏膜以及肠道菌群等产生影响。微生态... 详细信息

化疗是恶性肿瘤治疗的重要组成部分,是提高患者的生活质量和生存率的一种治疗手段。目前化疗的不良反应并不局限于恶心呕吐、腹痛、腹泻、乏力和贫血等常见的反应,更主要的是化疗药物会对胃肠道、肠黏膜以及肠道菌群等产生影响。微生态制剂包括益生菌、益生元和合生元等。微生态制剂作为一种能够促进机体正常生长的微生态调节剂,可以通过维持肠道微生态平衡来保持机体健康,微生态制剂还具有调节免疫和消除炎症等功能,从而减少宿主因化疗而产生的不良反应。

关键词：微生态制剂益生菌化疗肠黏膜肠道菌群

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仙台病毒递送新型冠状病毒RBD蛋白鼻内免疫接种增强呼吸道黏膜和系统性免疫应答的初步研究

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空军军医大学学报 2023年第7期44卷 609-614页

作者：袁明城张剑陈洋薛潘武福星袁若栋董阳超徐志凯张芳琳雷迎峰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

目的研究仙台病毒(SeV)作为递送载体在增强新型冠状病毒(SARS-CoV-2)RBD蛋白诱导呼吸道黏膜和系统性免疫应答的特征。方法利用同源重组技术构建SARS-CoV-2 RBD与抗体Fc融合蛋白编码基因的真核表达质粒,将其转染293-T细胞中进行表达并... 详细信息

目的研究仙台病毒(SeV)作为递送载体在增强新型冠状病毒(SARS-CoV-2)RBD蛋白诱导呼吸道黏膜和系统性免疫应答的特征。方法利用同源重组技术构建SARS-CoV-2 RBD与抗体Fc融合蛋白编码基因的真核表达质粒,将其转染293-T细胞中进行表达并用Western blotting验证;将RBD-Fc融合蛋白表达质粒转染293-T细胞大量表达并使用亲和层析进行蛋白纯化;通过SeV递送RBD-Fc蛋白进行鼻内免疫接种,同时设置RBD-Fc组、SeV组、PBS组作为对照,各组分别在2周后加强免疫1次,3周后检测血清样本和肺泡灌洗液(BALF)中特异性抗体水平。结果 RBD、Fc蛋白编码基因片段通过重叠PCR方法得到融合蛋白基因片段(RBD-Fc),成功构建pCAGGS-RBD-Fc真核表达质粒;Western blotting结果显示RBD-Fc融合蛋白的表达条带符合预期大小,大量表达后经亲和层析获得一条单一的接近Mr 60 000的条带,与预期大小一致,纯度高;与RBD-Fc组、SeV组、PBS组相比,SeV递送RBD-Fc蛋白通过鼻腔加强免疫小鼠后的血清样本和BALF中均可检测到RBD特异性IgG(血清样本:P<0.01;BALF样本:P<0.05),且BALF中RBD特异性IgA相比RBD-Fc组有一定升高。结论 SeV在递送SARS-CoV-2 RBD蛋白进行鼻内免疫接种方面能够诱导一定水平的黏膜免疫和系统性免疫,为呼吸道传染病的黏膜疫苗研究奠定了初步的实验基础。

关键词：新型冠状病毒 RBD-Fc蛋白黏膜免疫仙台病毒

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表达促凋亡蛋白Bid的重组耻垢分枝杆菌的构建及其对巨噬细胞凋亡的影响

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医学信息 2022年第23期35卷 41-49页

作者：逄亚宁杨国平孟余吴利先李光华大理大学基础医学院医学微生物与免疫学教研室

目的构建表达并分泌外源性促凋亡蛋白Bid的重组耻垢分枝杆菌，并研究其对小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡的影响。方法运用生物信息技术对小鼠Bid蛋白质的理化性质、分泌属性、保守结构域及蛋白相互作用网络等进行分析，应用无缝克隆技术及... 详细信息

目的构建表达并分泌外源性促凋亡蛋白Bid的重组耻垢分枝杆菌，并研究其对小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡的影响。方法运用生物信息技术对小鼠Bid蛋白质的理化性质、分泌属性、保守结构域及蛋白相互作用网络等进行分析，应用无缝克隆技术及传统酶切酶连方式构建pMV261-ASP(BamHI)-10His、pMV261-ASP(BamHI)-Bid-10His、pMV261-ASP(EcoRI)-10His、pMV261-ASP(EcoRI)-Bid-10His重组质粒，并电转化入耻垢分枝杆菌；通过BCA蛋白定量及免疫印迹技术分析蛋白表达情况，采用AnnexinV-FITC/PI双染法流式检测Bid重组耻垢分枝杆菌对RAW264.7小鼠巨噬细胞凋亡的影响。结果小鼠Bid蛋白是一种等电点为4.80的亲水性蛋白质，其中亮氨酸所占比例最高，为11.3%，色氨酸含量最低，为0.5%；二级结构中，α-螺旋（Hh）、无规则卷曲（Cc）、β-折叠（Ee）、β-转角（Tt）所占比例依次为65.13%、27.69%、4.10%、3.08%;Bid蛋白不具有跨膜结构域及信号肽，属于非分泌性蛋白质，具有死亡保守结构域，可与Caspase8、Bcl-2、Granzyme B等凋亡相关蛋白发生相互作用；本次构建的ASP-Bid重组耻垢分枝杆菌可以表达并分泌目标蛋白，且可增强RAW264.7小鼠巨噬细胞凋亡的比例。结论表达外源基因Bid的重组耻垢分枝杆菌可以促进巨噬细胞凋亡发生，这可为新型结核病预防疫苗的研发提供新的思路与技术。

关键词：结核病耻垢分枝杆菌信号肽 Bid 细胞凋亡

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鸭源性H6N1亚型禽流感病毒在猪和人呼吸道的复制及其基因特点

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广西医科大学学报 2023年第4期40卷 618-623页

作者：解中钟伟娟张增峰广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021

目的:探索鸭源性H6N1亚型禽流感病毒是否可在人以及流感病毒的重要中间宿主猪中有效复制、感染。方法:选择前期分离的2株鸭源性H6N1病毒DK/Jiangxi/35634/2016、DK/Guiyang/2462/2007,受体结合特异性法分析病毒的受体结合特性,全基因组... 详细信息

目的:探索鸭源性H6N1亚型禽流感病毒是否可在人以及流感病毒的重要中间宿主猪中有效复制、感染。方法:选择前期分离的2株鸭源性H6N1病毒DK/Jiangxi/35634/2016、DK/Guiyang/2462/2007,受体结合特异性法分析病毒的受体结合特性,全基因组测序分析病毒基因位点的变化,体外感染人和猪呼吸道组织。结果:2株鸭源性H6N1病毒均与禽型SAα-2,3Gal受体结合,基因测序分析显示HA裂解位点为PQIETR/GL,属低致病性禽流感病毒的分子特征,HA、NA、PB2等主要基因位点未发生突变,但病毒可在人肺组织的肺泡细胞和巨噬细胞、猪气管上皮细胞以及肺组织的肺泡细胞和巨噬细胞增殖并引起细胞损伤、组织结构的破坏。结论:鸭源性H6N1亚型禽流感病毒具有禽流感病毒的基因特点,虽然仍与禽型SAα-2,3Gal受体结合,但已具有跨种间屏障感染猪和人的能力。因此,必须密切监测家禽中流感病毒H6N1流行和进化演变。

关键词：禽流感病毒 H6N1亚型基因特点呼吸道组织

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耻垢分枝杆菌感染人脐带间充质干细胞模型的建立及其特征

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微生物学通报 2023年第11期50卷 5031-5044页

作者：康亚莉宁唤唤谢燕玲任瑞白鹭路延之康健韦垠张琳娜柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室陕西西安710032 宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系宁夏银川750001 延安大学生命科学学院陕西延安716000

【背景】结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)休眠菌形成被认为是潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)的主要原因,但目前缺乏体内和体外模型进行机制研究。新近研究表明Mtb可感染间充质干细胞(mesenchymal stem... 详细信息

【背景】结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)休眠菌形成被认为是潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)的主要原因,但目前缺乏体内和体外模型进行机制研究。新近研究表明Mtb可感染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)并以休眠状态在细胞中长期存活。然而Mtb感染细胞模型存在周期长和生物安全要求高等问题,需要探索可用的MSC感染细胞模型用于Mtb休眠机制的研究。【目的】建立快速生长型耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)感染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord MSC,hUCMSC)的细胞模型并研究其特征。【方法】取分离好的hUCMSC,流式细胞术鉴定其表面标志性抗原;以Ms菌株感染hUCMSC,DiI标记细胞膜,荧光显微镜下观察细胞吞噬作用;平板法计数Ms胞内存活率;油红O染色观察细胞脂滴形成;鬼笔环肽荧光染色观察细胞骨架变化;实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测Ms感染的hUCMSC脂质代谢、静息和分化相关基因转录水平。【结果】Ms感染hUCMSC后在胞内以非复制方式存活,其感染率与感染复数呈正相关;Ms感染hUCMSC可诱导脂滴合成相关基因表达,而抑制降解相关基因转录水平,从而促进细胞内脂滴形成。Ms感染促进hUCMSC细胞骨架发生重构,RT-qPCR检测结果显示细胞增殖和分化相关基因表达增加,Ms感染促进hUCMSC向成脂、成骨细胞分化。【结论】本研究建立了可模拟Mtb休眠形成的Ms感染hUCMSC模型,可进一步用于LTBI机制的相关研究。

关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌间充质干细胞休眠菌结核潜伏感染

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基于PD-1/PD-L1阻断的联合疗法在非小细胞肺癌治疗中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第5期38卷 472-478页

作者：张宁宁王旭沈金澳孙世昱沈燕王军空军军医大学基础医学院学员二大队陕西西安710032 微生物与病原生物学教研室陕西西安710032

非小细胞肺癌(NSCLC)严重威胁患者的生存质量,传统治疗手段存在副作用大、易复发、易耐药、缺乏特异性等缺点。基于免疫检查点阻断的免疫疗法是近年来肿瘤治疗领域的突破性进展,它将肿瘤治疗从“点”向“面”转换,是一种以T细胞功能调... 详细信息

非小细胞肺癌(NSCLC)严重威胁患者的生存质量,传统治疗手段存在副作用大、易复发、易耐药、缺乏特异性等缺点。基于免疫检查点阻断的免疫疗法是近年来肿瘤治疗领域的突破性进展,它将肿瘤治疗从“点”向“面”转换,是一种以T细胞功能调控为重点,进而控制肿瘤进展的新策略。程序性死亡蛋白1(PD-1)是研究最充分的免疫检查点分子。近年来,靶向PD-1及其配体PD-L1信号通路的免疫疗法凭借其特异性较强、副作用小等优势,已经在NSCLC治疗中获得了令人振奋的疗效,但是仍有相当一部分患者对靶向PD-1/PD-L1通路的单一抗体治疗效果不显著,研究表明,基于PD-1/PD-L1通路的靶向免疫疗法联合其他肿瘤治疗手段能够显著提高患者的生存率和生存质量。例如放化疗、双免疫检查点、免疫调节物质,甚至肠道菌群调节均可联合抗PD-1/PD-L1单抗应用于NSCLC的临床治疗,这些联合疗法各有其优缺点,其协同作用机制也有待更进一步研究。对于NSCLC而言,更多基于PD-1/PD-L1阻断的新型联合疗法也在探索中,从而为提高患者生存率和生存质量奠定基础。

关键词：非小细胞肺癌(NSCLC) 程序性死亡受体1(PD-1) 程序性死亡受体1配体1(PD-L1) 联合治疗综述

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基于样本来源探索病原生物学实验整合课程新模式

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南方医科大学学报 2021年

作者：高剑迪丽达尔·库德热提单骄宇新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆医科大学基础医学院医学微生物学教研室

基于病原生物学整合课程中人体寄生虫学和医学微生物学生物学分类的绝对差异,理论教学短期内往往难以达到融合的目的,但基于传染病的样本采集与检验,病原生物学实验课程可能通过样本来源重新划分模块,并能够实现两门课程的融合。本文尝... 详细信息

基于病原生物学整合课程中人体寄生虫学和医学微生物学生物学分类的绝对差异,理论教学短期内往往难以达到融合的目的,但基于传染病的样本采集与检验,病原生物学实验课程可能通过样本来源重新划分模块,并能够实现两门课程的融合。本文尝试探讨基于样本来源探索病原生物学实验课程整合建设的立论依据和应用意义,并延伸思考虚拟实验室等多媒体教学手段对该种实验课程模式的应用。

关键词：病原生物学实验课程整合建设样本来源虚拟实验室网络课程

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负载锌离子的复合水凝胶对糖尿病小鼠全层皮肤缺损感染创面的作用及机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第9期40卷 866-875页

作者：潘泽平石云龙袁志强彭毅志安中莲乐率龚雅利陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤与化学中毒全国重点实验室重庆400038 重庆大学附属江津医院急诊科重庆402260 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室微生物工程重庆市高校重点实验室重庆400038

目的探讨负载锌离子的复合水凝胶(以下简称含锌水凝胶)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损感染创面的作用及其机制。方法该研究为实验研究。制备聚(甘油癸二酸酯)-共-聚乙二醇-共聚-邻苯二酚/季铵化壳聚糖水凝胶(以下简称单纯水凝胶)和在单纯水... 详细信息

目的探讨负载锌离子的复合水凝胶(以下简称含锌水凝胶)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损感染创面的作用及其机制。方法该研究为实验研究。制备聚(甘油癸二酸酯)-共-聚乙二醇-共聚-邻苯二酚/季铵化壳聚糖水凝胶(以下简称单纯水凝胶)和在单纯水凝胶的基础上添加锌离子的疏松多孔且具有良好黏附性的固态含锌水凝胶。计算用磷酸盐缓冲液(PBS)浸泡14 d后含锌水凝胶中锌离子的释放率。检测用单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS培养2 h后耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)浓度。利用酶标仪检测单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除率,反映清除氧自由基能力。测量用单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS培养24 h后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)形成的血管长度。采用细胞计数试剂盒8检测用单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS培养24 h后L929细胞的活力。将小鼠红细胞悬液分为用PBS处理的空白对照组和用相应溶液处理的单纯水凝胶组、含锌水凝胶组和Triton X-100组,利用酶标仪检测孵育2 h后红细胞的溶血情况并计算溶血率。以上实验样本数均为3。取21只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠,在背部脊柱对称位置各制备1个用MRSA感染的全层皮肤缺损创面。将小鼠分为滴加PBS的空白对照组和用相应水凝胶处理的单纯水凝胶组和含锌水凝胶组。伤后3 d,检测空白对照组、单纯水凝胶组、含锌水凝胶组小鼠创面中的细菌浓度,样本数为4。于伤后0(即刻)、3、7、14 d,大体观察小鼠创面感染情况并计算伤后3、7、14 d创面愈合率,样本数为5。伤后14 d,行苏木精-伊红染色和Masson染色分别检测小鼠创面中的新生上皮和胶原生成情况,行免疫荧光染色检测小鼠创面中血管新生及M2型巨噬细胞分布情况。结果浸泡14 d后,含锌水凝胶中锌离子的释放率为(70.5±4.6)%。与用含锌水凝胶比较,用PBS和单纯水凝胶培养2 h后细菌浓度均明显升高(P<0.05)。含锌水凝胶对DPPH的清除率明显高于PBS、单纯水凝胶(P值均<0.05)。与用PBS比较,用含锌水凝胶培养24 h后HUVEC形成的血管长度明显增长(P<0.05)。与用含锌水凝胶比较,用PBS和单纯水凝胶培养24 h后L929细胞的活力均明显降低(P<0.05)。孵育2 h后,与Triton X-100组相比,空白对照组、单纯水凝胶组、含锌水凝胶组红细胞的溶血率均显著降低(P<0.05);而后3组的红细胞溶血率相近(P>0.05)。伤后3 d,含锌水凝胶组小鼠创面中的细菌浓度明显低于空白对照组和单纯水凝胶组(P值均<0.05)。伤后3~14 d,3组小鼠创面均逐渐愈合,含锌水凝胶组小鼠伤后14 d创面基本愈合。伤后7 d,含锌水凝胶组小鼠创面愈合率为(72.4±8.4)%,明显高于空白对照组和单纯水凝胶组的(31.6±6.7)%、(44.7±5.4)%(P值均<0.05)。伤后14 d,含锌水凝胶组小鼠创面愈合率为(92.7±4.3)%,明显高于空白对照组的(73.5±7.4)%,P<0.05。伤后14 d,与空白对照组和单纯水凝胶组相比,含锌水凝胶组小鼠创面的新生表皮长度更长、厚度更厚,胶原沉积更多,新生血管和M2型巨噬细胞分布更丰富。结论含锌水凝胶具有良好的生物相容性、清除氧自由基能力和体内外抗菌效果、促血管生成能力,可持续缓释锌离子,促进创面再上皮化及胶原合成,从而促进小鼠全层皮肤缺损感染创面愈合。

关键词：生物相容性材料水凝胶感染糖尿病,实验性锌离子抗菌性创面修复

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新型冠状病毒Beta变异株感染C57BL/6小鼠肺组织转录组分析及趋化因子实验验证

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病毒学报 2024年第2期40卷 255-265页

作者：张高倩吴长城黄保英李涵霍恕婷叶飞赵莉阿茹罕张钟贤沈晓玲谭文杰内蒙古医科大学基础医学院微生物学教研室呼和浩特010010 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会生物安全重点实验室北京102206 包头医学院公共卫生学院包头014030

研究旨在通过从转录组水平分析新冠病毒Beta变异株感染C57BL/6小鼠肺部的基因表达变化,以揭示引发轻症肺部损伤的关键宿主因子。首先构建Beta变异株感染C57BL/6小鼠模型,并对感染和未感染第3天(3d)小鼠的肺组织进行病原检测、病理分析... 详细信息

研究旨在通过从转录组水平分析新冠病毒Beta变异株感染C57BL/6小鼠肺部的基因表达变化,以揭示引发轻症肺部损伤的关键宿主因子。首先构建Beta变异株感染C57BL/6小鼠模型,并对感染和未感染第3天(3d)小鼠的肺组织进行病原检测、病理分析以及差异表达基因分析。最后,筛选可能导致肺部损伤的5个炎症反应关键基因进行RT-qPCR验证。研究结果显示Beta变异株能感染C57BL/6小鼠肺部并导致轻度病理损伤。在感染的小鼠中,Beta变异株激活了肺组织的天然免疫应答,主要通路包括Toll样受体信号通路、Ⅰ和Ⅱ型干扰素反应、白细胞趋化反应和细胞因子反应等。通过对重症与轻症感染小鼠的肺组织转录组比较,筛选出与疾病严重程度相关的炎症反应趋化因子,包括Ccl2、Ccl7、Cxcl9、Cxcl10和Cxcl14。通过RT-qPCR验证,基因表达变化趋势与转录组结果一致,表明这些趋化因子过度激活与肺部病理表型损伤程度相关。本研究揭示了Beta变异株感染小鼠肺部激活宿主炎症反应通路关键因子,可能是引发小鼠肺部轻度病理损伤的主要诱因之一,这为预防和治疗新冠病毒感染提供了有利的研究靶点。

关键词：新型冠状病毒Beta变异株肺部损伤天然免疫炎症因子转录组

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