检索结果-内蒙古大学图书馆

皖南医学院学报 2023年第1期42卷 13-16页

作者：潘中武汪天平周书林皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院医学寄生虫学教研室安徽芜湖241002 安徽省血吸虫病防治研究所安徽合肥230061

目的:研究可能影响银杏内生真菌CS15菌株杀螺效果的相关因素。方法:应用形态学特征观察结合rDNA-ITS序列综合分析对该菌株进行鉴定。使用浸泡法配制不同浓度的菌株CS15发酵液;实验随机分为4组(超纯水对照组和1%、2%、4%滤液组),评定不... 详细信息

目的:研究可能影响银杏内生真菌CS15菌株杀螺效果的相关因素。方法:应用形态学特征观察结合rDNA-ITS序列综合分析对该菌株进行鉴定。使用浸泡法配制不同浓度的菌株CS15发酵液;实验随机分为4组(超纯水对照组和1%、2%、4%滤液组),评定不同浓度CS15发酵滤液对钉螺的杀灭效果。采用蒽酮比色定量分析法检测发酵滤液浸泡处理后的螺体内糖原含量变化。结果:菌株经分离培养、形态学及分子生物学鉴定,该菌株为草酸青霉真菌。实验组菌株CS151%、2%、4%浓度下的发酵滤液均有一定的杀螺效果。其中在24 h后,以4%发酵滤液杀螺效果最佳(P<0.05),在48 h和72 h后,4%发酵滤液杀螺效率优于1%和2%发酵滤液(P<0.05)。经不同浓度CS15发酵滤液处理后,钉螺软体组织内糖原含量均明显降低,以4%发酵滤液组最为明显(P<0.05)。结论:在本实验条件下,银杏内生真菌CS15发酵滤液对湖北钉螺具有毒杀效应,以4%发酵滤液杀螺效果最佳,其杀螺因素可能与螺软体组织内糖原合成相关。

关键词：湖北钉螺银杏内生真菌杀螺作用糖原

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3种方法对1株临床疑难菌的鉴定及结果比较

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检验医学与临床 2024年第9期21卷 1224-1228,1234页

作者：许一丹谢成彬苏喆王频佳成都医学院检验医学院临床微生物学教研室四川成都610500 四川省妇幼保健院/成都医学院附属妇女儿童医院检验科四川成都610045

目的通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、16S rRNA序列分析和全基因组测序(WGS)对从临床标本中分离的1株疑似盐单胞菌进行菌种鉴定,比较3种方法的鉴定结果。方法采用MALDI-TOF MS对待测菌进行蛋白质图谱收集,通过比... 详细信息

目的通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、16S rRNA序列分析和全基因组测序(WGS)对从临床标本中分离的1株疑似盐单胞菌进行菌种鉴定,比较3种方法的鉴定结果。方法采用MALDI-TOF MS对待测菌进行蛋白质图谱收集,通过比对图谱特征峰实现菌种鉴定;对菌株进行16S rRNA基因测序,将测序结果与数据库比对;待测菌WGS后进行序列比对分析,具体包括使用ANIm和ANIb 2种方法计算平均核苷酸一致性(ANI)以及与基因组分类数据库(GTDB)进行比对;基于全基因组序列中的16S rRNA序列和看家基因序列构建系统进化树,以及基于COG和KEGG功能对基因组进行聚类分析。结果MALDI-TOF MS对待测菌株的鉴定结果是Halomonas hamiltonii;经16S rRNA序列分析,发现待测菌株与3种盐单胞菌(Halomonas hamiltonii、Halomonas stevensii和Halomonas johnsoniae)的相似度均>99%,且相似度差异非常小,因此无法进行准确的菌种鉴定;基于WGS的基因序列比对、系统发育树、聚类分析均显示待测菌与Halomonas stevensii的亲缘关系更为接近。结论3种方法对分离的1株疑难菌的菌种鉴定结果有差异,MALDI-TOF MS的菌种鉴定操作更加方便、快速,非常适用于临床检验工作;基于WGS的细菌鉴定更适合用于遗传特征相似的菌种之间的鉴别。

关键词：细菌鉴定基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 16S rRNA序列全基因组测序

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单增李斯特菌前噬菌体的分布及遗传特征分析

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疾病监测 2023年第5期38卷 529-536页

作者：纪顺师王艳宋泽萱毛盼李玲玲陈晋妮刘凌云孙晖罗霞叶长芸中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病国家重点实验室北京102206 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州省病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025

目的了解单增李斯特菌基因组中前噬菌体分布状况和基因组特征。方法自公共数据库GenBank获得275株单增李斯特菌的全基因组序列,运用前噬菌体在线预测软件(PHASTER)对其携带的前噬菌体进行预测。并对预测的完整前噬菌体进行聚类分析、... 详细信息

目的了解单增李斯特菌基因组中前噬菌体分布状况和基因组特征。方法自公共数据库GenBank获得275株单增李斯特菌的全基因组序列,运用前噬菌体在线预测软件(PHASTER)对其携带的前噬菌体进行预测。并对预测的完整前噬菌体进行聚类分析、插入位点识别、噬菌体整合酶多态性分析。此外,通过比对耐药基因和毒力基因数据库,搜寻前噬菌体可能携带的耐药基因和毒力基因。结果本研究发现99.3%的单增李斯特菌基因组含有前噬菌体序列,155株(56.4%)单增李斯特菌基因组预测到229个完整前噬菌体序列。所有完整前噬菌体聚集成4个群,进一步划分为10个簇。前噬菌体分群与其宿主菌所属家系具有较强的相关性,但与宿主菌来源无关。本研究识别到10个前噬菌体插入位点,其中lmot17(tRNAArg),lmot11(tRNASer)和comK是3个最常见的插入位点,lmo1263为新发现的插入位点。相同插入位点前噬菌体所携带整合酶氨基酸序列高度相似。此外,研究发现部分家系Ⅲ菌株和1株家系Ⅰ菌株的噬菌体中携带毒力相关蛋白E编码基因(virE),所有完整前噬菌体中未发现耐药基因。结论单增李斯特菌普遍携带前噬菌体,超过半数的菌株携带完整前噬菌体,其基因组具有多样性,且在宿主菌染色体中具有多个插入位点。这些插入位点与噬菌体所携带整合酶氨基酸序列密切相关。此外,未发现前噬菌体中携带耐药基因。

关键词：单增李斯特菌前噬菌体插入位点整合酶

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整合素β1通过ILK/FAK/F-actin通路影响幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬的研究

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中国病原生物学杂志 2020年第9期15卷 1028-1032,1037页

作者：杜运秋张锐清曲磊程雪吴玉龙赵慧琳张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的观察整合素β1对ILK/FAK/F-actin通路的调节作用,分析其对幽门螺杆菌(Hp)诱导GES-1细胞自噬的影响。方法利用siRNA沉默GES-1细胞整合素β1的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测ILK的表达。以ILK特异性抑制剂Cpd22抑制细... 详细信息

目的观察整合素β1对ILK/FAK/F-actin通路的调节作用,分析其对幽门螺杆菌(Hp)诱导GES-1细胞自噬的影响。方法利用siRNA沉默GES-1细胞整合素β1的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测ILK的表达。以ILK特异性抑制剂Cpd22抑制细胞ILK的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测LC3B、p62、FAK、Paxillin的表达;制备细胞爬片,以iFluor-594标记的鬼笔环肽对F-actin进行染色,观察细胞形态。结果沉默整合素β1后,空白组、Hp组、沉默组、阴性对照组、沉默+Hp组、阴性对照+Hp组ILK相对表达量分别为1.012±0.073、0.637±0.216、0.727±0.173、1.173±0.177、0.712±0.160、0.983±0.119,与空白组相比,Hp组ILK的相对表达量降低(t=3.288,P<0.05),沉默组较阴性对照组,沉默+Hp组较阴性对照+Hp组ILK相对表达量均显著降低(t值分别为-4.420和-3.238,均P<0.01)。抑制ILK表达后,空白组、Cpd22组、Hp组、Cpd22+Hp组LC3B的相对表达量分别为0.437±0.064、0.808±0.116、0.812±0.130、1.247±0.201,p62相对表达量分别为0.904±0.141、1.121±0.105、1.392±0.110、0.960±0.103,与空白组相比,Cpd22和Hp组细胞内LC3B及p62相对表达量均显著增加(t值分别为-4.838、-4.479、-3.269、3.313,均P<0.01),Cpd22+Hp组较Hp组细胞LC3B的相对表达量增高(t=-3.147,P<0.05),p62相对表达量降低(t=2.907,P<0.05)。Cpd22组FAK、Paxillin相对表达量较空白组均增加(t值分别为-2.303、-3.460,均P<0.05),Cpd22+Hp组FAK、Paxillin相对表达量较Hp组均降低(t值分别为2.446、-2.648,P<0.05),Cpd22抑制ILK后感染Hp,细胞F-actin染色呈现明显杂乱碎丝状。结论整合素β1通过上调ILK的表达抑制幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬,其机制可能与FAK/Paxillin/F-actin通路有关。

关键词：幽门螺杆菌整合素β1 GES-1细胞整合素连接激酶细胞自噬

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大叶茜草素抑制肺癌A549、H1299细胞增殖和迁移的机制研究

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皖南医学院学报 2022年第4期41卷 311-314,325页

作者：朱欣颖胡云王耀辉吴志浩余方流皖南医学院微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院临床医学院安徽芜湖241002 皖南医学院医学生物学教研室安徽芜湖241002

目的:观察大叶茜草素对肺癌A549、H1299细胞增殖和迁移的作用,探讨其抑制肿瘤细胞可能的分子机制。方法:在体外培养肺癌A549、H1299细胞,加入大叶茜草素共同培养,采用MTT实验和细胞划痕实验探究细胞增殖和迁移的变化情况;利用蛋白质印... 详细信息

目的:观察大叶茜草素对肺癌A549、H1299细胞增殖和迁移的作用,探讨其抑制肿瘤细胞可能的分子机制。方法:在体外培养肺癌A549、H1299细胞,加入大叶茜草素共同培养,采用MTT实验和细胞划痕实验探究细胞增殖和迁移的变化情况;利用蛋白质印迹法检测细胞上皮-间充质转化(EMT)蛋白(Fibronectin、E-cadherin、Vimentin、Snail)和Wnt/β-catenin信号通路蛋白(GSK-3β、pGSK-3β、β-catenin)的表达情况。结果:大叶茜草素对A549、H1299细胞的增殖和迁移具有显著抑制作用,并且其抑制增殖作用与药物浓度呈依赖性(P<0.05)。细胞划痕实验48 h后,加药组A549、H1299细胞的迁移均受到抑制(P<0.05)。蛋白质印迹实验结果显示,大叶茜草素作用后,Fibronectin、Vimentin、Snail、pGSK-3β(失活型)、β-catenin蛋白表达受到抑制,而E-cadherin蛋白表达上升(P<0.05)。结论:大叶茜草素具有抑制肺癌A549、H1299细胞的增殖与迁移作用,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路并导致EMT进程受阻有关。

关键词：大叶茜草素肺癌上皮-间充质转化糖原合成酶激酶-3β

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幽门螺杆菌对GES-1细胞自噬及凋亡的影响

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1262-1267,1276页

作者：张锐清杜运秋李菁佟小涵曲磊吴玉龙季晓飞张莹李波清滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003

目的研究幽门螺杆菌(Hp)对胃上皮细胞GES-1自噬与凋亡的影响。方法Hp与自噬抑制剂3-MA、广谱凋亡抑制剂Z-VAD-FMK处理后的GES-1细胞共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测LC3B-Ⅱ、Caspase-3及PARP蛋白的表达。结果3-MA... 详细信息

目的研究幽门螺杆菌(Hp)对胃上皮细胞GES-1自噬与凋亡的影响。方法Hp与自噬抑制剂3-MA、广谱凋亡抑制剂Z-VAD-FMK处理后的GES-1细胞共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测LC3B-Ⅱ、Caspase-3及PARP蛋白的表达。结果3-MA处理后,与空白对照组相比,Hp组LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著增高(t=7.54,P<0.01);3-MA+Hp组与Hp组相比,LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著降低(t=-3.24,P<0.05);与空白对照组相比,Hp组、3-MA组GES-1细胞凋亡率均显著增加(t值分别为-9.71和-3.25,P<0.01或P<0.05)。Z-VAD-FMK处理后,与空白对照组相比,Hp组GES-1细胞凋亡率显著增加,(t=-9.29,P<0.01);Hp+Z-VAD-FMK组较Hp组GES-1细胞凋亡率显著下降(t=-8.47,P<0.01);与空白对照组相比,Hp组、Z-VAD-FMK组的LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量均显著增加(t值分别为-12.98和-11.28,均P<0.01)。3-MA与Z-VAD-FMK共处理后,3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组较3-MA+Z-VAD-FMK组和Hp+Z-VAD-FMK组的GES-1细胞凋亡率显著增加(t值分别为-4.91和-9.64,P<0.05或P<0.01);3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组与3-MA+Z-VAD-FMK组相比,Caspase-3蛋白相对表达量显著增加,PARP蛋白相对表达量显著下降(t值分别为-5.16和3.02,均P<0.05);3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组较Hp+Z-VAD-FMK组LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著下降(t=4.63,P<0.05)。结论幽门螺杆菌既能上调GES-1细胞自噬也能诱导其凋亡,并通过增加Caspase-3表达的同时降低PARP的表达以增强自噬抑制引起的细胞凋亡。而在抑制凋亡后,幽门螺杆菌可能诱导GES-1细胞发生自噬性死亡。

关键词：幽门螺杆菌自噬凋亡 GES-1细胞

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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中HCMV基因表达谱及其特异性抗体特征

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病毒学报 2023年第1期39卷 113-123页

作者：施昕妤谢尚丹项超丽李宝青陈朝生薛向阳章慧娣温州医科大学基础医学院、分子病毒学与免疫学研究所、微生物与免疫学教研室温州325000 浙江大学医学院免疫研究所杭州310000 温州医科大学附属第二医院温州325000 温州医科大学附属第一医院温州325000

人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染是系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)的重要病因,并会加剧疾病进展。然而,SLE患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中HCMV基因的表达谱及其特异性抗体特征尚未完全阐明,并且HCMV蛋白特异性抗体水平与SLE患者临床特征的相关性尚未得到证实。通过Poly(A)建库的mRNA转录组测序(Poly(A)RNA-Seq)检测3例SLE患者和3例健康对照者(Healthy control,HC)的PBMC中的HCMV基因表达谱。然后在10例SLE患者和10例HC的链特异性建库的mRNA转录组测序(strand-specific RNA-seq)结果中验证检测到的HCMV基因。除此之外,通过免疫信息学分析筛选HCMV基因的B细胞表位。ELISA用于检测120例SLE患者和75例HC血清中的HCMV特异性抗体水平,并将其与患者的临床特征相关联。本研究在SLE患者和HC的PBMC中检测到8个HCMV基因。免疫信息学分析筛选出7个HCMV基因的优势B细胞表位。与HC相比,SLE患者血清中UL32和UL82特异性抗体显著降低。UL32特异性抗体可能与SLE患者血细胞功能异常有关。UL82特异性抗体可能参与SLE患者免疫系统功能异常和肾脏功能障碍。受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)分析表明,其中UL32特异性抗体可以有效区分SLE患者和HC。

关键词：人巨细胞病毒系统性红斑狼疮外周血单个核细胞 B细胞表位

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胃癌患者肿瘤组织中B细胞的浸润及其免疫抑制功能的研究

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陆军军医大学学报 2024年第9期46卷 1034-1040页

作者：李雨贤段振铨王莹谭雪玲余小红张媛媛朱宝行邱远彭六生邹全明陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室重庆400038 川北医学院附属医院肿瘤科四川南充637000 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院普外科重庆400037 重庆理工大学药学院重庆400054

目的检测B细胞在胃癌患者肿瘤组织和正常胃组织中的分布,分析其表型特征并探究肿瘤组织来源的B细胞对T细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学染色对33例胃癌患者的肿瘤组织和正常胃组织切片进行B细胞表面标志CD19染色并分析其浸润数目... 详细信息

目的检测B细胞在胃癌患者肿瘤组织和正常胃组织中的分布,分析其表型特征并探究肿瘤组织来源的B细胞对T细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学染色对33例胃癌患者的肿瘤组织和正常胃组织切片进行B细胞表面标志CD19染色并分析其浸润数目,同时采用流式细胞术检测肿瘤组织和正常胃组织中B细胞的趋化因子受体和免疫球蛋白分子表达水平,并通过趋化实验研究CXCL12-CXCR4轴对B细胞的趋化作用,最后分离纯化出肿瘤组织和正常胃组织中的B细胞与自体的外周T细胞共培养,探讨B细胞对T细胞增殖的影响。结果胃癌患者肿瘤组织中B细胞的浸润数目显著高于正常胃组织(P<0.01);且与正常胃组织来源的B细胞相比,肿瘤组织来源的B细胞高表达趋化因子受体CXCR4(P<0.05);TCGA数据库表明胃癌患者肿瘤组织中CXCL12的表达水平与CD19的表达水平呈正相关(r=0.15,P<0.01),胃癌患者临床样本的肿瘤组织中CXCL12的表达水平与B细胞浸润数目亦呈正相关(r=0.93,P<0.05),趋化实验证实CXCL12-CXCR4轴参与促进B细胞的趋化(P<0.05);尽管B细胞在肿瘤组织和正常胃组织中表达的IgM、IgG和IgA相当,但是体外共培养研究显示,与正常胃组织来源的B细胞相比,肿瘤组织来源的B细胞可显著抑制T细胞的增殖(P<0.01)。结论 B细胞在胃癌组织中的浸润增加,其可能通过CXCL12-CXCR4轴被募集至肿瘤组织,进而抑制T细胞的增殖以参与促进胃癌的进展。

关键词：胃癌 B细胞免疫抑制

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结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答

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中国人兽共患病学报 2022年第5期38卷 379-386页

作者：白鹭宁唤唤康健梁璇谢燕玲彭钰君张婧瑶路延之柏银兰延安大学生命科学学院延安716000 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室西安710032 西北大学生命科学学院西安710069

目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组***诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以E... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组***诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以EsxV和/或联合环二腺苷酸(c-di-AMP)经鼻黏膜免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠特异性抗体水平及亚类,MTS法检测脾细胞增殖,qRT-PCR检测脾和肺脏细胞因子表达水平,ELISA法检测脾细胞因子分泌水平。结果成功构建EsxV的原核表达载体pET28a(+)-esxV并诱导表达目的蛋白,亲和层析法获得了纯化的重组EsxV蛋白。EsxV经黏膜免疫可诱导显著的体液免疫应答,但诱导的细胞免疫应答水平不高。EsxV与c-di-AMP经黏膜接种可诱导特异性IgG水平增加,EsxV蛋白特异的脾细胞增殖,脾和肺细胞的IFN-γ转录增加。c-di-AMP显著提高EsxV特异的IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17细胞因子分泌,而不诱导炎症因子TNF-α和IL-6表达。结论EsxV与c-di-AMP佐剂构建的亚单位疫苗可诱导特异性体液和细胞免疫应答,可进一步用于新型结核病亚单位疫苗的研制。

关键词：结核分枝杆菌 6kDa早期分泌靶抗原分泌系统蛋白V(EsxV) 亚单位疫苗黏膜免疫环二腺苷酸

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OBE教学理念在临床免疫学检验技术教学中的应用

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第3期 111-113页

作者：潘云华大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室云南大理671000

临床免疫学检验技术对相关免疫疾病的发病机制等方面提供理论支持,这对临床对免疫疾病的防治有着积极性作用。但,由于临床免疫学检验技术教学内容过于复杂、抽象,语言较为深奥,进而导致学生无法对相关内容完全理解与掌握,而临床免疫学... 详细信息

临床免疫学检验技术对相关免疫疾病的发病机制等方面提供理论支持,这对临床对免疫疾病的防治有着积极性作用。但,由于临床免疫学检验技术教学内容过于复杂、抽象,语言较为深奥,进而导致学生无法对相关内容完全理解与掌握,而临床免疫学检验技术知识前后交织,若基础知识掌握不全面对整体教学效果有着不利影响,学生知识结构掌握不牢固对其日后参加检验工作也有所不利,而OBE(outome-based education)以结果为基础的教学手段,是一种新型的教学理念,对学生的综合能力与学习成果均有着积极性提升作用,可进一步优化教学模式。

关键词：临床免疫学检验技术 OBE教学理念教学效果考核成绩教学满意度

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