检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：王景穆媛媛黎庶陈志瑾熊坤丛延广第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室遵义医学院研究生院

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-Sac... 详细信息

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-SacⅡ-BglⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段。载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性。结果成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株。结论本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的基因的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用。

关键词：敲除载体构建突变株基因功能

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免疫印迹法检测人血清IgG g链

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第四军医大学学报 2009年第9期30卷 838-838页

作者：赵汉宁刘仿米娜吴瑗冯胜军赵毅广东医学院微生物学与免疫学教研室广东湛江524023

1材料和方法1.1 材料垂直电泳槽,转移电泳槽(美国BIO-RAD公司);WD-9405B型水平摇床(北京六一仪器厂).1.2方法①原样人血清用生理盐水稀释10倍,人标准IgG蛋白稀释成浓度2 mg/L,再分别加等量2×上样品缓冲液混匀.除marker外,全部沸水... 详细信息

1材料和方法1.1 材料垂直电泳槽,转移电泳槽(美国BIO-RAD公司);WD-9405B型水平摇床(北京六一仪器厂).1.2方法①原样人血清用生理盐水稀释10倍,人标准IgG蛋白稀释成浓度2 mg/L,再分别加等量2×上样品缓冲液混匀.除marker外,全部沸水浴加热5 min,稍适离心待上样.

关键词：免疫印迹法 IgG g链检测

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硝酸甘油和硝酸异山梨酯抗柯萨奇B组3型病毒感染的体内实验研究

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医学研究杂志 2009年第4期38卷 85-88页

作者：孙艳影杜凤霞夏美玲孙艳钟照华齐齐哈尔医学院医学技术学院病原教研室 161006 齐齐哈尔医学院医学技术学院检验中心哈尔滨医科大学微生物学研室

目的研究硝酸甘油(glyceryl trinatrate,GTN)和硝酸异山梨酯(isosorbide dinitrate,ISDN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用,为GTN和ISDN今后在抗CVB性心肌疾病的临床应用提供实验依据。方法用HeLa细胞扩增并收获CVB3后,测定CVB3的半数组... 详细信息

目的研究硝酸甘油(glyceryl trinatrate,GTN)和硝酸异山梨酯(isosorbide dinitrate,ISDN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用,为GTN和ISDN今后在抗CVB性心肌疾病的临床应用提供实验依据。方法用HeLa细胞扩增并收获CVB3后,测定CVB3的半数组织培养感染剂量(TCID50),BALB/c小鼠腹腔注射5000TCID50的CVB3,同时给予GTN和ISDN,14天后处死小鼠,取心脏做常规组织病理学检查。结果用GTN、ISDN保护的小鼠心肌病理标本每视野(×100)病灶数明显低于病毒对照组,GTN组为0.89±0.18,ISDN组为1.25±0.22,与病毒对照组差异显著(P<0.05)。结论GTN、ISDN等临床常用于抗心绞痛的硝酸酯类药物具有明确的抗CVB3感染BALB/c小鼠心肌细胞的作用。

关键词： B组柯萨奇病毒硝酸甘油硝酸异山梨酯一氧化氮抗病毒

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白细胞介素-17和变应性哮喘

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国际儿科学杂志 2009年第2期36卷 182-185页

作者：王芳(综述) 李付广(审校) 李玉琴(审校) 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001 郑州大学第一附属医院儿科

白细胞介素（IL）-17主要是由CD4^＋ CIN5RO^＋记忆性T细胞分泌的一种促炎症细胞因子，它可刺激支气管上皮细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞释放IL-6、IL-8、粒-巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子-α等细胞因子，促进CD34^＋造血干细... 详细信息

白细胞介素（IL）-17主要是由CD4^＋ CIN5RO^＋记忆性T细胞分泌的一种促炎症细胞因子，它可刺激支气管上皮细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞释放IL-6、IL-8、粒-巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子-α等细胞因子，促进CD34^＋造血干细胞增殖分化为中性粒细胞和中性粒细胞在气道的募集。变应性哮喘（AA）是严重危害儿童健康的呼吸系统疾病，IL-17是连接固有性免疫和获得性免疫的桥梁，与从的发病密切相关。该文就细胞因子IL-17和其在AA发病机制中的作用加以综述。

关键词：白细胞介索-7 变应性哮喘发病机制儿童

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黄芩苷对脂多糖诱导的巨噬细胞NF-κB活化和炎症因子表达的影响

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现代生物医学进展 2009年第22期9卷 4219-4221,4278页

作者：李明陈伟强李岩高智群邝枣园简玲敏广东药学院病理生理学教研室广东广州510006 广州中医药大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室广东广州510006

目的:研究黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)表达的影响。方法:分别用LPS(终浓度1μgomL-1)和LPS+黄芩苷(终浓度10,50,100μmolmoloL-1)处理生长良好的小鼠巨噬细胞RAW264... 详细信息

目的:研究黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)表达的影响。方法:分别用LPS(终浓度1μgomL-1)和LPS+黄芩苷(终浓度10,50,100μmolmoloL-1)处理生长良好的小鼠巨噬细胞RAW264.7,用RT-PCR法和Elisa法检测细胞及其上清液中TNF-α、IL-6mRNA和蛋白的表达变化,用Western Blot法检测细胞核内NF-κBp65蛋白含量变化。结果:LPS刺激RAW264.7细胞可导致NF-κB激活,上调TNF-α、IL-6表达;黄芩苷预处理能降低LPS诱导的NF-κB活化和TNF-α、IL-6表达。结论:黄芩苷可通过抑制NF-κB活化,下调LPS诱导的巨噬细胞TNF-α、IL-6的生成,发挥抗炎作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。

关键词：黄芩苷巨噬细胞细胞因子核因子κκB 内毒素

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小细胞肺癌细胞诱发人脑微血管内皮细胞紧密连接的开放

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解剖科学进展 2009年第2期15卷 183-187,191页

作者：赵晓云李波曹立业方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院微生物和细胞生物学教研室沈阳110016

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌... 详细信息

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌细胞与微血管内皮细胞单层共培养时紧密连接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在内皮细胞紧密连接处的分布情况;应用跨内皮迁移实验及辣根过氧化物酶渗漏实验分析小细胞肺癌细胞与内皮细胞单层共培养后其跨内皮细胞单层的迁移能力和内皮单层渗透性的改变;利用ROCK特异性抑制剂Y27632,分析Rho/ROCK信号通路是否参与小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结果小细胞肺癌细胞能够通过人脑微血管内皮细胞单层迁移,在0h到12h之间随培养时间的延长小细胞肺癌细胞的迁移率逐渐增加;共培养8h时人脑微血管内皮细胞紧密连接处紧密连接结构蛋白(ZO-1和occludin)表达减少,通透性明显增加;ROCK特异性抑制剂Y27632能够阻断小细胞肺癌细胞引起的内皮细胞间紧密连接处紧密连接结构蛋白ZO-1和occludin表达减少、内皮单层通透性的增加及小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结论小细胞肺癌细胞与人脑微血管内皮细胞单层共培养诱发人脑微血管内皮细胞间紧密连接的开放,利于小细胞肺癌细胞的跨内皮单层迁移。

关键词：小细胞肺癌细胞人脑微血管内皮细胞共培养紧密连接

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湖南农村部分地区饮用水的检测及分析

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中华预防医学杂志 2009年第5期43卷 375-375页

作者：叶湘漓卢坚雷立芳湖南师范大学医学院微生物学教研室长沙410013 中南大学湘雅医学院第三医院

为调查湖南农村的饮用水安全现状，笔者对湖南桃江、安化、桂阳等地农村301户分散式供水家庭（均为一户一井）的水源水进行了检测，现报告如下。

关键词：饮用水安全农村湖南检测分散式供水水源水

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幽门螺杆菌L型抑制胃癌细胞凋亡的实验研究

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癌变．畸变．突变 2009年第2期21卷 93-97页

作者：宣兰兰于东红承泽农唐素兰蚌埠医学院第一附属医院临床病理科安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233003 蚌埠医学院微生物学教研室安徽蚌埠233003

背景与目的:研究幽门螺杆菌L型(helicobacter pyloriL-form,Hp-L型)抑制胃癌细胞BGC-823凋亡的作用及其作用机制。材料与方法:将BGC-823细胞与Hp-L型以不同比例(1∶20、1∶100、1∶500)共培养,以不加Hp-L型为对照组,在不同时段进行以下... 详细信息

背景与目的:研究幽门螺杆菌L型(helicobacter pyloriL-form,Hp-L型)抑制胃癌细胞BGC-823凋亡的作用及其作用机制。材料与方法:将BGC-823细胞与Hp-L型以不同比例(1∶20、1∶100、1∶500)共培养,以不加Hp-L型为对照组,在不同时段进行以下实验:倒置显微镜观察细胞形态学变化;透射电镜观察细胞凋亡及超微结构变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组化(SP法)检测细胞中凋亡抑制基因Livin、bcl-2及抑癌基因p53的表达情况。结果:与对照组相比,Hp-L型作用BGC-823细胞后,倒置显微镜观察到BGC-823细胞增殖旺盛,瘤巨细胞增多,并出现明显的凋亡抑制现象;电镜观察到BGC-823细胞凋亡形态特征及凋亡数目减少;流式细胞仪检测结果显示Hp-L型可降低BGC-823细胞的凋亡率(P<0.05);免疫组化结果发现BGC-823细胞中Livin、bcl-2和p53蛋白表达阳性率逐渐增加(P<0.05);以上作用均呈细菌浓度和作用时间依赖性(P均<0.05)。结论:Hp-L型可抑制胃癌细胞BGC-823凋亡,其机制与上调Livin、bcl-2、p53蛋白的表达有关。

关键词：幽门螺杆菌L型胃癌细胞BGC-823 凋亡 Livin

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黑色素瘤抗原-3的二级结构及B细胞表位的初步预测分析

黑色素瘤抗原-3的二级结构及B细胞表位的初步预测分析

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2009年浙江省外科学学术年会

作者：王安周珠哈朱冠保朱珊丽张丽芳浙江省温州市温州医学院附属第一医院胃肠外科温州医学院微生物学与免疫学教研室

目的对黑色素瘤抗原-3(MAGE-3)的二级结构及其B细胞表位进行初步预测分析。方法应用计算机软件,用SOPMA、HNN、GOR三种方案分析比较MAGE-3二级结构,并用亲水性、极性、柔韧性、表面可及性和抗原性等多参数分析其B细胞优势表位,进一步采... 详细信息

目的对黑色素瘤抗原-3(MAGE-3)的二级结构及其B细胞表位进行初步预测分析。方法应用计算机软件,用SOPMA、HNN、GOR三种方案分析比较MAGE-3二级结构,并用亲水性、极性、柔韧性、表面可及性和抗原性等多参数分析其B细胞优势表位,进一步采用平均抗原指数对上述结果进行综合分析。结果MAEG-3肿瘤抗原为一可溶性蛋白,其二级结构中以无规则卷曲的区域出现较多,占47.45%～52.87%;其次为螺旋结构和Beta折叠,而Beta转角较少,占0～3.5%,多夹在无规则卷曲构象中

关键词：黑色素瘤抗原细胞表位二级结构预测分析

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金葡菌L型感染在卵巢癌中检测的意义

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中国微生态学杂志 2009年第10期21卷 920-922,925页

作者：俞岚郭冰沁汪万英唐素兰安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院病理学教研室蚌埠医学院第一附属医院病理科安徽蚌埠233003 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233004 蚌埠医学院微生物学教研室安徽蚌埠233003

目的探讨金葡菌L型感染在卵巢癌中检测的意义。方法应用革兰染色、免疫组织化学染色技术检测HO-8910PM细胞株以及97例卵巢乳头状癌、23例卵巢乳头状瘤石蜡包埋组织中细菌L型的感染情况。结果(1)HO-8910PM细胞与金葡菌L型体外共培养后在... 详细信息

目的探讨金葡菌L型感染在卵巢癌中检测的意义。方法应用革兰染色、免疫组织化学染色技术检测HO-8910PM细胞株以及97例卵巢乳头状癌、23例卵巢乳头状瘤石蜡包埋组织中细菌L型的感染情况。结果(1)HO-8910PM细胞与金葡菌L型体外共培养后在肿瘤细胞的胞浆及胞核中检测到L型的阳性表达。(2)卵巢乳头状癌和乳头状瘤组织中,细菌L型感染率分别为25.8%(25/97)和13.0%(3/23)。L型检出率与卵巢癌的临床分期、病理分级及腹腔淋巴结转移的差异均有显著性(P<0.005),与组织学类型无关(P>0.05)。结论金葡菌L型可以进入细胞内,并能够在一定程度上促进卵巢癌的发生、发展。

关键词：卵巢肿瘤 L型 HO-8910PM细胞免疫组织化学

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