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国际医药卫生导报 2009年第9期15卷 5-8页

作者：谭忠伟江振友岳磊邹林施珊珊肖京中江门市妇幼保健院检验科 529000 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室 510632 广州葆盛科技开发有限公司 510000

目的研究观察复方中药提取物（葆盛口服液）对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长的影响及其作用机制。方法以人宫颈癌Hela细胞为研究对象，用MTT法观察葆盛口服液对Hela细胞生长的影响，以肝细胞株7701作为比较；流式细胞仪分析Hela细胞... 详细信息

目的研究观察复方中药提取物（葆盛口服液）对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长的影响及其作用机制。方法以人宫颈癌Hela细胞为研究对象，用MTT法观察葆盛口服液对Hela细胞生长的影响，以肝细胞株7701作为比较；流式细胞仪分析Hela细胞凋亡以及凋亡基因Fas的表达情况，以顺铂作为对照。结果葆盛口服液对Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用，流式细胞术发现葆盛口服液能促进Fas表达，诱导Hela细胞凋亡。结论葆盛口服液诱导细胞凋亡，在抗肿瘤作用中可能具有重要意义。

关键词：复方中药细胞凋亡 Fas基因

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利用DNA免疫制备登革2型病毒NS2B多克隆抗体

利用DNA免疫制备登革2型病毒NS2B多克隆抗体

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全军免疫学第七届学术交流会暨免疫学新进展主题论坛

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所第三军医大学基础部医学微生物教研室第三军医大学基础部组织胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的：构建登革2型病毒(DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。意义为研究NS2B在登革病毒感染中的作用提供研究工具。方法：PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P... 详细信息

目的：构建登革2型病毒(DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。意义为研究NS2B在登革病毒感染中的作用提供研究工具。方法：PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果：成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论：本研究通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白,为进一步研究DV感染过程中NS2B的作用奠定了基础。

关键词：登革病毒 NS2B DNA免疫多克隆抗体

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穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞活化及特异性抗体应答的影响

穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞活化及特异性抗体应答的影响

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第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议

作者：王维王静刘春红 ITALIANI,Paola BORASCHI,Diana 马世平瞿涤中国药科大学中药药理教研室复旦大学上海医学院生物医学研究院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室病复旦大学上海医学院原微生物研究所医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室复旦大学上海医学院病原微生物研究所

目的:研究穿心莲内酯对小鼠天然免疫和适应性免疫应答的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,经LPS诱导向M1活化或IL-4诱导向M2活化,同时以穿心莲内酯(10μg/ml)处理;利用real-time PCR检测巨噬细胞活化相关的M1和M2类细胞因子基因转... 详细信息

目的:研究穿心莲内酯对小鼠天然免疫和适应性免疫应答的影响。方法:小鼠腹腔巨噬细胞体外培养,经LPS诱导向M1活化或IL-4诱导向M2活化,同时以穿心莲内酯(10μg/ml)处理;利用real-time PCR检测巨噬细胞活化相关的M1和M2类细胞因子基因转录水平(M1:IL-1β,IL-18,IL-12等;M2:IL-1Ra,IL-18B P,IL-10等),流式细胞术检测巨噬细胞活化及抗原提呈功能相关的细胞表面分子(CD40,CD80,CD86,MHC等)。用乙肝表面抗原(HBsAg)免疫小鼠,同时腹腔注射给予穿心莲内酯(1mg/kg);利用ELISA方法检测anti-HBsAg,ELISPOT法检测分泌IL-4的脾淋巴细胞数量。结果:穿心莲内酯单独处理巨噬细胞24小时后使其偏向M2活化(IL-12/IL-10比例从0.78降低至0.12),处理LPS激活的巨噬细胞抑制其向M1分化(IL-12/IL-10比例从30.97降低至10.77),处理IL-4激活的巨噬细胞促进其向M2分化(IL-12/IL-10比例从0.32降低至0.15);并且穿心莲内酯下调了LPS激活的巨噬细胞表面分子CD40,CD80,CD86及MHC I的表达。HBsAg免疫的小鼠给予穿心莲内酯后血清特异性抗体anti-HBs滴度下降,分泌IL-4的脾淋巴细胞数量减少。结论:穿心莲内酯可调节小鼠的天然免疫和适应性免疫应答,调节巨噬细胞的活化并减少特异性抗体的产生。

关键词：穿心莲内酯免疫调节巨噬细胞细胞因子抗体

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核激素受体等对乙型肝炎病毒转录与复制的影响

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实用临床医药杂志 2009年第7期13卷 25-29页

作者：陈群王甦刘凤君唐红赵连三扬州大学医学院微生物与免疫学教研室江苏扬州225001 扬州大学医学院附属医院消化内科江苏扬州225001 四川大学华西医院感染疾病中心四川成都610000

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源细胞复制体系,观察核激素受体等对HBV基因转录和复制的调控作用。方法用复制型HBV重组质粒pHBV4.1与核激素受体HNF4、和RXRa/PPARa以及HNF3的表达质粒,分别共转染非肝源细胞株NIH3T3;用Northern吸印... 详细信息

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源细胞复制体系,观察核激素受体等对HBV基因转录和复制的调控作用。方法用复制型HBV重组质粒pHBV4.1与核激素受体HNF4、和RXRa/PPARa以及HNF3的表达质粒,分别共转染非肝源细胞株NIH3T3;用Northern吸印杂交检测HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平。结果复制型HBV重组质粒pHBV4.1在肝癌细胞中,能检测到3.5 kb HBV RNA转录产物和HBV DNA复制中间体;用pHBV4.1转染NIH3T3细胞后,在没有核激素受体表达质粒共转染时未能检出3.5 kb HBV RNA等转录产物,也无HBV DNA复制中间体;当用核激素受体HNF4和RXRa/PPARa共转染时,能够激活3.5 kb HBV RNA转录和HBV DNA复制,而HNF3未能激活HBV复制,但在核激素受体HNF4或RXRα/PPARα介导的病毒复制体系中,同时共转染HNF3时,均可见3.5 kb HBV mRNA的转录和HBV DNA复制水平下降。结论利用核激素受体等成功地建立HBV在非肝源细胞中的转录与复制,且显示HNF4和RXRa/PPARa可支持HBV在非肝源细胞中转录与复制;HNF3抑制HBV肝特异性基因转录与复制。

关键词：乙型肝炎病毒非肝源细胞核激素受体肝细胞核因子3 转录与复制

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黄连解毒汤对小鼠肠黏膜组织结构的影响

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长春中医药大学学报 2009年第1期25卷 14-15页

作者：罗海华董姝周红袁广明李美玉邝枣园中山大学基础医学实验教学中心广东广州510089 中山大学中山医学院 2004级广东广州510089 广州中医药大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室广东广州510006

目的通过观察黄连解毒汤对小鼠肠道组织的影响,研究尝试从肠黏膜组织结构角度探讨"苦寒伤胃"药的机制,以期为临床合理使用清热解毒中药提供参考资料。方法建立抗生素引起菌群失调小鼠模型和不同剂量的黄连解毒汤灌胃小鼠模型... 详细信息

目的通过观察黄连解毒汤对小鼠肠道组织的影响,研究尝试从肠黏膜组织结构角度探讨"苦寒伤胃"药的机制,以期为临床合理使用清热解毒中药提供参考资料。方法建立抗生素引起菌群失调小鼠模型和不同剂量的黄连解毒汤灌胃小鼠模型,与正常小鼠比较,评价黄连解毒汤对小鼠肠道组织的影响情况。结果灌胃14 d后黄连解毒汤高剂量组出现回肠黏膜损伤脱落,盲肠水肿。其盲肠指数与抗生素组、正常组均存在差异显著性(P<0.05)。黄连解毒汤低剂量组回肠黏膜和盲肠均正常,其盲肠指数与正常组差异无显著性(P>0.05),与抗生素组存在差异显著性(P<0.05)。结论黄连解毒汤在高剂量长期应用时将损伤小鼠肠道组织,有类似滥用抗生素的破坏作用。在低剂量使用时对小鼠肠道组织无明显损伤作用。

关键词：黄连解毒汤肠黏膜损伤盲肠指数小鼠

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腹侧急性闭合性脊髓损伤模型建立

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中华实验外科杂志 2009年第5期26卷 591-591页

作者：胡炜关方霞杨波焦红亮马建常克亮胡祥李远杜英宋来君郑州大学第一附属医院神经外科 450052 郑州大学生物工程系深圳北科生物科技有限公司郑州大学医学院微生物与免疫教研室

脊髓损伤发病率高，病理机制复杂，建立理想的模型尤为重要，现已有多种模型报道。我们用自制适形撞击器建立腹侧急性闭合性脊髓损伤动物模型。

关键词：急性闭合性损伤模型脊髓损伤腹侧病理机制动物模型发病率撞击器

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小鼠β防御素3在大肠杆菌中的融合表达及其抗菌作用的初步研究

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西部医学 2009年第7期21卷 1091-1094页

作者：江滟王保宁杨晓芳李婉宜刘冯欢蒋忠华李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041 成都康华生物制品有限公司四川成都610100 四川大学口腔疾病国家重点实验室四川成都610041

目的构建小鼠β防御素3(mouseβdefensin3,mBD3)基因的原核表达载体pET-32a(+)/mBD3,诱导mBD3融合蛋白在大肠杆菌中的表达,并融合蛋白的抗菌活性。方法运用PCR技术从质粒pcDNA3.1(+)/mBD3中扩增mBD3基因片段,将该片段插入pET-32a(+)原... 详细信息

目的构建小鼠β防御素3(mouseβdefensin3,mBD3)基因的原核表达载体pET-32a(+)/mBD3,诱导mBD3融合蛋白在大肠杆菌中的表达,并融合蛋白的抗菌活性。方法运用PCR技术从质粒pcDNA3.1(+)/mBD3中扩增mBD3基因片段,将该片段插入pET-32a(+)原核表达载体,并对构建的重组质粒进行PCR、酶切和测序鉴定。将鉴定正确的质粒转化大肠杆菌表达菌株Rosetta-gami(2),用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE和Western Blot鉴定融合蛋白。通过镍亲和层析获得纯化的融合蛋白,用微量液体稀释法测定融合蛋白鼠β防御素3(f mBD3)的抗菌活性。结果mBD3的原核表达载体pET-32a(+)/mBD3构建成功,在大肠杆菌中表达出fmBD3并提取获得纯化的融合蛋白。fmBD3对单细胞真菌具有较好的抑制和杀灭作用,可抑制革兰阳性菌的生长,而对革兰阴性菌无作用。结论构建的原核表达载体在大肠杆菌中成功表达fmBD3,该融合蛋白显示出较强的杀真菌作用和一定的抗细菌作用,为进一步研究鼠防御素的抗微生物活性奠定了实验基础。

关键词：鼠β防御素3 原核表达融合蛋白抗菌作用

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中药大蒜素体外抗弓形虫效应及其机制的研究

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中国微生态学杂志 2009年第9期21卷 812-816,821页

作者：陈光马淑霞蔡连顺罗兰毕胜代月佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室黑龙江佳木斯154000 佳木斯大学儿童神经康复实验室黑龙江佳木斯154000 佳木斯大学基础医学院微生物学教研室黑龙江佳木斯154000 佳木斯大学第一附属医院消化一科黑龙江佳木斯154000

目的观察大蒜提取物体外抗弓形虫的作用效果及其机制。方法将弓形虫RH株速殖子与兔肾细胞共同培养，加入不同浓度的大蒜素（实验组）和磺胺嘧啶（阳性对照组），培养不同时间后取出细胞，固定染色后观察细胞感染率及每个纳虫泡中弓形虫... 详细信息

目的观察大蒜提取物体外抗弓形虫的作用效果及其机制。方法将弓形虫RH株速殖子与兔肾细胞共同培养，加入不同浓度的大蒜素（实验组）和磺胺嘧啶（阳性对照组），培养不同时间后取出细胞，固定染色后观察细胞感染率及每个纳虫泡中弓形虫速殖子的数量；采用MTT比色法观察大蒜素对弓形虫速殖子侵袭细胞及其正常细胞增殖的影响；采用台盼兰着色法观察大蒜素对弓形虫速殖子活性的影响；采用TUNEL末端标记法检测弓形虫速殖子凋亡率，对药物的效应和机制进行探讨。结果（1）10—80μg/ml的大蒜素能抗弓形虫的感染，呈现剂量依赖性，与时间无明显的相关性。（2）40μg/ml、80μg/ml的大蒜素不能抑制细胞的增殖，对细胞无明显的毒副作用；160μg/ml的大蒜素对细胞有明显的毒副作用。（3）大蒜素80μg/ml时，台盼兰着色率最高，弓形虫的活力最低。（4）大蒜素80μg/ml的浓度时，弓形虫速殖子凋亡率最高。结论大蒜素可以抑制弓形虫速殖子的活力、对宿主细胞的感染力、在细胞内的增殖，无明显的毒副作用，最适宜浓度为80μg/ml。大蒜素是一种良好的抗弓形虫药物，诱导弓形虫速殖子凋亡是其抗弓形虫机制之一。

关键词：大蒜素体外培养弓形虫效应机制

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戴氏虫草多糖抗突变活性的研究

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中药材 2008年第1期31卷 86-88页

作者：彭克军刘杰麟贵阳医学院临床微生物和免疫教研室

目的:探讨戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖(CDP1)是否具有抗突变效应。方法:采用Am es试验及小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核形成试验评价不同浓度的CDP1的抗突变作用。结果:CDP1在未加S9条件下,对TA97、TA98、TA100及TA102回复突变均具有... 详细信息

目的:探讨戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖(CDP1)是否具有抗突变效应。方法:采用Am es试验及小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核形成试验评价不同浓度的CDP1的抗突变作用。结果:CDP1在未加S9条件下,对TA97、TA98、TA100及TA102回复突变均具有不同程度的抑制作用,尤其对TA97、TA98及TA102更为明显,其最高抑制率分别达68.5%、79.5%及81.3%,且结果呈现一定的剂量-效应关系,对TA100表现较弱,但最高抑制率仍达19.8%;CDP1对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓PCE微核发生率也有显著的拮抗作用,其最高抑制率达70.3%,且结果亦呈现剂量-效应关系。结论:在本实验条件下,戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖具有明显的抗突变活性。

关键词：戴氏虫草多糖抗突变 Ames试验微核试验

来源：评论

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灵芝孢子粉在真菌性肠炎所致腹泻中的应用

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中国微生态学杂志 2009年第9期21卷 850-850,852页

作者：杨春佳苏德望马淑霞王春敏李丽秋杨景云佳木斯大学基础医学院微生物教研室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学儿童神经康复实验室黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学第一附属医院黑龙江佳木斯154007

目的了解真菌性肠炎所致腹泻的菌种分布特点,探索灵芝孢子粉对其的治疗效果。方法将110例腹泻患者的粪便直接涂片革兰染色镜检。查见较多真菌孢子和菌丝者进行分离鉴定,并采用灵芝孢子粉治疗。结果110例腹泻患者中查见真菌孢子及菌丝者6... 详细信息

目的了解真菌性肠炎所致腹泻的菌种分布特点,探索灵芝孢子粉对其的治疗效果。方法将110例腹泻患者的粪便直接涂片革兰染色镜检。查见较多真菌孢子和菌丝者进行分离鉴定,并采用灵芝孢子粉治疗。结果110例腹泻患者中查见真菌孢子及菌丝者62例;真菌分布白色假丝酵母菌占56.45%,克柔假丝酵母菌占16.13%,热带假丝酵母菌占14.52%,近平滑假丝酵母菌占6.45%,季也蒙假丝酵母菌占6.45%,用灵芝孢子粉治疗真菌性肠炎所致腹泻21 d后有效率为96.77%。结论真菌性肠炎所致腹泻以白色假丝酵母菌感染为主,应用灵芝孢子粉治疗方法简单、安全、有效。

关键词：灵芝孢子粉真菌性肠炎白色假丝酵母菌

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