检索结果-内蒙古大学图书馆

2008年中国微生物学会学术年会

作者：韦莉刘勇夏佩莹蚌埠医学院微生物学教研室

目的通过提取Mtb细胞壁上19 KD的蛋白(P19),观察其对巨噬细胞表面TLR-2的影响,研究其对细胞凋亡及细胞因子分泌的作用。方法提取P19,与巨噬细胞建立感染模型;流式细胞术检测巨噬细胞TLR-2表达;激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞TLR-2的分布... 详细信息

目的通过提取Mtb细胞壁上19 KD的蛋白(P19),观察其对巨噬细胞表面TLR-2的影响,研究其对细胞凋亡及细胞因子分泌的作用。方法提取P19,与巨噬细胞建立感染模型;流式细胞术检测巨噬细胞TLR-2表达;激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞TLR-2的分布、检测细胞凋亡、ELISA细胞因子分泌的情况。结果流式发现:P19作用后,细胞的平均荧光强度明显增强;同时P19短期诱导后的巨噬细胞表面出现多个斑块状染色阳性的荧光标

关键词：巨噬细胞 TLR-2 细胞凋亡率 Mtb19KD

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核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达

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中国新药杂志 2008年第23期17卷 2031-2033页

作者：张园李晓眠王华天津医科大学基础医学院医学微生物教研室天津出入境检验检疫局工业产品安全技术中心

目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAX1-F,并在COS7细胞中表达。方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用HindⅢ/EcoRⅠ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴... 详细信息

目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAX1-F,并在COS7细胞中表达。方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用HindⅢ/EcoRⅠ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴定,并将此重组质粒通过脂质体介导转染COS 7细胞,流式细胞术检测抗原蛋白表达、RT-PCR法检测外源基因的表达。结果:经PCR法和酶切鉴定,目的片段大小与预期相符,经测序目的基因序列与GenBank(EF679198)公布结果一致。重组质粒pVAX1-F转染COS 7细胞72 h后,能够表达抗原蛋白,流式细胞术检测达到58.3%,与对照组3.6%比较差异具有显著性(P<0.01),且F基因mRNA明显表达。结论:成功构建pVAX1-F,并能够在COS 7细胞中瞬时表达,为仙台病毒F基因核酸疫苗进行免疫学评价奠定基础。

关键词：仙台病毒核酸疫苗 F基因

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铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶编码基因的研究

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南方医科大学学报 2008年第8期28卷 1510-1511页

作者：冯春颜胡琴深圳市宝安区龙华人民医院检验科广东深圳518109 广东医学院微生物免疫教研室广东湛江524023

目的了解我院铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶流行现状及其编码基因的携带情况。方法采用亚胺培南-EDTA纸片增效法对金属β-内酰胺酶表型进行确证并用PCR检测金属β-内酰胺酶的编码基因。结果38例表型确证实验阳性,36例产VIM型金属β-内... 详细信息

目的了解我院铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶流行现状及其编码基因的携带情况。方法采用亚胺培南-EDTA纸片增效法对金属β-内酰胺酶表型进行确证并用PCR检测金属β-内酰胺酶的编码基因。结果38例表型确证实验阳性,36例产VIM型金属β-内酰胺酶,占23.1%。结论碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌多携带有产金属酶的编码基因,且携带有产金属酶编码基因的铜绿假单胞菌多表现为多重耐药。

关键词：铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶耐药基因

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河南省8株狂犬病毒磷蛋白基质蛋白基因分析

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中国人兽共患病学报 2008年第9期24卷 859-863,867页

作者：熊成龙邵中军魏纪东居丽雯周联娣姜庆五复旦大学公共卫生学院流行病学教研室公共卫生安全教育部重点实验室上海200032 第四军医大学预防医学系流行病学教研室新乡医学院微生物学教研室

目的分析河南省8株狂犬病毒磷蛋白P及基质蛋白M的基因序列,探讨狂犬病毒流行株毒力与致病性变异的可能原因。方法以免疫荧光法检测2006年采自河南省的121份犬脑,取阳性犬脑组织悬液接种鼠脑分离病毒,以RT-nest-edPCR法扩增病毒P与M基因... 详细信息

目的分析河南省8株狂犬病毒磷蛋白P及基质蛋白M的基因序列,探讨狂犬病毒流行株毒力与致病性变异的可能原因。方法以免疫荧光法检测2006年采自河南省的121份犬脑,取阳性犬脑组织悬液接种鼠脑分离病毒,以RT-nest-edPCR法扩增病毒P与M基因,克隆测序后进行生物信息学分析。结果分离到8株狂犬病毒,序列分析表明8株病毒均为基因1型狂犬病毒,8株病毒彼此之间P基因与M基因核苷酸序列同源性均为98.9%～99.8%,推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%～99.3%和97.0%～99.5%。8株病毒与我国宁夏分离株CNX8511、CNX8601的同源性最高,P基因与M基因核苷酸同源性分别为89.1%～89.7%和91.1%～92.0%,氨基酸同源性分别为93.3%～94.3%和96.6%～98.0%。在核苷酸及氨基酸水平上,8株病毒与CTN疫苗株的P与M同源性均明显高于与其它疫苗株的相应同源性。系统发育分析表明,8株病毒与我国宁夏街毒株、CTN疫苗株、泰国及菲律宾等东南亚株进化关系最近,而与CTN以外的其它疫苗株、标准攻击毒CVS株,以及我国80年代初分离的DRV、MRV株进化关系较远。氨基酸对位分析表明,较之参比的其它基因1型毒株,河南省8株狂犬病毒的P与M出现多处变异。结论8株狂犬病毒仍属基因1型狂犬病毒,但其P基因及M基因在核苷酸及推导的氨基酸水平上均出现了明显变异。

关键词：狂犬病毒 P基因 M基因遗传特征

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SEA对PML-RARα多肽体外诱导外周血单个核细胞TCRζ链表达的作用

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第4期29卷 347-350页

作者：高珂林晨白雪陈少华杨力建陈思 B.N.Selvakumar 李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:了解金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合PML-RARα融合多肽体外诱导正常人外周血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:利用T细胞液体培养法分别与正常人外周血淋巴细胞加入PML-RARα融合多肽、SEA和SEA联合PML-RARα多肽诱导培养T细胞... 详细信息

目的:了解金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合PML-RARα融合多肽体外诱导正常人外周血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:利用T细胞液体培养法分别与正常人外周血淋巴细胞加入PML-RARα融合多肽、SEA和SEA联合PML-RARα多肽诱导培养T细胞,其中SEA刺激包括培养初始或培养第5天加入SEA两组(PS、PSI),并设空白对照组(不加多肽及SEA)。分别收集各组培养20 d后细胞提取mRNA并合成cDNA,采用SYBR G reenⅠ荧光定量PCR和相对定量检测TCRζ链在不同组别T淋巴细胞中的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-△△C t分析TCRζ链表达差异。结果:与空白组相比,联合诱导组在培养初始加入SEA及第5天加入SEA的培养T细胞中TCRζ链表达上升,而单独SEA诱导组的TCRζ链表达下降。结论:超抗原SEA联合PML-RARα多肽体外诱导T细胞可使TCRζ链基因表达水平升高,有望为研制急性早幼粒细胞白血病疫苗提供新的切入点。

关键词： T细胞受体ζ链实时定量PCR 金黄色葡萄球菌肠毒素A T细胞受体 PML-RARα融合多肽

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结核分枝杆菌保护性抗原的研究进展

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咸宁学院学报（医学版） 2008年第4期22卷 354-358页

作者：邓毛子咸宁学院医学院医学微生物学教研室湖北咸宁437100

结核病(tubeiculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的人兽共患的慢性传染病,可累及全身多种组织器官,其中以肺结核(pulmonary tuberculosis)最为常见。由于MTB耐药株的出现,AIDS合并MTB感染以及全球范... 详细信息

结核病(tubeiculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的人兽共患的慢性传染病,可累及全身多种组织器官,其中以肺结核(pulmonary tuberculosis)最为常见。由于MTB耐药株的出现,AIDS合并MTB感染以及全球范围的结核高危人群的流动,造成了TB的全球流行。[第一段]

关键词：结核分枝杆菌保护性抗原 tuberculosis MTB感染慢性传染病人兽共患组织器官高危人群

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鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

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安徽农业科学 2008年第8期36卷 3226-3227,3249页

作者：杨帆李淑梅汤波刘平新乡医学院微生物学教研室河南新乡453003 河南科技学院化工学院河南新乡453003 新乡医学院保健科河南新乡453003

[目的]为研究传染性支气管炎(IBV)的流行变异及其防治奠定基础。[方法]从辉县某大型养鸡场疑似IBV的发病鸡群中采集病料,进行病毒分离和鉴定,并对分离病毒的M基因进行RT!PCR扩增。[结果]从鸡病料中分离到1株IBV,命名为IBV!HN05。经浓度1... 详细信息

[目的]为研究传染性支气管炎(IBV)的流行变异及其防治奠定基础。[方法]从辉县某大型养鸡场疑似IBV的发病鸡群中采集病料,进行病毒分离和鉴定,并对分离病毒的M基因进行RT!PCR扩增。[结果]从鸡病料中分离到1株IBV,命名为IBV!HN05。经浓度1%胰酶、卵磷脂酶C和10%乙醚处理后,该病毒尿囊液可以凝集鸡、绵羊、人、小鼠和兔的红细胞,而未处理的病毒尿囊液则无此凝集活性。该分离株IBV-HN05和标准毒株IBVM41对NDVLaSota都有抑制作用。该病毒对9日龄鸡胚的致病变率达100%。通过鸡胚矮小试验和动物回归试验,发现该分离株能引起鸡胚和病鸡典型的临床症状和病理变化。PCR扩增结果进一步证实了该分离株为IBV病毒。[结论]该研究为SARS病毒的研究提供了动物模型。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定

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酶联分光光度法测定3T3-F442A分化细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶的活性

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生物医学工程学杂志 2008年第5期25卷 1161-1165页

作者：朱沙王岩杜英李三强轩小燕唐悦郑州大学基础医学院微生物学与免疫学研究室郑州450001 郑州特业工程高等专科学校医药系郑州450011 河南科技大学医学院生化与分子生物学教研室洛阳471003

测定3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞的过程中，细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶（Semicarbazide-sensitiveamineoxidase，SSAO）活性的变化情况，用于SSAO病理生理学功能的研究。3T3-F442A细胞在分化的不同天数内，收集细胞，超声波破碎后制备... 详细信息

测定3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞的过程中，细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶（Semicarbazide-sensitiveamineoxidase，SSAO）活性的变化情况，用于SSAO病理生理学功能的研究。3T3-F442A细胞在分化的不同天数内，收集细胞，超声波破碎后制备SSAO初提物。用分光光度法研究酶活性的基础上加入一种氧化酶，即采用酶联分光光度法分别研究细胞分化不同时间所表达的SSAO活性。结果显示，体外3T3-F442A细胞在分化过程中，SSAO在细胞内的表达呈曲线上升趋势。分化前细胞内几乎检测不到SSAO的存在，分化的第3d只能检测到少量SSAO，此后，SSAO的表达呈急剧上升趋势，细胞分化后的第6～7dSSAO活性达到高峰。

关键词： 3T3-F442A细胞氨基脲敏感胺氧化酶分化酶联分光光度法

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HBsAg负载的慢性乙肝患者DCs诱导特异性Th1细胞分化的作用

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世界华人消化杂志 2008年第12期16卷 1344-1349页

作者：吴琼汪晓莺周晓荣汤伟苏丽南通市肿瘤医院生物治疗中心江苏省南通市226001 南通大学医学院微生物学与免疫学教研室江苏省南通市226001 南通大学医学院传染病学教研室江苏省南通市226001

目的:研究HBsAg负载的慢性乙肝患者外周血树突状细胞(dendritic cells,DCs)对自身Th1细胞分化的诱导作用.方法:Ficoll密度梯度离心和贴壁法分离慢性乙肝患者外周血单核细胞,以含rhIL-4+rhGM-CSF的完全培养基诱导DCs.流式细胞术检测各组D... 详细信息

目的:研究HBsAg负载的慢性乙肝患者外周血树突状细胞(dendritic cells,DCs)对自身Th1细胞分化的诱导作用.方法:Ficoll密度梯度离心和贴壁法分离慢性乙肝患者外周血单核细胞,以含rhIL-4+rhGM-CSF的完全培养基诱导DCs.流式细胞术检测各组DC表面CD80,CD86,CD40和HLA-DR分子的表达,CCK-8法检测各组DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,ELISA法检测各组DCs培养液上清中IL-12的水平.免疫磁珠分选慢性乙肝患者外周血CD4+T细胞,分别与患者自身的DCs共培养,细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测共培养后CD4+T细胞内特征性细胞因子IFN-γ和IL-4,ELISA法检测共培养上清中IFN-γ/IL-4的水平.结果:与对照组相比,HBsAg、IFN-γ和HBsAg+IFN-γ组DCs表面表达CD80,CD86,CD40和HLA-DR分子水平较高;刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力较强;DCs分泌的上清液中,IL-12水平也较高.与对照组相比,HBsAg、IFN-γ和HBsAg+IFN-γ组DCs与自身Th细胞共培养后,Th1细胞占CD4+T细胞的百分比升高(10.76%±3.98%,11.43%±4.32%,15.28%±4.73%vs7.84%±3.10%,P<0.01),Th2细胞占CD4+T细胞的百分比降低(1.43%±0.96%,1.68%±0.16%,0.92%±0.21%vs2.61%±1.27%,P<0.01),共培养上清中IFN-γ的水平增高(578±47mg/L,496±92mg/L,784±97mg/Lvs342±34mg/L,P<0.05),IL-4的水平降低(187±52mg/L,169±38mg/L,89±37mg/Lvs226±48mg/L,P<0.05),以HBsAg+IFN-γ组最为明显.结论:经HBsAg负载的DCs可以改善患者体内因DCs功能低下而引起的Th1细胞分化不足的状态.

关键词：树突状细胞慢性乙型肝炎 Th1/Th2 细胞因子流式细胞术酶联免疫吸附试验

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多重耐药伤寒沙门菌耐药基因的研究

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微生物与感染 2008年第2期3卷 67-69,83页

作者：虞春华李琼黄瑞苏州大学医学院微生物学教研室苏州215123

目的检测多重耐药伤寒沙门菌对抗菌药物的敏感性及其耐药基因定位。方法随机选取实验室保存的5株耐药菌和1株敏感菌,用纸片扩散法检测对12种抗菌药物的敏感性。用利舍平抑制试验检测菌株是否存在药物外排系统。用聚合酶链反应(PCR)检测... 详细信息

目的检测多重耐药伤寒沙门菌对抗菌药物的敏感性及其耐药基因定位。方法随机选取实验室保存的5株耐药菌和1株敏感菌,用纸片扩散法检测对12种抗菌药物的敏感性。用利舍平抑制试验检测菌株是否存在药物外排系统。用聚合酶链反应(PCR)检测TEM型β内酰胺酶基因、aac(6′)-Ⅰb和aac3-Ⅱ型氨基糖苷类修饰酶基因、qacEΔ1-sul1耐消毒剂和磺胺基因、catA和catB氯霉素乙酰基转移酶基因以及cmlA氯霉素外排泵蛋白基因等7种耐药基因。结果5株多重耐药菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛、头孢西丁、卡那霉素、庆大霉素、复方磺胺甲唑及氯霉素等8种抗菌药物全部耐药,对美罗培南、头孢哌酮、头孢吡肟全部敏感;对头孢噻吩中度敏感。1株无质粒pRST98的菌株对上述药物全部敏感。利舍平抑制试验均为阴性。4株耐药菌TEM型β内酰胺酶基因检测为阳性。全部耐药菌株aac3-Ⅱ、qacEΔ1-sul1和catA基因均为阳性,而aac(6′)-Ⅰb、catB和cmlA基因均为阴性。结论多重耐药伤寒沙门菌质粒pRST98上同时存在多种耐药基因,是导致菌株同时对多种结构各异的抗菌药物耐药的原因。

关键词：伤寒沙门菌多重耐药耐药基因

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