检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2008年第9期24卷 799-802页

作者：吴利先王国富黄文祥云南大理学院下关校区基础医学院微生物学教研室大理671000 重庆医科大学附属第一医院感染科重庆400016

目的构建屎肠球菌透明质酸酶基因(hyaluronidase,hyl)突变株(*hyl),通过动物实验来研究hyl基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价屎肠球菌hyl基因突变株(*hyl)的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数... 详细信息

目的构建屎肠球菌透明质酸酶基因(hyaluronidase,hyl)突变株(*hyl),通过动物实验来研究hyl基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价屎肠球菌hyl基因突变株(*hyl)的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量(LD50)提高了7倍,存活率也明显高于野生株,引起的兔心内膜炎的病理改变也较野生株轻微。结论hyl基因在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一。

关键词：屎肠球菌透明质酸酶基因腹膜炎模型心内膜炎模型

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Skp2和p27^(kip1)蛋白在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达、定位及意义

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临床检验杂志 2008年第3期26卷 167-169页

作者：陆建明陆建新沈爱国张冬梅王燏婵何松程纯南通大学附属医院输血科江苏南通226001 南通大学医学院微生物与免疫学教研室南通市肿瘤医院病理科

目的探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义。方法用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免... 详细信息

目的探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义。方法用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免疫荧光双标记技术检测淋巴瘤Raji细胞株Skp2和p27kip1蛋白的定位情况。结果Skp2蛋白在B-NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达高于惰性组;p27kip1蛋白在B-NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达低于惰性组;Skp2蛋白主要在Raji细胞的胞浆中表达,p27kip1蛋白主要表达于胞核。结论在B-NHL组织中,Skp2的高表达和p27kip1的低表达可能与其发生发展有关;Skp2和p27kip1在Raji细胞中的亚细胞定位与其生物学功能一致。

关键词： S期激酶相关蛋白2 p27^kip1 B细胞性非霍奇金淋巴瘤

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LMP1基因沉默对EBV阳性上皮细胞凋亡和增殖影响

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青岛大学医学院学报 2008年第2期44卷 103-107页

作者：冯艺王笑峰王云罗兵青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266021

目的探讨化学合成小干涉RNA(siRNA)对Epstein-Barr病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)阳性胃上皮(GT38)细胞LMP1编码基因表达的抑制作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法化学合成靶向LMP1mRNA不同位点的3对siRNA,分别转染GT38细胞,选择干扰... 详细信息

目的探讨化学合成小干涉RNA(siRNA)对Epstein-Barr病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)阳性胃上皮(GT38)细胞LMP1编码基因表达的抑制作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法化学合成靶向LMP1mRNA不同位点的3对siRNA,分别转染GT38细胞,选择干扰效果最佳的siRNA进行实验研究,行RT-PCR、Hochest 33258荧光染色及流式细胞术分析。结果RT-PCR结果显示,3对靶向LMP1的siRNA均能抑制GT38细胞LMP1的转录表达,以靶向LMP1 mRNA 649位点的siRNA作用效果最强。Hochest 33258荧光染色可见siRNA649作用后的GT38细胞发生凋亡。流式细胞分析显示,siRNA649作用24、72以及120 h后的细胞其细胞周期无明显改变。RT-PCR检测结果表明,转染siRNA649的靶细胞Bcl-2的表达水平降低。结论靶向LMP1的特异性siRNA可以有效抑制LMP1的转录表达,进而可能通过抑制Bcl-2的表达诱导靶细胞凋亡。GT38细胞系可作为研究LMP1生物活性及其在EBV相关肿瘤发生中所起作用的理想的靶细胞。

关键词： Epstein—Barr病毒潜伏膜蛋白1 RNA干扰小干涉RNA 细胞凋亡

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29种细菌用新鲜牛乳低温保存菌种的新方法

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海南医学 2008年第10期19卷 150-151页

作者：徐雅娟袁桂峰陈森洲张淼桂林医学院微生物学与免疫学教研室广西桂林541004

目的为了摸索出一种简便、实用、并能较长期保存菌种方法,以便更好地为教学、科研提供标准菌株。方法将复苏的29种细菌菌种,接种于经鉴定无污染者的无菌新鲜牛乳中,置普通冰箱冷冻室-20℃低温保存,并定期复苏进行鉴定。结果所有菌种一... 详细信息

目的为了摸索出一种简便、实用、并能较长期保存菌种方法,以便更好地为教学、科研提供标准菌株。方法将复苏的29种细菌菌种,接种于经鉴定无污染者的无菌新鲜牛乳中,置普通冰箱冷冻室-20℃低温保存,并定期复苏进行鉴定。结果所有菌种一次接种可保存三年以上,通过对细菌存活情况、形态、染色、生化特性及血清学试验观察和鉴定等与初始鉴定结果一致。结论新鲜牛乳保存菌种法保存菌种效果可靠,而且不须反复传代,不需特殊设备,是一种操作简便、易于推广的保存菌种新方法。

关键词：新鲜牛乳菌种培养基

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过氧化物酶增殖子活化受体-γsiRNA腺病毒载体的构建

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郑州大学学报（医学版） 2008年第3期43卷 477-479页

作者：王义生张弛李月白赵国强王少华李振伟殷力刘宏建郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001

目的:构建针对过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因的siRNA腺病毒载体。方法:依据siR-NA设计原则,在PPARγmRNA(AF013266)序列中设计2个特异性靶序列(36-54、73-91),体外合成对应发卡样DNAs,退火后先将其克隆入pSIREN-Shuttle载... 详细信息

目的:构建针对过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因的siRNA腺病毒载体。方法:依据siR-NA设计原则,在PPARγmRNA(AF013266)序列中设计2个特异性靶序列(36-54、73-91),体外合成对应发卡样DNAs,退火后先将其克隆入pSIREN-Shuttle载体,再亚克隆入pAdeno腺病毒载体,对插入序列进行DNA序列分析。结果:发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后,电泳可见明亮靶条带。连接退火寡核苷酸和pSIREN-Shuttle载体得到阳性克隆pSIREN-Shuttle-siPPARγ-36、pSIREN-Shuttle-siPPARγ-73。同源重组后得到亚克隆pAdeno-siPPARγ-36、pAdeno-siPPARγ-73,测序证实插入序列与设计序列完全一致。结论:成功构建2个靶向PPARγ基因的siRNA载体pAdeno-siPPARγ-36和pAdeno-siPPARγ-73。

关键词： RNA干扰过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 腺病毒载体克隆

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嗜肺军团菌ip基因的克隆及其原核表达

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宁夏医学院学报 2008年第6期30卷 696-699页

作者：杨志伟曹秀琴宁夏医学院基础学院微生物学与免疫学教研室银川750004

目的克隆嗜肺军团菌主要免疫原蛋白ip基因,构建重组质粒pET-ip,并在原核系统中表达。方法采用聚合酶链反应(PCR),从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增军团菌主要免疫原蛋白ip基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达重组质粒... 详细信息

目的克隆嗜肺军团菌主要免疫原蛋白ip基因,构建重组质粒pET-ip,并在原核系统中表达。方法采用聚合酶链反应(PCR),从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增军团菌主要免疫原蛋白ip基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达重组质粒pET-ip,经限制性内切酶鉴定、PCR及测序分析后,转化宿主菌大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果扩增出了792 bp完整的ip基因,构建的原核表达重组质粒pET-ip表达出49 kDa Trx-IP的融合蛋白质,Western-blot证实获得蛋白为所需要的目的蛋白。结论成功构建了军团菌ip基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中得到了高效表达。

关键词：军团菌 ip基因克隆基因表达

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医学微生物学选修课的开设与体会

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检验医学教育 2008年第4期15卷 19-20页

作者：朱珊丽李文姝张丽芳温州医学院微生物学与免疫学教研室浙江温州325035

针对医学微生物学学科知识量大,内容繁杂,传统教学中学生学习被动、依赖性强、积极性不高的问题,本教研室开设医学微生物学选修课,改变教学方式,激发学生的学习兴趣;拓宽了学生的知识面,增强了学生的社会责任感和历史使命感。

关键词：医学微生物学选修课素质教育

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应用RAPD技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传学改变

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广西医科大学学报 2008年第6期25卷 857-859页

作者：王险峰陈森洲刘福英桂林医学院微生物学与免疫学教研室桂林541000 河北医科大学实验动物中心石家庄050017

目的：用RAPD技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法：小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8、H22-H2G4、H22-H2E10、H22-H2C4，用47条随机引物经PCR扩增，对扩增产物进行电泳，凝胶分析系统观察结果并照相。结果：47条引物均... 详细信息

目的：用RAPD技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法：小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8、H22-H2G4、H22-H2E10、H22-H2C4，用47条随机引物经PCR扩增，对扩增产物进行电泳，凝胶分析系统观察结果并照相。结果：47条引物均能扩增出明显的条带，条带数多为4-10条，片段大小在200-2000bp之间。其中4条引物的扩增条带具有多态性，表现为带的有无、移动和强弱差异。结论：RAPD技术可以用来对小鼠肝癌H22细胞克隆株进行遗传检测。

关键词：小鼠肝癌H22细胞克隆株随机扩增多态性DNA(RAPD) 遗传检测

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猪苓多糖刺激/诱导小鼠树突状细胞成熟

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现代免疫学 2008年第4期28卷 318-321页

作者：许文李心群浙江温州医学院微生物学与免疫学教研室温州325035 福建三明市第一医院温州三明365000

研究猪苓多糖对小鼠骨髓树突状细胞(DC)表型及功能成熟的影响。从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNC),用rmGM-CSF、IL-4培养5 d后,实验组加入猪苓多糖(50μg/ml),空白对照组加等量RPMI 1640,阳性对照组加LPS(1μg/ml),3组分别同时作用48 h... 详细信息

研究猪苓多糖对小鼠骨髓树突状细胞(DC)表型及功能成熟的影响。从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNC),用rmGM-CSF、IL-4培养5 d后,实验组加入猪苓多糖(50μg/ml),空白对照组加等量RPMI 1640,阳性对照组加LPS(1μg/ml),3组分别同时作用48 h。扫描电镜观察其体外培养过程中的形态特征,流式细胞仪(FACS)分析其表型特征,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其功能。用猪苓多糖刺激的小鼠骨髓MNC具典型的DC形态;细胞表达I-A/I-E、CD11c和分泌IL-12能力比空白对照组增加,具有极强的激发MLR的能力,显示成熟DC的特征。猪苓多糖可以促进体外培养的小鼠骨髓DC的成熟,促进DC诱导的免疫应答启动。

关键词：树突状细胞猪苓多糖混合淋巴细胞反应

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重组蓝藻抗病毒蛋白N的纯化复性及其抗单纯疱疹病毒1型活性的研究

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中国海洋药物 2008年第3期27卷 1-5页

作者：刘宗涛于红尹延梅李丹张文卿青岛大学医学院微生物学教研室山东青岛266071

目的纯化复性重组蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N,CV-N)并研究其抗病毒活性。方法将诱导表达的重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化并以稀释法复性,在Vero细胞中进行CV-N抗单纯疱疹病毒1型(herpes si mplex virus type1,HSV-1)活性的研究。通... 详细信息

目的纯化复性重组蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N,CV-N)并研究其抗病毒活性。方法将诱导表达的重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化并以稀释法复性,在Vero细胞中进行CV-N抗单纯疱疹病毒1型(herpes si mplex virus type1,HSV-1)活性的研究。通过观察细胞病变效应(CPE)及MTT比色法检测细胞活性,以判断CV-N的抗病毒效应。结果重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化后,SDS-PAGE显示11KDa处清晰的单一条带,复性的重组CV-N对Vero细胞毒性极低,对HSV-1无直接灭活作用,CV-N对病毒的吸附及生物合成均有抑制作用,且强于阳性对照药物阿昔洛韦。结论经纯化复性的CV-N具有良好的抗HSV-1活性,值得进一步研究和开发。

关键词：重组蓝藻抗病毒蛋白N 纯化复性单纯疱疹病毒1型抗病毒

来源：评论

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