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VEGF-B对胰岛β细胞胰岛素分泌和Ca^(2+)、cAMP、ATP含量的影响

滨州医学院学报 2021年第1期44卷 18-23页

作者：贾景丹骆徐于瀚浦郑兰蕙刘婉琛王梓旭李雅娜滨州医学院基础医学院病理生理学教研室山东烟台264003 滨州医学院临床医学院山东烟台264003

目的观察血管内皮生长因子B(VEGF-B)对胰岛MIN6细胞胰岛素分泌及细胞内Ca^(2+)、cAMP和ATP含量的影响,并探讨其作用机制。方法采用50 ng/mL VEGF-B蛋白在5.5 mM和25 mM葡萄糖条件下处理MIN6细胞,在2 h和24 h时应用ELISA试剂盒检测MIN6... 详细信息

目的观察血管内皮生长因子B(VEGF-B)对胰岛MIN6细胞胰岛素分泌及细胞内Ca^(2+)、cAMP和ATP含量的影响,并探讨其作用机制。方法采用50 ng/mL VEGF-B蛋白在5.5 mM和25 mM葡萄糖条件下处理MIN6细胞,在2 h和24 h时应用ELISA试剂盒检测MIN6细胞的胰岛素分泌,细胞内Ca^(2+)、cAMP和ATP含量。应用siRNA抑制MIN6细胞中的VEGF-B 48 h后,在5.5 mM和25 mM葡萄糖条件下检测2 h和24 h时MIN6细胞的胰岛素分泌、细胞内Ca^(2+)、cAMP和ATP含量。结果VEGF-B干预MIN6细胞后胰岛素分泌减少,同时细胞内Ca^(2+)、cAMP和ATP含量均减少;抑制VEGF-B后胰岛素分泌增加,细胞内Ca^(2+)、cAMP和ATP含量与胰岛素变化趋势一致。结论VEGF-B可能通过影响Ca^(2+)、cAMP和ATP的含量影响胰岛β细胞胰岛素分泌。

关键词： VEGF-B MIN6细胞胰岛素分泌

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基于精英教育理念探讨生物技术专业混合教学改革

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新教育时代电子杂志（教师版） 2021年第35期 145-146页

作者：高雪（通讯作者）秦加阳马运琪滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003 滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003 滨州医学院药学院细胞工程教研室山东烟台264003

高等教育是实现精英人才培养的关键环节，旨在培育出精英式学术人才和创新人才。生物技术专业的本科生肩负着我国未来生物医学、生物制药、人口健康、生态保护等领域发展的重任，对其进行精英式混合教学有助于提高学生创新能力和综合素... 详细信息

高等教育是实现精英人才培养的关键环节，旨在培育出精英式学术人才和创新人才。生物技术专业的本科生肩负着我国未来生物医学、生物制药、人口健康、生态保护等领域发展的重任，对其进行精英式混合教学有助于提高学生创新能力和综合素质，推动我国生物医药产业的发展。本文以精英教育理念为核心，围绕生物技术专业特点对混合教学的开展进行讨论，为生物技术混合教学建设和改革提供参考。

关键词：混合教学精英教育课程改革生物技术

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齐墩果酸聚乙二醇修饰自组装及其对白血病细胞K562的增殖抑制作用

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山西医科大学学报 2022年第10期53卷 1227-1234页

作者：赵彬男毛晶葛堂栋张鹏霞王迪迪朴金花佳木斯大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室佳木斯154007 滨州医学院烟台附属医院医学美容科

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜... 详细信息

目的用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对齐墩果酸(oleanolic acid,OA)进行修饰,并探讨其衍生物对人慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用。方法以OA和PEG为原料,酯化法、纳米沉淀法合成齐墩果酸聚乙二醇衍生物,核磁共振、电子显微镜、动态光散射检测衍生物表征。CCK-8法检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞增殖抑制的影响,倒置显微镜检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞形态的影响,流式细胞术检测齐墩果酸聚乙二醇衍生物对K562细胞凋亡的影响,Western blot检测K562细胞凋亡蛋白(Caspase-3、Caspase-9、PARP-1)及其剪切后蛋白表达。结果成功合成了齐墩果酸聚乙二醇自组装颗粒OAP5,粒径为(584.49±76.2)nm,结构为核-壳结构,电位趋近于0 mV。OAP5对白血病细胞K562具有增殖抑制作用,处理48 h后的IC_(50)为(16.10±0.64)μg/ml。OAP5处理K562细胞后,细胞密度降低,萎缩变形,折光性变差。OAP5能够促进K562细胞凋亡,剪切Caspase-3、剪切Caspase-9、剪切PARP-1表达增多(P<0.05)。结论OAP5能够通过诱导白血病细胞K562凋亡作用而抑制K562细胞增殖,为齐墩果酸抗肿瘤临床应用提供了依据。

关键词：齐墩果酸聚乙二醇自组装 K562 凋亡

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超声声衰减成像评估兔脂肪肝模型肝脂肪变性程度的实验研究

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肿瘤影像学 2023年第4期32卷 334-338页

作者：包静文吴惠宁吕越明王坤王文平河西学院医学院医学影像教研室甘肃张掖734000 张掖市第二人民医院普外科甘肃张掖734000 滨州医学院附属医院超声科山东滨州256600 复旦大学附属中山医院超声科上海200032

目的:探讨超声声衰减成像(attenuation imaging,ATI)技术在定量评估兔脂肪肝模型肝脂肪变性程度中的应用价值。方法:高脂高胆固醇饲料喂养20只雄性新西兰大白兔,构建不同程度兔脂肪肝模型。在高脂饲料喂养前(第0周)及喂养后(1~36周)每4... 详细信息

目的:探讨超声声衰减成像(attenuation imaging,ATI)技术在定量评估兔脂肪肝模型肝脂肪变性程度中的应用价值。方法:高脂高胆固醇饲料喂养20只雄性新西兰大白兔,构建不同程度兔脂肪肝模型。在高脂饲料喂养前(第0周)及喂养后(1~36周)每4周随机取2只实验兔进行灰阶超声及ATI检查,从第4周开始,2只实验兔在灰阶超声及ATI检查后处死并行肝组织取材。以病理学检查为金标准,观察并分析脂肪肝形成及发展过程中ATI技术测得的声衰减系数(attenuation coefficient,AC)值的变化。结果:兔脂肪肝形成及发展过程中肝脏AC值呈逐渐上升趋势,于第12周开始,兔肝脏AC值[(0.909±0.189)dB/(cm·MHz^(-1))]与第0周AC值[(0.592±0.131)dB/(cm·MHz^(-1))]相比差异有统计学意义(P=0.015)。以病理学检查结果为参照,AC值随肝脂肪变性程度的增加而增加,其中S0与S2、S3之间,S1与S2、S3之间的AC值差异有统计学意义(P<0.008),S0与S1、S2与S3之间差异无统计学意义(P=0.030,P=0.021)。进一步分析发现兔肝脏AC值与肝脂肪变性程度呈显著正相关(r=0.912,P<0.001)。结论:AC值在脂肪肝形成及发展过程中呈稳定上升趋势,AC值与肝脂肪变性程度的相关性高,ATI技术能够定量检测肝脂肪变性程度并动态监测其病程变化。

关键词：脂肪肝声衰减成像声衰减系数兔脂肪肝模型

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PIK3R1在人原发性肝细胞癌中的表达及其与肿瘤上皮间质转化关系

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蚌埠医学院学报 2023年第5期48卷 570-573页

作者：姚楠孙景秋郭冰沁武世伍蚌埠医学院病理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院病理科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院核医学科安徽蚌埠233004

目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶调节亚单位1(PIK3R1)在人原发性肝细胞癌(HCC)中的表达水平及其与恶性肿瘤上皮间质转化的相关性。方法:选取80例HCC病人癌组织及相应癌旁组织,通过免疫组织化学染色法检测HCC组织及相应癌旁组织中PIK3R1编码蛋... 详细信息

目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶调节亚单位1(PIK3R1)在人原发性肝细胞癌(HCC)中的表达水平及其与恶性肿瘤上皮间质转化的相关性。方法:选取80例HCC病人癌组织及相应癌旁组织,通过免疫组织化学染色法检测HCC组织及相应癌旁组织中PIK3R1编码蛋白(PIK3R1/p85α)表达,并检测HCC组织中EMT相关蛋白转化生长因子β(TGF-β)、上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)表达,评估其表达与HCC病人临床特征的相关性。结果:PIK3R1/p85α在HCC组织中的阳性率为70.0%(56/80),高于癌旁组织的17.5%(7/40)(P<0.05);不同组织分化程度HCC病人的PIK3R1/p85α、E-cadherin和TGF-β表达差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01);HCC组织中PIK3R1/p85α与E-cadherin表达呈明显负相关关系(r=-0.323,P<0.01),与TGF-β表达呈正相关关系(r=0.247,P<0.05);无侵袭转移HCC病人和有侵袭转移病人的PIK3R1/p85α蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PIK3R1在HCC组织中表达水平升高,高水平PIK3R1可能会促进肿瘤上皮间质转化的发生,并与HCC不良预后有关。

关键词：原发性肝细胞癌磷脂酰肌醇-3激酶调节亚单位1 上皮间质转化

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进阶整合二段式腹腔镜模拟培训课程在外科住院医师规范化培训中的应用探讨

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外科理论与实践 2024年第3期29卷 249-253页

作者：张鲁阳鞠萍周雪亮邵岩飞吴超王佳玉孙晶潘睿俊蔡伟上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市微创外科临床医学中心上海200025 上海交通大学瑞金临床医学院外科学教研室上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院核医学科上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院医学教育处上海200025 上海交通大学瑞金临床医学院医学模拟教研室上海200025

目的:探讨采取进阶整合二段式腹腔镜模拟培训课程在外科住院医师规范化培训中的可行性及课程设计的合理性。方法:2019年12月至2021年12月于我院进行规范化培训的2019—2020级外科住院医师中开展进阶整合二段式腹腔镜模拟培训课程。课程... 详细信息

目的:探讨采取进阶整合二段式腹腔镜模拟培训课程在外科住院医师规范化培训中的可行性及课程设计的合理性。方法:2019年12月至2021年12月于我院进行规范化培训的2019—2020级外科住院医师中开展进阶整合二段式腹腔镜模拟培训课程。课程分为2个阶段。一阶段BEST课程(best essential surgical technique train‐ing)采用达尔文^(■)腔镜培训系统、天堰^(■)腔镜培训系统、微创医疗^(■)3D腹腔镜以及简易模具进行培训。二阶段BEST PLUS课程采用一阶段培训系统及动物离体模型进行培训。采取问卷调查法(课前与课后问卷)对课程形式、课程使用模具、教师授课方式、课程时间安排、课程内容难度、课程培训效果和课程满意度等课程设置进行评价。结果:总共37位外科住院医师完成两阶段课程培训并完成调查问卷。对于课程设计安排的总体满意率为100%,认为一阶段课程显著提高临床水平的有32人(86.5%),认为二阶段课程对临床水平有显著提高的有35人(94.6%),认为一阶段课程对二阶段课程有显著帮助的有36人(97.3%)。结论:接受培训的外科住院医师课后对进阶整合二段式腹腔镜模拟培训课程的认可度高,该课程整体设计合理且可行,对于外科住院医师具有吸引力。

关键词：外科住院医师规范化培训腹腔镜模拟教学进阶整合二段式

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逆转录重组酶介导的新型冠状病毒可视化快速检测方法的建立

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医学研究生学报 2022年第5期35卷 471-477页

作者：蔡欣周婷婷朱进孙学伟刘晓光杨展汪茂荣东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室/安徽医科大学八一临床学院南京210002 东部战区疾病预防控制中心南京210001 滨州医学院基础医学院烟台264003 南方医科大学南京临床医学院(东部战区总医院)呼吸与危重症医学科南京210002

目的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁。研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备。方法根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结... 详细信息

目的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁。研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备。方法根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结合逆转录重组酶介导的等温扩增(RT-RAA)和荧光定量、胶体金侧向流免疫层析试纸条(LFD)建立逆转录重组酶介导的等温扩增荧光法(荧光RT-RAA法)和试纸条法(RT-RAA-LFD法)并进行优化,分别以构建的N、S、ORF1ab基因质粒为模板评估这两种方法的灵敏性和重复性;对其他冠状病毒质粒[如HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、SARS]模板进行检测,验证这两种方法的特异性。结果两种检测方法均可在39℃恒温条件下12 min内完成检测。荧光RT-RAA法中,ORF1ab基因可检测至10^(0)拷贝数,N、S基因可检测至10^(1)拷贝数。RT-RAA-LFD法中,3种基因均可检测至10^(3)拷贝数。两种方法与其他类型的冠状病毒无交叉反应,具有良好的特异性。结论RT-RAA法和LFD法检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于SARS-CoV-2的快速筛查、诊断和监测。

关键词：新型冠状病毒肺炎新型冠状病毒重组酶介导的等温扩增快速检测

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TGF-β诱导IGFBP3在GBM进展中的作用机制

TGF-β诱导IGFBP3在GBM进展中的作用机制

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第十四届全国免疫学学术大会

作者：张学华张贺赵磊磊董裕翠滨州医学院免疫教研室齐齐哈尔医学院免疫教研室

背景:多形性胶质母细胞瘤(GBM)是最常见的原发性恶性脑肿瘤,中位生存期<一年。TCGA将GBM分为四种类型,其中经典型中有97%的患者表现为EGFR高度扩增。2019年,研究人员通过单细胞测序发现GBM中主要存在四种不同的细胞状态,它们之间受基... 详细信息

背景:多形性胶质母细胞瘤(GBM)是最常见的原发性恶性脑肿瘤,中位生存期<一年。TCGA将GBM分为四种类型,其中经典型中有97%的患者表现为EGFR高度扩增。2019年,研究人员通过单细胞测序发现GBM中主要存在四种不同的细胞状态,它们之间受基因CDK4、EGFR、PDGFRA和NF1影响而相互转换。EGFRvⅢ是EGFR最常见的突变体,目前临床上以EGFR为靶点的治疗效果并不理想。许多研究揭示,肿瘤微环境在肿瘤的发生发展中至关重要。本研究模拟星形胶质细胞分泌TGF-β构建GBM的微环境,前期研究发现在GBM-EGFRvⅢ中,TGF-β可诱导IGFBP3产生,但IGFBP3在GBM中的效应及机制尚不明确。目的:探讨EGFRvⅢ中,IGFBP3 (胰岛素样生长因子结合蛋白3)的效应及作用机制,为GBM提供新的治疗靶点。方法:收集GBM患者标本进行免疫组化分析TGF-β和IGFBP3的表达及相关性;构建EGFRvⅢ的细胞模型,TGF-β作用后通过RT-qPCR、WB检测IGFBP3的表达及其信号通路;细胞增殖、划痕、TransweⅡ检测TGF-β对GBM生物学行为的影响;ELISA、免疫荧光检测上清及细胞核中IGFBP3的表达;si-IGFBP3或加入IGFBP3中和抗体检测IGFBP3对EGFRvⅢ细胞的影响;荧光素酶报告基因验证转录因子AP1对IGFBP3的转录调控作用;利用TCGA、CGGA等数据库分析TGF-β、EGFRvⅢ、IGFBP3的相关性及与患者预后的关系。结果:免疫组化显示GBM患者中EGFR与TGF-β、IGFBP3表达有相关性。TGF-β作用后促进EGFRvⅢ组细胞增殖、迁移侵袭及EMT变化。并且TGF-β促进IGFBPs家族中的IGFBP3升高,同时检测到PD-L1的表达升高。IGFBP3 siRNA和IGFBP3中和抗体后,可部分抵消由TGF-β引发的GBM恶性生物学行为。WB、荧光素酶报告基因证实TGF-β作用后,引起smad2/3及MAPK信号通路的活化及转录因子AP1表达升高,进而引起IGFBP3的升高。结论:在GBM-EGFRvⅢ中,TGF-β通过SMAD3/AP1/IGFBP3信号轴引起IGFBP3升高,进而介导GBM恶性进展。因而以IGFBP3为靶点,可能为GBM患者治疗带来新的希望。

关键词： EGFRvⅢ TGF-β IGFBP3

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叶黄素联合氟尿嘧啶对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖和凋亡的影响

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潍坊医学院学报 2023年第3期45卷 195-198,241页

作者：任丽赵春贞潍坊医学院药学院药理学教研室山东潍坊261053 滨州市中心医院药剂科

目的观察叶黄素联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人绒癌JEG-3细胞增殖和凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测药物的IC_(50)值;平板克隆实验检测各组药物对JEG-3细胞的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期以及凋亡情况。结果CCK-8实验结果显示,叶黄素的I... 详细信息

目的观察叶黄素联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人绒癌JEG-3细胞增殖和凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测药物的IC_(50)值;平板克隆实验检测各组药物对JEG-3细胞的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期以及凋亡情况。结果CCK-8实验结果显示,叶黄素的IC_(50)值为26.3μmol/L,5-FU的IC_(50)值为10.6mg/L,联合用药后,IC_(50)值降为0.8mg/L。克隆形成实验显示当与10μmol/L叶黄素合用时对JEG-3细胞有显著抑制作用。流式细胞周期实验结果表明,单药与联合用药对细胞周期没有明显的影响。细胞流式凋亡实验结果显示:相较于单独用药,联合用药对JEG-3细胞的杀伤作用明显增强。结论叶黄素显著提高5-FU对JEG-3细胞的杀伤作用。

关键词：叶黄素人绒毛膜癌JEG-3 5-氟尿嘧啶

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生物技术专业分子生物学实验课程考核方式改革研究

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中华医学教育探索杂志 2021年第5期20卷 546-549页

作者：姚庆收赛思翔张小华秦加阳滨州医学院药学院基因工程教研室烟台264003

分子生物学实验课程在生物技术专业课程体系中具有承上启下的桥梁作用,对培养学生实验操作技能、分析问题和解决问题的能力具有重要作用。本文以地方医学院校生物技术专业为例,对分子生物学实验课程教学过程中考核方式的改革及效果进行... 详细信息

分子生物学实验课程在生物技术专业课程体系中具有承上启下的桥梁作用,对培养学生实验操作技能、分析问题和解决问题的能力具有重要作用。本文以地方医学院校生物技术专业为例,对分子生物学实验课程教学过程中考核方式的改革及效果进行分析和阐述,旨在促进分子生物学实验课程教学水平,提高生物技术专业人才培养质量。

关键词：生物技术分子生物学实验考核

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