目的测量不同长骨制备的脱矿骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中BMP-2的浓度,评价不同DBM诱导MC3T3-E1细胞成骨分化的能力。方法取同一尸体标本不同长骨制备DBM,按取材部位分成尺骨组(uDBM组)、肱骨组(hDBM组)、胫骨组(tDBM组)和...
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目的测量不同长骨制备的脱矿骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中BMP-2的浓度,评价不同DBM诱导MC3T3-E1细胞成骨分化的能力。方法取同一尸体标本不同长骨制备DBM,按取材部位分成尺骨组(uDBM组)、肱骨组(hDBM组)、胫骨组(tDBM组)和股骨组(fDBM组),以煮沸后的DBM为对照组(cDBM组)。将各组DBM经盐酸胍提取蛋白后采用ELISA法检测BMP-2含量;然后将其与MC3T3-E1细胞共培养,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法观察各组细胞增殖情况,行茜素红、ALP、Van Gieson染色定性观察和ALP含量定量分析各组细胞成骨分化能力;并采用线性回归分析DBM中BMP-2浓度对细胞合成ALP的影响。结果各DBM组间BMP-2浓度比较差异均有统计学意义(P<0.05),下肢长骨中BMP-2浓度高于上肢长骨,其中fDBM组BMP-2浓度约为uDBM组的35.5倍。CCK-8法检测示,共培养5 d内各组细胞持续增殖,5 d时各组吸光度(A)值从高到低依次为fDBM组>tDBM组>hDBM组>uDBM组>cDBM组。共培养14 d,各组细胞表达ALP、钙化结节和胶原纤维的程度与DBM中BMP-2浓度分布趋势一致。ALP含量从低到高依次为cDBM组
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